Proposal Penelitian

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN GARGARISMA DARI

EKSTRAK DAUN PINANG (Areca catechu L.)
TERHADAP BAKTERI
Streptococcus mutans

Proposal Penelitian ini diajukan untuk

Menyusun Laporan Tugas Akhir

Diajukan oleh :

SITI AISYAH EKAYANTI

NIM. PO.71.26.6.16.038

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES JAYAPURA
JURUSAN FARMASI
TAHUN 2019
 HALAMAN PERSETUJUAN

Proposal Penelitian

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN GARGARISMA DARI

EKSTRAK DAUN PINANG (Areca catechu L.)
TERHADAP BAKTERI
Streptococcus mutans

Diajukan Oleh :
SITI AISYAH EKAYANTI
NIM. PO.71.26.6.16.038

Telah disetujui untuk dipertahankan

Di depan Dewan Penguji Proposal Laporan Tugas Akhir
Jurusan Farmasi, Politeknik Kesehatan Kemenkes Jayapura

Jayapura, Januari 2019

Pembimbing I Pembimbing II

Rani Dewi Pratiwi, S.Farm., M.Si,Apt Pratiwi Soegiharti, S.Farm, Apt

NIP. 19870979 201404 2 001

Mengetahui,
Ketua Jurusan Farmasi

Wiwiek Mulyani, SKM, M.Sc

NIP. 19770326 200003 2 001

ii
 HALAMAN PENGESAHAN

Proposal Penelitian

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN GARGARISMA DARI

EKSTRAK DAUN PINANG (Areca catechu L.)
TERHADAP BAKTERI
Streptococcus mutans

Diajukan Oleh:
SITI AISYAH EKAYANTI
NIM. PO.71.26.6.16.038

Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji

Proposal Laporan Tugas Akhir pada tanggal, Januari 2018
Dan dinyatakan telah lulus memenuhi syarat.

Susunan Dewan Penguji

1. Ketua : Rani Dewi Pratiwi, S.Farm., M.Si,Apt 1.

2. Anggota : Pratiwi Soegiharti, S.Farm, Apt 2.

3. Anggota : Baiq Daraquthni W, S.Si 3.

Mengetahui,
Ketua Jurusan Farmasi

Wiwiek Mulyani, SKM, M.Sc

NIP. 19770326 200003 2 001

iii
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas

berkat dan rahmat-Nya sehingga penulis dapat menyusun dan menyelesaikan

proposal yang berjudul “Uji Aktivitas Sediaan Gargarisma dari Ekstrak Daun

Pinang (Areca catechu L.) terhadap Bakteri Streptococcus mutans” tepat pada

waktunya.

Penyusunan proposal ini tidak dapat terlaksana tanpa bantuan dan

bimbingan dari pihak yang dengan ikhlas bersedia meluangkan waktu membantu

penulis dalam penyusunan proposal. Oleh karena itu dengan penuh rasa hormat

dan dengan setulusnya penulis berterima kasih kepada :

1. Bapak Dr. Arwam Hermanus MZ, SE., M.Kes., D.Min, sebagai Direktur

Politeknik Kesehatan Jayapura yang telah memberikan kesempatan kepada

penulis dalam mengikuti perkuliahan

2. Ibu Wiwiek Mulyani, SKM.,M.Sc, selaku Ketua Jurusan Farmasi yang

telah membimbing penulis selama menempuh pendidikan di Politeknik

Kesehatan Jayapura

3. Ibu Rani Dewi Pratiwi, S.Farm., M.Si,Apt sebagai pembimbing pertama

yang telah membimbing dan memberikan motivasi serta masukan kepada

penulis dalam penyusunan laporan tugas akhir ini.

4. Ibu Pratiwi Soegiharti, S.Farm, Apt sebagai pembimbing kedua yang juga

telah membimbing dan memberikan motivasi serta masukan dalam

penyusunan laporan tugas akhir ini.

iv
 5. Bapak/Ibu Staf Dosen Politeknik Kesehatan Kemenkes Jayapura yang

telah membimbing penulis selama menjadi mahasiswa di Politeknik

Kesehatan Kemenkes Jayapura

6. Kedua orang tuaku dan kekasihku yang telah memberikan doa, dorongan

dan semangat selama penulis menyusun laporan tugas akhir ini.

7. Kepada seluruh teman-teman angkatan 2016 Jurusan Farmasi yang telah

membantu penulis dari mulai kuliah sampai dengan selesainya proposal

ini. Kebersamaan ini tidak akan pernah dilupakan.

Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan proposal ini masih jauh dari

sempurna, oleh karena itu penulis menerima masukan, kritikan yang sifatnya

membangun guna kesempurnaan laporan tugas akhir ini.

Jayapura, Januari 2019

Penulis

v
 DAFTAR ISI

Halaman
Halaman Judul ........................................................................... i
Halaman Persetujuan .......................................................................... ii
Halaman Pengesahan ...................................................................... iii
Kata Pengantar ........................................................................ iv
Daftar Isi ......................................................................... vi
Daftar Tabel ....................................................................... viii
Daftar Gambar ......................................................................... ix

BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ......................................................................... 1
B. Rumusan Masalah ......................................................................... 3
C. Tujuan Penelitin ...........................................................................4
1. Tujuan Umum ...........................................................................4
2. Tujuan Khusus ...........................................................................4
D. Manfaat Penelitian ...........................................................................4
E. Keaslian Penelitian ...........................................................................5
F. Hipotesis Penelitian ...........................................................................6

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

A. Tumbuhan Pinang (Areca catechu L.) ..................... ........................................8
1. Morfologi ...........................................................................8
2. Klasifikasi ...........................................................................9
3. Kegunaan dan Manfaat ...........................................................................9
4. Metabolit Sekunder .........................................................................10
B. Bakteri Streptococcus Mutans ...................................................................... 12
1. Morfologi ....................................................................... 12
2. Klasifikasi ..................................................................... 14
C. Antibakteri ..................................................................... 14
D. Gargarisma ..................................................................... 16

vi
E. Monografi Bahan ........................................................................ 17
F. Simplisia ........................................................................ 19
G. Ekstraksi . ....................................................................... 20
H. Skrinning Fitokimia ....................................................................... 21
I. Mutu Fisik Sediaan Gargarisma .................................................................. 23
J. Kerangka Teori ...................................................................... 25
K. Kerangka Konsep ....................................................................... 26
L. Definisi Operasional Variabel ........................................................................ 27

BAB III METODE PENELITIAN

A. JenisPenelitian .........................................................................30
B. Waku dan Tempat Penelitian .......................................................................30
C. Obyek Penelitian .........................................................................30
D. Instrumen Penelitian .........................................................................31
1. Alat .........................................................................31
2. Bahan .........................................................................31
E. Prosedur Kerja ........................................................................ 31
1. Pembuatan Simplisia .........................................................................31
2. Ekstrak Etanol Daun Pinang .................................................................32
3. Uji Skrinning Fitokimia .........................................................................32
4. Formulasi Sediaan Gargarisma ................................................................34
5. Uji Aktivitas Antibakteri .........................................................................36
6. Uji Mutu Fisik Sediaan Gargarisma ......................................................37
F. Cara Pengumpulan Data .........................................................................38
G. Analisa Data .........................................................................38
H. Alur Penelitian ....................................................................... 39
I. Jadwal Penelitian .........................................................................40
DAFTAR PUSTAKA .........................................................................41

vii
 DAFTAR TABEL

Halaman
Tabel 1 Keaslian Penelitian ....................................................................5
Tabel 2 Klasifikasi Respon Hambatan Pertumbuhan Bakteri .......................15
Tabel 3 Definisi Operasional ..................................................................27
Tabel 4 Formulasi Sediaan Gargarisma Ekstrak Biji Pinang ...........................34
Tabel 5 Formulasi Sediaan Gargarisma Ekstrak daun Pinang .........................35
Tabel 6 Jadwal Penelitian ..................................................................40

viii
 DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 1 Tumbuhan Pinang (Areca catechu L.) ................................................9
Gambar 2 Streptococcus mutans di Bawah Mikroskop dengan Perbesaran
1000 Kali .......................................................................13
Gambar 3 Bakteri Streptococcus mutans .........................................................14
Gambar 4 Kerangka Teori .......................................................................25
Gambar 5 Kerangka Konsep .......................................................................26
Gambar 6 Alur Penelitian .......................................................................39

ix
 BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Dalam bidang kesehatan gigi dan mulut, karies gigi adalah salah satu

gangguan kesehatan gigi. Karies gigi terbentuk karena ada sisa makanan yang

menempel pada gigi yang pada akhirnya menyebabkan pengapuran gigi,

dampaknya gigi menjadi keropos, berlubang, bahkan patah (Sinaga, 2013).

Di Indonesia penyakit karies gigi mengalami peningkatan, hal ini berdasarkan

dari laporan Riset Kesehatan Dasar Pada tahun 2007 sebanyak 67,2%

masyarakat Indonesia mempunyai pengalaman karies gigi dan meningkat

menjadi 72,3% pada tahun 2013. Walaupun penyebabnya multifaktor, namun

dapat dikatakan bahwa pemicu terjadinya karies gigi adalah bakteri dominan

Streptococcus yakni Streptococcus mutans ( Kemenkes RI, 2014; Rosdiana,

2016 ).

Salah satu cara untuk mengatasi terbentuknya karies gigi yaitu dengan

menggunakan gargarisma (obat kumur) yang mengandung bahan antibakteri,

bahan aktif gargarisma yang bersifat antibakteri dapat berasal dari bahan

kimia maupun bahan alam. Namun karena selogan “Back to Nature” yang

sering terdengar di masyarakat, maka bahan alam pun menjadi sorotan yang

sangat populer (Akraina, 2011).

Untuk merawat kesehatan gigi dan mulut dapat digunakan tanaman

herbal contohnya tanaman Pinang (Areca catechu L.). Pinang tidak asing lagi

dan sering di jumpai dalam kehidupan sehari-hari. Di Papua, Pinang (Areca

1
 2

catechu L.) termasuk jenis tanaman khas karena penyebarannya yang hampir

merata diseluruh wilayah papua. Bagi orang papua, buah pinang dipercaya

bermanfaat bagi pencernaan dan sebagai penguat gigi, sebagai pengobat

beragam penyakit (seperti luka kulit, kudis, koreng, rabun mata, bisul,

cacingan penghilang bau mulut), dan sarinya menjadikan tubuh bersih dari

dalam (Yuliana, 2018).

Tumbuhan pinang (Areca catechu L.) telah lama dikenal dan hampir

semua bagian tumbuhan dapat dimanfaatkan. Biji pinang berkhasiat seebagai

antielmintik, penenang, mengobati luka, memperbaiki pencernaan,

meluruhkan dahak dan malaria. Sabut pinang dapat digunakan untuk

mengatasi gangguan pencernaan (dispepsia), sulit buang air besar (sembelit),

edema, dan beri-beri (Dalimartha, 2009). Daun pinang mengandung minyak

atsiri yang dapat mengobati gangguan radang tenggorokan, dan pembuluh

broncial. Pucuk daun muda yang rasanya pahit pun dapat dijadikan obat nyeri

otot (Kristinan & Syahid, 2007).

Dalam penelitian Wenetu (2011), variasi bahan pada pembuatan

gargarisma kadar tween 80 berpengaruh terhadap sifat fisik sediaan

gargarisma ekstrak biji buah pinang (Areca catechu L.) yang dihasilkan.

Semakin tinggi kadar tween 80 hasil sediaan yang didapat akan semakin baik.

Pada penelitian Afni, Said, dan Yuliet (2015), sediaan pasta gigi yang

mengandung ekstrak biji pinang memiliki aktivitas antibakteri terhadap

Streptococcus mutans dengan konsentrasi ekstrak biji pinang 4,5% yang dapat

menghasilkan diameter daya hambat untuk bakteri Streptococcus mutans

 3

sebesar 11,37 mm. Di dalam hasil penelitian Debby Siregar (2016), obat

kumur yang mengandung ekstrak biji buah pinang berpengaruh terhadap

penurunan akumulasi plak gigi bila dibandingkan dengan obat kumur plasebo.

Berdasarkan penelitian Merry Anggraini (2002), hasil bioekstraksi yang

terdiri dari akar, buah, dan daun pinang yang memiliki aktivitas sebagai daya

hambat terhadap bakteri Streptococcus mutans yang relatif besar adalah pada

daun pinang. Bakteri Streptococcus mutans merupakan bakteri yang terletak

di dalam mulut dan dapat menyebabkan karies gigi, sehingga dibutuhkan

formulasi sediaan gargarisma dari ekstrak daun pinang untuk mengatasi

pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans. Oleh karena itu peneliti ingin

memanfaatkan daun dari tanaman pinang untuk diformulasikan menjadi

sediaan gargarisma, sehigga peneliti memilih judul “Uji Aktivitas Sediaan

Gargarisma dari Ekstrak Daun Pinang (Areca catechu L.) terhadap Bakteri

Streptococcus mutans”.

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang masalah dapat di rumuskan permasalahan

sebagai berikut :

Apakah formulasi sediaan gargarisma dari ekstrak daun pinang (Areca

catechu L.) memiliki aktivitas antibakteri dalam menghambat bakteri

Streptococcus mutans penyebab karies gigi ?

 4

C. Tujuan Penelitian

1. Tujuan Umum

Untuk mengetahui aktivitas antibakteri sediaan gargarisma ekstrak daun

pinang (Areca catechu L.) terhadap bakteri Streptococcus mutans.

2. Tujuan Khusus

a. Untuk mengetahui skrinning fitokimia dari ekstrak daun pinang (Areca

catechu L.).

b. Untuk mengetahui mutu fisik formulasi sediaan gargarisma ekstrak

daun pinang (Areca catechu L.).

c. Untuk mengetahui konsentrasi yang paling besar pada formulasi

sediaan gargarisma dalam menghambat bakteri Streptococcus mutans.

D. Manfaat Penelitian

1. Bagi IPTEK

Manfaat penelitian bagi pengembangan IPTEK sendiri dapat menambah

ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang kesehatan, yang menjelaskan

bahwa daun pinang dapat dimanfaatkan sebagai sediaan untuk obat kumur.

2. Bagi Institusi

Memberikan informasi hasil dan menambah data penelitian dari formulasi

sediaan antiseptik obat kumur ekstrak daun pinang sebagai karies gigi dan

bau mulut.
 5

3. Bagi Peneliti

Menambah pengalaman dalam melakukan penelitian dan menambah

wawasan dalam menganalisis sediaan antiseptik obat kumur ekstrak daun

pinang khususnya untuk menjaga kesehatan mulut.

E. Keaslian Penelitian

Tabel 1. Keaslian Penelitian

No Nama Peneliti Tahun Judul

Formulasi Sediaan Gargarisma
Ekstrak Biji Buah Pinang (Areca
1 Pandu Wenetu 2011
catechu L.) dengan Variasi
Kadar Tween 80
Uji Aktivitas Antibakteri Pasta
Nur Afni, Gigi Ekstrak Biji Pinang (Areca
2 Nasrah Said, 2015 catechu L.) terhadap
Dan Yuliet Streptococcus mutans dan
Staphylococcus aureus
Efektivitas Penggunaan Obat
Kumur Ekstrak Biji Buah Pinang
Debby Permata
3 2016 (Areca catechu L.) 3% terhadap
Sari Siregar
Akumulasi Plak pada Mahasiswa
FKG USU Angkatan 2011

1. Pada penelitian Pandu Wenetu (2011), formulasi pembuatan sediaan

gargarisma dengan memvariasikan kadar tween 80 yang dapat

mempengaruhi sifat fisik sediaan gargagarisma dan sampel yang

digunakan adalah ekstrak biji buah pinang (Areca catechu L.). Sedangkan

pada peneliti ini sampel yang digunakan adalah ekstrak daun pinang dan

tidak menggunakan variasi tween 80.

2. Nur Afni, Nasrah Said, dan Yuliet (2015), menguji aktivitas antibakteri

sediaan yang diformulasikan menjadi sediaan pasta gigi ekstrak biji

 6

pinang (Areca catechu L.) dan di ujikan terhadap bakteri Streptococcus

mutans dan Staphylococcus aureus. Sedangkan pada penelitian ini,

sediaan yang akan dibuat adalah gargarisma dari ekstrak daun pinang

(Areca catechu L.) dan kemudian dilakukan uji aktivitas antiibakteri

terhadap bakteri Streptococcus mutans.

3. Debby Permata Sari Siregar (2016), melakukan penelitian untuk

mengetahui pengaruh obat kumur yang mengandung ekstrak bji buah

pinang terhadap penurunan akumulasi plak terhadap mahasiswa Fakultas

Kedoteran Gigi Universitas Sumatera Utara. Sedangkan pada penelitian

ini hanya untuk mengetahui mutu fisik sediaan dan untuk mengetahui

pengaruh gargarisma ekstrak daun pinang (Areca catechu L.) terhadap

aktivitas bakteri Streptococcus mutans.

F. Hipotesis Penelitian

Hipotesis adalah suatu pernyataan hubungan antara dua variabel atau

lebih yang dapat menjawab pertanyaan penelitian. Sehingga hipotesis tidak

menilai benar atau salah tetapi menguji asumsi dengan data empiris apakah

sesuai atau tidak (Surahman, Rachmat, & supardi, 2016).

Hipotesis :

H0 = Tidak ada perbedaan aktivitas mutu fisik dan aktivitas antibakteri

pada Formula 1, Formula 2, dan Formula 3 sediaan gargarisma

ekstrak daun pinang (Areca catechu L.).

 7

H1 = Ada perbedaan aktivitas mutu fisik dan aktivitas antibakteri pada

Formula 1, Formula 2, dan Formula 3 sediaan gargarisma ekstrak

daun pinang (Areca catechu L.).

 BAB II
TINJAUAN UMUM

A. Tumbuhan Pinang (Areca catechu L.)

Tumbuhan pinang (Areca catechu L.) merupakan salah satu dari jenis

tumbuhan yang memiliki banyak kegunaan antara lain untuk dikonsumsi,

bahan industri kosmetika. Kesehatan, dan bahan pewarna pada industri

tekstil. Tumbuhan ini tumbuh dan tersebar luas di wilayah India, Malaysia,

Taiwan, Indonesia, dan negara asia lainnya, baik secara individu maupun

populasi (Jaiswal et al., 2011).

1. Morfologi

Pinang merupakan tumbuhan palma family Arecaceae yang

tingginya dapat mencapai 12 hingga 30 cm, berakar serabut berwarna

putih, batang tegak lurus bergaris tengah 15 sampai 20 cm, tidak

bercabang dengan bekas daun yang lepas terlihat jelas. Pembentukan

batang baru terjadi setelah 2 tahun dan berbuah pada umur 5 hingga 8

tahun tergantung keadaan tanah, tanah dengan kelembaban yang baik

dan memiliki rentang pH 5-8 sangat mendukung untuk pertumbuhan

(Staples & Bevacqua, 2006). Daun memiliki panjang sekitar 1,5 hingga 2

m, daunnya tunggal menyirip bertoreh sangat dalam tumbuh berkumpul

di ujung batang membentuk roset batang (Jaiswal et al., 2011).

8
 9

2. Klasifikasi

Menurut Herbarium Medanese (2016), klasifikasi tumbuhan pinang

adalah sebagai berikut :

Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyte
Class : Monocotyledonae
Ordo : Arecales
Famili : Arecaceae/palmae
Genus : Areca L.
Jenis : Areca catechu L.

Gambar 1. Tumbuhan Pinang (Areca catechu L.)

Sumber : Dokumentasi Pribadi, 2019

3. Kegunaan dan Manfaat

Daun pinang dapat mengobati gangguan radang tenggorokan,

pangkal tenggorokan, dan pembuluh broncial. Pucuk daun muda yang

rasanya pahit pun dapat dijadikan obat nyeri otot. Selain obat, daun pinang

dapat dijadikan sebagai pupuk hijau. Pelepah pinang dapat dipakai sebagai

bahan baku pembungkus makanan, kantong tempat ikan, serta alat

 10

permainan anak-anak (Sihombing, 2000). Biji pinang berkhasiat sebagai

antielmintik, penenang, mengobati luka, memperbaiki pencernaan,

meluruhkan dahak dan malaria. Sabut pinang dapat digunakan untuk

mengatasi gangguan pencernaan (dispepsia), sulit buang air besar

(sembelit), edema dan beri-beri karena urin sedikit (Dalimartha, 2009).

Berbagai penelitian telah dilakukan untuk menguji manfaat sabut pinang,

diantaranya sebagai antioksidan (Zhang, dkk., 2009) dan antidiare

(Tamimi, 2015). Daun pinang mengandung minyak atsiri yang dapat

mengobati gangguan radang tenggorokan, dan pembuluh broncial. Pucuk

daun muda yang rasanya pahit pun dapat dijadikan obat nyeri otot

(Kristinan & Syahid, 2007).

4. Metabolit Sekunder

Belum terdapat data penelitian skrining fitokimia pada daun pinang

secara spesifik, tetapi sudah terdapat beberapa penelitian tentang senyawa

yang ada di dalam biji pinang. Golongan metabolit sekunder yang terdapat

didalam infusa biji pinang (Areca catechu L.) antara lain flavonoid, tanin

dan saponin (Shie, 2014).

Beberapa penelitian menyatakan senyawa kimia dalam tumbuhan

pinang (Areca catechu L.) dapat bersifat antibakteri yaitu mampu

menghambat pertumbuhan bakteri (Nugraha, 2013). Zat aktif yang dapat

digunakan sebagai antibakteri pada biji pinang yaitu Polyphenol,

Flavonoid, Tanin dan Alkaloid. Fungsi kandungan senyawa zat aktif

dalam biji pinang sebagai antibakteri adalah sebagai berikut :

 11

a. Polyphenol

Polyphenol bekerja dengan cara membentuk ikatan koagulasi

protoplasma bakteri. Berperan sebagai pendenaturasi protein serta

mencegah proses perkembangan metabolisme bakteri.

b. Flavonoid

Flavonoid bersifat desinfektan yang bekerja dengan cara mendenaturasi

protein yang dapat menyebabkan aktifitas metabolisme sel bakteri

berhenti karena semua aktivitas metabolisme sel bakteri dikatalisis oleh

suatu enzim yang merupakan protein. Berhentinya aktivitas

metabolisme ini akan mengakibatkan kematian sel bakteri. Flavonoid

juga bersifat bakteriostatik yang bekerja melalui penghambatan sintesis

dinding sel bakteri (Trease & Evans dalam Wibowo, 2012).

c. Tanin

Tanin merupakan salah satu jenis senyawa yang termasuk ke dalam

golongan polifenol. Senyawa tanin ini banyak dijumpai pada tumbuhan.

Tanin memiliki aktivitas antibakteri, secara garis besar mekanisme yang

diperkirakan adalah toksisitas tanin terhadap ion logam yang dapat

menambah daya toksisitas tanin itu sendiri. Mekanisme kerja tanin

diduga dapat mengkerutkan dinding sel atau membrane sel sehingga

mengganggu permeabilitas sel. Akibat terganggunya permeabilitas, sel

tidak dapat melakukan aktivitas hidup sehingga pertumbuhannya

terhambat dan mati (Ajizah, 2004).

 12

d. Alkaloid

Senyawa alkaloid memiliki aktivitas mekanisme antibakteri dengan

penghambatan dengan cara mengganggu komponen penyusun

peptidoglikan pada sel bakteri, sehingga lapisan dinding sel tidak

terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel tersebut

(Juliantina, 2008).

B. Bakteri Streptococcus Mutans

1. Morfologi

Streptococcus mutans merupakan bakteri gram positif, bersifat

nonmotil (tidak bergerak), bakteri anaerob fakultatif. Memiliki bentuk

kokus yang sendirian berbentuk bulat atau bulat telur dan tersusun dalam
0 0
rantai.Bakteri ini tumbuh secara optimal pada suhu sekitar 18 -40 Celsius

(Widya Ari, 2008). Streptococcus mutans biasanya ditemukan pada

rongga gigi manusia yang luka dan menjadi bakteri yang paling kondusif

menyebabkan karies untuk email gigi.

Pengamatan dibawah mikroskop memperlihatkan bahwa morfologi

baktreri Streptococcus mutans berupa memiliki bentuk coccus dengan

diameter 1-2 μm dan menyerupai bentuk rantai. Perkembangan bakteri ini

melakui cara membelah ke satu arah dan memiliki kecenderungan untuk

tetap bersama membentuk coccus.

Penyakit yang disebabkan oleh bakteri ini adalah karies gigi.

Beberapa hal yang menyebabkan karies gigi bertambah parah adalah

seperti asupan sukrosa, ketahanan host (gigi) dan saliva. Setelah

 13

mengkonsumsi makanan yang mengandung sukrosa atau beberapa menit

setelah penyikatan gigi dilakukan, glikoprotein yang melekat (kombinasi

molekul protein dan karbohidrat) akan tetap bertahan pada gigi untuk

mulai membentuk plak pada permukaan email gigi. Pada saat yang sama

bakteri Streptococcus mutans dalam jumlah yang sangat banyak juga

terkandung pada glikoprotein. Walaupun banyak bakteri jenis lain yang

melekat namun hanya Streptococcus mutans yang dapat menyebabkan

kareis gigi (Nugraha, 2008). Beberapa sifat penting yang ditunjukkan

oleh bakteri Streptococcus mutans yaitu :

a. Mampu mensintesis polisakarida yang tidak dapat dipecahkan dari

sukrsosa,

b. Membentuk homo fermentasi asam laktat,

c. Mampu membunuh koloni pada permukaan gigi, dan

d. Lebih bersifat asam dari spesies Streptococcus yang lain.

(Supartinah, 2001)

Gambar 2. Streptococcus mutans di Bawah Mikroskop

dengan Pembesaran 1000 kali
Sumber : Rosdiana, 2016
 14

2. Klasifikasi

Menurut Milad 2014, klasifikasi bakteri Streptococcus mutans

adalah sebagai berikut :

Kingdom : Bacteria
Phylum : Firmicutes
Kelas : Cocci
Ordo : Lactobacillales
Famili : Streptococcaceae
Genus : Streptococcus
Spesies : Streptococcus mutans

Gambar 3. Bakteri Streptococcus mutans

Sumber : Milad, 2014

C. Antibakteri

Antibakteri merupakan suatu senyawa yang mampu membunuh bakteri

secara langsung (Bacteriasidal) atau mampu menghambat pertunbuhana dari

mikroba (Bacteriostatic). Bacteriostastic memiliki pertahanan sendiri

termasuk dalam mempertahankan antibodi dan phagositosis yang biasanya

berguna untuk membunuh mikroorganisme (Pratiwi, 2008). Terdapat dua

metode untuk menguji daya antimikroba, yaitu dilusi dan difusi. Menurut

Pratiwi (2008) metode difusi dan metode dilusi terbagi menjadi beberapa

metode, yaitu:
 15

1. Metode Difusi adalah pengukuran dan pengamatan diameter zona bening

yang terbentuk di sekitar cakram, dilakukan pengukuran setelah

didiamkan selama 18-24 jam dan diukur menggunakan jangka sorong

(Khairani, 2009). Salah satu metode difusi adalah Metode disc diffusion

atau metode Kirby Baure, metode ini menggunakan kertas cakram yang

berisi zat antimikroba dan diletakkan pada media agar yang telah ditanami

bakteri uji (Sari et al., 2013).

2. Metode Dilusi (metode pengenceran) merupakan metode yang dilakukan

dengan mengencerkan zat antimikroba yang dimasukkan kedalam

tabung-tabung reaksi steril. Masing-masing tabung tersebut ditambahkan

sejumlah mikroba uji yang telah diketahui jumlahnya. Pada interval

tertentu, dilakukan pemindahan dari tabung-tabung reaksi kedalam

tabung-tabung reaksi berisi mediasteril kemudian diinkubasi dan diamati

penghambatan pertumbuhannya (Pratiwi, 2008).

Tabel 2 : Klasifikasi respon hambatan pertumbuhan bakteri

Diameter zona bening Respon hambatan

pertumbuhan
>20 mm Kuat
16-20 mm Sedang
10-15 mm Lemah
<10 mm Kurang efektif
Sumber : Greenwood, 1995

Metode yang dipergumnakan umumnya adalah metode difusi Kirbi

Bauer, dasar pemilihan metode ini adalah karena cepat, mudah dan

sederhana dalam pengerjaannya. Prinsip dari metode difusi Kirbi Bauer zat

uji dengan konsentrasi b/v yang diteteskan pada kertas cakram dapat terdifusi
 16

dengan baik pada permukaan media padat yang sebelumnya telah diinokulasi

bakteri uji pada permukaannya. Kontrol positif berfungsi sebagai kontrol dari

zat uji, dengan membandingkan Diameter Daerah Hambat (DDH) yang

terbentuk. Kontrol negatif yang digunakan adalah aquadest steril, kontrol

negatif berfungsi untuk mengetahui ada tidaknya pengaruh pelarut terhadap

pertumbuhan bakteri sehingga dapat diketahui bahwa yang mempunyai

aktivitas antibakteri adalah zat uji bukan pelarut (Nuria, 2009)

D. Gargarisma

Obat kumur (gargarisma/gargle) merupakan larutan yang biasanya

mengandung bahan penyegar nafas, astringen, demulsan, surfaktan, atau

antibakteria untuk menyegarkan dan membersihkan saluran pernafasan yang

pemakainnya dengan cara berkumur (Akarina, 2011).

Gargarisma sudah digunakan sejak dahulu dengan tujuan untuk

mengurangi mikroorganisme dalam rongga mulut. Komposisi obat kumur

secara umum adalah zat aktif, air (pelarut), dan pemanis (perasa). Sebagai

pemanis sering digunakan sorbitol, sucralose, sakarin Na, atau xylitol yang

juga memberikan aktivitas penghambatan pertumbuhan mikroba

(Sariningrum, 2009).

Obat kumur merupakan cairan yang berupa larutan dalam air yang

digunakan pada mulut. Tetapi tidak semua obat kumur tersedia dalam bentuk

tersebut. Beberapa produk dalam bentuk padatan atau cairan pekat yang harus

diencerkan terlebih dahulu sebelum digunakan. Secara umum, obat kumur

dapat berupa kosmetik, astringen, konsentrat, buffer, dan deodoran. Selain itu
 17

juga terdapat obat kumur yang didesain untuk membunuh mikroba normal

yang ditemukan dalam jumlah banyak di mulut dan tenggorokan, serta yang

didesain untuk terapi (Yulineri, 2006).

E. Monografi Bahan

1. Propylene glycol

Propylene glycol berfungsi sebagai zat tambahan atau pelarut.

Pemerian dari propylene glycol adalah cairan kental, jernih, tidak

berwarna, rasa khas, praktis, tidak berbau, dan menyerap air pada udara

lembab. Kelarutan dari propylene glycol adalah dapat bercampur dengan

air, dengan aseton, dan dengan kloroform, larut dalam eter dan beberapa

minyak esensial, tetapi tidak dapat bercampur dengan minyak lemak

(Depkes RI, 2014).

2. Mannitol

Mannitol merupakan gula alkohol berfungsi sebagai pemanis yang

tidak mudah difermentasi oleh mikroorganisme dan memberikan efek

mencegah plak gigi, sehingga manitol bersifat nonkariogenik (Lucida,

2007). Pemerian mannitol adalah mudah larut dalam air, larut dalam

larutan basa, sukar larut dalam piridin, sangat sukar larut dalam etanol,

praktis tidak larut dalam eter . kelarutan mannitol adalah, mudah larut

dalam air, larut dalam larutan basa, tidak berbau, rasa manis (Depkes RI,

2014).
 18

3. Tween 80

Tween 80 memiliki nama resmi Polysorbatum 80 dengan khasiat

dan penggunaanya sebagai zat tambahan. Pemerian dari tween 80 adalah

cairan seperti minyak, jernih, berwarna kuning muda, bau khas lemah,

rasa pahit dan hangat. Kelarutan tween 80 adalah sangat mudah larut

dalam air, larutan tidak berbau dan praktis tidak berwarna, larut dalam

etanol, dalam etil asetat, tidak larut dalam minyak mineral (Depkes RI,

2014).

4. Natrium Benzoat

Natrium bezoat digunakan sebagai sebagai antiseptikum dan

antijamur. Pemerian dari natrium benzoat adalah hablur bentuk jarum atau

sisik, putih, sedikit berbau, biasanya bau benzaldehida atau benzoin, agak

mudah menguap pada suhu hangat, mudah menguap dalam uap air.

Kelarutan natrium benzoat adalah sukar larut dalam air, mudah larut

dalam etanol, dalam kloroform dan eter (Depkes RI, 2014).

5. Mentol

Mentol digunakan sebagai korigen dan antiiritan. Pemerian dari

mentol adalah hablur heksagonal atau serbuk hablur, tidak berwarna,

biasanya berbentuk jarum, atau massa yang melebur,bau enak seperti

minyak permen. Kelarutan dari mentol adalah sukar larut dalam air,

sangat mudah larut dalam etanol, dalam kloroform, dalam eter, dan

dalam heksan, mudah larut dalam asam asetat glasial, dalam minyak
 19

mineral, dalam minyak lemak, dan dalam minyak atsiri (Depkes RI,

2014).

6. Aqua Destilata

Aqua destilata biasa disebut juga air suling yang dibuat dengan cara

menyuling air yang dapat diminum, aqua destilata berfungsi sebagai

pelarut dan penyesuai volume akhir. Pemerian dari aqua destilata adalah

cairan jernih, tidak berbau, tidak berwarna, tidak mempunyai rasa

(Depkes RI, 2014)

F. Simplisia

Simplisia merupakan bahan awal pembuatan sediaan herbal. Mutu

sediaan herbal sangat dipengaruhi oleh mutu simplisia yang digunakan. Oleh

karena itu, sumber simplisia, cara pengolahan, dan penyimpanan harus dapat

dilakukan dengan cara yang baik. Simplisia adalah bahan alam yang

digunakan sebagai bahan sediaan herbal yang belum mengalami pengolahan

apapun dan kecuali dinyatakan lain simplisia merupakan bahan yang telah

dikeringkan (Ditjen POM, 2005).

Simplisia dibedakan menjadi tiga golongan :

1. Simplisia nabati, simplisia yang berupa tumbuhan utuh bagian tumbuhan

atau eksudat tumbuhan. Eksudat tumbuhan ialah isi sel yang secara

spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang dengan cara tertentu

dikeluarkan dari selnya atau senyawa nabati lainnya yang dengan cara

tertentu dipisahkan dari tumbuhannya dan belum berupa senyawa kimia

murni. Simplisia nabati sering berasal dan berupa seluruh bagian

 20

tumbuhan, tetapi sering berupa bagian atau organ tumbuhan seperti akar,

kulit akar, batang, kulit batang, kayu, bagian bunga dan sebagainya

(Endarini. 2016).

2. Simplisia hewan, seperti halnya dengan simplisia dari tumbuhan diperoleh

dari hewan piaraan atau hewan liar. Hewan liar harus diburu, misalnya

ikan paus, menjangan dan lain-lain. Untuk mendapatkan simplisia dengan

kondisi optimum maka diusahakan sejauh mungkin hewan untuk simplisia

berasal dari hewan peliharaan seperti pada tumbuhan dibudidaya, misal

tawon untuk menghasilkan madu yang baik.

Bahan obat seperti lanolin, produk susu, hormon, produk endokrin dan

beberapa enzim diperoleh dari hewan piaraan seperti domba, sapi, babi

dan sebagainya. Sebagai sumber produk kelenjar hewan dan enzim

biasanya rumah penjagalan, dan dalam jumlah besar dapat dijadikan bahan

obat dalam farmasi (Endarini. 2016).

3. Simplisia pelikan atau mineral

Simplisia pelikan atau mineral adalah simplisia berupa bahan pelikan atau

mineral yang belum diolah atau telah diolah dengan cara sederhana.

Contohnya serbuk seng dan serbuk tembaga (Gunawan, 2010).

G. Ekstraksi

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut

sehingga terpisah dari bahan yang tidak larut dengan pelarut cair. Senyawa

aktif yang terdapat dalam berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam

golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid dan lain-lain. Dengan

 21

diketahuinya senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah

pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat (Dirjen POM, 2000).

Prinsip ekstraksi adalah melarutkan senyawa polar dalam pelarut polar

dan senyawa non polar dalam pelarut non polar. Pelarut yang digunakan

dalam ekstraksi adalah pelarut non polar (n-heksan), pelarut semi polar

(diklorometan atau etil asetat) dan pelarut polar (metanol atau etanol)

(Amalina, 2008).

Metode Ekstraksi yang dipakai untuk penelitian ini adalah Maserasi.

Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut

dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan

(kamar). Prinsip metode maserasi didasarkan bahwa sampel yang direndam

dengan menggunakan pelarut organik akan terjadi pemecahan dinding dan

membran sel akibat dari perbedaan tekanan yang terdapat di luar dan didalam

sel sehingga metabolit sekunder yang terkandung di dalam sitoplasma akan

terlarut kedalam pelarut organik (Yeon-Ju et al.,2014).

H. Skrinning Fitokimia

Skrining fitokimia merupakan cara untuk mengidentifikasi bioaktif yang

belum tampak melalui suatu tes atau pemeriksaan yang dapat dengan cepat

memisahkan antara bahan alam yang memiliki kandungan fitokimia tertentu

dengan bahan alam yang tidak memiliki kandungan fitokimia tertentu.

Skrining fitokimia merupakan tahap pendahuluan dalam suatu penelitian

fitokimia yang bertujuan untuk memberikan gambaran tentang golongan

senyawa yang terkandung dalam tanaman yang sedang diteliti. Metode

 22

skrining fitokimia dilakukan dengan melihat reaksi pengujian warna dengan

menggunakan suatu pereaksi warna. Hal penting yang berperan penting

dalam skrining fitokimia adalah pemilihan pelarut dan metode ekstraksi

(Kristianti, Kurniadi , & Aminah, 2008).

Untuk identifikasi metabolit sekunder yang terdapat pada suatu ekstrak

digunakan berbagai metode berikut ( Kemenkes RI, 2016) :

1. Identifikasi senyawa Alkaloid

Alkaloid merupakan senyawa nitrogen yang sering terdapat didalam

tumbuhan. Salah satu pereaksi untuk mengidentifikasi adanya alkaloid

menggunakan pereaksi Dagendroff yang akan terdapat endapan berwarna

coklat kemerahan, pereaksi Mayer yang yang akan terdapat endapan

berwarna putih, dan pereaksi Wagener yang akan terdapat endapan

berwarna coklat kemerahan.

2. Identifikasa Senyawa Flavonoid

Uji skrining senyawa ini dilakukan dengan cara menggunakan pereaksi

Wilstater atau Sianidin. Adanya flavonoid ditandai dengan warna merah,

oranye dan hijau tergantung struktur flavonoid yang terkandung dalam

sampel.

3. Identifikasa Senyawa Tanin

Uji skrining tanin dapat dilakukan dengan 2 metode yaitu uji gelatin

FeCl3. Untuk uji FeCl3, maka sebanyak 2 ml ekstrak air dari suatu bagian

tanaman ditambahkan ke dalam 2 ml air suling. Selanjutnya, larutan

ekstrak tersebut ditetesi dengan satu atau dua tetes larutan FeCl31%.
 23

Adanya kandungan tanin ditandai dengan timbulnya warna hijau gelap

atau hijau kebiruan. Metode kedua, suatu esktrak bagian tanaman

mengandung tanin jika terbentuk endapan putih, setelah diberi larutan

gelatin 1% yang mengandung .NaCl 10%.

4. Identifikasi Senyawa Polifenol

Untuk identifikasi senyawa polifenol, larutan uji ditambahkan FeCl3, Uji

positif senyawa polifenol akan menimbulkan warna hijau kebiru-biruan

hingga hitam.

5. Identifikasa Senyawa Terpenoid

Terpenoid terdiri atas beberapa macam senyawa, mulai dari komponen

minyak atsiri, yaitu monoterpen dan seskuiterpen yang mudah menguap,

diterpen yang lebih sukar menguap, sampai ke senyawa yang tidak

menguap, triterpenoid dan sterol serta pigmen karotenoid. Uji skrining

senyawa golongan terpenoid dilakukan dengan menggunakan pereaksi

Lieberman-Burchard. Adanya senyawa golongan terpenoid akan ditandai

dengan timbulnya warna merah

I. Mutu Fisik Sediaan Gargarisma

Pengujian mutu fisik sediaan gargarisma adalah sebagai berikut :

1. Uji Organoleptis

Uji organioleptis merupakan pengapamatan sediaan akhir dengan cara

mengamati warna, bau, rasa secara obyektif yang bertujuan untuk melihat

terjadinya perubahan secara signifikan pada sediaan yang telah dibuat

(Apriyanti, 2016)
 24

2. Uji pH Sediaan

Secara umum obat kumur memiliki pH yang berkisar 5-6. Jika pH < dari

5 sediaan terlalu asam dan akan menyebabkan semakin banyaknya

pertumbuhan bakteri dan jika pH > dari 6 maka sediaan terlalu basa dan

akan menyebabkan pertumbuhan jamur sehingga mengakibatkan

timbulnya sariawan (Sopianti & Novero, 2017).

3. Uji Homogenitas

Salah satu syarat sediaan larutan yang baik adalah homogenitas, sediaan

yang homogen merupakan sediaan yang bebas dari kontaminasi dan

pertumbuhan mikroba (Depkes RI, 2014).

 25

J. Kerangka Teori
Klasifikasi dan
morfologi

Tumbuhan pinang Metabolit sekunder

(Areca catechu L.)

Kegunaan dan manfaat

Klasifikasi dan Bakteri Streptococcus
morfologi mutan

Metode difusi Antibakteri Metode dilusi

Gargarisma

Propylene glycol,
Monografi bahan Mannitol, Mentol,
Tween 80,
Natrium Benzoat,
Aqua Destilata
Simplisia

Ekstrasi
Identifikasi
senyawa :
Alkaloid,
Skrinning Fitokimia
Uji Homogenitas Flavonoid,
Tanin,
Terpenoid
Uji pH sediaan Mutu fisik sediaan Polifenol
Gargarisma
Uji Organoleptik

Gambar 4. Kerangka Teori

 26

K. Kerangka Konsep

Variabel Bebas : Variabel terikat :

Uji aktivitas antibakteri dari

Sediaan gargarisma ekstrak sediaan gargarisma ekstrak daun
daun pinang (Areca catechu pinang (Areca catechu L.)
L.) konsentrasi 0,1%, 1%, terhadap bakteri Streptococcus
dan 10% mutans .

Gambar 5. Keragka Konsep

 27

L. Definisi Operasoional Variabel

Tabel 3. Definisi Operasional

Instrumen dan Skala

Variabel Definisi Hasil ukur
Cara ukur data
Gargarisma Larutan Inst: pengamatan 1. Formulasi obat Rasio
ekstrak daun yang kumur ekstrak
pinang mengandung Cara ukur : daun pinang
(Areca ekstrak daun Dilakukan (Areca catechu
catechu L.) pinang berdasarkan L.) konsentrasi
(Areca prosedur 0,1%
catechu L.) pembuatan 2. Formulasi obat
berfungsi kumur ekstrak
untuk daun pinang
mengurangi (Areca catechu
mikroorganis L.) konsentrasi
me dalam 1%
rongga mulut 3. Formulasi obat
kumur ekstrak
daun pinang
(Areca catechu
L.) konsentrasi 10
%
Skrinning Kandungan Inst : 1. Alkaloid (timbul Nominal
fitokimia senyawa Tabung reaksi, endapan merah
ekstrak daun metabolit mortir, stamper, bata dengan
pinang sekunder kertas saring. reagen
(Areca yang Dragendorff dan
catechu L.) terkandung Cara ukur : timbul endapan
dalam daun Dilakukan putih dengan
pinang pengujian warna reagen Mayer),
(Areca terhadap ekstrak 2. Flavonoida
catechu L.) daun pinang (Areca (terbentuk warna
catechu L.) merah dengan
menggunakan serbuk Mg dan
aquadest, besi (III) HCl),
klorida, HCl, Mg, 3. Saponin
reagen liberman (terbentuk buih
buchard, yang stabil
dragendroff, selama 10 menit
mayer. dengan tinggi 3
cm dengan
larutan aquades),
4. Tanin (timbul
 28

warna hijau
kehitaman
dengan ditetesi
besi (III) klorida,
5. Triterpenoid dan
steroid (warna
merah ungu
(violet), coklat,
ungu tua dengan
reagen liberman
buchard).
Uji Pemeriksaan Inst : 1. Warna : Nominal
organoleptik organoleptik Sistem indera Stabil : Hijau
meliputi Tidak stabil :
warna, bau, Cara ukur : selain hijau
dan bentuk pengamatan 2. Bau :
yang diamati Stabil : Bau
secara visual mentol
Tidak stabil :
tidak memiliki
bau mentol
3. Bentuk :
Stabil : Cair
Tidak stabil :
tidak cair (kental)
Uji pH Ukuran Inst : 1. Stabil : pH 5-6 Nominal
konsentrasi pH meter
ion hidrogen 2. Tidak stabil :
dari larutan. Cara ukur : pH > 5 dan > 6
pH meter dicelupkan
pada sediaan untuk
melihat berapa pH
sediaan.

Uji Pemeriksaan Inst : 1. Stabil : Nominal

homogenitas yang berupa Tabung reaksi, Bahan terlarut
menyatunya kertas hitam, dan sempurna
bahan aktif kertas putih
dan bahan 2. Tidak stabil :
tambahan Cara ukur : Bahan tidak
terhadap diamati terlarut sempurna
pelarutnya melalui latar
yang diamati berwarna hitam dan
secara visual putih.
 29

Aktivitas Pengujian Inst : Diameter Ordinal

antibakteri sediaan obat Media agar dan >20 mm = kuat,
terhadap kumur kertas cakram, 16-20 mm =
bakteri terhadap Jangka Sorong sedang
Streptococcu bakteri 10-15 mm = lemah
s mutans Streptococcu Cara ukur : <10 mm = kurang
s mutans Diameter zona efektif
menggunaka hambat
n metode
difusi agar
 BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah jenis

penelitian eksperimen laboratorium, yaitu suatu pengujian yang dilakukan

dilaboratorium untuk menguji dan mengamati aktivitas antibakteri sediaan

obat kumur dari ekstrak daun pinang (Areca catechu L.) terhadap bakteri

Streptococcus mutan penyebab karies gigi (Notoatmodjo, 2010)

B. Waktu dan Tempat Penelitian

1. Waktu

Penelitian ini dilakukan pada bulan April-Mei 2019

2. Tempat

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Fitokimia Jurusan Farmasi

Poltekkes Jayapura dan Laboratorium Farmasi FMIPA Universitas

Cendrawasih Jayapura,.

C. Objek Penelitian

Objek penelitian ini adalah daun pinang (Areca catechu L.) yang

diperoleh dari kecamatan Abepura Kota Jayapura Jl. Abe pantai Tanah Hitam

sebanyak 5 Kg.

30
 31

D. Instrumen Penelitian

1. Alat

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah peralatan kaca, botol 100

ml untuk sediaan obat kumur, incubator, kertas saring, mortir (diameter

12 cm), autoclave, timbangan digital (gram), sendok tanduk, dan

waterbath.

2. Bahan

Bahan yang digunakan untuk penelitian ini adalah daun pinang (Areca

catechu L.), aquadest, larutan Tween 80, mannitol, bakteri Streptococcus

mutan, medium Mueller Hinton Agar (MHA), mentol, dan natrium

benzoat, dan propylene glycol.

E. Prosedur Kerja

1. Pembuatan simplisia

a. Pengumpulan daun pinang (Areca catechu L.)

b. Dilakukan sortasi basah kemudian daun pinang (Areca catechu L.)

dicuci dipotong-potong hingga menjadi kecil-kecil..

c. Dikeringkan dengan cara diangin-anginkan ditempat yang tidak

terkena sinar matahari langsung.

d. Daun pinang (Areca catechu L.) yang telah kering dihalus kan

menjadi partikel-partikel kecil kurang lebih 1 cm..

 32

2. Ekstrak etanol daun pinang (Areca catechu L.)

Pembuatan ekstrak dilakukan dengan metode maserasi dengan

pelarut etanol 96%. Sebanyak 400 gr simplisia ekstrak daun pinang

dengan perbandingan 1: 3 dengan pelarutnya, jadi pelarut yang akan

digunakan sebanyak 1.200 ml per hari.

Prosedur kerja pembuatan ekstrak etanol daun pinang (Areca catechu L.)

adalah sebagai berikut (Endarini, 2016) :

a. Dimasukkan serbuk daun pinang ke dalam wadah

b. Ditambahkan dengan pelarut etanol 96% sebanyak 1.200 ml ke dalam

wadah dan ditutup

c. Di biarkan selama 3 hari pada temperatur suhu kamar dan terlindung

dari cahaya, sambil berulang-ulang diadukselama

d. Disaring ke dalam wadah bejana penampung untuk diambil fitratnya

setiap 1x24 jam

e. Filtrat yang diperoleh dipekatkan menggunakan evaporator dengan

suhu 50 oC-60oC.

3. Uji skrinning fitokimia

a. Uji Senyawa alkaloid

Sebanyak 2 g ekstrak daun pinang ditambahkan dengan 5 ml

ammonia digerus dalam mortir, kemudian ditambahkan 20 ml

kloroform, digerus kuat dan saring. Ke dalam filtrate ditambahkan

asam klorida, kemudian dibagi 2, masing-masing ditambahkan

pereaksi Dragendorff, reaksi positif ditunjukkan dengan

 33

terbentuknya endapan merah bata dan pada pereaksi Mayer, reaksi

positif ditunjukkan dengan terbentuknya endapan putih (Hayati et

al., 2012).

b. Senyawa flavonoida

Sebanyak 1 g ekstrak daun pinang dalam 100 ml air panas

didihkan selama 5 menit, kemudian disaring. Sebanyak 5 ml

larutan uji ditambahkan serbuk magnesium dan 2 ml asam klorida-

etanol, kemudian dikocok dengan 10 ml amil alkohol. Reaksi

positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna merah yang tertarik

pada lapisan amil alkohol(Arianti et al., 2013).

c. Uji Saponin

Ekstrak diambil 2 g dan ditambahkan dengan 10 ml aquades

kemudian dikocok kuat selama kurang lebih 1 menit. Selanjutnya

didiamkan selama 10 menit dan diamati buih atau busa yang

terbentuk. Keberadaan senyawa saponin dalam sampel ditandai

dengan terbentuknya buih yang stabil selama 10 menit dengan

tinggi 3 cm (Sandriana et al., 2014).

d. Uji Tanin

Ekstrak diambil 2 g dan ditambahkan dengan 10 mL air

panas, kemudian ditetesi menggunakan besi (III) klorida,

keberadaan tannin dalam sampel di tandai dengan timbulnya warna

hijau kehitaman (Sandriana et al., 2014).

 34

e. Senyawa Triterpenoid dan Steroid

Ekstrak daun pinang diambil 1 g, dilarutkan dalam 0,5 ml

kloroform dan ditambah dengan 0,5 ml asam asetat anhidrat.

Campuran ini selanjutnya ditambahkan dengan 1-2 ml H2SO4 pekat

melalui dinding tabung. Jika hasil yang diperoleh berupa cincin

kecoklatan atau violet pada perbatasan dua pelarut maka ekstrak

tersebut menunjukkan adanya triterpenoid, sedangkan jika hasil

yang diperoleh terbentuk warna hijau kebiruan maka ekstrak

tersebut menunjukkan adanya steroid (Halimah, 2010).

4. Formulasi sediaan gargarisma ekstrak daun pinang (Areca catechu L.)

Formulasi standar sediaan gargarisma sebagai berikut :

Tabel 4. Formulasi sediaan obat kumur ekstrak biji buah pinang

Bahan Jumlah
Ekstrak biji buah pinang 0,44 g
Propylene glycol 4g
Mannitol 1g
Larutan Tween 80 1,5 %
Na. Benzoat 0,1%
Mentol 0,05 %
Aquadest ad 200 ml
Sumber : Pandu Wenetu, 2011

Berdasarkan formulasi diatas, dilakukan modifikasi formulasi

gargarisma dengan mengganti bahan ekstrak biji buah pinang menjadi

ekstrak daun pinang (Areca catechu L.) dengan konsentrasi 0,1%, 1%,

dan 10%.
 35

Tabel 5. Formulasi sediaan gargarisma ekstrak daun pinang

(Areca catechu L.)

Formula 1 Formula 2 Formula 3

Bahan 0,1% 1% 10%

Ekstrak daun pinang 0,1 g 1 g 10 g

Propylene glycol 2g 2g 2g
Manitol 0,5 g 0,5 g 0,5 g
Larutan Tween 80 0,75 % 0,75 % 0,75 %
Na. Benzoat 0,05% 0,05% 0,05%
Mentol 0,025 % 0,025 % 0,025 %
Aquadest ad 100 ml 100 ml 100 ml

Proses pembuatan gargarisma ekstrak daun pinang (Areca catechu L.) :

a. Disiapkan alat dan bahan

b. Dilakukan kalibrasi botol ad 100 ml

c. Ditimbang masing-masing bahan yang akan digunakan

d. Dimasukkan ekstrak daun pinang dan propylene glycol kedalam

erlenmeyer, kemudian dicampur hingga homogen

e. Di tambahkan natrium benzoat dan mannitol, kemudian dicampur

hingga homogen

f. Di larutkan mentol menggunakan tween 80 dan masukkan ke dalam

erlenmeyer kemudian dicampur hingga homogen

g. Ditambahkan aqua destilata hingga 100 ml kemudian di campur

hingga homogen

h. Dimasukkan ke dalam botol sediaan. (Wenetu, 2011)

 36

5. Uji aktivitas antibakteri dengan Metode Difusi Agar

a. Pembuatan suspensi bakteri Streptococccus mutan :

Kultur bakteri Streptococccus mutan dengan cara mengambil

satu ose bakteri dari agar miring kemudian dibiakkan ke dalam

media Nutrient Broth (NB) steril, selanjutnya diinkubasi pada suhu

37oC. Setelah 24 jam didapatkan suspensi biakkan bakteri

Streptococccus mutan yang dapat digunakan untuk pengujian

aktivitas antimikroba (Mahmudah & Atun, 2017)..

b. Pembuatan media Mueller Hinton Agar (MHA) :

Sebanyak 3 gram media Mueller Hinton Agar (MHA)

dilarutkan menggunakan 150 ml aquadest, selanjutnya media Mueller

Hinton Agar (MHA) diaduk dan dipanaskan diatas hot plate. Di

masukkan kedalam 5 buah cawan petri dengan masing-masing cawan

petri berisi 15 ml selanjutnya media Mueller Hinton Agar (MHA)

dan kemudian didiamkan di suhu ruang hingga menjadi padat,

selanjutnya media Mueller Hinton Agar (MHA) disterilkan di

autoclave selama 15 menit dengan suhu 121 oC (Mahmudah & Atun,

2017).

c. Uji daya hambat aktivitas antibakteri

Disiapkan 5 cawan petri yang berisikan media Mueller Hinton

Agar (MHA) yang telah disterilkan, selanjutnya diambil suspensi

bakteri Streptococcus mutan menggunakan lidi kapas steril dan

dioleskan secara merata pada permukaan medium agar. Kertas

 37

cakram dicelupkan selama 5 menit kedalam sediaan gargarisma

ekstrak daun pinang (Areca catechu L.) dengan formula konsentrasi

0,1%, 1%, dan 10%. Kertas cakram yang telah dicelupkan ke dalam

sediaan kemudian ditaruh di atas media agar, media agar satu berisi 3

buah kertas cakram yang telah di rendam pada sediaan formula 1,

media agar dua berisi kertas cakram formula 2, media agar tiga berisi

kertas cakram formulasi 3, media agar 4 sebagai kontrol positif, dan

media agar 5 sebagai kontrol negatif yang kertas cakramnya

dicelupkan kedalam aquadest. Setelah itu media diinkubasi selama 24

jam pada suhu 37oC. (Mahmudah & Atun, 2017).

Zona hambat yang terbentuk diamati menggunakan jangka

sorong atau penggaris milimeter sebagai data kualitatif. Pengukuran

dilakukan dengan mengukur delapan sisi yaitu secara horizontal,

vertikal, dan sisi miring. Ukuran yang diperoleh kemudian dirata-rata.

Diameter zona bening dalam satuan milimeter (mm).

6. Uji mutu fisik sediaan gargarisma

a. Uji organoleptik

Uji organoleptik dilakukan oleh 10 orang untuk mengamati tampilan

fisik secara visual dengan mencium bau, melihat warna, dan bentuk

dari sediaan.
 38

b. Uji pH

Uji pH dilakukan dengan mencelup kertas pH indikator dan kemudian

mencocokkan warnanya pada tabel yang telah tersedia dan lihat rentan

pH yang terbentuk, dilakukan pengulakan sebanyak 3 kali.

c. Uji homogenitas

Uji homogenitas dilakukan dengan cara memasukkan sediaan ke

dalam tabung reaksi, kemudian diamati dengan latar berwarna hitam

dan putih untuk melihat homogenitas dari bahan dengan pelarutnya.

dilakukan pengulakan sebanyak 3 kali.

F. Cara Pengumpulan Data

Cara pengumpulan data pada penelitian ini dilakukan dengan cara

pengumpulan primer. Pengumpulan data dilakukan dengan melihat hasil

pengujian sediaan gargarisma ekstrak daun pinang (Areca catechu L.) yang

telah dibuat.

G. Analisa Data

Data yang diperoleh dari uji mutu fisik dan uji antibakteri sediaan

gargarisma ekstrak daun pinang (Areca catechu L.) ditampilkan dalam

bentuk tabel dan narasi kemudian dianalisis menggunakan statistik Anova

One Way dengan metode SPSS.

 39

H. Alur Penelitian

Daun Pinang (Areca catechu L.)

Simplisia Daun Pinang (Areca catechu L.)

Ekstraksi maserasi Uiji Alkaloid

Uji Flavonoid
Uji Saponin
Skrinning Fitokimia Uji Tanin
Uji Triterpenoid
dan steroid
Formulasi sediaan gargarisma ekstrak
daun pinang (Areca catechu L.)

Konsentrasi 0,1% Konsentrasi 1% Konsentrasi 10%

Uji aktivitas terhadap bakteri

Streptococcus mutan pada media agar

Uiji Organoleptik
Uji mutu fisik sediaan gargarisma ekstrak Uji Ph
daun pinang (Areca catechu L.) Uji Homogenitas

Analisa Data

Gambar 6. Alur Penelitian

 40

I. Jadwal Penelitian

Tabel 6. Jadwal Penelitian

Bulan
No Uraian Kegiatan
12 1 3 4 5 6

1. Pembuatan Proposal ###

2. Penyajian Proposal ###

3, Uji Coba Instrumen ###

4. Pengambilan Data ###

5. Pengelolahan Data dan Analisis ###

6. Penulisan laporan tugas akhir ###

7. Penyajian dan ujian laporan ###

tugas akhir
 DAFTAR PUSTAKA

Amalina. (2008). Uji sitotoksik ekstra ketanol 70% buah merica hitam (Piper
nigrum L.) terhadap sel HeLa. Fakultas Farmasi Universitas. Surakarta :
Muhammadiyah Surakarta.
Akarina. (2011). Pengaruh Konsentrasi Humektan terhadap Stabilitas Formulasi
Obat Kumur. Medan : Jurnal USU.

Ariyanti, Dyah Arum, Khairul Anam, Dewi Kusrini. (2013). Identifikasi Senyawa
Flavonoid dari Daun Ketapang Kencana (Terminaliamuelleri Benth) dan
Uji Aktivitas Sebagai Antibakteri Penyebab Bau Badan: Journal Chem
Info.

Anggraeni. (2002). Pemanfaatan Ekstrak Selenium Pinang dengan Fermentasi

Acetobacter-Saccharomyces sebagai Antiseptik Obat Kumur. Bogor :
IPB.

Dalimartha. (2009). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 1. Jakarta : Trubus

Agriwidya.

Dirjen POM. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta
: Cetakan Pertama.

Dey. (2014). Uji Aktivitas Antibakteri Infusa Biji Pinang (Areca catechu Lin.)
Terhadap Streptococcus mutans. Pontianak : Universitas Tanjung Pura.

Endarini L. (2016). Farmakogni dan Fitokimia. Jakarta : Pusat Data dan Informasi
Kementerian Kesehatan RI.

Greenwood. (1995). Antibiotics Susceptibility (Sensitivity) Test, Antimicrobial

and Chemotheraphy. USA : Mc Graww Hill Company.

Gunawan, Didik dan Sri M. (2010). Ilmu Obat Alam (Farmakognosi) jilid 1,
Jakarta: Penebar Swadaya.

Hayati. Elok Kamilah, Akyunul Jannah, Rachmawati Ningsih. (2012). Identifikai

senyawa dan Aktivitas Antimalaria in Vivo Ekstrak Etil Asetat Tanaman
Anting-anting (Acalyphaindica L.). Surakarta : Universitas Sebelas Maret

Halimah, N. (2010). Uji Fitokimia dan Uji Toksisitas Ekstrak Tanaman Anting-
Anting (Acalyphaindica Linn.) terhadap Larva Udang Artemiasalina
Leach. Skripsi Diterbitkan. Malang : Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.

Herbarium Medanese. (2016). Identifikasi Tumbuhan. Medan : Universitas

Sumatera Utara

41
Kemenkes RI. (2014). Situasi Kesehatan Gigi dan Mulut.Jakarta : Pusat Data dan
Informasi Kementerian Kesehatan RI.

Kristianti., et al. (2008). Buku Ajar Fitokimia. Surabaya : Jurusan Kimia

Laboratorium Kimia Organik FMIPA Universitas
Kristina, N. N. dan Syahid. (2007). Penggunaan Tanaman Kelapa, Pinang, dan
Aren Sebagai Tanaman Obat. Bogor : Warta Puslitbangbun.

Lucida, H. (2007). Formulasi Sediaan Antiseptik Mulut dari Katekin Gambir. J.

Bandung : Institut Teknologi Bandung

Putri CA. (2010). Penggunaan Obat Kumur untuk Menjaga Kesehatan Rongga
Mulut. Sumatera : Universitas Sumatera Utara.

Majang, Yunazar. Isolasi Karakterisasi Senyawa Terpenoid dan Steroid. Padang :

Universitas Andalas.

Milad, Iin. (2014). Efektivitas Antibakteri Tuak (Nypa fruticans) Terhadap

Streptococcus mutans (Penelitian in vitro). Makassar : Universitas
Hasanuddin.

Muhlis. (2014). Informasi Singkat Benih. Makassar : Balai Perbenihan Tanaman

Hutan.

Nuria, Arvin, & Sumantri. (2009). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jarak Pagar (Jatropha Curcas L) terhadap Bakteri Staphylococcus
Aureus, Escherichia Coli, dan Salmonella Typhi. Semarang : Universitas
Wahid Hasyim

Notoatmodjo,S. (2010).MetodologiPenelitianKesehatan. Jakarta: RinekaCipta.

Nugraha.A.W. (2008). Plak dimana-mana. Fakultas farmasi. Yogyakarta : USD

Pratiwi, ST. (2008). Mikrobiologi Farmasi. Jakarta : Airlangga

Putri MH, Herijulianti E, & Nurjannah N. (2010). Ilmu Pencegahan Penyakit

Jaringan Keras dan Jaringan Pendukung Gigi. Jakarta: EGC.

Romas, Rosyida, & Aziz. (2015). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kulit
Buah Manggis (Garcina mangistana 1) terhadap Bakteri Eascherechia
coli,Staphylococcus aureus Secara in Vitro. Bandung : Universitas
Padjadjaran.

Rosdiana, Nova. (2016). Gambaran Daya Hambat Minyak Kelapa Murni dan
Minyak Kayu Putih dalam Menghambat Pertumbuhan Streptococcus
mutans. Banda Aceh : Universitas Syiah Kuala.

42
Sandriana A, Oratmangun, Fatimawali, dan Widdhi B. (2014). Uji Toksisitas
Ekstrak Tanaman PatahTulang (Euphorbia tirucalli L.) Terhadap
Artemiasalina Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)
Sebagai Studi Pendahuluan Potensi Anti Kanker : Jurnal Ilmiah Farmasi.

Sariningrum, E. (2009). Hubungan Tingkat Pendidikan, Pengetahuan Dan Sikap

Orang Tua Tentang Kebersihan Gigi Dan Mulut Pada Anak Balita Usia
3– 5 Tahun Dengan Tingkat Kejadian Karies Di Paud Jatipurno.
Fakultas Ilmu Kesehatan. Surakarta : Universitas Muhammadiyah
Surakarta.

Sinaga, A. (2013). Faktor-faktor yang Berhubungan dengan perilaku Ibu dalam

Mencegah Karies Gigi Anak Usia 1-5 Tahun di Puskesmas Babakan Sari
Bandung.

Sopianti & Ade Novero. (2017). Ekstrak Etanol Daun Salam (Eugenia Polyantha
Wight) Sebagai Formulasi Obat Kumur. Bengkulu : Akademi Farmasi
Al-Fatah Bengkulu.
Supartinah AL. (2001). Pencegahan Terbentuknya Karies Baru Berdasarkan
Ekspresi Faktor Resiko Dari Cariogram Pada Anak. Maj Ked gigi.
Surabaya : Universitas Airlangga.

Surahman, Rachmat, & Supardi. (2016). Metodologi Penelitian. Jakarta : Pusdik

SDM Kesehatan.
Widya, Ari. (2008). Streptococcus mutans Si Plak Dimana-mana. Fakultas
Farmasi. Yogyakarta : USD Yogyakarta

Yuliana. (2018). Pinang Dalam Kehidupan Orang Papua di Kota Jayapura.

Makassar : Universitas Hasanuddin.

43