NODA PADA LEMPENG PENANDA ALKOLOID: Menurut Wagner (1999), di bawah
lampu UV 365 nm senyawa alkaloid pada umumnya berwarna biru, biru kehijauan atau ungu berfluoresensi KENAPA MASIH DIKROMATOGRAFI KOLOM: kromatografi kolom gravitasi dimaksudkan untuk proses fraksinasi dimana hal ini bertujuan untuk mendapatkan senyawa murni. Kromatografi kolom gravitasi memiliki prinsip yang sama dengan kromatografi kolom cair vakum yaitu sampel dielusi dengan eluen yang memiliki tingkat kepolaran yang rendah sampai eluen yang memiliki tingkat kepolaran tinggi. Fasa diam berupa silika G60 Merck. Proses elusi dilakukan dengan metode bergradien, sehingga elusi diawali dengan eluen tunggal n-heksana yang bersifat non polar kemudian divariasi dengan eluen yang lebih polar. Fasa gerak dibiarkan mengalir melalui kolom yang disebabkan oleh gaya dorong gravitasi, dimana pita senyawa terlarut akan bergerak dengan laju yang berbeda, memisah dan dikumpulkan berupa fraksi ketika keluar dari kolom (Jayanti, 2012) MENGAPA FRAKSI III YANG DIAMBIL: Dalam penelitian ini ada 170 fraksi yang kemudian fraksi dengan penampakan warna yang sama digabungkan sehingga diperoleh 7 fraksi. Menurut Nuraini (2015) Setiap fraksi kemudian diuji dengan reagen mayer dan dragendrof, jika pada reaksi mayer terbentuk endapan jingga dan pada reagen dragendrof terbentuk endapan putih maka fraksi menunjukkan alkaloid. Fraksi inilah yang Bisa dilanjutkan ke tahap berikutnya. Dalam penelitian ini tidak menyebutkan apakah masih di gunakan reagen atau tidak, namun langsung diambil Fraksi ke tiga.
4. PADA HASIL KLT PREPARATIF ADA HASIL PITA (WARNA-WARNA), JELASKAN
HASIL WARNA-WARNA PITA MENANDAKAN APA: Fraksi yang diperoleh dari proses fraksinasi kemudian diisolasi dengan KLT preparatif dan diperoleh beberapa pita. Menurut Ibrahim (2015) pita yang dihasilkan ada beberapa wmacam warna, warna biru atau hijau adalah penanda bahwa senyawa mengandung alkaloid. KENAPA FC YANG DILANJUTKAN: Hasil Fc menunjukkan pita warna biru sehingga dapat dipastikan ada senyawa alkaloid didalamnya sehingga inilah yang dteruskan. Menurut Ibrahim (2015) pita yang dihasilkan ada beberapa wmacam warna, warna biru atau hijau adalah penanda bahwa senyawa mengandung alkaloid KENAPA MASIH MENGHASILKAN TIGA PITA LAGI: dalam peenlitian ini, Fc kemudian di KLT preparatif kembali dengan eluen yang sama untuk mendapatkan senyawa yang lebih spesifik..