Uji Ekstrak Etanol Daun Ketepeng Cina (Cassia Alata L.

) Dalam Menghambat
Degranulasi Sel Mast Pada Mencit Putih Jantan Yang Tersensitisasi Aktif Secara
In Vitro

Yufri Aldi 1) , Miming Andika 2) , Zet Rizal 2)

1). Fakultas Farmasi Universitas Andalas (UNAND) Padang.
2). Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFARM) Padang.

Email: mimingandika@gmail.com

ABSTRAK

Daun ketepeng cina telah digunakan oleh masyarakat untuk obat anti parasit, kurap, kudis dan panu. Dari
hasil penelitian sebelumnya menunjukkan ekstrak daun ketepeng cina mempunyai efek terhadap aktivitas dan
kapasitas fagositosis sel makrofag. Pada penelitian ini bertujuan untuk melihat efek ekstrak daun ketepeng cina
dalam menghambat degranulasi sel mast mencit putuh jantan yang alergi dengan putih telur ayam ras. Penelitian
ini dilakukan secara invitro, diambil suspensi sel mast yang telah diinduksi putih telur ayam ras yang di uji
dengan ekstrak, selanjutnya dihitung jumlah sel mast yang masih terbentuk granul. Ekstrak daun ketepeng cina
dibagi menjadi 5 konsentrasi yaitu 25, 50, 100, 200, dan 400 g/mL. Setelah diinkubasi selama 30 menit,
suspensi sel mast dihitung yang masih terbentuk granulasi. Hasil persentase degranulasi dari masing-masing
konsentrasi 25, 50, 100, 200, dan 400 g/mL adalah 67,39 %, 62,58 %, 55,92 %, 48,04 %, dan 30,83 %. Dari
hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak daun ketepeng cina dapat mencegah terbentuknya degranulasi
sel mast yang tersensitisasi aktif pada mencit putih jantan.

Kata kunci: Cassia Alata L, degranulasi, sel mast, anafilaksis, sensitisasi.

ABSTRACT

Cassia alata L. leaves has been used by the community for anti-parasitic drugs, ringworm, scabies and
turtles. From the results of previous research showed that the leaves extract of Cassia alata L. has an effect on
the activity and capacity of phagocytosis of magrophage cells. In this study aims to see the effect of leaf extract
of Cassia alata L. in inhibiting degranulation of mast cells of male males who are allergic to egg white chicken.
This research was done by invitro, taken by suspension of mast cells that have been induced egg white of
chicken that tested by extract, then counted the number of mast cells still formed granule. The leaves extract of
Cassia alata L. is divided to 5 concentrations 25, 50, 100, 200, and 400 g/mL. After incubation for 30
minutes, the mast cell suspension was calculated which still formed granulation. The result of percentage of
degranulation from each concentration 25, 50, 100, 200, and 400 g/mL was 67.39 %, 62.58 %, 55.92 %, 48.04
%, and 30.83 %. From result of research can be concluded that leaf extract of Cassia alata L. can prevent the
formation of degranulation of mast cells that sensitized active on male white mouse.

Keywords: Cassia Alata L, degranulation, mastocytes, anaphylactic, sensitized.

PENDAHULUAN dalam sitoplasmanya yang dapat

Reaksi alergi yang terjadi di tubuh
dapat diperantarai oleh aktivitas sel mast.
Sel mastosit dilibatkan dalam reaksi alergi
yakni pada reaksi tipe I. Reaksi tipe I
dikenal dengan reaksi segera (anafilaksis).
Bila antigen, khususnya alergen, berikatan
dengan molekul IgE yang sebelumnya
telah melekat pada permukaan mastosit
dan basofil, maka hal itu akan
menyebabkan dilepaskannya berbagai
mediator oleh mastosit dan basofil
(Subowo, 2010).
Sel mast merupakan sel-sel besar
berinti bulat dengan penuh butir-butir
1
diperlihatkan dengan pewarnaan basa
toluidin blue. Sel mast sering dijumpai
pada jaringan penghubung, lebih tepatnya
didekat pembuluh darah dan limfa
(Subowo, 2010).
Degranulasi sel mastosit adalah
proses pelepasan komponen-komponen
yang terdapat didalam granul sel mastosit
terebut seperti histamin, heparin dan
prostagladin. Senyawa yang dikeluarkan
ini berefek kemotaksis terhadap sel-sel
inflamasi dan memediasi timbulnya reaksi
alergi (Parslow et al., 2001).
 Pengobatan alergi dapat dilakukan
dengan berbagai cara antara lain :
meningkatkan antibodi IgG dan IgM
sehingga antigen yang masuk dapat
dihancurkan melalui sistem komplemen,
pemberian obat yang berefek anti histamin,
mengurangi kadar antibodi IgE sehingga
ikatan antara antigen dengan antibodi IgE
dapat dihambat, mencegah masuknya
antigen kedalam tubuh, selain itu juga
dapat dilakukan dengan menghambat
terjadinya degranulasi mastosit sehingga
tidak terjadi pelepasan mediator - mediator
kimia yang dapat menstimulasi terjadinya
reaksi hipersensitifitas (Hasdianah et al.,
2014).
Tanah air Indonesia kaya akan
sumber bahan obat alam dan tradisional
yang secara turun-temurun telah digunakan
sebagai ramuan obat tradisional.
Pengobatan tradisional dengan tanaman
obat diharapkan dapat dimanfaatkan dalam
peningkatan kesehatan masyarakat.
(Wijayakusuma, 1999). Salah satu
tumbuhan yang berkhasiat secara
tradisional adalah tumbuhan ketepeng cina
(Cassia alata L.). Secara tradisional daun
ketepeng cina digunakan sebagai
antiparasit, laksan, kurap, kudis, panu
(Kusmardi et al., 2007). Juga bisa
mengobati malaria yang disebabkan oleh
Plasmodium falcifarum (Murni et al.,
2014).
Untuk itu dalam penelitian ini dicoba
meneliti aktivitas dari ekstrak etanol daun
ketepeng cina dalam menghambat
deganulasi sel mast pada mencit putih
jantan yang diinduksi dengan putih telur
ayam secara in vitro.
METODE PENELITIAN
Alat
Alat-alat yang digunakan pada
penelitian ini adalah botol gelap,
timbangan hewan, timbangan analitik,
kandang hewan, rotary evaporator, gelas
ukur, labu ukur, tabung reaksi, lumpang,
stemper, spatel, sudip, cawan penguap,
stop watch, termometer, mikropipet, alat
2
bedah, haemocytometer, mikroskop,
vortex, spektrofotometer UV-Vis,
inkubator.
Bahan
Bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah daun ketepeng cina,
aquadest, etanol 70 %, Natrium carboxy
methyl cellulose (Na CMC), etanol 95 %,
aminophilline 24 mg/mL, natrium klorida
fisiologis 0,9 %, heparin, kalsium klorida,
kalium klorida, natrium klorida, biru
toluidin, gelatin, putih telur ayam ras,
silica gel 60 F254, etil asetat, asam format,
biru toluidin, gelatin, Silica gel 60 F254,
natrium asetat, mencit putih jantan.
Prosedur
Persiapan sampel
Sampel yang digunakan untuk
penelitian ini adalah daun ketepeng cina
(Cassia alata L.) sebanyak 6000 gram,
yang diambil di Jalan DPR ujung, RT 04/
RW 14, Kelurahan Dadok Tunggul Hitam,
Kecamatan Koto Tangah, Kota Padang,
Provinsi Sumatra Barat.
Pembuatan Ekstrak Etanol Daun
Ketepeng Cina
Serbuk simplisia daun ketepeng cina
direndam dengan etanol 70%, selama 6
jam pertama sambil sekali-sekali diaduk,
kemudian didiamkan selama 18 jam.
Maserat dipisahkan dengan cara
penyaringan. Proses penyarian dilakukan
pengulangan 3 kali dengan menggunakan
jenis dan jumlah pelarut yang sama.
Semua maserat dikumpulkan, kemudian
diuapkan dengan rotary evaporator hingga
diperoleh ekstrak kental. (Depkes RI,
2011). Rendemen yang diperoleh
ditimbang dan dihitung:
Berat ekstrak kental
% Rendemen = x 100 %
Berat simplisia kering
Hewan Percobaan
Hewan yang digunakan adalah
mencit putih jantan umur 8-12 minggu
dengan berat antara 20-30 gram sebanyak
10 ekor. Sebelum diperlakukan mencit
diaklimatisasi selama 7 hari dengan diberi
makan dan minum yang cukup. Hal ini
bertujuan untuk penyesuaian lingkungan,
mengontrol kesehatan dan berat badan.
Hewan yang sakit dengan tanda-tanda bulu
berdiri, aktivitas motorik dan berat badan
menurun tidak dipakai dalam penelitian.
Hewan yang digunakan adalah mencit
yang sehat yakni berat badan selama
diaklimatisasi tidak mengalami perubahan
lebih dari 10 % dan secara visual
menunjukkan prilaku yang normal (Vogel,
2002).
Perencanaan Dosis
Dosis ekstrak etanol daun ketepeng
cina yang digunakan adalah 25, 50, 100,
200, dan 400 µg/mL.
Larutan Na CMC 0,5 %
Taburkan 500 mg Na CMC dalam 10
mL air panas yang telah dimasukkan
kedalam lumpang panas, biarkan selama
15 menit, kemudian gerus hingga
homogen dan encerkan dengan aquadest
hingga volume 100 mL.
Pembuatan Larutan Antigen
Sebagai antigen digunakan putih
telur ayam ras, dimana diambil 5 mL putih
telur ayam ras ditambahkan dengan 5 mL
NaCl fisiologis 0,9 % sehingga diperoleh
larutan dengan konsentrasi 50 %.
Kemudian larutan 50 % diambil 5 mL lalu
dicukupkan volumenya hingga 10 mL
dengan NaCl fisiologis 0.9 % sehingga
diperoleh larutan dengan konsentrasi 25%.
Lakukan pengenceran seperti diatas
sampai diperoleh konsentrasi 12,5 %, 10
%, 5 %, dan 1 %
Pembuatan Larutan Pembanding
Zat pembanding yang digunakan
adalah Aminophylline 24 mg/ml. Dipipet
Aminophylline 24 mg/mL sebanyak 4,166
mL lalu disuspensikan dalam 10 mL
NaCMC 0.5% sehingga didapatkan
konsentrasi 10.000 µg/mL. Kemudian
3
diambil 1mL dari konsentrasi 10.000
µg/mL lalu disuspensikan dalam 10 mL
NaCMC 0.5% sehingga didapat
konsentrasi 1000 µg/mL . Kemudian
diambil 1mL dari konsentrasi 1000 µg/mL
lalu disuspensikan dalam 10 mL NaCMC
sehingga didapat konsentrasi 100 µg/mL.
Demikian seterusnya sampai diperoleh
konsentrasi 50, 25, 10, dan 5 µg/mL.
Pembuatan Larutan Biru Toluidin
Campurkan NaCl fisiologis
sebanyak 39 mL dengan asam asetat
glasial 1 mL, 10 mL formaldehid 37 %
(v/v) dan etanol 95 % sebanyak 50 mL,
kemudian kocok. Setelah itu tambahkan
biru toluidin 100 mg dan kocok hingga
didapatkan larutan biru toluidin (Aldi et
al., 2008).
Pembuatan Larutan Tyrode
Larutan yang dibuat merupakan
larutan Tyrode induk dan larutan Tyrode
encer. Pembuatan larutan Tyrode induk
dengan cara mencampurkan NaCl 160
gram, KCl 4 gram, CaCl 2 gram, NaHPO4
1 gram dan aquadest hingga volumenya
2000 mL. Untuk larutan Tyrode encer,
diambil 50 mL larutan Tyrode induk dan
ditambahkan dengan NaHCO3 sebanyak 1
gram, glukosa 1 gram, dan aquadest
hingga 1000 mL.
Pengujian Degranulasi Mastosit
Tersensitisasi Aktif
a. Pembuatan Suspensi Mastosit
Tersensitisasi
Pada hari pertama, mencit disuntikan
secara intaperitoneal dengan antigen
telur ayam ras 25 % 0,2 mL/ 20 g BB.
Pada hari ke-7 dan ke-14 diulangi lagi
penyuntikan antigen telur ayam ras 25
% 0.1 mL/ 20 g BB secara subkutan.
Pada hari ke-21 setelah penyuntikan
pertama mencit dipuasakan selama 18
jam, kemudian mencit dikorbankan.
Kemudian segera suntik dengan 2 mL
larutan Tyrode yang telah
ditambahkan gelatin 0.1 % dan
heparin 50 µg/ mL secara intra
peritoneal, lalu bagian perut dipijat
perlahan selama 10 menit, lalu
dibedah dan diambil cairan peritoneal
sebanyak mungkin, masukan dalam
tabung sentrifus dan sentrifus selama
10 menit dengan kecepatan 2000 rpm.
Bagian supermatan dibuang dan
endapan dicuci 2 kali dengan larutan
Tyrode sama banyak, kemudian
endapan diambil dan dicukupkan
volume hingga 1 mL dengan larutan
Tyrode dan siap untuk pengujian.
b. Menghitung Mastosit Tersensitisasi
Sebanyak 50 µl suspensi mastosit
dimasukkan kedalam tabung reaksi,
ditambahkan 40 µl larutan Tyrode
dan 10 µl larutan biru toluidin, lalu
diaduk perlahan dengan menggunakan
vortek dan dinkubasikan selama 30
menit pada suhu 37oC. Kemudian
campuran diteteskan diatas
haemositometer dan dihitung jumlah
mastosit dibawah mikroskop dengan
pembesaran 400 kali.
c. Degranulasi Mastosit Oleh Antigen
Sebanyak 50 µl suspensi mastosit di
masukkan kedalam tabung reaksi, lalu
ditambahkan 30 µl larutan Tyrode, 10
µl larutan antigen, 10 µl larutan biru
toluidin dan aduk secara perlahan
dengan menggunakan alat vortek.
Campuran ini kemudian diinkubasi
selama 30 menit pada suhu 37oC,
diteteskan diatas haemositometer dan
dihitung jumlah mastosit dibawah
mikroskop dengan pembesaran 100
kali. Larutan antigen putih telur ayam
ras dibuat dengan konsentrasi
berbeda-beda sehingga di dapatkan
konsentrasi yang mendegranulasi
mastosit secara maksimal.
d. Pengujian aktivitas Penghambatan
Degranulasi Mastosit oleh larutan
4
uji (ekstrak daun ketepeng cina &
Aminophylin)
Sebanyak 50 µl suspensi mastosit
dimasukkan kedalam tabung reaksi,
ditambahkan 30 µl larutan uji, 10 µl
larutan antigen putih telur ayam ras
dan 10 µl larutan biru toluidin.
Campuran diaduk secara perlahan
dengan menggunakan alat vortek dan
diinkubasikan selama 30 menit pada
suhu 37oC, campuran diteteskan diatas
haemositometer dan dihitung jumlah
mastosit dibawah mikroskop dengan
pembesaran 100 kali. Data yang
diperoleh dari hasil pengujian
degranulasi sel mast dinyatakan dalam
bentuk persentase degranulasi.
p−s
% Degranulasi = × 100%
p
Keterangan :
p = Jumlah mastosit sebelum
perlakuan
s = Jumlah mastosit setelah
perlakuan
e. Perhitungan Jumlah Sel Mast
Dengan Hemositometer
Bersihkan permukaan
hemositometer dengan tisu bersih
dan etanol dengan hati hati dan
bagian permukaan atas
haemositometer ditutup dengan
cover glass yang sebelumnya telah
dibersihkan juga. Pipet suspensi sel
mast dengan menggunakan pipet
mikro (10 µL) dan diamkan hingga
10 menit agar suspensi sel mast
dapat mengisi ruang kapiler
hemositometer.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Dalam penilitian digunakan tanaman
daun ketepeng cina (Cassia alata L.)
seperti terlihat pada Gambar 1. Daun
ketepeng cina, yang telah di ekstraksi
dalam penelitian ini sebanyak 200 g
diperoleh total ekstrak kental sebanyak
48,4771 g dengan nilai rendemen sebesar
24,2385%. Ekstrak yang diperoleh
dilakukan karakterisasi sehingga diperoleh
susut pengeringan dari ekstrak sebesar
17,0506% dan ini memenuhi persyaratan.
Hasil kadar abu total dari ekstrak diperoleh
4,58% dan menuhi persyaratan.
Gambar 1. Daun ketepeng cina (Cassia
alata L.)
Pada hari pertama dilakukan
sensitisasi terhadap hewan percobaan
dengan cara menyuntikkan putih telur
ayam ras 25% secara intraperitoneal
sebanyak 2 mL/20g BB mencit sebagai
antigen. Putih telur ayam ras digunakan
sebagai antigen karena putih telur ini sifat
imunogeniknya cukup tinggi (Kim, 2008).
Dengan kandungan protein yang cukup
tinggi yaitu sekitar 12 % (Sirait, 1986).
Tujuan sensitisasi pertama adalah untuk
membangkitkan respon imun primer.
Penyuntikan antigen pertama dilakukan
secara intraperitoneal bertujuan agar
proses pengenalan antigen lebih cepat oleh
sel limfosit. Proses pengenalan ini
dilakukan oleh sel makrofag, karena sel ini
merupakan sel APC (antigen precenting
cell) dan banyak terdapat pada rongga
perut (Kimura et al., 1978).
Pada hari ke-7, 14, dan 21 hewan
diboster kembali dengan antigen yaitu
putih telur ayam ras 25% secara subkutan
sebanyak 1 mL/20 g BB. Tujuan
pembosteran ini adalah untuk
memperbanyak terbentuknya antibodi IgE,
sehingga reaksi alergi semakin hebat.
Pembosteran diberikan secara subkutan
dan dengan dosis antigen putih telur ayam
5
ras yang lebih rendah dengan tujuan agar
tidak menimbulkan reaksi shok anafilaksis
dan kematian hewan percobaan (Price &
Hamilton, 2007). Reaksi anafilaksis terjadi
karena proses degranulasi sel mast dan
basofil di dalam tubuh. Reaksi ini terjadi
saat antigen berikatan dengan antibodi IgE
yang ada pada permukaan sel mast dan
basofil. Ikatan ini dalam hitungan beberapa
menit dapat menyebabkan degranulasi sel
mastosit yang berakibat pengeluaran
mediator (terutama histamin) (Parslow et
al., 2001).
Pada hari ke-21 setelah penyuntikan,
mencit dipuasakan selama 18 jam,
kemudian di korbankan dan segera
disuntik dengan 2 mL larutan tyrode yang
telah ditambahkan gelatin 0,1 % dan
heparin 50 µg/mL sebelumnya secara
intraperitoneal. Bagian perut lalu dipijat
secara perlahan-lahan selama 10 menit,
lalu dibedah secara hati-hati dan diambil
cairannya sebanyak mungkin, lalu
masukan kedalam mikrotube dan sentrifus
selama 10 menit dengan kecepatan 2000
rpm. Setelah itu bagian supernatan dibuang
dan endapan dicuci dua kali dengan larutan
tyrode sama banyak, kemudian endapan
dicukupkan volume hingga 1 mL dengan
larutan tyrode. Dan suspensi mastosit siap
untuk di uji.
Perhitungan jumlah sel dilakukan
dengan alat hemositometer. Sebelum
mengunakan hemositometer. Bersihkan
permukaan hemositometer dengan tisu
bersih dan etanol dengan hati hati dan
bagian permukaan atas hemositometer
ditutup dengan cover glass yang
sebelumnya telah dibersihkan juga. Pipet
suspensi sel mastosit dengan
menggunakan pipet mikro sebanyak 10 µL
dan diamkan hingga 10 menit agar
suspensi sel mast dapat mengisi ruang
kapiler hemositometer dan hitunglah
jumlah sel dalam dua puluh lima kamar
hitung.
Bentuk sel mast normal dibawah
mikroskop terlihat warna ungu dan
dibagian tengah bergranul., untuk lebih
jelasnya dapat dilihat Gambar 2. Sel mast
yang telah terdegranulasi tidak terlihat lagi
karena telah hancur dan tidak mengikat zat
warna lagi. Semakin banyak sel yang
terdegranulasi maka semakin sedikit sel
yang terlihat.

Gambar 2. Foto sel mastosit yang

diisolasi dari cairan
peritoneal mencit putih
jantan dengan pembesaran
400x.

Tabel 1.. Jumlah sel mast dan rata rata persentase degranulasi sel mast yang aktif oleh
antigen putih telur ayam ras dengan berbagai konsentrasi
Hewan I Hewan II Hewan III
Jumlah sel
Jumlah sel Jumlah sel
Perhitungan
Perhitungan (P) Perhitungan (P)
Perla- (P)
(x104) (x104)
kuan (x104)
% % % Rata-rata
Rata Degra Rata Degra Rata Degran % deg
Rata nulasi Rata nulasi Rata ulasi ± SD

0,00
F 188 0,00 183 0,00 163 0,00
±0,00
8,23±
Ag1 174 7,45 165,5 9,56 150,5 7,67
1,16
9,86±
Ag2 172 8,51 159 13,11 150 7,97
2,82
15,95±
Ag3 152,5 18,88 148,5 18,85 146,5 10,12
5,05
25,72±
Ag4 136 27,66 134,5 26,50 125,5 23,00
2,42
35,67±
Ag5 106,5 43,35 126 31,15 110 32,51
6,68
48,43±
Ag6 99 47,34 74,5 59,29 100 38,65
10,36

6
 48.43 Ag3 : Antigen konsentrasi 10%
50 Ag4 : Antigen konsentrasi 12,5%
35.67
% Degranulasi
40 Ag5 : Antigen konsentrasi 25%
25.72 Ag6 : Antigen konsentrasi 50%.
30
15.95
20 Dari hasil tersebut dapat terlihat
8.23 9.86
10 bahwa semakin tinggi konsentrasi putih
0
telur ayam ras (antigen) yang digunakan
Ag 1 Ag 2 Ag 3 Ag 4 Ag 5 Ag 6 maka semakin tinggi persen degranulasi.
Pada uji stastistik Anova satu arah
Konsentrasi
menunjukkan bahwa pemberian antigen
dengan konsentrasi yang semakin tinggi,
Gambar 3. Grafik persen degranulasi sel menyebabkan degranulasi sel mastosit
mastosit yang diberi antigen yang semakin tinggi pula. Dari
dengan berbagai konsentrasi uji lanjut duncan terlihat bahwa persen
Keterangan : degranulasi sel mastosit dari tiap-tiap
F : Suspensi sel mast konsentrasi antigen yang digunakan sangat
Ag : Antigen konsentrasi 1% berbeda nyata (P<0,01)
Ag2 : Antigen konsentrasi 5%

Tabel II. Jumlah sel mast dan rata rata persentase degranulasi sel mast yang aktif oleh
antigen putih telur ayam ras konsentrasi 50% setelah pemberian ekstrak etanol
daun ketepeng cina
Hewan I Hewan II Hewan III
Jumlah sel Jumlah sel Jumlah sel
Perla- Perhitungan (P) Perhitungan (P) Perhitungan(P)
kuan (x104) (x104) (x104)
% % %
Rata Rata Rata Rata-rata
Degra Degra Degra
Rata rata Rata % deg
nulasi nulasi nulasi
0,00
F 188 0,00 183 0,00 163 0,00
±0,00
75,44±
F+Ag 44 76,59 38 79,23 48 70,55
4,45
67,39±
E1+Ag 61,5 67,29 53,5 70,76 58,5 64,11
5,43
62,58±
E2+Ag 66,5 64,63 64,5 64,75 69,5 58,36
3,65
78,5 58,24 78 57,38 78 52,15 55,92±
E3+Ag
3,29
48,04±
E4+Ag 90 52,13 86,5 52,73 99 39,26
7,61
30,83±
E5+Ag 125,5 33,24 110,5 39,62 131 19,63
10,21

7
 75.44 E2 : Ekstrak konsentrasi 50µg/mL
80
% Degranulasi 67.39 62.58 E3 : Ekstrak konsentrasi 100µg/mL
55.92 E4 : Ekstrak konsentrasi 200µg/mL
60 48.04
E5 : Ekstrak konsentrasi 400µg/mL
40 30.83

20
Dari hasil tersebut dapat terlihat
bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak
0 daun ketepeng cina yang digunakan maka
F+ E1 + E2 + E3 + E4 + E5 + semakin kecil persen degranulasi sel
Ag Ag Ag Ag Ag Ag mastosit. Pada uji stastistik anova satu arah
Konsentrasi
menunjukkan bahwa ekstrak daun
ketepemg cina dapat menghambat
Gambar 4. Grafik persen degranulasi sel degranulasi sel mast dengan signifikan
mastosit yang diberi ekstrak (P<0,01). Dari uji lanjut duncan
daun ketepeng cina dengan menunjukkan bahwa persen degranulasi
berbagai konsentrasi . dari masing-masing konsentrasi ekstrak
Keterangan : daun ketepeng cina yang digunakan sangat
F : Suspensi sel mast berbeda nyata (P<0,01).
Ag : Antigen konsentrasi 50%.
E1 : Ekstrak konsentrasi 25µg/mL

Tabel III. Jumlah sel mast dan rata rata persentase degranulasi sel mast yang aktif oleh
antigen putih telur ayam ras konsentrasi 50% setelah pemberian aminophylin
Hewan I Hewan II Hewan III

Jumlah sel Jumlah sel Jumlah sel

Perhitungan (P) Perhitungan (P) Perhitungan(P)
Perla- (x104) (x104) (x104)
kuan
% % % Rata-rata
Rata Degra Rata Degranul Rata Degranul % deg
Rata nulasi Rata asi rata asi ± SD

0,00
F 188 0,00 183 0,00 163 0,00 ±0,00

75,44±
F+Ag 44 76,59 38 79,23 48 70,55
4,50
69,51±
A1+Ag 54,5 71,01 47 74,32 60 63,19 5,71

64,10±
A2+Ag 62 67,02 57 68,85 71 56,44 6,70

54,24±
A3+Ag 80,5 57,18 78 57,38 84,5 48,16 5,27

37,50±
A4+Ag 110,5 41,22 102,5 43,99 118,5 27,30
8,94
26,82±
A5+Ag 131 30,32 125,5 31,42 132,5 18,71 7,04

8
 75.44 sel mast tersensitasi aktif secara in
80 69.51 vitro.
64.1
70 54.24 2. Semakin tinggi pemberian konsentrasi
% Degranulasi

60
50 37.5
ekstrak daun ketepeng cina, maka
40 26.82 semakin meningkat kemampuannya
30 dalam menghambat proses degranulasi
20 sel mast.
10 3. Ekstrak daun ketepeng cina dan
0
F+ A1 + A2 + A3 + A4 + A5 +
aminophylin sama-sama mempunyai
Ag Ag Ag Ag Ag Ag efek dalam penghambatan degranulasi
sel mast yang tersensitasi aktif secara
Konsentrasi
in vitro.

Gambar 5. Grafik persen degranulasi sel UCAPAN TERIMAKASIH

mastosit yang diberi Pada kesempatan ini perkenankan
aminophylin dengan berbagai penulis mengucapkan penghargaan dan
konsentrasi terima kasih yang setulusnya atas bantuan,
Keterangan: bimbingan, do’a, dukungan, semangat, dan
F : Suspensi sel mast perhatian atas terwujudnya tulisan ini
Ag : Antigen konsentrasi 50% kepada Bapak Dr. H. Yufri Aldi, MS. Apt
A1 : Aminophylin konsentrasi 5µg/mL selaku Pembimbing I dan Bapak Drs. Zet
A2 : Aminophylin konsentrasi 10µg/mL Rizal, M. Kesss selaku pembimbing II atas
A3 : Aminophylin konsentrasi 25µg/mL ilmu dan kesabarannya dalam
A4 : Aminophylin konsentrasi 50µg/mL membimbing penulis untuk menyelesaikan
A5: Aminophylin konsentrasi 100µg/mL artikel ini.

Dari hasil tersebut dapat terlihat DAFTAR PUSTAKA

bahwa semakin tinggi konsentrasi Aldi , Y., Handayani, D., & Zurmiati.
aminophylin yang digunakkan maka (2008). Aktivitas Penghambatan
semakin kecil persen degranulasi sel Degranulasi Mastosit yang
mastosit. Pada uji stastistik anova satu arah Tersensitisasi oleh Ekstrak Metanol
menunjukkan bahwa aminophylin dapat Spon Laut Acathodendrilla sp.
menghambat degranulasi sel mastosit Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi,
dengan signifikan (P<0,01). Dari uji lanjut 13, (1), 43-48.
duncan menunjukkan bahwa persen Departemen Kesehatan RI. (2011).
degranulasi dari masing-masing Suplemen II Farmakofe Herbal
konsentrasi aminophylin yang digunakan Indonesia (Edisi I). Jakarta:
sangat berbeda nyata (P<0,01). Penerbit Departemen Kesehatan
Republik Indonesia.
KESIMPULAN Hasdianah., Dewi. P., Peristowati., &
Berdasarkan penelitian yang telah Imam.S. (2014). Imunologi
dilakukan tentang uji ekstrak etanol daun Diagnosa dan Teknik Biologi
ketepeng cina dalam menghambat molekuler. (Edisi 1). Yogyakarta:
degranulasi sel mastosit yang tersensitisasi Nuha Medika.
aktif secara in vitro dapat disimpulkan Kim, S.H., Kwon, T.K. & Shin, T.Y.
bahwa : (2008), Antiallergic Effects of Vitis
1. Ekstrak daun ketepeng cina pada amurensis on Mast Cell-Mediated
konsentrasi 25, 50, 100, 200 dan 400 Allergy Model, Exp Biol Med
µg/mL dapat menghambat degranulasi (Maywood). 233(2), 192-199.
9
Kimura, M., Waki, I., & Kobuko, M. Parslow, T.G., Daniel S.P., Abba T.I., &
(1978). Inhibition Of Compound John I.B. (2001). Medical
48/80 Mediated Histamin Release Immunology (10th ed). United
From Isolated Rat Mast Cell By state: Large medical books/Mc graw
Oosponol Related Compounds hill medical publishing devision.
(4 – acyl –isocoumarins). Journal Price, K.S. & Hamilton, R.G. (2007).
Pharmacol. 28, 639 – 673. Anaphylactoid reactions in two
Kusmardi., Kumala, S., & Enif, E. (2007). patients after omalizu-mab
Efek Imunomodulator Ekstrak Daun administration after successful
Ketepeng Cina (Casia Alata L.) long-term therapy. Allergy
Terhadap Aktivitas Dan Kapasitas Asthma Proc. 28, 313–319.
Fagositosis Makrofag. Jurnal Sirait, C.H. (1986). Telur dan
Makara Kesehatan, 11, (2), 50-53. pengolahannya. Bogor: Pusat
Murni., Gunawan., & Janitra, B., (2014). penelitian dan pengembagan
Efektivitas Ekstrak Etanol Daun perternakan.
Ketepeng Cina (Cassia alata L.) Dan Subowo. (2010). Imunologi (Edisi ke II).
Ketepeng Kecil (Cassia tora L.) Jakarta: Sagung seto.
Terhadap Plasmodium falciparum Wijayakusuma, H.M.H. (1999). Tanaman
Secara In Vitro. Jurnal Balaba, 10, berkhasiat obat Indonesia. (Jilid
(02), 83-88. 1). Jakarta: Prestasi Insan
Indonesia.

10
11