Inkubator

Inkubator harus mempertahankan suhu yang seragam dan konstan setiap saat di
semua area, yaitu,
mereka tidak boleh bervariasi lebih dari ± 0,5 ° C di area yang digunakan.
Dapatkan akurasi seperti itu dengan menggunakan a
inkubator berjaket air atau anhidrik dengan suhu rendah yang dikontrol secara
termostatis
unit pemanas listrik terisolasi dengan baik dan terletak di atau berdekatan
dengan dinding atau lantai
ruang dan sebaiknya dilengkapi dengan alat mekanis dari sirkulasi udara.
Inkubator yang dilengkapi dengan unit pemanas suhu tinggi tidak memuaskan,
karena itu
sumber panas, ketika ditempatkan secara tidak tepat, sering menyebabkan panas
berlebih dan terlokalisasi
pengeringan media, dengan menghambat pertumbuhan bakteri. Inkubator yang
sangat panas mungkin
dioperasikan dengan memuaskan dengan mengganti unit suhu tinggi dengan kabel
yang cocok diatur untuk
beroperasi pada suhu yang lebih rendah dan dengan memasang perangkat
sirkulasi udara mekanis. ini
diinginkan, di mana suhu kamar biasa bervariasi secara berlebihan, untuk
menjaga inkubator laboratorium tetap masuk
kamar khusus dipertahankan pada beberapa derajat di bawah suhu inkubator yang
disarankan.
Atau, gunakan ruang inkubasi khusus yang terisolasi dan dilengkapi dengan
baik
unit pemanas terdistribusi, sirkulasi udara paksa, dan pelabuhan pertukaran
udara, asalkan mereka
sesuai dengan batas suhu yang diinginkan. Saat ruangan seperti itu digunakan,
catat suhu harian
Kisaran di daerah di mana piring atau tabung diinkubasi. Berikan inkubator
dengan kawat logam terbuka atau
rak lembar berlubang yang ditempatkan sedemikian rupa untuk memastikan
keseragaman suhu di seluruh ruangan.
Sisakan ruang 2,5 cm antara dinding dan tumpukan piring atau keranjang
tabung.
Pertahankan termometer yang akurat, dapat dilacak ke National Institute of
Standards dan
Teknologi (NIST), dengan bohlam direndam dalam cairan (gliserin, air, atau
minyak mineral) pada masing-masingnya
rak digunakan dalam inkubator dan catat pembacaan suhu harian (lebih disukai
pagi dan sore hari)
sore). Selain itu, diinginkan untuk mempertahankan pendaftaran maksimum dan
minimum
termometer di dalam inkubator di rak tengah untuk merekam kisaran suhu kotor
periode 24 jam. Pada interval tertentu, tentukan variasi suhu dalam inkubator
saat diisi
kapasitas maksimum. Instal termometer perekaman bila memungkinkan, untuk
menjaga kontinu
dan catatan suhu permanen.
Biasanya, mandi air dengan penutup runcing untuk mengurangi kehilangan air
dan panas, atau panas yang solid
wastafel inkubator, diperlukan untuk mempertahankan suhu 44,5 ± 0,2 ° C. Jika
suhunya memuaskan
kontrol tidak tercapai, menyediakan resirkulasi air. Jaga kedalaman air dalam
inkubator cukup
untuk merendam tabung ke tingkat atas media.
Oven Sterilisasi Udara Panas
Gunakan oven sterilisasi udara panas dengan ukuran yang cukup untuk mencegah
crowding internal; dibangun untuk
berikan suhu sterilisasi yang seragam dan memadai 170 ± 10 ° C; dan
dilengkapi dengan yang cocok
termometer. Opsional gunakan alat perekam suhu.
3. Autoclave
Gunakan autoclave dengan ukuran yang cukup untuk mencegah crowding internal;
dibangun untuk menyediakan
suhu seragam di dalam bilik (sampai dan termasuk suhu sterilisasi 121 ° C);
dilengkapi dengan termometer yang akurat, bohlam yang terletak tepat di
saluran pembuangan untuk mendaftarkan suhu minimum di dalam ruang sterilisasi
(alat perekam suhu adalah opsional); dilengkapi dengan pengukur tekanan dan
benar
katup pengaman yang disesuaikan terhubung langsung dengan jalur pasokan uap
jenuh yang dilengkapi dengan
filter yang sesuai untuk menghilangkan partikel dan tetesan minyak atau
langsung ke uap khusus yang sesuai
generator (jangan gunakan uap dari boiler yang diperlakukan dengan amina
untuk kontrol korosi); dan mampu
mencapai suhu yang diinginkan dalam 30 menit. Konfirmasikan, melalui uji
kimia atau toksisitas, bahwa
pasokan uap belum diolah dengan amina atau bahan kimia pengontrol korosi
lainnya
memberikan toksisitas.
Penggunaan autoclave vertikal atau pressure cooker tidak disarankan karena
kesulitan dalam
menyesuaikan dan mempertahankan suhu sterilisasi dan potensi bahaya. Jika
pressure cooker
digunakan dalam keadaan darurat atau keadaan khusus, lengkapi dengan pengukur
tekanan yang efisien dan a
termometer bohlam yang 2,5 cm di atas permukaan air.

Peralatan pH
Gunakan pH meter elektrometri, akurat untuk setidaknya 0,1 unit pH, untuk
menentukan nilai pH
media.
7. timbangan
Gunakan keseimbangan yang memberikan sensitivitas setidaknya 0,1 g pada beban
150 g, dengan tepat
beban. Gunakan keseimbangan analitis yang memiliki sensitivitas 1 mg di bawah
beban 10 g untuk penimbangan
sejumlah kecil (kurang dari 2 g) bahan. Saldo cepat timbang tunggal paling
banyak
mudah.
8. Peralatan Persiapan Media
Gunakan gelas borosilikat atau peralatan non-korosif lainnya yang sesuai
seperti stainless steel. Menggunakan
gelas yang bersih dan bebas dari residu, agar-agar kering, atau bahan asing
lainnya yang mungkin
mencemari media.
9. Pipet
Gunakan pipet dengan ukuran yang sesuai, asalkan memberikan volume yang
dibutuhkan secara akurat
dan dengan cepat. Kesalahan kalibrasi untuk lot pabrikan tertentu tidak boleh
melebihi 2,5%. Menggunakan
pipet memiliki kelulusan yang ditandai dengan jelas dan dengan kiat yang
tidak terputus. Pemindahan bakteriologis
pipet atau pipet yang sesuai dengan standar APHA dapat digunakan. Jangan
pipet melalui mulut; gunakan pipet
membantu.
Gunakan silinder lulus yang memenuhi Standar ASTM (D-86 dan D-216) dan dengan
akurasi
batas yang ditetapkan oleh NIST jika perlu.
10. Wadah Pipet
Gunakan kotak aluminium atau stainless steel, ukuran ujung 5 hingga 7,5 cm,
berbentuk silinder atau
persegi panjang, dan panjangnya sekitar 40 cm. Ketika ini tidak tersedia,
bungkus kertas untuk
pipet individu dapat diganti. Untuk menghindari hangus berlebihan selama
sterilisasi, gunakan
kertas pulp (kraft) sulfat berkualitas terbaik. Jangan gunakan tembaga atau
kaleng atau kotak paduan tembaga sebagai pipet
wadah.

Kulkas
Gunakan kulkas yang menjaga suhu 1 hingga 4,4 ° C untuk menyimpan sampel,
media, reagen,
dll. Jangan menyimpan pelarut, makanan, atau minuman yang mudah menguap di
lemari es dengan media. Bebas Frost
lemari es dapat menyebabkan dehidrasi media yang berlebihan pada penyimpanan
lebih dari 1 minggu.
12. Perangkat Pemantau Suhu
Gunakan termometer kaca atau logam yang lulus 0,5 ° C untuk memantau sebagian
besar inkubator dan
lemari es. Gunakan termometer yang diturunkan ke 0,1 ° C untuk inkubator yang
beroperasi di atas 40 ° C. Menggunakan
alat perekam terus menerus yang sama-sama sensitif. Verifikasi akurasi dengan
perbandingan dengan a
Termometer bersertifikasi NIST, atau setara.
13. Botol atau Tabung Pengenceran
Gunakan botol atau tabung gelas tahan, lebih disukai gelas borosilikat,
ditutup dengan kaca
sumbat atau tutup ulir yang dilengkapi dengan pelapis yang tidak menghasilkan
toksik atau bakteriostatik
senyawa pada sterilisasi. Jangan gunakan sumbat kapas sebagai penutup. Tandai
tingkat kelulusan
tak terhapuskan di sisi botol atau tabung pengenceran. Botol plastik dari
bahan yang tidak beracun dan dapat diterima
ukuran dapat diganti dengan kaca asalkan mereka dapat disterilkan dengan
benar.
14. Cawan Petri
Untuk jumlah piring, gunakan cawan petri kaca atau plastik sekitar 100 × 15
mm. Gunakan piring itu
bagian bawah yang bebas dari gelembung dan goresan dan rata sehingga media
akan dari
ketebalan seragam di seluruh pelat. Untuk teknik filter membran gunakan kaca
lepas atau
piring plastik, 60 × 15 mm, atau piring tertutup, 50 × 12 mm. Sterilkan cawan
petri dan simpan di
kaleng logam (aluminium atau baja tahan karat, tetapi bukan tembaga), atau
dibungkus kertas — lebih disukai
pulp sulfat (kraft) berkualitas terbaik — sebelum disterilkan. Cawan petri
presterilis adalah komersial
tersedia.
Tabung dan Botol Fermentasi
Gunakan tabung fermentasi jenis apa pun, jika desainnya sesuai dengan medium
dan
persyaratan volume untuk konsentrasi bahan gizi seperti yang dijelaskan
selanjutnya. Dimana
tabung digunakan untuk pengujian produksi gas, melampirkan botol shell,
terbalik. Gunakan tabung dan botol
sedemikian rupa sehingga vial akan diisi sepenuhnya dengan medium, setidaknya
sebagian terendam dalam
tabung, dan cukup besar untuk membuat gelembung gas mudah terlihat.
Botol Sampel
Untuk sampel bakteriologis, gunakan botol kaca atau plastik yang dapat
disterilkan dengan ukuran yang sesuai
dan bentuk. Gunakan botol yang mampu menampung volume sampel yang cukup untuk
semua tes yang diperlukan dan
ruang udara yang memadai, memungkinkan pencucian yang tepat, dan
mempertahankan sampel yang tidak terkontaminasi hingga
ujian selesai. Botol-botol kaca-stopper, lebih disukai bermulut lebar dan
dari
kaca tahan, dianjurkan. Botol plastik dengan ukuran yang sesuai, mulut lebar,
dan terbuat dari
bahan beracun seperti polypropylene yang dapat disterilkan berulang kali
memuaskan
wadah sampel. Kantong plastik presterilis, dengan atau tanpa zat deklorinasi,
tersedia
komersial dan dapat digunakan. Wadah plastik menghilangkan kemungkinan
kerusakan selama
pengiriman dan mengurangi berat pengiriman.
Penutup logam atau plastik dengan tutup dapat digunakan pada botol sampel
asalkan
tidak ada senyawa beracun yang diproduksi pada sterilisasi.
Sebelum sterilisasi, tutupi bagian atas dan leher botol sampel yang ditutup
dengan kaca
aluminium foil atau kertas kraft berat.