BERUTO ET AL (1999)

Agar adalah polisakarida yang diekstrak dari rumput laut milik Rhodophyceae. Ekstrak diperoleh
dengan memasak ganggang dalam air yang diasamkan, penyaringan, dan gelifikasi dengan
pendinginan. Setelah itu, gel dimurnikan dengan pembekuan dan pencairan (Araki, 1959). Komposisi
agar dan kekuatan gel yang sesuai dipengaruhi oleh kualitas air lokal yang digunakan untuk
pengolahan (Buzzonetti, 1956), spesies rumput laut (Craigie dan Wen, 1984), pasokan nutrisi (Bird et
al., 1981), tingkat cahaya, suhu (Shi et al., 1983; Craigie dan Wen, 1984), dan usia jaringan alga
(Craigie dan Wen, 1984).

Agar masih merupakan salah satu agen pembentuk gel yang paling banyak digunakan untuk
memadatkan media untuk kultur jaringan tanaman, karena memiliki banyak keuntungan (George
dan Sherrington, 1984). Namun, kelemahan terpenting adalah agar agar bukanlah produk standar
(Debergh, 1983). Sebagai akibatnya, kualitas (merek) dan jumlah agar yang digunakan untuk
memadatkan media kultur dapat mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan jaringan
(Romberger dan Tabor, 1971; Debergh et al., 1981; Debergh, 1983; Pasqualetto et al., 1988; Selby et
al., 1989; Pochet et al., 1991; Tremblay dan Tremblay, 1991; Ladyman dan Girard, 1992)

Kesimpulan umum dari pekerjaan kami adalah bahwa ketersediaan air dan nutrisi yang berbeda
dapat ditetapkan dalam gel agar yang berbeda karena sifat fisikokimia yang berbeda. Akibatnya,
pertumbuhan jaringan secara in vitro dapat terpengaruh. Investigasi lebih lanjut akan
mempertimbangkan kinerja biologis planlet Ranunculus yang dikultur in vitro pada media yang
dipadatkan dengan tiga merek agar dipelajari (M. Beruto et al., 1998).

MARGA ET AL (1997)

Penurunan hyperhydricity kultur apel, dalam menanggapi peningkatan konsentrasi agar terhidrolisis,
sesuai dengan temuan penelitian dengan spesies yang sama (Pasqualetto et al., 1988) atau yang lain
(Singha, 1982; Debergh, 1983) yang dikultur pada media agarsolidifikasi. . Penyebab korelasi terbalik
antara konsentrasi agar dan tingkat hiperhidrisitas jaringan dalam kultur yang telah dibahas
sebelumnya, telah disarankan bahwa keadaan fisik medium dapat mempengaruhi difusi regulator
pertumbuhan tanaman dan nutrisi (Bornman dan Vogelman, 1984). ). Selain itu, agar dapat
memodifikasi ketersediaan zat larut melalui interaksi kimia (Daguin dan Letouz'e, 1986; Brand,
1993). Memang, agar adalah campuran kompleks polisakarida, beberapa di antaranya sangat sulfat,
yang memberi mereka karakter ionik. Pochet et al. (1991) menggunakan sifat ini untuk menjelaskan
pengurangan tunas yang diamati ketika kultur Thuja plicata telah dilakukan dengan adanya
polisakarida tersulfasi. Juga diketahui bahwa sulfasi mempengaruhi sifat reologi gel agar (Rees,
1969).

VYAS ET AL (2008)

Agar telah menjadi agen pembentuk gel yang paling banyak digunakan untuk media kultur jaringan
tanaman sejak pertama kali digunakan oleh White (1939). Stabilitas, kejernihan tinggi, sifat tidak
beracun dan resistensi terhadap metabolisme agar telah mempopulerkan penggunaannya selama
kultur (McLachan 1985; Henderson dan Kinnersley 1988). Namun, beberapa penyelidikan telah
menimbulkan keraguan tentang kelembaman biologis dan sifatnya yang tidak beracun (Babbar dan
Jain 1988). Jumlah laporan tentang efek merugikan agar-agar telah diterbitkan termasuk variabilitas
batch-ke-batch, penghambatan pertumbuhan, adanya pengotor dan impartemen dan gangguan
hiperhidrasi (Romberger dan Tabor 1971; Debergh et al. 1981; Debergh 1983; ditinjau secara luas
oleh Cameron 2008). Selain itu, penanaman in vitro tanaman pada gel agar-agar, media padat
membutuhkan langkah-langkah padat karya termasuk subkultur berulang. Selain itu, agar
menyumbang 10-20% dari biaya media kultur (Tabel 1). Untuk mengatasi kekurangan agar-agar ini,
perlu dicari alternatif lain. Salah satu pendekatan tersebut adalah dengan menggunakan teknik
perbanyakan baru-baru ini seperti sistem perendaman sementara atau sistem kultur cair (Nandwani
et al. 2004). Baru-baru ini, metode perbanyakan in vitro dalam medium cair telah dicoba (Varshney
et al. 2000; Aggarwal dan Barna 2004; Cao et al. 2006). Penggunaan media cair dalam kultur jaringan
sering digambarkan sebagai cara untuk mengurangi biaya budidaya mikro (Alvard et al. 1992).
Keuntungannya termasuk peningkatan ketersediaan air dan zat terlarut pada eksplan dan biaya
tenaga kerja dan produksi yang lebih rendah (Gupta dan Timmis 2005; Mehrotra et al. 2007).
Namun, media cair memberikan lingkungan yang jauh berbeda untuk planlet dan penggunaannya
yang luas terhambat oleh beberapa masalah termasuk hyperhydricity dari jaringan, penyebaran
kontaminan yang cepat, sesak napas plantlet dan perubahan geotropi.

Terlepas dari masalah di atas, sistem kultur cair telah banyak digunakan dalam sejumlah kasus (Sood
et al. 2000; Kim et al. 2003; Prathanturarug et al. 2005; Prasad dan Gupta 2006; Maxwell et al. 2007).