PENGARUH SINERGIS ANTIJAMUR BIOSYNTHESIZED PERAK NANOPARTIKEL

DIKOMBINASIKAN DENGAN FUNGISIDA

Abstrak

Nanopartikel perak (AgNPs) disintesis oleh ekstrak buah ginkgo. UV-vis, TEM, SEM, EDX dan
AFM diterapkan untuk karakterisasi mereka. Tingkat penghambatan AgNPs terhadap Bipolaria
maydis mencapai 78,7% pada konsentrasi 200 mg / mL. efek antijamur sinergis menonjol
ditemukan ketika AgNPs digabungkan dengan fungisida yang dipilih. Rasio toksisitas ditentukan
dengan metode Horsfall mencapai 1,33, 1,34, dan 1,23 ketika proporsi AgNPs dan tebuconazole,
propineb, fludioxonil adalah 1: 1, 9: 1, dan 7: 3, masing-masing. Senyawa-senyawa tersebut
tidak hanya mengeksplorasi pendekatan baru untuk mengontrol bakteri patogen tetapi juga
memberikan kemungkinan untuk menghindari terjadinya resistensi obat. © 2018 Penerbit Teman
Sains.

Material dan metode Bahan dan Reagen

buah-buahan Ginkgo berkumpul di kota Fengyang, Provinsi Anhui, China. Perak nitrat (AgNO
3) dibeli dari Sinopharm Chemical Reagent Co, Ltd (Cina). Tebuconazole, propineb, dan
fludioxonil dibeli dari Shandong Weifang Rainbow Chemical Co., Ltd Jamur bernama B. maydis
dilestarikan di laboratorium Perlindungan Tanaman dari Anhui Sains dan Teknologi Universitas.
Persiapan Ekstrak Buah
Ekstrak buah Ginkgo dibuat sebagai berikut: buah-buahan yang denucleated dan dicuci secara
menyeluruh dengan air steril, kemudian dikeringkan di bangku bersih. Puting 10 g buah-buahan
ke dalam 100 ml air deionisasi, kemudian dipanaskan pada 95 ° C selama 30 menit. Selama
proses pemanasan, itu perlu untuk aduk dari waktu ke waktu. Setelah itu, ekstrak disaring
melalui kertas saring untuk dua kali dan diawetkan untuk digunakan lebih lanjut.
Sintesis dari AgNPs
sintesis hijau dari AgNPs dicapai melalui penambahan 10 mL filtrat 90 mL deioniszed air,
diikuti dengan reaksi dengan 1 mM AgNO 3 pada 80 ° C selama 15 menit. Selama proses
pemanasan ini, warna larutan berubah (Skema 1).
Karakterisasi AgNPs
Untuk mengukur sifat optik dari AgNPs disintesis hijau, UV-Vis spektroskopi (TU-1950)
diaplikasikan pada kisaran 350 nm sampai 600 nm. Karakteristik AgNPs seperti morfologi,
ukuran, dan dispersi diukur melalui TEM, SEM, AFM, dll TEM (JEM-2100F) analisis partikel
disonikasi selama 10 menit pada awalnya, dan kemudian menetes di grid tembaga dilapisi karbon
untuk benar-benar kering. Untuk SEM (S-4800) analisis, AgNPs disintesis seperti yang
diletakkan di atas piring sampel, diikuti oleh lapisan dengan platinum. AFM (BioScope)
diaplikasikan untuk mendeteksi AgNPs kering di piring mika. Selanjutnya, EDX digunakan
untuk mengukur kemurnian AgNPs.
Penghambatan Tingkat AgNPs
Sentrifugal dan AgNPs Oven kering dilarutkan dalam air steril sebagai larutan stok (10 mg /
mL). Sebuah volume 5 mL larutan stok diencerkan ditambahkan ke 45 mL medium PDA pada
suhu perkiraan 55-60 ° C, dan konsentrasi akhir dari AgNPs 12,5, 25, 50, 100 dan 200 mg / mL
diperoleh dengan pengenceran dengan air steril. Set kontrol berisi 5 mL air steril tanpa
nanopartikel perak. Sebuah blok jamur (φ = 5 mm) diinokulasi di pusat setiap cawan Petri
dengan konsentrasi yang berbeda dari AgNPs, diikuti dengan inkubasi pada suhu 28 ° C selama
3-5 d. Setiap kontrol dan eksperimen pengobatan dilakukan dalam tiga ulangan.
Sinergis Antijamur Pengaruh AgNPs dan Fungisida 50% konsentrasi efektif (EC 50) dari
AgNPs dan tiga fungisida diukur melalui metode tingkat pertumbuhan miselium, masing-masing.
Berdasarkan itu, berbagai senyawa
proporsi diselesaikan sebagai 00:10, 1: 9, 2: 8, 3: 7, 4: 6, 5: 5, 6: 4, 7: 3, 8: 2, 9: 1 dan 10: 0.
Semua senyawa yang siap segar dan dicampur secara menyeluruh selama 5 menit. Penilaian efek
sinergis (rasio toksisitas) dari AgNPs dan fungisida ditentukan oleh persamaan berikut (Horsfall,
1945): (1) Realisasi tingkat penghambatan = [(Diameter kontrol koloni-koloni Diameter
pengobatan) / (Diameter kontrol koloni-Diameter blok jamur)] * 100%; (2) Teori inhibisi rate =
(tingkat penghambatan Realisasi A pada konsentrasi menengah * persentase A + tingkat
penghambatan Realisasi B pada konsentrasi media * persentase B) * 100%; (3) rasio Keracunan
= Realisasi tingkat penghambatan / Theoretical tingkat penghambatan. Efek kombinasi
menunjukkan sinergis ketika rasio toksisitas lebih besar dari 1; itu menunjukkan antagonis ketika
rasio toksisitas kurang dari 1; itu menunjukkan aditif ketika rasio toksisitas hampir sama dengan
1. hasil Biosintesis AgNPs Seperti ditunjukkan dalam Gambar. 1, warna filtrat diencerkan
berubah dari putih ke kuning setelah pemanasan pada 80 ° C selama 15 menit di bawah kondisi 1
mM AgNO 3, menunjukkan pembentukan AgNPs, sedangkan warna tetap tak berubah selama
filtrat tanpa AgNO 3 ( Gambar. 1a). spektroskopi UV-Vis menunjukkan bahwa serapan
maksimum pada 426 nm (Gbr. 1b), sesuai dengan permukaan plasmon resonansi AgNPs (Lok et
al., 2007). Namun, tidak ada puncak serapan karakteristik perak pada rekening AgNO 3 ( garis
hijau) atau) filtrat (garis merah saja.
Karakterisasi AgNPs analisis TEM: Seperti ditunjukkan dalam Gambar. 2, penokohan dari
morfologi, dispersi, ukuran dan distribusi ukuran AgNPs muncul. Mudah untuk melihat AgNPs
disintesis seperti itu bola atau dekat bola dengan dispersi menguntungkan (Gambar. 2a, b dan c).
Dalam rangka untuk menentukan ukuran partikel dan distribusi ukuran, 200 AgNPs khas dipilih
secara acak dari beberapa mikrograf TEM. Ukuran partikel berada di kisaran 8 ~ 24 nm dengan
ukuran rata-rata sekitar 14 nm. 6,5% dari partikel didistribusikan antara 5 ~ 10 nm, 60% dari
partikel didistribusikan antara 10 ~ 15 nm, sementara 32% jatuh antara 15 ~ 20 nm, dan 1,5%
antara 20 ~ 25 nm (Gambar. 2d).
Analisis SEM dan EDX Ketika diterangi oleh SEM, partikel muncul pada substrat, yang
mewakili AgNPs (Gambar. 3a). Puncak pada sekitar 3 keV menunjukkan adanya perak unsur,
sementara puncak lain mungkin dikaitkan dengan unsur-unsur dari ekstrak ginkgo buah dan
reagen (Gambar. 3b). Hasil menunjukkan disintesis AgNPs adalah murni, dan dapat digunakan
untuk eksperimen lebih lanjut.
Analisis AFM morfologi yang ditentukan fitur dari hijau nanopartikel disintesis diselidiki oleh
AFM. Semua partikel pada mika yang monodispersed
Penghambatan Tingkat AgNPs Seperti ditunjukkan pada Gambar. 5, AgNPs menunjukkan
efek penghambatan yang menonjol pada pertumbuhan koloni. Diameter C. lunata tanpa AgNPs
diukur dengan metode cross adalah 6.37 cm, dan menurun secara bertahap dengan peningkatan
konsentrasi AgNPs. Diameter AgNPs mencapai nilai minimum (1,75 cm) pada 200 ug / mL.
Data dari tiga ulangan dari perawatan dengan konsentrasi yang berbeda rata-rata dan digunakan
untuk menghitung oleh SPSS 13.0 50% efektif konsentrasi (EC 50), yang 31,73 ug / mL.
Sinergis Antijamur Kegiatan AgNPs dan Fungisida Seperti terlihat pada Tabel 1, 2 dan 3, ada
menunjukkan aktivitas antijamur sinergis yang jelas antara AgNPs dan tiga fungisida terhadap B.
maydis. Kombinasi AgNPs dan tebuconazole menunjukkan efek antijamur yang universal
sinergis di berbagai proporsi, dan maksimum mencapai 1,33 ketika dua komponen yang sama.
Senyawa AgNPs dan propineb disajikan efek antijamur sinergis pada rasio volume 8: 2 dan 9: 1,
dan maksimum mencapai 1,33 pada 9: 1, yang sisanya adalah aditif atau antagonis. Senyawa
AgNPs dan fludioxonil menunjukkan efek antijamur sinergis pada rasio volume 7: 3, 8: 2 dan 9:
1, dan maksimum mencapai 1,23 pada 7: 3, yang sisanya adalah aditif atau antagonis.
Diskusi Dalam beberapa tahun terakhir, biosintesis AgNPs menarik perhatian lebih dan lebih
peneliti dalam pandangan sifat unik mereka. Di antara bahan-bahan ini, jaringan tanaman
terbukti optimal. Sebagai bahan obat yang terkenal, ekstrak daun Ginkgo digunakan untuk
mempersiapkan AgNPs dalam studi sebelumnya (Song dan Kim, 2009; Ren et al., 2016; Huang
et al., 2017). Untuk pengetahuan kita, itu adalah pertama kalinya untuk mensintesis AgNPs
menggunakan ekstrak buah ginkgo.resistensi obat oleh bakteri patogen dan jamur telah terus
meningkat dalam beberapa tahun terakhir, sehingga perlu untuk mengembangkan agen
antimikroba baru. Penelitian dalam beberapa tahun terakhir membuktikan bahwa AgNPs adalah
kandidat yang menjanjikan, dan aktivitas antibakteri yang disempurnakan AgNPs dan antibiotik
telah diverifikasi oleh Li et al. ( 2005) dan Dar et al. (2013), sedangkan efek antijamur sinergis
dari AgNPs dan zat kimia jarang dilaporkan (Monteiro et al., 2013). Dalam studi ini, ada muncul
aktivitas antijamur sinergis dari AgNPs dan tiga fungisida yang berbeda, dan proporsi optimal
masing-masing bervariasi dengan kategori fungisida. Hasil ini tidak hanya akan memberikan
cara baru untuk penghambatan patogen tetapi juga mengurangi resistensi obat sejauh maksimal.