Nama : Isnaniyah

NIM : 164820144820019
UJIAN TENGAN SEMESTER
TEKNOLOGI FITOFARMASETIKA

PENGARUH ANTIOKSIDAN DAN PENANGKAPAN RADIKAL BEBAS DARI EKSTRAK

BUAH MORINDA CITRIFOLIA
Pendahuluan
Morinda citrifolia yang merupakan keluarga Rubiaceae, umumnya dikenal sebagai noni dan
merupakan obat yang paling popular dalam pengobatan ayurveda. Morinda citrifolia ini adalah
tanaman tropis dan subtropis yang tumbuh di pulau - pulau pasifik dan telah digunakan untuk
mengobati berbagai macam penyakit untuk lebih dari 2000 penyakit. Berbagai senyawa biologis
seperti glikosida, polisakarida, alkaloid, lignan, ester asam lemak, anthroquinones, scopoletin,
morindin, vitamin dan mineral telah diisolasi dari buah noni, akar dan daun.

Bahan dan metode

Buah-buahan dari Morinda citrifolia dikumpulkan dari daerah setempat di sekitar Chennai dan
Coimbatore dan selanjutnya disahkan oleh Survei Botani of India (BSI) di Universitas Pertanian
Tamil Nadu, Coimbatore. SEBUAH spesimen voucher (No: BSI / SRC / 5/23 / 2012-13 / Tech
44) telah disimpan di herbarium Departemen Botani. Sampel dicuci dengan air leding dan
dipisahkan sebelum menjadi dipotong-potong. Mereka dikeringkan dengan oven pada suhu 45 °
C selama 2 hari dan ditumbuk menjadi bubuk.
Kriteria pemilihan buah Morinda citrifolia
Buah mengkudu pasca panen, berwarna putih kekuningan merata, dan daging buah masih keras.
Persiapan ekstrak
Bahan bubuk dari Morinda citrifolia diekstraksi dengan empat berbagai pelarut seperti petroleum
eter, etanol 50%, air dan kloroform dalam empat ekstraktor Soxhlet yang berbeda secara
mendalam untuk 20- 24 jam. Ekstrak terkonsentrasi sampai kering di bawah berkurang tekanan
dan suhu terkendali (40-50 ° C). Ekstrak kering yang diperoleh digunakan dalam penelitian ini.
Ekstraksi menggunakan ekstraktor soxhlet karena senyawa yang diinginkan memiliki kelarutan
yang terbatas dalam suatu pelarut, dan pengotornya tidak larut dalam pelarut. Metode ini tidak
dapat digunakan untuk senyawa termolabil sebagai pemanasan berkepanjangan dapat
menyebabkan degradasi senyawa (Nikhal, 2010).

Pengujian
Tes Antioksidan Total
1. Mengurangi uji daya
Pengurangan kekuatan ekstrak dievaluasi sesuai dengan Metode Oyaizu. 1ml dari berbagai
konsentrasi yang berbeda ekstrak sampel dicampur dengan 2.5ml kalium ferricyanide
dan 2,5 ml dapar fosfat (pH 6,6). Campuran diinkubasi pada 50 ° C selama 20 menit. Setelah
inkubasi, 2,5ml TCA (10%) adalah ditambahkan ke dalamnya dan disentrifugasi pada 3000rpm
selama 10 menit. 2,5ml dari supernatan diambil. 2,5 ml air dan 0,5 ml besi klorida (0,1%)
ditambahkan ke dalamnya. Absorbansi warna diukur spektrofotometri pada 700nm. Peningkatan
daya serap campuran reaksi menunjukkan peningkatan daya reduksi. Percobaan dilakukan dalam
rangkap tiga dan mengurangi kekuatan dinyatakan sebagai ekivalen dari asam askorbat (μg) / mg
ekstrak.
2. pengujian kadar abts penangkapan radikal
2,2'-azino-bis [3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid] atau ABTS aktivitas penangkapan
radikal ekstrak diukur dengan metode RiceEvans et al [25]. Kation radikal ABTS (ABTS +)
diproduksi dengan mereaksikan larutan ABTS (7mm) dengan amonium 2,45mM persulfat dan
campuran dibiarkan berdiri dalam gelap di kamar suhu selama 12-16 jam sebelum digunakan.
Perbedaan konsentrasi ekstrak etanol 50% dan standar (0,5ml) ditambahkan ke 0,3ml larutan
ABTS dan 50% etanol untuk membuat 1ml. Asam askorbat tadinya digunakan sebagai standar.
Absorbansi dibaca pada 745nm. Itu Percobaan dilakukan dalam rangkap tiga.
3. Uji frap
Uji FRAP digunakan untuk memperkirakan penurunan kapasitas buah ekstrak sesuai dengan
metode Oyaizu. Pereaksi FRAP mengandung 2.5ml TPTZ dalam asam hidroklorat encer, 20ml
besi buffer klorida dan 25 ml asetat disiapkan baru dan dihangatkan hingga 35ºC. Pereaksi FRAP
1.5ml dan larutan sampel 50μl berbeda konsentrasi diinkubasi pada 37ºC selama 10 menit dan
absorbansi direkam pada 593nm. Ferro sulfat digunakan sebagai standar. Nilai FRAP dinyatakan
sebagai mmoles / 100 berdasarkan berat kering menggunakan kurva kalibrasi Fe2 +.
4. Uji fosfomolibdenum
Total kapasitas antioksidan diukur dengan spektrofotometri metode Prieto et al. Tabung berisi
ekstrak (berbeda konsentrasi) dan pereaksi (0,6 M asam sulfat, 28 mM natrium fosfat dan 4mM
amonium molibdat) diinkubasi pada 95 ° C selama 90 menit. Setelah campuran didinginkan
hingga suhu kamar, maka absorbansi setiap larutan diukur pada 695 nm terhadap blanko.
Metanol (0,3 ml) di tempat ekstrak digunakan sebagai kosong. Itu aktivitas antioksidan
dinyatakan sebagai jumlah setara dengan asam askorbat.

Hasil
Penapisan Fitokimia Awal Morinda Citrifolia

Kuantifikasi antioksidan yang dipilih dalam buah morinda citrifolia

Sistem antioksidan kompleks adalah sangat penting untuk melindungi membran sel dan organel
dari efek merusak spesies oksigen aktif. Ini termasuk baik antioksidan enzimatik dan non
enzimatik.
Antioksidan enzimatik
Superoksida dismutase adalah enzim antioksidan pertama yang menangani oxyradicals yang
mempercepat pembuangan superoksida (O2-) menjadi hydrogen peroksida (H2O2). Katalase
adalah protein heme peroksisomal yang mengkatalisis penghapusan hidrogen peroksida yang
terbentuk selama Reaksi dikatalisis oleh SOD. Dengan demikian, SOD dan CAT bertindak
bersama enzim antioksidan yang mendukung yang memberikan pertahanan pelindung terhadap
spesies oksigen reaktif. Peroksidase mengacu pada enzim yang mengandung heme mampu
mengoksidasi senyawa organik dan anorganik menggunakan hydrogen peroksida sebagai co-
substrat. Non-spesifisitas peroksidase membuatnya enzim yang cocok untuk berbagai donor
electron substrat.
Antioksidan Non enzimatik

Asam askorbat adalah vitamin yang larut dalam air dan banyak dibutuhkan dalam metabolisme
makhluk hidup. Asam askorbat digunakan sebagai obat dan juga ditambahkan dalam pembuatan
makanan untuk pengawetan produk dalam waktu lama.
α-tocopherol adalah antioksidan pemecah rantai yang paling efektif dalam membran sel. Itu
mampu memperbaiki radikal pengoksidasi secara langsung oleh mencegah langkah perambatan
rantai selama peroksidasi lipid.
Karotenoid adalah antioksidan yang efisien, pendinginan molekul keadaan tereksitasi dan
mengambil oksigen reaktif lainnya spesies termasuk radikal peroksida. Asupan karotenoid telah
dikaitkan dengan penurunan risiko kanker, kardiovaskular Peristiwa, gangguan ophthalmological
dan usia yang terkait penyakit konginitif.
Flavanoid adalah zat fenolik yang merupakan kelompok terbesar fenol. Mereka umumnya terjadi
sebagai unit C6-C3 terkait dengan cincin aromatic.
Fenol adalah metabolit sekunder paling luas dalam tanaman. Kelompok senyawa yang beragam
ini telah menerima banyak hal perhatian sebagai antioksidan alami potensial dalam hal
kemampuan mereka bertindak sebagai pengambil radikal yang efisien dan chelator logam.
aktivitas antioksidan fenol telah dilaporkan terutama disebabkan oleh sifat redoks mereka, donor
hidrogen dan oksigen singlet quenchers.
Tanin adalah moieties kompleks yang diproduksi oleh sebagian besar tanaman sebagai pelindung
zat yang memiliki aktivitas farmakologis yang luas. B berapa ulasan pada antioksidan diet
diindikasikan bahwa mereka telah digunakan sejak dulu sebagai agen tanin dan dilaporkan
mengandung zat antioksidan, antimikroba, astringen, antiinflamasi, dan antimikroba.
Polisakarida adalah produk alami yang penting dalam pengobatan Cina tradisional, memiliki
sifat antioksidan oleh yang melindungi sel terhadap spesies oksigen reaktif, kronis dan penyakit
degenerative. lavonoid, fenol dll dari Felicia Muricata menunjukkan sifat antioksidan yang
signifikan.

1. Uji daya ferric yang mengurangi antioksidan (frap)

Uji FRAP banyak digunakan dalam evaluasi antioksidan komponen dalam polifenol makanan.
Aktivitas antioksidan ditemukan berbanding lurus dengan konten fenolik.

2. Abts aktivitas penangkapan radikal

Uji radikal ABTS dapat digunakan dalam pelarut organik dan air sistem. Karena itu sering
digunakan dalam mengevaluasi antioksidan total kekuatan senyawa tunggal dan campuran
kompleks berbagai tanaman.
Kegiatan penangkapan pada buah Morinda citrifolia dan asam askorbat berkorelasi baik dengan
peningkatan konsentrasi. Asam askorbat bertindak sebagai standar perbandinganA. ktivitas
penangkapan radikal ABTS maksimum Buah mengkudu dan asam askorbat ditemukan.

3. Mengurangi daya
Mengurangi kekuatan suatu senyawa dapat berfungsi sebagai indikator yang signifikan aktivitas
antioksidan potensial.

Data menunjukkan bahwa semua sampel meningkatkan kemampuan mengurangi mereka ketika
konsentrasi ekstrak meningkat. Kemampuan untuk mengurangi Fe (III) dapat dikaitkan dengan
donasi hidrogen dari senyawa fenolik yang juga terkait dengan keberadaan agen pereduksi.
Selain itu nomor dan posisinya dari gugus hidroksil senyawa fenolik juga mengatur aktivitas
antioksidannya.

4. Uji fosfomolibdenum
Uji ini berhasil digunakan untuk mengukur vitamin E dalam biji. Metode ini sederhana dan
independen terhadap antioksidan lain pengukuran dan umumnya digunakan untuk ekstrak
tanamanhun