Ridzky Ardiansyah Jati

17312241057
Pendidikan IPA I 2017

Isolasi Senyawa β-Karoten

dari Minyak Kelapa Sawit Mentah (Elaeis guineensis Jacq.)

1. Karakterisasi Bahan Baku

Tentukan kadar air

Analisis karotenoid dan kadar β-karoten

Ridzky Ardiansyah Jati
17312241057
Pendidikan IPA I 2017
2. Ekstraksi dengan Metode Transesterifikasi-adsorpsi-desorpsi
Masukkan 50 g kelapa
sawit mentah, 0,25 g
H2SO4, dan 9,45 g
metanol ke dalam labu
dasar 250 ml dan diaduk
pada kecepatan 300 rpm
Masukkan isi labu ke da
sentrifugasi (1500 rpm,
30 menit)
Atur pH metil ester kasar
menjadi netral
Residu yang tertinggal
pada kertas saring
dikumpulkan dan
didesorpsi menggunakan
pelarut heksana dengan
metode maserasi selama
24 jam dengan bantuan
pengadukan
Simpan konsentrat
dalam botol amber gelap
Panaskan labu dasar
Tambahkan 0,5 g dalam dengan suhu 60o C
9,45 g metanol selama 1 jam dan aduk
pada kecepatan 300 rpm
Cuci kembali metil ester
Tambahkan akuades
kasar dengan akuades
untuk memisahkan fasa
untuk menghilangkan
polar dan metil ester
fasa polar yang masih
kasar
tersisa
Tambahkan adsorben
Saring hasil pengadukan
kaolin dan diaduk
hingga filtrat berwarna
dengan pengaduk
jernih
magnetis
Hasil maserasi proses
desorpsi didekantasi, Residu pada labu dasar
dipindahkan pada labu dilarutkan kembali
dasar bulat dan diuapkan dengan 5 ml heksana
dengan rotary evaporator sehingga menjadi
pada suhu 35oC kondisi konsentrat
vakum
Ridzky Ardiansyah Jati
17312241057
Pendidikan IPA I 2017

3. Ekstraksi dengan Metode esktraksi-saponifikasi

Masing-masing sampel
ditambahkan dengan 30
Masukkan 10 g sampel
ml campuran pelarut
minyak kelapa sawit Sampel disonifikasi
HAET (heksana, aseton,
mentah ke dalam labu selama 2 menit
etanol dan toluen
takaar gelap 100 ml
dengan perbandingan
10:7:6:7)

Ambil 10 ml larutan dan

Pindahkan hasil
pindahkan ke labu takar
saponifikasi ke dalam
gelap yang sudah berisi
corong pisah gelap dan
Tambahkan pelarut 20 ml pelarut HAET, 1
tambahkan 40 ml pelarut
hingga batas tera pada ml air, 4 ml KOH dalam
HAET, 40 ml Na2SO4
labu takar tepat 100 ml metanol (40% w/v) dan
anhidrat, dan 50 ml
dan dikocok agar masukkan ke dalam
akuades, dikocok dan
homogen penangas air pada suhu
didiamkan hingga
56o C dengan waktu
terpisah menjadi dua
reaksi 0 menit, 30 menit
fasa
dan 60 menit.

Fasa paling atas

dikumpulkan pada labu
dasar bulat untuk Larutkan residu pada
Ambil fasa paling
dievaporasi dengan labu dasar bulat dengan
bawah
rotatory evaporator pada etanol absolut 5 ml
suhu 35o C kondisi
vakum
Ridzky Ardiansyah Jati
17312241057
Pendidikan IPA I 2017

4. Analisis Hasil Ekstraksi dengan Kromatografi Lapis Tipis

Kombinasi campuran Fase diam yang telah

Konsentrat ditotolkan
pelarut dimasukkan ke dibubuhkan contoh
pada fase diam gel
dalam chamber KLT konsentrat dan senyawa
silika secara perlahan
untuk dijenuhkan standar dimasukkan ke
dan berulang
selama 60-120 menit dalam chamber KLT

Diamkan hingga fase

gerak mencapai batas
atas yang telah
ditentukan

5. Pemisahan fraksi dengan kromatografi kolom terbuka

Pipet 250 μl konsentrat

Masukkan fase diam gel
silika ke dalam ko;om
kromatografi
hasil ekstraksi ke dalam
Buka keran kolom dan
kolom dengan fase diam
kecepatan aliran diatur
gel silika dan fase gerak
pada kecepatan 1
pelarut optimum hasil
ml/menit
ujicoba pada analisis
KLT

Ukur absorbansi hasil

Kumpulkan eluat hasil
kromatografi dalam
wadah botol amber gelap
setiap 3 menit
eluat dengan Gabung eluat menjadi
spektrofotometer kelompok berdasarkan
UV_VIS pada rentang kesamaan nilai
panjang gelombang 350- absorbansi
800 nm
Ridzky Ardiansyah Jati
17312241057
Pendidikan IPA I 2017

6. Karakterisasi dan kuantifikasi fraksi mengandung β-karoten

Konsentrasi kelompok eluat yang

Karakterisasi kelompok eluat yang
telah dikumpulkan menggunakan
KLT dengan cara membandingkan
nilai Rf yang didapat dengan
senyawa standar
mengandung senyawa β-karoten
dihitung dengan instrumen
spektrofotometer UV-VIS berdasarkan
perhitungan dari rumus regresi standar
β-karoten pada konsentrasi 0,2 ; 0,4 ; 0,6
; 0,8 ; 2,0 ; 3,0 ; 4,0 ; dan 5,0 ppm

Hitung persentase recovery

perolehan β-karoten dengan cara
membandingkan konsentrasi β-
karoten senyawa setelah diisolasi
dengan konsentrasi β-karoten bahan
baku sebelum diekstraksi dan
diisolasi.