SKENARIO PEMBELAJARAN I

Mata Kuliah : Biokimia Lanjutan (JCPB 361)

Pertemuan : Ke-2
Waktu : 3 X 50 menit

Topik Bahasan: Prinsip Umum Analisis Biokimia: Separasi

A. Capaian Pembelajaran Mata Kuliah (CPMK)

1. Menjelaskan konsep separasi biomolekul, yang terdiri dari sentrifugasi, filtrasi dan
destilasi untuk pemanfaatan biodiversitas dalam pengembangan pangan, energi dan
obat.

B. Indikator Kegiatan (Sub-CPMK):

Pada akhir perkuliahan mahasiswa mampu
a. Menjelaskan prinsip kerja dari sentrifugasi
b. Menjelaskan penggunaan dari sentrifugasi untuk analisis biokimia
makromolekul
c. Menghitung atau mengkonversi RCF (Relative Centrifugal Force) ke RPM
(Revolutions Per Minute)
d. Menentukan kecepatan sentrifugasi terbaik untuk memisahkan makromolekul
atau sampel
e. Menjelaskan prinsip kerja dari filtrasi
f. Menjelaskan penggunaan dari filtrasi untuk analisis biokimia makromolekul
g. Menjelaskan prinsip kerja dari destilasi
h. Menjelaskan penggunaan dari destilasi untuk analisis biokimia makromolekul

C. Langkah Kegiatan
1. Prakuliah :
Masing-masing mahasiswa mempelajari LKM dan membaca bahan bacaan rujukan,
kemudian mengerjakan LKM.
2. Perkuliahan
3. Pasca Perkuliahan:
a. Mahasiswa mengerjakan LKM 30 menit sebelum perkuliahan selesai.
b. Dosen mengevaluasi ketercapaian perkuliahan.
 LKM BIOKIMIA LANJUTAN
PERTEMUAN 2
PRINSIP DASAR BIOKIMIA

Nama : ………………………………..
NIM : ………………………………..

Topik Pembahasan Diskusikan/Jawablah/Kerjakan Diskusi dan Jawaban

Pertanyaan/Perintah Berikut Dapat Dilengkapi
dengan Gambar
1. Sentrifugasi a. Jelaskan prinsip kerja dari sentrifugasi? a. Dalam metode
b. Jelaskan penggunaan sentrifugasi di sentrifugasi, prinsip
laboratorium biokimia guna memisahkan yang digunakan
makromolekul atau sampel? memisahkan
c. Berapa rpm kecepatan centrifuge yang substansi berdasar
diperlukan, jika sampel dapat terpisah pada berat jenis molekul
100,000 x g dalam sebuah rotor dengan dengan cara
radius 7.2 cm? memberikan gaya
d. Sentrifugasi diferensial digunakan untuk sentrifugal sehingga
memisahkan fraksi mitokondria yang substansi yang lebih
diisolasi dari organ hati. Mitokondria yang berat akan berada di
dihasilkan dengan metode tersebut relatif dasar sedang
murni, dan cocok untuk studi yang berkaitan substansi ringan
dengan respirasi. Sentrifugasi diferensial berada di atas
merupakan metode cepat untuk memisahkan
organel seluler berdasarkan kecepatan b. Sentrifugasi
sedimentasi. Berdasarkan narasi tersebut, digunakan dalam
dapatkah Anda menggunakan tipe low speed laboratorium
centrifuge untuk memisahkan fraksi biokimia sebagai
mitokondria dari organel seluler lainnya? pemisah suatu zat
Jelaskan alasannya? dengan densitas
berbeda
(dibandingkan filtrasi
yang memisah zat
dengan komposisi
berbeda); contoh
aplikasinya adalah
pemisahan lemak
dari susu, untuk
memperoleh sampel
susu skim.

c. 35.215 rpm
(Perhitungan di
lampiran).
 d. Untuk
memisahkan fraksi
mitokondria dari
organel seluler
lainnya tidak dapat
menggunakan tipe
low speed centrifuge
karena mitokondria
memiliki densitas
yang rendah akibat
dari bobotnya yang
juga rendah.
Semakin kecil
ukuran komponen
sel, maka akan
semakin sulit untuk
mendapatkan
fraksinya dan
semakin besar
kecepatan yang
digunakan untuk
mengisolasi
komponen sel
tersebut.

2. Filtrasi a. Jelaskan prinsip kerja dari filtrasi? a. Prinsip kerja

b. Jelaskan perbedaan antara gravity filtration metode Gravity
dengan vacuum filtration? Filtration, cairan
c. Jelaskan aplikasi metode filtrasi di melewati pori-pori di
laboratorium biokimia guna memisahkan kertas, dan padatan
makromolekul atau sampel? dipertahankan di atas
kertas.
Prinsip kerja
metode Vacuum
Filtration,
menggunakan corong
Buchner, digunakan
ketika Anda ingin
mengisolasi endapan
(padatan) untuk
analisis lebih lanjut.

b. Gravity Filtration,
Filtrasi yang
cairannya mengalir
karena gaya berat.
 Sedangkan Vacum
Filtration, Filtrasi
dengan cairan yang
mengalir karena
prinsip hampa udara
(penghisapan).

c. Filtrasi digunakan
untuk memisahkan
zat dengan komposisi
berbeda
(dibandingkan
setrifusi yang
memisahkan zat
dengan densitas
berbeda; contoh
aplikasi filtrasi dalam
biokimia adalah
filtrasi gen untuk
kromatografi.

3. Destilasi a. Jelaskan prinsip kerja dari destilasi? a. Prinsip kerja

b. Jelaskan aplikasi metode destilasi di destilasi ialah: ”Bila
laboratorium biokimia guna memisahkan suatu zat pada
makromolekul atau sampel? larutan tak sama-
sama menguap,
berarti uap larutan
akan mempunyai
komponen yang beda
dengan larutan yang
aslinya”. 

b. Contoh aplikasi
destilasi di
laboratorium
biokimia adalah
destilasi alkohol atau
produk fermentasi
lain dari cairan.
Perhitungan RPM:

rpm 2 x 2
(
RCF = 1,12 × Radius × )
1000 (
100.000=1,12 ×72 ×
1000) x=35.215