SKENARIO PEMBELAJARAN I

Mata Kuliah : Biokimia Lanjutan (JCPB 361)

Pertemuan : Ke-3
Waktu : 3 X 50 menit

Topik Bahasan: Prinsip Umum Analisis Biokimia: pH dan buffer; elektroforesis

A. Capaian Pembelajaran Mata Kuliah (CPMK)

1. Menjelaskan konsep pH dan buffer dan separasi makroomolekul menggunakan
teknik elektroforesis untuk pemanfaatan biodiversitas dalam pengembangan
pangan, energi dan obat.

B. Indikator Kegiatan (Sub-CPMK):

Pada akhir perkuliahan mahasiswa mampu
a. Menjelaskan cara mengukur pH pada suatu larutan
b. Menjelaskan cara pembuatan larutan penyangga atau buffer yang banyak
digunakan di laboratorium biologi/biokimia/biologi molekuler
c. Menjelaskan konsep separasi makromolekul menggunakan elektroforesis.
d. Menentukan panjang basa atau berat molekul dari makromolekul yang telah
dipisahkan dengan elektroforesis.

C. Langkah Kegiatan
1. Prakuliah :
Masing-masing mahasiswa mempelajari LKM dan membaca bahan bacaan rujukan,
kemudian mengerjakan LKM.
2. Perkuliahan
3. Pasca Perkuliahan:
a. Mahasiswa mengerjakan LKM 30 menit sebelum perkuliahan selesai.
b. Dosen mengevaluasi ketercapaian perkuliahan.
 LKM BIOKIMIA LANJUTAN
PERTEMUAN
PRINSIP DASAR BIOKIMIA: pH dan buffer; Elektroforesis

Nama : Erma Rofianti

NIM : 1811013120002

Topik Diskusikan/Jawablah/Kerjakan Diskusi dan Jawaban Dapat Dilengkapi

Pembahasan Pertanyaan/Perintah Berikut
1. pH dan a. Jelaskan konsep dasar pH dan
buffer pOH?
b. Hitunglah pH larutan dari 100 ml
larutan 0.01 M HCl?
c. Hitunglah pH larutan dari 2 liter
larutan 0.1 mol asam sulfat?
d. Jelaskan konsep dasar larutan
penyangga atau buffer?
e. Jelaskan cara membuat PBS
(Phosphate Buffered Saline) (1x,
pH 7.4)?
dengan Gambar
a. Asam adalah molekul yang
mendonasikan ion hidrogen ke
suatu larutan. Dalam formula
kimia, asam dimulai dengan "H".
Ex. HCl, HF (asam klorida, asam
fluorida) Basa adalah molekul
yang bergabung dengan ion
hidrogen untuk
menghilangkannya dari suatu
larutan
Dalam formula kimia, akhiri
dengan "OH". Ex. NaOH, KOH
(natrium hidroksida, kalium
hidroksida)
[H+] + [OH-] = 1 x 10-14
pH + pOH = 14

b. [H⁺] = a × Ma
= 1 × 10⁻²
      = 10⁻²
pH = - log [H⁺]
     = - log 10⁻²
     = 2

c. Ma = n/V
Ma = 0,1/2
Ma = 0,05 M

[H+] = a . Ma
[H+] = 2 . 0,05 M
[H+] = 0,1 M

pH = -log [H+]
pH = -log (0,1)
pH = -log (10^-1)
pH = 1

2. a. Jelaskan prinsip kerja dari
Elektrofores elektroforesis?
is b. Pada praktikum teknik elektroforesis,
instruktur memberikan tugas kepada
Anda untuk memurnikan dan
mengindentifikasi protein tersebut dengan
metode SDS-PAGE. Hasil akhir dari
praktikum seperti ilustrasi di bawah ini.
Sumur L adalah ladder atau marker
protein, sedangkan S adalah sampel.
Berdasarkan ilustrasi elektrogram yang
didapatkan, sampel protein yang Anda
murnikan teridentifikasi sebagai:
b. Protein tersebut terdefinisikan sebagai
d. Buffer adalah zat yang dapat
mengambil atau melepaskan ion
hidrogen ke dalam larutan
sehingga pH dapat
mempertahankan keseimbangan.
Jika pH rendah, [H +] tinggi. Jika
pH tinggi, [H +] rendah.
Jika pH turun, buffer akan
menghilangkan ion hidrogen dari
larutan.
Jika pH naik, buffer menyumbang
ion hidrogen ke larutan.
e. Siapkan 800 mL air suling dalam
wadah yang sesuai.
Tambahkan 8 g NaCl ke
larutannya.
Tambahkan 200 mg KCl ke
dalam larutan.
Tambahkan 1,44 g Na2HPO4
pada larutan.
Tambahkan 240 mg KH2PO4 ke
dalam larutan.
Sesuaikan larutan dengan pH
yang diinginkan (biasanya pH ≈
7,4).
Tambahkan air suling sampai
volume 1 L.
a. Prinsip dasar elektroforesis adalah
molekul dan partikel bermuatan akan
bergerak ke arah elektrode yang
memiliki muatan berlawanan di
bawah pengaruh medan listrik. Laju
migrasi molekul bermuatan tersebut
menuju elektrode yang bermuatan
negatif disebut elektromobilitas.
Asam nukleat bergerak dari kutub
negatif ke kutub positif.
carbonic anhydrase