Tak berkesudahan kasih setia TUHAN,

tak habis-habisnya rahmatNya,

selalu baru t i a p pagi;
besar kesetiaanMu!

(Ratapan 3:2 2-2 3 )

k a r y a kecil b u a t :

Sahabaf Se j a t i .
Tuhan Yesus Krisrus
P a p a . re-ie.
W i d . Gin.
Ida. A s i k i n ,
Daniel
Papi. Mami.
Varvara. Trivina.
Fiona. Revina. E v t i n a
 rr
1 4 KULTUR AWTHER DAW KULTUR PUGUK
PEPAVA ( e a r i c a papaya L . )
SEGARA 3 n Witre

Oleh
NANDUANTO WIDJOJO
A 22.0360

J U R U S A N BUD8 D A Y A P E R T A N l A N
F A K U L T A S PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN 806027
1 9 9 0
 RINGKASAN

HANDYANTO WIDJOJO. K u l t u r Anther dan K u l t u r Pucuk Pepaya

( C a r i c a papaya L. ) secara I n V i t r o ( d i bawah bimbingan

LIVY WINATA GUNAWAN dan S R I S E T Y A T I HARJADI).

P e n e l i t i a n i n i t e r d i r i d a r i 2 percobaan t e r p i s a h , ya-

i t u k u l t u r a n t h e r dan k u l t u r pucuk. K u l t u r anther bertu-

j u a n mempelajari pengaruh sukrosa terhadap proses androge-

nes's langsung, sedangkan k u l t u r pucuk b e r t u j u a n mencari

kombinasi t a r a f NAA dan BA yang t e p a t s e r t a mempelajari

'pengaruhnya terhadap penggandaan tunas.

Pada k u i t u r a n t h e r digunakan eksplan a n t h e r d a r i kun-

cup bunga ,pepaya Bangkok dan Hawai b e r j e n i s k e l a m i n herma-

p r o d i t dengan panjang p e t a l 16-18 rnrn ( f a s e mikrospora u n i -

nukleat). Media dasar yang digunakan adalah media Tsay

dan Su (1985) ditarnbah 100 mg/l g l u t a m i n dan 1 mg/l ade-

n i n dengan perlakuan 5 t a r a f sukrosa: 30, 45, 60, 7 5 , dan

90 dl.
Pada k u l t u r pucuk digunakan eksplan pucuk t u n a s sam-

p i n g pepaya Bangkok hermaprodit berukuran 2-3 rnm. Perla-

kuan kombinasi NAA ( 1 , 3 a M ) dan BA ( 2 , 4 , 6 .uM) dicobakan

dengan media dasar Murashige dan Skoog (MS). Eksplan d i -

tanam pada media perlakuan, tunas yang tumbuh d i s u . b k u l t u r

ke media yang sama s e t e l a h berumur 12 minggu dan 8 minggu

S e t e l a h 4 minggu pada media MS-0 tunas d i s u b k u l t u r ke me-

d i a yang sama s e p e r t i pada i n i s i a s i awal dan s u b k u l t u r I .

Proses androgenesis langsung maupun m e l a l u i k a l u s

t i d a k t e r j a d i pada semua a n t h e r yang ditanam pada media

perlakuan. D a r i 327 a n t h e r pepaya Bangkok yang aksenik

hanya 2 yang mengalami pembengkakan pada p e r l a k u a n t a r a f

sukrosa 30 g / l . Pada v a r i e t a s Hawai d i j u m p a i 2 a n t h e r

membengkak d a r i 630 a n t h e r aksenik, y a i t u pada p e r l a k u a n

t a r a f sukrosa 30 dan 75 g / l . Semua a n t h e r yang membengkak

berwarna c o k l a t dan m a t i sebelum berkembang l e b i h l a n j u t .

Pengaruh sukrosa terhadap proses androgenesis langsung

belum dapat d i p e l a j a r i pada percobaan i n i .

Kontaminasi b a k t e r i yang t i n g g i menjadi masalah utama

dalam k u l t u r pucuk (70.35 % ) . Jumlah eksplan yang m a t i

bertambah dengan meningkatnya t a r a f BA sehingga pad8 sub-

kultur I perlakuan BA 6 a M t i d a k dapat d i l a n j u t k a n karena

hampir semua eksplan mengalami kematian.

Pembentukan tunas majemuk pada k u l t u r pucuk pepaya

Bangkok baru t e r j a d i s e t e l a h eksplan mengalami s u b k u l t u r

I 1 atau 8 b u l a n s e j a k i n i s i a s i awal. Jumlah tunas p e r

k u l t u r t e r t i n g g i d i h a s i l k a n pada kombinasi NAA 1 u M dan BA

2 uM, y a i t u sebanyak 2 . 8 tunas.

 KULTUR ANTHER DAN KULTUR PUCUK

PEPAYA ( Car i c a papaya L . )

SECARA I n V i t r o

oleh

HANDYANTO WIDJOJO

A 22.0360

L a p o r a n K a r y a I l m i a h sebagai s a l a h s a t u s y a r a t

u n t u k m e m ~ e r o l e hg e l a r

S a r j a n a P e r t a n i an

pada

Jurusan B u d i D a y a P e r t a n i a n

Fakultas P e r t a n i a n

I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor

JURUSAN BUD1 DAYA PERTANIAN

FAKULTAS PERTANIAN

I N S T I T U T PERTANIAN BOGOR

1990
 I N S T I T U T PERTANIAN BOGOR

FAKULTAS PERTANIAN, JURUSAN BUD1 DAYA PERTANIAN

K a m i m e n y a t a k a n l a p o r a n K a r y a I l m i a h y a n g disusun

oleh:

Nama M a h a s i s w a : HANDYANTO WIDJOJO

Nomor Pokok : A 22.0360

Judul : KULTUR ANTHER DAN KULTUR PUCUK

PEPAYA ( C a r i c a papaya L . )

SECARA I n V i t r o

d i t e r i m a s e b a g a i salah satu s y a r a t m e m p e r o l e h g e l a r

S a r j a n a ~ e r t a n i a npada Jurusan B u d i D a y a P e r t a n i a n ,

Fakultas Pertanian, Institut P e r t a n i a n Bogor.

rl\* u

D r I r L i v y Winata G u n a w a n Dr Ir S r i Setyati Harjadi

Dosen Pembimbing I

Ir S r i Setyati Harjadi

K e t u a Jurusan K e t u a PS A g r o n o m i

Bogor, April 1990

 R I W A Y A T HIDUP

P e n u l i s d i l a h i r k a n d i L o s a r i ( C i r e b o n ) pada tanggal

5 Juli 1967 d a r i pasangan Soegianto W i d j o j o dan L i n d i a -

ningsih Limijadi.

P e n u l i s menyelesaikan p,endidikan Taman Kanak-kanak d i

TK P e r t i w i L o s a r i Timur pada tahun 1972. Pada tahun 1973

sampai 1976 p e n u l i s menempuh p e n d i d i k a n d i SD Negeri 1

L o s a r i Timur. Pada tahun 1977 p e n u l i s pindah ke SD Negeri

40 Tegal dan l u l u s pada tahun 1979. P e n u l i s rnelanjutkan

pendidikannya ke SMP Santa M a r i a Cirebon dan l u l u s pada

tahun 1982. Pada tahun yang sama p e n u l i s meneruskan pen-

d i d i k a n n y a ke SMA Santo A l o y s i u s Bandung dan l u l u s pada

tahun 1985.

M e l a l u i j a l u r Sistem Penerimaan Mahasiswa Baru ( S i -

penmaru) p e n u l i s d i t e r i m a d i i n s t i t u t P e r t a n i a n aogor pada

tahun 1985. Setahun kemudian p e n u l i s m e m i l i h j u r u s a n Budi

3aya P e r t a n i a n dan s e l a n j u t n y a mengambil Program S t u d i

Agronomi dengan bidang kekhususan H o r t i k u l t u r a .

P e n u l i s pernah a k t i f dalam k e g i a t a n Desa Binaan yang

diselenggarakan o l e h Himpunan Mahasiswa Agronomi pada t a -

hun 1986, memperoleh j u a r a 2 pada Lomba Karya T u l i s I l r n i a h

se Jurusan Budi Daya P e r t a n i a n IPB tahun 1987, dan rnenjadi

a s i s t e n B i o l o g i Umum pada tahun 1988-1989.

 UCAPAN T E R I M A KASIH

P e n u l i s menyampaikan r a s a t e r i r n a k a s i h yang mendalam

kepada:

D r I r L i v y Winata Gunawan dan D r I r S r i S e t y a t i

H a r j a d i s e l a k u dosen pembirnbing yang t e l a h mernberi-

kan d i d i k a n , bimbingan, nasehat, dan dorongan

D r I r G. A. Wattirnena dan I r N i Made Armini Wiendi

yang t e l a h rnenguji dan rnernberikan saran p e r b a i k a n

Urusan Senimar dan Karya I l r n i a h

Petugas L a b o r a t o r i u m K u l t u r J a r i n g a n Budi Daya

Pertanian

Ternan-ternan d i l a b o r a t o r i u r n a t a s bantuan, kerjasama,

dan p e r h a t i a n yang d i b e r i k a n

Rekan-rekan d i Komisi Pelayanan Siswa a t a s dukungan

dan kasihnya

H a j i Odom dan Pak Wanta yang rnengijinkan p e n u l i s

rnernperoleh bahan tanaman untuk p e n e l i t i a n i n i d a r i

kebun pepayanya

Semua pihak yang t e l a h rnernbantu dalarn penyelesaian

p e n e l i t i a n dan p e n u l i s a n k a r y a i l r n i a h i n i .
 DAFTAR IS1

Hal arnan

DAFTAR TABEL ..................................... X

DAFTAR GAMBAR ................................... xii

PENDAHULUAN ..................................... 1

L a t a r Belakang ............................. 1

Tujuan P e n e l i t i a n .......................... 4

H i p o t e s i s .................................. 5

TINJAUAN PUSTAKA ................................ 6

Sejarah dan Botani P.epaya .................. 6

Syarat Tumbuh ..............................

Budidaya P r a k t i s dan Produksi ..............
Genetika J e n i s Kelamin Pepaya ..............

K u l t u r Pucuk ...............................

K u l t u r Pucuk Pepaya ...................

K u l t u r Anther .................... .........

I

K u l t u r Anther Pepaya ..................

BAHAN DAN METODE ................................

Tempat dan Waktu P e n e l i t i a n ................

Bahan dan A l a t .............................

S t e r i l i s a s i A l a t dan Media .................
Metode P e n e l i t i a n ..........................

K u l t u r Anther ..............................
Perlakuan dan Eksplan ................. 17

Penentuan Fase Mikrospora ............. 17

 Ha 1 aman

Penanaman ............................. 19

Lingkungan Tumbuh ..................... 19

Pengamatan ............................ 19

K u l t u r Pucuk ............................... 20

Perlakuan dan Eksplan ................. 20

Penanaman ............................. 20

Pemi ndahan Eksplan .................... 21

Lingkungan Tumbuh ..................... 21

Pengamatan ............................ 22

HASIL DAN PEMBAHASAN ............................ 23

K u l t u r Anther .............................. 23

K u l t u r Pucuk ............................... 28

T i n g k a t Kontaminasi ................... 28

I n i s i a s i Awal ......................... 29

S u b k u l t u r I ........................... 34

S u b k u l t u r I 1 .......................... 35

KESIMPULAN DAN SARAN ............................ 41

~ e s i m p u l a n .................................. 41

Saran ...................................... 41

DAFTAR PUSTAKA .................................. 42

LAMPIRAN ......................................... 45
 DAFTAR TABEL

Halarnan

Perbandingan Sex H a s i l Penyerbukan pada Ta-

naman Pepaya ..............................
Banyaknya Anther yang D i k u l t u r k a n , Terkonta-
minasi, dan Aksenik hingga 8 Bulan S e t e l a h
Tanam ( 8 BST) .............................
Jumlah Anther yang Berwarna Kuning, Kuning
Pucat, dan Kecoklatan pada 8 BST ..........
Jumlah dan Persentase Anther yang Mengalami
Pembengkakan pada Beberapa T a r a f Sukrosa ..
Banyaknya Pucuk yang Ditanam, Aksenik, Ter-
kontarninasi, dan M a t i pada Media S e l e k s i ..
Banyaknya Pucuk Awal, Terkontaminasi, Mati,
dan Aksenik pada I n i s i a s i Awal ............
Pengaruh BA terhadap T i n g g i Tunas pada I n i -
s i a s i Awal (12 MST) .......................
R a t a - r a t a Jurnlah Daun per K u l t u r dan Jurnlah
Eksplan Berkalus pada A k h i r I n i s i a s i Awal .
Pengaruh BA terhadap T i n g g i Tunas pada A k h i r
S u b k u l t u r I ( 8 MST) .......................
R a t a - r a t a Jumlah Daun p e r K u l t u r dan Banyak-
nya Eksplan Berkalus pada A k h i r S u b k u l t u r I

Banyaknya K u l t u r yang Tidak dan Membentuk

Tunas Majemuk s e r t a K i s a r a n Jumlah Tunas
yang D i h a s i l k a n p e r Kul t u r pada Akhi r Sub-
k u l t u r I 1 ( 8 MST) .........................
T i n g g i Tunas T e r t i n g g i , R a t a - r a t a Jumlah Da-
un p e r K u l t u r dan Banyaknya Eksplan B e r k a l u s
pada A k h i r S u b k u l t u r I 1 ...................
 Larnoi r a n

1. Kornposisi Media Murashige dan Skoog (1962)

2. Kornposisi Media Tsay dan Su (1985) ......

3. S i d i k ~ i g a mT i n g g i Tunas pada A k h i r I n i s i -
a s i Awal ( 1 2 MST) .......................
4. S i d i k Ragam T i n g g i Tunas pada A k h i r Subkul
t u r I ( 8 MST) ...........................
 DAFTAR GAMBAR

Halaman

1. Kuncup Bunga dan Polen yang Berada pada

Fase Mikrospora U n i n u k l e a t .............. 18

2. Anther yang Membengkak .................. 26

3. Pengaruh BA terhadap Persentase Eksplan

yang Hidup dan M a t i pada I n i s i a s i Awal .. 30

4. G r a f i k Pertumbuhan Eksplan pada I n i s i a s i

Awal .................................... 31

5. Tunas yang Membentuk Daun dengan Tangkai

Oaun yang Pendek dan Gemuk s e r t a H e l a i Da-
un yang Tidak Sempurna .................. 33

6. R a t a - r a t a Jurnlah Tunas p e r K u l t u r pada

A k h i r S u b k u l t u r I 1 ( 8 MST).............. 36

7. Eksplan yang Menghasilkan Tunas Majernuk

dan Membentuk Kalus ..................... 39
 PENDAHULUAN

L a t a r Be1 akanq

Pepaya adalah s a l a h s a t u tanaman buah-buahan t r o p i s

yang tumbuh b a i k d i I n d o n e s i a dan mempunyai p o t e n s i u n t u k

dikembangkan sebagai k o m o d i t i ekspor non migas. Pada t a -

hun 1983 volume ekspor pepaya I n d o n e s i a sebesar 1 9 t o n .

Jumlah i n i t e r u s meningkat dan pada tahun 1985 volume

e k s p o r n y a menjadi 5 9 t o n . dengan negara t u j u a n S i n g a p u r a

dan A u s t r a l i a . * l

S e l a i n kesinambungan p r o d u k s i dan k u a n t i t a s yang

mencukupi, k u a l i t a s a d a l a h s a l a h s a t u komponen p e n t i n g

yang h a r u s d i p e r h a t i k a n dalam memproduksi buah pepaya

u n t u k t u j u a n ekspor. Pengadaan b i b i t unggul yang memi-

l i k i s i f a t g e n e t i k yang seragam, p r o d u k t i v i t a s t i n g g i ,

dan k u a l i t a s buah yang b a i k t i d a k dapat d i p u n g k i r i l a g i

merupakan langkah awal yang h a r u s d i l a k u k a n dalam pengu-

sahaan tanaman pepaya s k a l a b e s a r secara k o m e r s i a l u n t u k

t u j u a n ekspor.

Penanaman pepaya m e l a l u i b i j i merupakan c a r a b u d i -

daya yang b i a s a d i l a k u k a n p a r a p e t a n i pepaya k a r e n a r e l a -

t i f murah, mudah, dan t i d a k memerlukan i n v e s t a s i awal b i -

b i t yang t i n g g i . T e t a p i c a r a i n i bukanlah c a r a yang t e r -

b a i k dalam penanaman pepaya s k a l a besar k a r e n a adanya

*) S t a t i s t i k a I n d o n e s i a 1985, 1987, BPS, J a k a r t a .

 2

variasi genetik yang sangat tinggi dan terjadinya segre-

gasi tipe jenis kelamin (jantan, betina, dan hermaprodit).
Penyerbukan terkendali dengan cara menyerbuki putik
bunga hermaprodit dengan serbuk sari bunga hermaprodit
dari varietas yang sama atau dengan penyerbukan sendiri
dapat menekan keragaman sifat buah, tetapi belum dapat
mengatasi keragaman jenis kelamin pepaya. Benih yang
berasal dari buah hermaprodit asal penyerbukan terkendali
pada tanaman hermaprodit tetap akan menghasilkan tanaman
pepaya hermaprodit dan tanaman betina dengan perbandingan
2:l.

Selain segregasi jenis kelamin, hama, dan penyakit

juga merupakan rnasalah yang serius dalam budidaya pepaya.
Penyakit terpenting pada pepaya adalah penyakit yang di-
sebabkan oleh virus. Penyakit virus bercak cincin pepaya
dilaporkan telah menjadi penyakit terpenting di Hawai,
Amerika Utara, Afrika, Karibia, India, dan Taiwan (Chen,
Wang, dan Maeda, 1987; Litz, 1986). Tanaman yang terse-
rang akan menghasilkan buah pepaya dengan kadar gula yang
rendah sehingga tidak dapat dipasarkan.
Teknik kultur jaringan merupakan salah satu alterna-
tif pemecahan masalah. Kultur pucuk diandalkan untuk
mempertahankan suatu klon tertentu dan perbanyakan cepat,
sedangkan kultur anther untuk memperoleh tanaman pepaya
homozigot yang dapat digunakan dalam kegiatan pemuliaan
 3

tanarnan. M e l a l u i k u l t u r pucuk dapat d i h a s i l k a n b i b i t

yang seragam dalarn jurnlah b e s a r dalarn waktu s i n g k a t , be-

bas harna dan p e n y a k i t , dan rnerupakan c a r a e f e k t i f u n t u k

rnernperoleh tanarnan b a r u yang sarna dengan induknya. Kul-

t u r a n t h e r dapat rnenunjang k e g i a t a n pernuliaan tanarnan,

r n i s a l n y a dalarn usaha menghasilkan h i b r i d a t e r k e n d a l i un-

t u k rnemperoleh tanarnan yang r e s i s t e n t e r h a d a p p e n y a k i t

virus.

Tanarnan h a p l o i d rnernpunyai jurnlah krornoscin sornatik

sarna dengan s e l - s e l garnetnya. Pada tanarnan pepaya d i -

ploid, krornosornnya b e r j u r n l a h 2n=18 dan s e l - s e t garnetnya

rnengandung krornosorn n=9, s e h i n g g a tanaman h a p l o i d pepaya

r n e r n i l i k i jurnlah krornosorn n=9. Dalarn k u l t u r a n t h e r tanarn-

an h a p l o i d dapat d i p e r o l e h r n e l a l u i p r o s e s a n d r o g e n e s i s

l a n g s u n g (perkernbangan p o l e n langsung rnenjadi tanarnan

tanpa rnelalui f e r t i l i s a s i ) atau melalui kalus

K e b e r h a s i l a n p r o s e s a n d r o g e n e s i s pada k u l t u r a n t h e r

s e c a r a urnurn d i p e n g a r u h i o l e h p e r l a k u a n suhu rendah, korn-

p o s i s i media yang digunakan, dan l i n g k u n g a n f i s i k d i mana

k u l t u r diternpatkan. Salah s a t u kornponen media yang b e r -

p e r a n p e n t i n g dalarn rnendapatkan tanarnan h a p l o i d r n e l a l u i

a n d r o g e n e s i s adalah g u l a ( N i t s c h , 1 9 8 1 ) . Namun u n t u k

rnengetahui s e j a u h rnana pengaruh g u l a s e c a r a s p e s i f i k pada

k u l t u r a n t h e r pepaya v a r i e t a s t e r t e n t u rnasih d i p e r l u k a n

suatu penelitian.
 4

Penelitian kultur anther pepaya telah dilakukan oleh

Litz dan Conover ( 1 9 7 8 , dalam Litz, 1 9 8 6 ) . Tanaman ha-
ploid yang diperoleh hanya 0 . 1 % dari seluruh anther yang
ditanam pada modifikasi media dasar Murashige dan Skoog
(MS) yang ditambah 20 g/l sukrosa dengan perlakuan awal
suhu rendah. Pembentukan tanaman haploid melalui kultur
anther berhasil diperbaiki oleh Tsay dan Su ( 1 9 8 5 ) dengan
menggunakan rnodifikasi media dasar MS-1/2 (Na-Fe- EDTA
penuh) ditambah 60 g/l sukrosa. Anther yang dikulturkan
berada pada fase sel polen uninukleat. Keberhasilan ter-
bentuknya tanarnan haploid pada penelitian ini juga rnasih
sangat rendah, yaitu sekitar 1 % tetapi sudah lebih ting-
gi dibandingkan hasil yang dicapai oleh Litz dan Conover
( 1978).

Dalam kultur pucuk perimbangan auksin dan sitokinin

msmegang peranan penting. Litz dan Conover ( 1 9 7 8 ) berha-
sil rnemperoleh 7 tunas pepaya 'Solo' baru per 3 minggu
rnelalui kultur pucuk dengan menambahkan 1 .uM NAA dan 2 .uM
@.A pada media perbanyakan MS.

Tu.iuan Penel i tian

1. Kultur anther: mempelajari dan mengamati pengaruh
sukrosa terhadap proses androgenesis langsung pada
media Tsay dan Su ( 1 9 8 5 ) .
 5

2. K u l t u r pucuk: rnencari k o m b i n a s i t e p a t t a r a f NAA dan

BA s e r t a rnempelajari pengaruhnya t e r h a d a p

penggandaan t u n a s pepaya pada media M S .

Hi~otesis

1. Sukrosa berpengaruh t e r h a d a p p r o s e s a n d r o g e n e s i s

1angsung.

2. Kornbinasi k o n s e n t r a s i NAA dan B A yang t e p a t mengha-

s i l k a n penggandaan t u n a s yang t e r b a i k .
 TINJAUAN PUSTAKA

S e i a r a h dan B o t a n i PeDaya

Pepaya a d a l a h tanaman a s l i Amerika Tengah yang b e r -

i k l i m t r o p i s (Samson, 1980). Tanaman pepaya yang d i b u . d i -

dayakan sekarang merupakan h a s i l p e r s i l a n g a n a l a m i a n t a r a

C a r i c a p e l t a t a Hook. and Arn. dengan s p e s i e s l i a r l a i n n y a

( L i t s , 1984).

Pepaya yang m e m i l i k i nama b o t a n i C a r i c a papaya L.

termasuk tanaman b e r k e p i n g dua, s a l a h s a t u anggota k e l u -

a r g a Caricaceae dan genus C a r i c a . Jumlah kromosom soma-

t i k n y a 2n=18 ( L i t z , 1984).

Tanaman yang m e m i l i k i pembuluh l a t e k s pada semua ba-

g i a n tanamannya i n i termasuk h e r b a t a h u n a n b e r k a y u f u n a k ,

batangnya t i d a k bercabang, besar, t i n g g i n y a d a p a t menca-

p a i beberapa meter d i a t a s t a n a h (Hartmann, F l o c k e r , dan

Kof ranek, 1981 ; Samson, 1980 ) .

Daunnya besar dan l e b a r , m e n j a r i dengan t a n g k a i daun

yang panjang dan b e r l u b a n g pada b a g i a n tengahnya s e p e r t i

p i p a , t e r s u s u n secara m e l i n g k a r (Samson, 1980 dan S o e d i r -

djoatmodjo, 1985).

Pada tanaman pepaya d a p a t d i j u m p a i bermacam-macam

b e n t u k , t i p e , dan j e n i s bunga. Berdasarkan j e n i s k e l a -

minnya S o e d i r d j o a t m o d j o ( 1 9 8 5 ) menyebutkan beberapa macam

bunga, y a i t u bunga b e t i n a , bunga j a n t a n , bunga sempurna

 7
elongata, bunga sempurna petandria, bunga sempurna anta-
ra, dan bunga sempurna rudimenter.
Buah pepaya termasuk buah buni. Bagian yang dapat
dimakan adalah bagian mesokarp dan endokarp yang berda-
ging lunak. Pada bagian dalam dinding ovarinya dijumpai
biji dalam jumlah banyak. Buah muda mengandung papain,
suatu enzim pencerna protein (Hartmann et a l . , 1981).
Bentuk buahnya bervariasi dari bulat hingga seperti buah
pear. Bobotnya umumnya berkisar 0.5-2.0 kg. Buah pepaya
sering dikonsumsi sebagai buah segar, salad, campuran es
buah, dan selai (Samson. 1980). Setiap 100 g buah pepaya
mengandung 45 kalori, dengan kandungan vitamin A sebanyak
710 SI. vitamin C 75 mg, kalium 221 mg, dan beberapa
mineral lainnya (Soedirdjoatmodjo, 1985).

Svarat Tumbuh
Pepaya dapat tumbuh pada suhu lingkungan 15O-35Oc,
tetapi suhu optimal bagi pertumbuhannya berkisar antara
22-28O~. Tanaman muda membutuhkan kelembaban tinggi.
Curah hujan yang baik bagi tanaman pepaya berkisar 1500-
2000 mm per tahun (Soedirdjoatmodjo, 1985). Tanaman
pepaya dapat tumbuh pada ~ ~ O L U - 3 2 '(Hartmann
~~ et a 7 . ,
1981).
Tanah bagi pertanaman pepaya harus memiliki drainase
dan aerasi yang baik, subur, kaya bahan organik, lebih
d i s u k a i yang m e m i l i k i t o p o g r a f i yang d a t a r , dan pH-nya

b e r k i s a r 6-7 (Samson. 1980).

Tanaman pepaya termasuk tanaman yang t a h a n k o n d i s i

k e k e r i o g a n karena s i s t e m perakarannya yang r a p a t . Pohon

penahan a n g i n sangat besar peranannya u n t u k m e l i n d u n g i

pertanaman pepaya d a r i t e r p a a n a n g i n yang k u a t (Samson,

1980).

Budidava P r a k t i s dan P r o d u k s i

Tanaman pepaya b i a s a d i t a n a m dengan j a r a k tanam

2.5 m x 2 m sampai 3 m x 3 m t e r g a n t u n g v a r i e t a s . Popu-

l a s i n y a p e r h e k t a r b e r k i s a r 1000-2000 tanaman (Samson,

1980).

%nga pertama muncul k i r a - k i r a 5 b u l a n s e t e l a h pe-

nanaman b i j i , sedangkan buah pertama d a p a t d i p e t i k 5 bu-

'lan k m u d i a n (Hartmann e t a l . , 1981). P r o d u k s i t o t a l di

P u l a u Jawa mencapai 1 890 602 k u i n t a l pada t a h u n 1988.

S e n t r a p r o d u k s i n y a t e r s e b a r d i s e l u r u h P u l a u Jawa dengan

daerah-daerah p e n g h a s i l utama Malang, Jombang, dan B o g o r . * )

G e n e t i k a J e n i s K e l a m i n Pepaya

Berdasarkan j e n i s k e l a m i n n y a t e r d a p a t 3 j e n i s k e l a -

m i n tanaman pepaya. yaitu: tanaman j a n t a n , betina, dan

h e r m a p r o d i t (Hartmann e t a l . , 1981; Litz, 198

1980; Soedirdjoatmodjo, 1985).

-
*) B i r o Pusat S t a t i s t i k , 1988.
 Dalarn t u l i s a n n y a S o e d i r d j o a t r n o d j o ( 1 9 8 5 ) rnengernuka-

kan h a s i l p e n e l i t i a n t e n t a n g penyerbukan s i l a n g dan

p e n y e r b u k a n s e n d i r i pada tanarnan pepaya yang d i l a k u k a n

o l e h S t o r e y d i Hawai (Tabel 1 ) .

Tabel 1 . Perbandingan Sex Hasil Penyerbukan pada

Tanarnan P e p a y a

Penyerbukan Perbandingan Sex

* diserbuk sendiri

Kul t u r P u c u k

K u l t u r p u c u k a d a l a h s a l a h s a t u d a s a r k e g i a t a n per-

b a n y a k a n t a n a r n a n s e c a r a v e g e t a t i f r n i k r o dalarn k u l t u r

jari ngan. D i bandingkan dengan kul t u r rneristern, kul t u r

pucuk l e b i h banyak d i l a k u k a n k a r e n a e k s p l a n yang l e b i h

b e s a r p a d a k u l t u r p u c u k l e b i h rnudah d i i s o l a s i , rnernpunyai

p e l u a n g h i d u p l e b i h b e s a r , d a n rnenunjukkan k e c e p a t a n

turnbuh y a n g l e b i h b a i k (Hu d a n Wang, 1983). Ukuran

 10
e k s p l a n yang digunakan dalam k u l t u r pucuk umumnya b e r k i -

s a r 3-10 mm (Gunawan, 1987).

Menurut Murashige (1974) dalam k u l t u r pucuk tahap

perkembangan e k s p l a n pada dasarnya t e r d i r i d a r i 3 f a s e ,

yaitu: (1) f a s e pertumbuhan, (2) f a s e penggandaan t u -

nas, dan ( 3 ) f a s e pembentukan a k a r . Pada f a s e penggan-

daan tunas t e r d a p a t 3 kemungkinan t e r b e n t u k n y a tunas ma-

jemuk, yaitu: m e l a l u i pembentukan tunas a k s i l a r , pem-

bentukan tunas a d v e n t i f , a t a u m e l a l u i pembentukan embrio

somatik (Hu dan Wang, 1983).

Kemampuan eksplan untuk b e r t a h a n h i d u p , menghasilkan

penggandaan tunas, dan beregenerasi d i p e n g a r u h i o l e h ba-

nyak f a k t o r , yaitu: sumber dan k o n d i s i f i s i o l o g i s eks-

p l a n , kandungan hormon endogen, c a r a s t e r i l i s a s i eksplan,

i s o l a s i eksplan, media, dan l i n g k u n g a n f i s i k k u l t u r (Hu

dan Wang, 1983).

K u l t u r Pucuk Pepava

K u l t u r pucuk pepaya t e l a h d i l a k u k a n o l e h beberapa

peneliti. Mehdi dan Hogan (1976) mengkulturkan pucuk

pepaya yang b e r a s a l d a r i kecambah dengan menggunakan

media MS ditambah 4.7 wM k i n e t i n . Untuk media perakaran

digunakan MS ditambah 4.7 wM k i n e t i n dan 24.5 wM I B A .

Pada p e n e l i t i a n t e r s e b u t t i d a k t e r j a d i perbanyakan pucuk.

Y i e dan Liaw (1977, dalam Litz, 1984) b e r h a s i l

menemukan media yang cocok untuk perbanyakan pucuk a s a l

 11
kecambah dengan menggunakan media MS yang mengandung 0.3

uM I A A dan 2 3 IVM k i n e t i n atau 2.2-4.4 .uM B A .

L i t z dan.Conover ( 1 9 7 8 ~ )menggunakan media MS ditam-

bah 50 .uM k i n e t i n dan 10 a M NAA pada suhu ruang tumbuh

2 5 O ~dan i n t e n s i t a s penyinaran 1.5 k l u x selarna 1 6 jam un-

t u k m e n g i n i s i a s i pucuk pepaya yang b e r a s a l d a r i tanaman

dewasa. Setelah berumur 2 bulan pucuk t e r s e b u t dipindah-

kan ke media perbanyakan. Media perbanyakan t e r b a i k ada-

l a h media MS yang ditambah 1 a M NAA dan 2 a M BA dengan

kecepatan perbanyakan 7 tanaman per 3 minggu. Perakaran

dirangsang dengan media MS yang ditambah 0.5-5 a M I B A

a t a u 0.5-15 a M NAA. NAA 5 IVM memberi pengaruh t e r b a i k

untuk pembentukan akar.

Pada tahun 1981 L i t z dan Conover melakukan p e n e l i -

t i a n k u l t u r pucuk pepaya dengan media yang sama s e p e r t i

yang mereka gunakan pada p e n e l i t i a n tahun 1978. Hasil

p e n e l i t i a n n y a menunjukkan bahwa pada k u l t u r pucuk pepaya

waktu dan kecepatan pertumbuhan dan perbanyakan tanaman

dipengaruhi o l e h : umur tanarnan sumber eksplan, musim

pada s a a t pucuk d i a m b i l , t i p e j e n i s kelamin, ada t i d a k n y a

kontaminasi b a k t e r i , dan t e r j a d i n y a e t i o l o g i yang d i s e -

babkan o l e h suatu patogen. Tanaman yang sedang berada

Dada f a s e pertumbuhan a k t i f merupakan sumber eksplan yang

baik. Eksplan yang d i a m b i l pada musim panas menunjukkan

pertumbuhan i n v i t r o l e b i h b a i k daripada eksplan yang

 12
d i a m b i l pada musim d i n g i n . Pucuk pepaya j a n t a n menunjuk-

kan pertumbuhan dan jumlah perbanyakan l e b i h t i n g g i d i -

bandingkan pucuk tanaman h e r m a p r o d i t dan b e t i n a . Media

perakaran MS ditambah 2.5 4 M IBA memberikan h a s i l yang

t e r b a i k.

K u l t u r Anther

K u l t u r anther merupakan s a l a h s a t u c a r a mendapatkan

tanaman h a p l o i d m e l a l u i proses androgenesis. Tanaman

h a p l o i d adalah tanaman yang mempunyai jumlah kromosom

sama dengan gamet pada s e l - s e l sporofitnya (Bajaj, 1983).

Androgenesis adalah perkembangan s e l polen menjadi tanam-

an t a n p a m e l a l u i proses f e r t i l i s a s i ( N i t s c h dan Godard,

1979).

Pada dasarnya mekanisme androgenesis adalah mencegah

pembentukan s e l g e n e r a t i f a t a u menghentikan perkembangan

g e n e r a t i f yang normal dan mempertinggi pembelahan s e l - s e l

v e g e t a t i f ( N i t s c h dan Godard, 1979).

Tanaman h a p l o i d m e l a l u i k u l t u r a n t h e r dapat d i p e r o -

l e h dengan 2 cara, yaitu: m e l a l u i proses androgenesis

langsung a t a u embriogenesis m e l a l u i pembentukan k a l u s

(Gunawan, 1987; Sink dan Padmanabhan, 1977).

Penggunaan tanaman h a p l o i d mencakup beberapa d i s i -

p l i n ilmu: pemuliaan tanaman, f i s i o l o g i , dan b i o k i m i a

(Collins, 1977; Gunawan, 1987; Pierik, 1987; Sink dan

Padmanabhan, 1977). Penggunaannya d i bidang t e r s e b u t

 13

adalah: (1) rnendeteksi rnutasi dan rekornbinan yang u n i k ,

(2) rnenghasilkan h i b r i d a t e r k e n d a l i , (3) seleksi s i f a t -

s i f a t tertentw, (4) rnempercepat upaya rnernperoleh tanarnan

hornozigot, (5) rnernpelajari s i f a t - s i f a t g e n e t i k yang r e -

s e s i f , dan ( 6 ) digunakan dalarn h i b r i d i s a s i sornatik.

Dibandingkan k u l t u r p o l e n dan k u l t u r o v u l yang belum

diserbuk, c a r a rnendapatkan tanarnan h a p l o i d r n e l a l u i k u l t u r

a n t h e r rnerniliki keuntungan karena t e k n i k i s o l a s i n y a l e b i h

rnudah. Kerugiannya adalah kernungkinan t e r b e n t u k n y a t a -

narnan d a r i j a r i n g a n s p o r o f i t , s e p e r t i d i n d i n g a n t h e r a t a u

t a n g k a i s a r i (Gunawan, 1987).

N i t s c h (1981) rnenyatakan bahwa unsur minor dan v i t a -

min t i d a k d i p e r l u k a n dalarn proses androgenesis. Pernberi-

an z a t pengatur turnbuh j u g a t i d a k berpengaruh bahkan da-

p a t b e r s i f a t rnerusak pada k o n s e n t r a s i t e r t e n t u , karena

dapat rnengharnbat proses ernbriogenesis. B a j a j (1983) rne-

ngernukakan bahwa z a t pengatur turnbuh sebaiknya d.iberikan

dalarn k o n s e n t r a s i serendah rnungkin untuk rnenghindari t e r -

bentuknya k a l u s d a r i j a r i n g a n d i p l o i d yang t i d a k d i h a r a p -

kan .
N i t s c h (1981) j u g a rnenyatakan bahwa u n t u k rnernperoleh

tanarnan h a p l o i d m e l a l u i androgenesis langsung p e r l u d i -

p e r h a t i k a n r n o d i f i k a s i g u l a dan asarn amino yang ditarnbah-

kan pada media turnbuh.

 14
H a s i l p e n e l i t i a n Mauro, Nef, dan F a l l o t (1986) me-

n u n j u k k a n bahwa penambahan g l u t a m i n 100 mg/l dan a d e n i n

1 mg/l pada media dasar MS-1/2 dengan tambahan NAA 0.5 .uM

dan BA 0.4 .uM meningkatkan pembentukan k a l u s dan pemben-

t u k a n tanaman h a p l o i d m e l a l u i p r o s e s e m b r i o g e n e s i s . Pe-

n e l i t i a n i n i d i l a k u k a n terhadap a n t h e r V i t i s v i n i f e r a

k u l t i v a r Carbenet-Sauvignon.

Menurut N i t s c h (1981) penggunaan cahaya p u t i h dengan

intensitas tinggi (5000 l u x ) menghambat p r o s e s androgene-

sis, sedangkan penyimpanan pada tempat g e l a p a t a u yang

d i b e r i cahaya b i r u t i d a k b e r s i f a t menghambat.

P e r l a k u a n awal suhu rendah pada k u l t u r a n t h e r mem-

b e r i k a n pengaruh yang b a i k ( N i t s c h dan Godard, 1979),

yaitu: meningkatkan v i a b i l i t a s p o l e n dan keserempakan

pehelahan sel, memperlambat metabolisme k e a r a h pema-

tangan s e k s u a l , dan merangsang pembelahan s e l - s e l vege-

t a t if .

K u l t u r A n t h e r Pepava

L i t z dan Conover ( 1 9 7 8 ~dalam L i t z , 1984) t e l a h

mencoba k u l t u r a n t h e r pepaya dengan menggunakan media MS

ditambah 20 g sukrosa, 2 mg BA, 0.5 mg NAA, dan 10 g

arang a k t i f p e r l i t e r media, d i i k u t i p e r l a k u a n awal suhu

rendah 4 ' ~ selama 3-4 hari. Tanaman h a p l o i d yang t e r b e n -

t u k hanya s e k i t a r 0.1 %.

Tsay dan Su (1985) menggunakan a n t h e r u n t u k mempero-

l e h tanaman h a p l o i d pepaya dengan media MS-1/2 (Na-Fe-

 15
EDTA penuh) yang ditarnbah 2 mg/l NAA, 1 mg/l BA, dan 6 0

g/l sukrosa. Fase rnikrospora yang rnenunjukkan t i n g k a t

pembentukan k a l u s t e r t i n g g i a d a l a h u n i n u k l e a t h i n g g a

m i t o s i s pertarna. Jurnlah tanarnan h a p l o i d yang t e r b e n t u k .

hanya 1 . 1 4 %. P e r l a k u a n tanpa cahaya f g e l a p ) pada r u a n g

k u l t u r memberikan h a s i l l e b i h b a i k pada pernbentukan

kalus. Tanarnan h a p l o i d d i p e r o l e h dengan memindahkan

embrio yang t e r b e n t u k ke media MS tanpa z a t p e n g a t u r

tumbuh dengan s u k r o s a sebanyak 60 g p e r l i t e r media.

 BAHAN DAN METODE

TemDat dan Waktu P e n e l i t i a n

P e n e l i t i a n d i l a k u k a n d i Laboratorium K u l t u r J a r i n g a n

Jurusan Budi Daya P e r t a n i a n , Fakultas Pertanian, I n s t i t u t

P e r t a n i a n Bogor. P e n e l i t i a n berlangsung pada b u l a n Janu-

a r i 1989 s a m ~ a i bulan Pebruari 1990.

Bahan dan A l a t

Media k u l t u r yang digunakan adalah f o r m u l a s i Murashige

dan Skoog (MS) dengan tambahan NAA, BA, g l u t a m i n , adenin,

agar, dan sukrosa. Bahan-bahan yang digunakan untuk s t e -

r i l i s a s i bahan tanaman dan a l a t tanarn adelah B e n l a t e , A g r i -

mycin, C l o r o x , Betadine, a l k o h o l , s p i r i t u s , dan a k u a d e s t i -

1a t a .

Alat-alat yang digunakan m e l i p u t i b o t o l k u l t u r k e c i l ,

gelas p i a l a , erlenmeyer, p i p e t , autoclave, oven, neraca,

g e l a s pengaduk, corong, p i p e t t e t e s , saringan kain, bun-

sen, k e r t a s alumunium f o i l , k a r e t gelang, pH-meter, kotak

tanam, gunting, p i n s e t , cawan p e t r i , lampu s p i r i t u s , dan

rak inkubasi.

S t e r i l i s a s i A l a t dan Media

Sebelurn digunakan b o t o l k u l t u r , p i n s e t , s k a l p e l , ca-

wan p e t r i d i s t e r i l k a n dengan a u t o c l a v e pada tekanan 1 7 . 5

p s i selama 1 jam. Media d i s t e r i l k a n dalam a u t o c l a v e se-

lama 30 m e n i t pada tekanan 1 7 . 5 psi.

 17

Metode P e n e l i t i a n

P e n e l i t i a n yang d i l a k u k a n t e r d i r i d a r i 2 percobaan

terpisah, yaitu: (1) k u l t u r a n t h e r dan ( 2 ) k u l t u r pu-

cuk. Kedua percobaan t e r s e b u t menggunakan rancangan acak

lengkap.

Kul t u r Anther

P e r 1 akuan dan E k s ~an

l

Pada percobaan i n i t e r d a p a t 5 t a r a f p e r l a k u a n s u k r o -

sa, yaitu: 30, 45, 60, 75, dan 90 g / l . Media yang d i g u -

nakan adalah.media Tsay dan Su ( 1 9 8 5 ) . y a i t u : MS-1/2

(Na-Fe-EDTA penuh) dengan kombinasi NAA 2 mg/1, BA 1 m g / l

ditambah 100 mg/l g l u t a m i n dan 1 mg/l adenin. Eksplan

yang digunakan a d a l a h a n t h e r pepaya Bangkok dam Hawai yang

b e r a s a l d a r i kuncup bunga dengan panjang p e t a l 16-18 mm.

S e t i a p p e r l a k u a n t e r d i r i d a r i 70 a n t h e r pepaya Bangkok dan

160 a n t h e r pepaya Hawai.

Penentuan Fase M i k r o s o o r a

Beberapa kuntum bunga pepaya yang masih kuncup dengan

p a n j a n g p e t a l 8-25 mm direndam dalam l a r u t a n a l k o h o l ase-

t a t selama 24 jam. L a r u t a n a l k o h o l a s e t a t d i b u a t dengan

mencampur 1 b a g i a n asam a s e t a t 9 5 % dan 3 b a g i a n a l k o h o l

96 % berdasarkan volume.

S e t e l a h 24 jam d i f i k s a s i dalam l a r u t a n a1 k o h o l a s e t a t

anther yang terdapat dalam kuncup bunga diambil dan

 18

d i l e t a k k a n pada g e l a s obyek. Anther d i t e k a n dan d i a d u k

dengan tusuk g i g i sehingga polennya t e r s e b a r pada permu-

kaan gelas obyek. Asetocarmin d i t e t e s k a n pada p o l e n yang

t e r s e b a r sebagai media p r e p a r a t dan b e r f u n g s i sebagai pe-

warna sehingga memperjelas bagian-bagian s e l polen. Sete-

l a h d i t u t u p dengan gelas penutup, p r e p a r a t d i a m a t i d i ba-

wah mikroskop yang d i l e n g k a p i dengan karnera f o t o ( i n v e r t e d

microscope) dengan perbesaran 6 0 0 k a l i dan d i f o t o .

H a s i l perneriksaan menunjukkan bahwa p o l e n yang berada

pada f a s e u n i n u k l e a t t e r d a p a t pada kuncup bunga pepaya de-

ngan panjang p e t a l 16-18 mm.

Gambar 1. Kuncup Bunga dan Polen yang Berada

pada Fase M i k r o s p o r a U n i n u k l e a t
 19
Penanaman
Bunga pepaya dengan panjang petal 16-18 mm dicuci
bersih dengan deterjen dan dibilas dengan air kran menga-
lir. Selanjutnya bunga pepaya tersebut direndam dalam la-
rutan alkohol 70 % selama 1 menit dan dibilas dengan air
steril yang telah disiapkan dalam kotak tanam.
Dalam kotak tanam bunga pepaya direndam dalam larutan
Clorox 20 % selama 10 menit lalu dibilas dengan air steril
sebanyak 3 kali masing-masing selama 2 menit. Kemudian
bunga pepaya dimasukkan ke dalam larutan Betadine encer
dalam cawan petri dan dilakukan pemisahan anther dari
tangkai sari dan petal yang membungkusnya. Setelah itu
anther dimasukkan ke dalam botol kultur yang telah berisi
media.

Linqkunqan Tumbuh
Setelah botol-botol kultur berisi anther diberi per-
lakuan awal suhu rendah 12'~ selama 10 hari di dalam
lemari es, botol-botol tersebut dipindahkan ke rak kultur
dengan perlakuan gelap pada suhu 25O6.

Penqamatan
Peubah yang diamati pada kultur anther adalah:
(1) banyaknya anther yang terkontarninasi
(2) banyaknya anther yang mengalami perubahan.
 20

Pengamatan dilakukan setelah kultur berumur 8 bulan sete-

lah tanam (8 B S T ) .

Kul tur Pucuk

Perlakukan dan Eksplan
Perlakuan yang dicobakan terdiri dari 2 faktor, yaitu
NAA dengan taraf 1 dan 3 N M dikombinasikan dengan BA 2, 4,
dan 6 .uM, sehingga semuanya ada 6 macam media perlakuan.
Media dasar yang digunakan adalah HS penuh. Eksplan yang
digunakan adalah pucuk tunas samping pepaya yang berumur
4-5 tahun dan berjenis kelamin hermaprodit. Sekitar 20
eksplan ditanam untuk masing-masing perlakuan

Penanaman
Pucuk tunas samping pepaya sepanjang + 1.5 cm yang

telah dipetik dari pohon induknya dicuci bersih dengan de-

terjen dan dibilas dengan air kran mengalir. Pucuk-pucuk
tersebut kemudian direndam dalam larutan Benlate dan Agri-
mycin dengan konsentrasi masing-masing 4 g/l selama 3 jam.
Selanjutnya pucuk-pucuk tersebut siap memasuki tahap ste-
ri 1 isasi berikutnya dalam kotak tanam.
Dalam kotak tanam pucuk yang akan digunakan sebagai
eksplan direndam dalam larutan Clorox 20 % selama 5 menit
lalu dibilas dengan air steril selama 2 menit, kemudian
dimasukkan ke dalam larutan Clorox 10 % selama 10 menit,
lalu dimasukkan lagi ke dalam larutan Clorox 5 X dan
 21

d i b i a r k a n selama 20 menit kemudian d i b i l a s dengan a i r s t e -

r i l selama 2 m e n i t sebanyak 3 k a l i .

Pucuk-pucuk t e r s e b u t s e l a n j u t n y a dipindahkan ke dalam

cawan p e t r i yang b e r i s i l a r u t a n B e t a d i n encer l a l u d i p o -

t o n g hingga d i p e r o l e h e k s p l a n s i a p tanam yang berukuran

2-3 mm. Eksplan ditanam pada media MS-0 sebagai media se-

l e k s i sebelum masuk ke media perlakuan.

Pemindahan Eksplan

S e t e l a h 1 rninggu berada dalam media s e l e k s i , e k s p l a n

yang h i d u p dan bebas d a r i kontaminasi dipindahkan ke media

perlakuan. Eksplan d i b i a r k a n tumbuh dan berkembang dalam

media t e r s e b u t selama 3 b u l a n .

S e t e l a h 3 b u l a n dalam media perlakuan, eksplan d i s u b -

k u l t u r ke media yang sama dan d i b i a r k a n selama 2 b u l a n .

Kemudian eksplan dipindahkan ke media MS-0 (MS tanpa z a t

pengatur tumbuh). S e t e l a h 1 b u l a n dalam media t e r s e b u t

eksplan d i s u b k u l t u r ke media yang sama s e p e r t i pada i n i -

s i a s i awal dan s u b k u l t u r I l a l u d i b i a r k a n mengalami p e r -

tumbuhan dan perkembangan selama 2 bulan.

Linqkunnan Tumbuh

Botol-botol k u l t u r pucuk pepaya d i l e t a k k a n pada r a k

k u l t u r dengan i n t e n s i t a s cahaya s e k i t a r 1500 l u x , lama

penyinaran 16 jam per h a r i , dan suhu Jingkungan 21°c.

 22
Pengamatan

Pengarnatan terhadap k u l t u r pucuk d i l a k u k a n s e t i a p

rninggu. Peubah yang diarnati r n e l i p u t i :

(1 ) t i n g g i tunas t e r t i n g g i

(2) jumlah daun per k u l t u r

(3) banyaknya eksplan b e r k a l u s

(4) banyaknya eksplan yang rnernbentuk tunas rnajernuk

(5) jumlah tunas p e r k u l t u r

 HASIL DAN PEMBAHASAN

K u l t u r Anther

Usaha mendapatkan k u l t u r aksenik dengan e k s p l a n an-

t h e r t i d a k menemui k e s u l i t a n . Hal i n i disebabkan l e t a k

a n t h e r pada tanaman i t u s e n d i r i yang t e r l i n d u n g d a r i ke-

mungkinan i n f e k s i o l e h mikroorganisme d i s e k i t a r n y a

(kontaminasi e k s t e r n a l l . Demikian juga kemungkinan kon-

t a m i n a s i i n t e r n a l t i d a k mencapai s e l - s e l reproduktif.

Besarnya kontaminasi pada v a r i e t a s Bangkok dan Hawai

masing-masing' adalah 6 . 6 % dan 21.3 % (Tabel 2 ) . Konta-

m i n a s i yang t e r j a d i sebagian besar karena kontaminasi

cendawan pada media yang mudah menyebar d i s e l u r u h permu-

kaan media sehingga semua a n t h e r yang t e r d a p a t dalam bo-

t o 1 k u l t u r tersebut terkontaminasi. T i n g g i n y a kontamina-

s i pada v a r i e t a s Hawai disebabkan karena s e t i a p b o t o l

k u l t u r b e r i s i l e b i h banyak a n t h e r dibandingkan pada va-

r i e t a s Bangkok, sehingga pada s a a t t e r j a d i kontaminasi

Tabel 2 . Banyaknya Anther yang D i k u l t u r k a n ,

Terkontaminasi, dan Aksenik hingga 8
Bulan S e t e l a h Tanam ( 8 BST)

Varietas Anther yang Anther yang t e r - Anther

dikulturkan kontaminasi ( % ) aksenik ( % )

Bangkok 350 23 (6.6) 327 (93.4)

Hawai 800 170 (21.3) 630 (78.71

(%) = persentase terhadap jumlah anther yang

d i kulturkan
 24
pada k u l t u r t e r s e b u t jurnlah anther vang terkontarninasi

j u g a l e b i h banyak.

Hingga s a a t 4 BST t i d a k ada satupun anther yang d i -

k u l t u r k a n rnengalami proses androgenesis langsung rnaupun

m e l a l u i pembentukan k a l u s . K u l t u r t i d a k mengalarni p e r u -

bahan k e c u a l i perubahan warna walaupun a n t h e r d i b i a r k a n

pada media t e r s e b u t hingga 8 bulan.

Warna a n t h e r berangsur-angsur menjadi pudar s e t e l a h

4 rninggu dalam b o t o l k u l t u r . Anther berubah d a r i warna

k u n i n g menjadi k u n i n g rnuda, kuning pucat, dan a k h i r n y a

rnenjadi c o k l a t .

Tabel 3 . Jumlah Anther yang Berwarna Kuning.

Kuning Pucat, dan Kecoklatan pada 8 BST

Varietas Sukrosa Anther Jumlah anther berwarna

( 9/11 akseni k c o k l a t pucat k u n i ng

Bangkok 30
45
60
75
90
Total

Hawai 30
45
60
75
90
Total

% = persentase terhadap jumlah anther aksenik

 25

D a r i pengamatan t e r h a d a p warna a n t h e r s e t e l a h 8 BST

t e r n y a t a hanya 9 a n t h e r d a r i 327 a n t h e r pepaya Bangkok

a k s e n i k a t a u s e k i t a r 2.8 % s a j a yang t e t a p berwarna ku-

ning. Sisanya sebanyak 17.7 % ( 5 8 / 3 2 7 ) berwarna k u n i n g

p u c a t dan 79.5 % (260/3271 mengalami kematian. Pada va-

r i e t a s Hawai d a r i 630 a n t h e r a k s e n i k yang a d a . h i n g g a

8 BST, 586 a t a u 93 % d i a n t a r a n y a t e l a h berwarna c o k l a t ,

30 ( 4 . 8 % ) berwarna k u n i n g p u c a t , dan hanya 14 ( 2 . 2 % )

yang masih berwarna k u n i n g (Tabel 3 ) .

Jumlah a n t h e r yang berwarna c o k l a t s a a t 8 BST pada

v a r i e t a s Bangkok 13.5 % l e b i h rendah d i b a n d i n g k a n v a r i e -

t a s Hawai (Tabel 3 ) . Hal i n i menunjukkan bahwa v a r i e t a s

Bangkok m e m i l i k i kemampuan b e r t a h a n yang l e b i h b a i k pada

l i n g k u n g a n f i s i k dan media p e r l a k u a n yang d i c o b a k a n d i -

bandingkan v a r i e t a s Hawai.

D a r i 327 a n t h e r pepaya Bangkok a k s e n i k hanya 2 yang

mengalami pembengkakan pada media dengan t a r a f s u k r o s a

30 g / l . Pada v a r i e t a s Hawai d i j u m p a i 2 a n t h e r yang meng-

a1 arni pembe&gkakan d a r i s e j u m l ah 630 a n t h e r a k s e n i k kese-

l u r u h a n , y a i t u pada a n t h e r yang d i t a n a m pada media dengan

t a r a f sukrosa 30 dan 75 g / l (Tabel 4 ) .

Semua a n t h e r yang membengkak berwarna c o k l a t dan ma-

t i sebelum sempat berkembang l e b i h l a n j u t . Hal i n i d i d u -

ga k a r e n a komposisi media dan l i n g k u n g a n f i s i k yang d i c o -

bakan belum cocok u n t u k j e n i s pepaya yang d i t e l i t i dan

t i d a k mendukung perkembangan k u l t u r l e b i h l a n j u t .
 Tabel 4. Jumlah dan Persentase Anther yang
Mengalami Pembengkakan pada Beberapa
Taraf Sukrosa

Varietas Sukrosa Anther Anther yang

( d l ) akseni k membengkak ( % )

Bangkok 30
45

Total
Hawai 30
45
60
75
90
Total

(%) = persentase terhadap anther akseni k

Komposisi media dan k o n d i s i k u l t u r adalah f a k t o r -

f a k t o r yang mempengaruhi respon anther yang d i k u l t u r k a n

s e l a i n t i n g k a t perkembangan mikrospora serbuk s a r i (Hu

dan Zeng , 1 9 8 4 ) .

Gambar 2. Anther yang rnernbengkak

 27

S i f a t g e n e t i k Juga rnempengaruhi respon a n t h e r yang

ditanarn t e r h a d a p p e r l a k u a n yang d i b e r i k a n . Baja.1 ( 1 9 8 3 )

rnenyebutkan bahwa g e n o t i p dan k o n d i s i tanarnan surnber

eksplan adalah f a k t o r - f a k t o r p e n t i n g yang mern~engaruhi

k e b e r h a s i l a n i n d u k s i tanarnan h a p l o i d pada k u l t u r a n t h e r .

Pada p e n e l i t i a n Tsay dan Su ( 1 9 8 5 ) a n t h e r d a r i 3 v a r i e t a s

pepaya yang digunakan rnemberikan respon yang berbeda.

V a r i e t a s S u n r i s e menunjukkan p e r s e n t a s e a n t h e r yang rnern-

bentuk k a l u s t e r t i n g g i , 0.97 %. Pada kedua v a r i e t a s l a -

i n n y a , y a i t u Tainung-CY dan F l o r i d a , persentase anther

yang rnembentuk k a l u s hanya 0.77 % dan 0.33 %. Pada pene-

l i t i a n k u l t u r a n t h e r j a g u n g (Genovesi dan C o l l i n s , 1982)

dengan menggunakan 7 g e n o t i p d i j u m p a i p u l a perbedaan

respon a n t a r g e n o t i p dalam ha1 p e r s e n t a s e a n t h e r yang

membentuk ernbrio a t a u k a l u s . Pada p e n e l i t i a n B u l l o c k ,

Baenziger, Schaffer, dan B u t t i n o (1982) dengan a n t h e r

gendum d i j u m p a i 1 v a r i e t a s yang t i d a k menunjukkan p r o s e s

a n d r o g e n e s i s sama s e k a l i d i a n t a r a 11 g e n o t i p yang d i c o -

ba. Kesepuluh v a r i e t a s l a i n n y a rnenunjukkan p e r s e n t a s e

a n t h e r yang mengalarni a n d r o g e n e s i s yang berbeda.

 29
pucuk a k s e n i k yang d i p e r o l e h pada media s e l e k s i

t i d a k s e l u r u h n y a b e r t a h a n h i n g g a a k h i r pengamatan. 12

rninggu s e t e l a h tanam ( M S T ) .

Inisiasi A d

D a r i 125 pucuk yang d i t a n a m pada media p e r l a k u a n

64 % d i a n t a r a n y a mengalami k e m a t i a n dan t e r k o n t a m i n a s i

o l e h b a k t e r i dan cendawan, hanya 36 % yang merupakan

t u n a s a k s e n i k h i n g g a a k h i r i n i s i a s i awal (Tabel 6 ) .

Tabel 6. Banyaknya Pucuk Awal. T e r k o n t a m i n a s i ,

M a t i , dan A k s e n i k pada I n i s i a s i Awal

Pucuk Jumlah Persentase ( % )

Awal 125 100

Terkontaminasi b a k t e r i 28 22.4
T e r k o n t a m i n a s i cendawan 6 4.8
Mat i 46 36.8
Akseni k a k h i r 45 36.0
-

Pada i n i s i a s i awal tampaknya ada kecenderungan Fe-

n ~ n g k a t a nt a r a f BA menyebabkan menurunnya j u m l a h k u l t u r

yang h i d u p dan meningkatkan j u m l a h k u l t u r yang mengalami

kematian. Penurunan j u m l a h k u l t u r yang h i d u p dan p e n i n g -

k a t a n j u m l a h k u l t u r m a t i yang t a j a m tampak pada p e n i n g -

k a t a n k o n s e n t r a s i BA d a r i 2 /uM m e n j a d i 4 .uM (Gambar 3 ) .

 +----c kultur hidup
&----a kultur mati

Garnbar 3 . Pengaruh B A t e r h a d a p Persentase

Eksplan yang H i d u p dan M a t i pada
I n i s i a s i Awal

Pada i n i s i a s i awa.1 j u g a t i d a k d i j u r n p a i adanya e k s -

p l a n yang rnernbentuk t u n a s rnajernuk. Perturnbuhan k u l t u r

rnulai t e r l i h a t pada 1 MST. Secara urnum e k s p l a n rnenunjuk-

kan perturnbuhan yang c e p a t hi-ngga 6 MST. Pada minggu-

rninggu b e r i k u t n y a e k s p l a n turnbuh larnbat (Garnbar 4 ) .

E k s p l a n dengan p e r l a k u a n N l B 1 , N2B1, dan N2B2 rnenunjukkan

kecepatan perturnbuhan s e c a r a urnurn yang l e b i h b a i k d i b a n -

d i n g k a n e k s p l a n dengan p e r l a k u a n NlB2, N183, dan N2B3.

Perturnbuhan t e r b a i k tarnpak pada e k s p l a n yang rnendapat

p e r l a k u a n kornb-iriasi NAA 1 hlM dan BA 2 .uM (NIB1 1.

 Gambar 4 . G r a f i k Pertumbuhan Eksplan pada
I n i s i a s i Awal
-NAA 1 aM (Nl) * BA 2 UM ( B 1 )
---- NAA 3 a M ( N 2 ) A BA 4 a M ( 8 2 )
0 BA 6 a M ( 8 3 )

T i n g g i tunas pada a k h i r i n i s i a s i awal,' y a i t u 1 2

mjnggu s e t e l a h tanam ( 1 2 M S T ) , hanya dipengaruhi o l e h t a -

r a f k o n s e n t r a s i B A , sedangkan k o n s e n t r a s i NAA dan kombi-

n a s i NAA-BA t i d a k n y a t a mempengaruhi t i n g g i t u n a s .

Peningkatan k o n s e n t r a s i BA d a r i 2 a M menjadi 6 .uM menye-

babkan penurunan t i n g g i sangat n y a t a (Tabel Lampiran 3 ,

Tabel 7 ) . Pemberian k o n s e n t r a s i yang t e r l a l u t i n g g i da-

p a t mengharnbat pemanjangan t u n a s dan menurunkan ukuran

t u n a s yang tumbuh (Hu dan Wang, 1983; Flegmann dan

Wainwright, 1981 )
 Tabel 7 . Pengaruh BA terhadap T i n g g i Tunas
pada I n i s i a s i Awal (12 MST)

BA (uM) T i n g g i tunas (mm)

6 6.22 a

K e Cerangari :
angka-angka yang d i i k u t i o l e h h u r u f yang
sama t i d a k berbeda n y a t a pada t a r a f u j i
Duncan 0 . 0 5

Jumlah daun pada semua t a r a f p e r l a k u a n t i d a k menun-

j u k k a n perbedaan yang n y a t a . Jumlah daun pada a k h i r pe-

ngamatan b e r k i s a r a n t a r a 2 . 0 hingga 2.6 p e r k u l t u r (Ta-

Tabel 8 . R a t a - r a t a Jumlah Daun p e r K u l t u r

dan Jumlah Eksplan B e r k a l u s pada
A k h i r I n i s i a s i Awal

Juml ah Juml ah ekspl an

NAA ( a M ) BA CUM) daun/ b e r k a l us/eks-
k u l t u r * ) p1an akseni k
 33
Secara umum daun-daun vang t e r b e n t u k m e m i l i k i t a n g -

k a i daun yang pendek dan gemuk s e r t a h e l a i daun yang t i -

dak sempurna (Gambar 5 ) .

Gambar 5 . Tunas yang Membentuk Daun dengan

Tangkai Daun yang Pendek.dan Gemuk
s e r t a H e l a i Daun yang Tidak Sempurna

Kalus mulai t e r l i h a t pada 3 MST, t e r b e n t u k pada

bagian yang mengalami pelukaan. Kalus pada umumnya b e r -

warna p u t i h sampai krem muda hampir t i d a k berwarna dan

mudah lepas. Jumlah k u l t u r b e r k a l u s meningkat dengan

peningkatan NAA d a r i 1 .uM menjadi 3 .uM (Tabel 81. Menu-

r u t P i e r i k (1987) pemberian a u k s i n dengan k o n s e n t r a s i

yang t i n g g i menyebabkan meningkatnya pembentukan k a l u s .

 34

Subkultur I
Penggandaan tunas t i d a k t e r j a d i hingga a k h i r s u b k u l -

tur I. Tunas hanya mengalami pertumbuhan. Secara umum

t u n a s bertambah dalam t i n g g i dan jumlah daunnya.

T i n g g i tunas pada s u b k u l t u r I hanya dipengaruhi o l e h

t a r a f BA. Peningkatan k o n s e n t r a s i BA d a r i 2 .uM menjadi

4 .uM t e l a h menyebabkan penurunan t i n g g i secara n y a t a pada

a k h i r s u b k u l t u r I (Tabel 9).

Tabel 9 . Pengaruh BA terhadap T i n g g i Tunas

pada A k h i r S u b k u l t u r I ( 8 MST)

BA (uM) T i n g g i t u n a s (mm)

Jumlah daun p e r k u l t u r pada a k h i r s u b k u l t u r I t i d a k

d i p e n g a r u h i secara n y a t a o l e h t a r a f NAA, BA, maupun kom-

b i n a s i keduanya. Jumlah daun p e r k u l t u r b e r k i s a r a n t a r a

2 . 3 h i n g g a 3.0 pada kombinasi NAA-BA yang dicobakan (Ta-

be1 10).

Hingga a k h i r s u b k u l t u r I hanya 1 eksplan yang mem-

bentuk k a l u s , y a i t u tunas yang ditanam pada media dengan

kombi n a s i NAA 3 u M dan BA 2 .uM (Tabel 10). Pada p e r l a -

kuan l a i n n y a t i d a k d i j u m p a i e k s p l a n yang membentuk k a l u s .

 Tabel 10. R a t a - r a t a Jumlah Daun per K u l t u r dan
Banyaknya Eksplan Berkalus pada A k h i r
Subkultur I

NAA BA Jumlah daun/ Jumlah eksplan berka-

(.uM) (at-?) k u l t u r * I l u s / e k s p l a n aksenik

Kalus yang Cerbentuk adalah k a l u s f r i a b e l , berwarna

t r a n s p a r a n krem muda hampir t i d a k berwarna, dan merupakan

respon a k i b a t perlukaan.

Subkultur I1

Penggandaan tunas baru t e r j a d i s e t e l a h e k s p l a n

mengalami s u b k u l t u r I1 a t a u s e k i t a r 8 b u i a n s e j a k pucuk

ditanam pada media i n i s i a s i awal. Hal i n i diduga karena

j e n i s pepaya Bangkok membutuhkan waktu yang r e l a t i f lama

untuk membentuk tunas majemuk.

Rata-rata jumlah tunas p e r k u l t u r t i d a k d i p e n g a r u h i

secara nyata o l e h , t a r a f B A , NAA, maupun kombinasi kedua-

nya. Kombinasi NAA 1 U M dan BA 2 ~ J M( N I B $ ) menghasilkan

r a t a - r a t a jumlah tunas per k u l t u r 2.8 tunas. Perlakuan

l a i n n y a , NlB2, N2B1, dan N2B2 masing-masing menghasilkan

2.3, 2.0, dan 2.0 tunas p e r k u l t u r (Gambar 6 ) .

 Tabel 1 1 . Banyaknya K u l t u r yang Tidak dan Mem-
bentuk Tunas Majernuk s e r t a K i s a r a n
Jumlah Tunas yang D i h a s i l k a n p e r K u l -
t u r pada A k h i r S u b k u l t u r I1 ( 8 MST)
-
NAA BA Kultur Kultur K u l t u r dengan Jurnlah
(uM) (uM) aksenik dengan tunas rnajernuk tunas/
1 t u n a s normal vitrous kultur

( ) = persentase terhadap tunas aksenik s e t i a p

p e r 1akuan

Jumlah dan persentase k u l t u r yang menghasilkan t u n a s

majemuk normal t e r t i n g g i d i jurnpai pada p e r l a k u a n kornbi na-

s i NAA 1 u M dan BA 2 .uM. Salah s a t u k u l t u r pada p e r l a k u -

an i n i menghasi l k a n 5 tunas b a r u .

Sernua k u l t u r pada kornbinasi NAA 1 u M - dan BA 4 .uM

rnenghasilkan tunas majemuk, t e t a p i hanya 6 7 % yang meru-

pakan t u n a s normal, sedangkan sisanya (33 % ) adalah t u n a s

vitrous.
Jumlah tunas p e r k u l t u r t e r t i n g g i yang d i p e r o l e h pa-

da p e n e l i t i a n i n i , y a i t u sebanyak 5 , l e b i h rendah diban-

dingkan h a s i l yang d i c a p a i o l e h L i t z dan Conover (1978)

dengan r a t a - r a t a jumlah tunas p e r k u l t u r sebanyak 7 .

Waktu yang dibutuhkan sarnpai t e r b e n t u k n y a t u n a s rnajernuk,

y a i t u 8 b u l a n s e j a k i n i s i a s i awal, j u g a l e b i h lama b i l a
d i b a n d i n g k a n pernbentukan t u n a s majemuk pada p e n e l i t i a n

L i t z dan Conover ( 1 9 7 8 ) yang hanya membutuhkan 3 b u l a n

s e j a k i n i s i a s i awal. Perbedaan t e r s e b u t d i d u g a t e r u t a m a

disebabkan o l e h perbedaan g e n o t i p v a r i e t a s yang d i g u n a -

kan .
T i n g g i t u n a s t e r t i n g g i dan j u m l a h daun p e r k u l t u r

pada a k h i r s u b k u l t u r I 1 t i d a k d i p e n g a r u h i s e c a r a n y a t a

o l e h t a r a f NAA. BA, rnauDun kornbinasi keduanya. Namun

d a r i t a b e l 12 tampak bahwa kombinasi NAA I .uM dan BA 2 .uM

menunjukkan t i n g g i t u n a s t e r t i n g g i (17.0 mm) yang l e b i h

b a i k d i b a n d i n g k a n p e r l a k u a n l a i n n y a (11.0-15.00 mrn).

Tabel 12. T i n g g i Tunas T e r t i n g g i , R a t a - r a t a Jum-

l a h D a u n / K u l t u r . dan Banyaknya E k s p l a n
B e r k a l u s pada A k h i r S u b k u l t u r I 1

NAA BA Tinggi tunas*) Jumlah Jumlah e k s p l a n

(.uM) (.uM) t e r t i n g g i (rnm) daun/*) berkalus/eks-
kultur p l a n aksenik

P e r l a k u a n kombinasi NAA I u M dan BA 2 a M m e n g h a s i l -

k a n j u m l a h daun p e r k u l t u r sebanyak 3.5, sedangkan p e r l a -

kuan NAA 1 .uM dengan t a r a f BA 4 uMN menghasilkan 4.0 daun

 39

p e r k u l t u r yang merupakan j u m l a h t e r t i n g g i d i a n t a r a p e r -

lakuan l a i n n y a . Pada kombinasi NAA 3 UM dengan t a r a f BA

2 a M dan 4 UM masing-masing d i h a s i l k a n jumlah daun p e r

kultur 3.3 dan 2.6 (Tabel 1 2 ) .

Gambar 7 . Eksplan yang Menghasilkan Tunas

Majemuk ( a ) dan Membentuk Kalus ( b )

Kalus t e r b e n t u k pada sernua p e r l a k u a n yang ada pada

s u b k u l t u r 11. Sebagian besar k a l u s a d a l a h f r i a b e l dan

t i d a k mampu beregenerasi membentuk tunas-tunas baru

(Gambar 7 ) .

Pada semua kombinasi p e r l a k u a n yang dicobakan t i d a k

d i j u m p a i k u l t u r yang membentuk akar. H a l i n i s e s u a i de-

ngan h a s i l p e n e l i t i a n L i t z dan Conover ( 1 9 7 8 ) , yang me-

nunjukkan p e r l u n y a pemindahan eksplan k e media yang hanya

mengandung a u k s i n u n t u k pembentukan a k a r .
 40

Usaha rnengakarkan t u n a s pada media MS yang ditambah

2 . 5 u M NAA s e p e r t i yang d i l a k u k a n L i t z dan Conover ( 1 9 7 8 )

t e l a h d i lakukan terhadap beberapa k u l t u r selama 2 b u l a n

narnun t e t a p t i d a k t e r j a d i pembentukan a k a r . Menurut Hu

dan Wang ( 1 9 8 3 ) kegagalan pembentukan akar biasanya t e r -

jadi pada eksplan yang b e r a s a l d a r i tanaman dewasa.

Pembentukan akar j u g a dapat terhambat karena kandungan

s i t o k i n i n yang t i n g g i dalam eksplan.

 KESIMPULAN DAN SARAN

Kesi rnpu 1an

Anther pepaya Bangkok dan Hawai belum b e r h a s i l d i -

tumbuhkan pada media dasar Tsay dan Su ( 1 9 8 5 ) . Pengaruh

sukrosa t e r h a d a p proses androgenesis langsung belurn dapat

diarnati.

K u l t u r pucuk pepaya Bangkok rnembutuhkan waktu r e l a -

t i f lama, y a i t u sarnpai s u b k u l t u r I 1 ( 8 bulan s e j a k d i t a -

narn pada media i n i s i a s i awal) untuk menghasilkan penggan-

daan t u n a s .

Jumlah t u n a s p e r k u l t u r t e r t i n g g i d i h a s i l k a n pada

kombinasi NAA 1 a M dan BA 2 N M .

Saran

P e n e l i t i a n k u l t u r a n t h e r pepaya p e r l u d i l a k u k a n pada

varietas-varietas l a i n untuk mencari g e n o t i p yang mampu

menghasilkan tanaman h a p l o i d . Pengaruh asam amino t e r h a -

dap proses androgenesis, penggunaan media c a i r , arang

a k t i f , dan i n t e n s i t a s cahaya rendah disarankan untuk d i -

t e l i t i lebih lanjut.

P e n e l i t i a n k u l t u r pucuk pepaya Bangkok b e r i k u t n y a

disarankan menggunakan t a r a f NAA dan BA yang l e b i h rendah

dengan s e l a n g k o n s e n t r a s i yang l e b i h sempit a t a u menggu-

nakan j e n i s a u k s i n dan s i t o k i n i n yang l a i n .

 DAFTAR PUSTAKA

B a j a j , Y . P. S. 1983. I n v i t r o production o f haploid,

p . 228-287. I n P . V . Arnrnirato, D. A . Evans, W . R .
Sharp, Y . ~ a m a d a( e d s . ) Handbook o f p l a n t c e l l
culture. I. Techniques f o r p r o p a g a t i o n and breed-
ing. M a c m i l l a n P u b l i s h i n g Co., New Y o r k .

B u l l o c k , W . P., P. S. B a e n z i g e r , G. W . S c h a e f f e r , and
P. J . B o t t i n o . 1982. A n t h e r c u l t u r e o f wheat
( T r i t i c u m a e s t i v u m L . ) F l ' s and t h e i r r e c i p r o c a l
crossses. Theor. A p p l . Genet. 62:155-159.

Chen, M. H., P. J . Wang, and Maeda. 1987. Somatic

embryogenesis and p l a n t r e g e n e r a t i o n i n C a r i c a
papaya L. t i s s u e c u l t u r e d e r i v e d from r o o t ex-
plants. P l a n t c e l 1. R e p o r t 6:348-351.

C o l l i n s , G. B. 1977. P r o d u c t i o n and u t i l i z a t i o n o f
anther-derived haploids i n crop plants. Crop S c i
17:583-586.

Flegmann. A. W . and H. W a i n w r i g h t . 1981. Shoot d o u b l i n g

time: a q u a n t i t a t i v e parameter f o r c h a r a c t e r i t i z i n g
shoot c u l t u r e i n v i t r o . P l a n t C e l l T i s s u e Organ
C u l t u r e 1 :85-92.

Genovesi, A . D. and G. B. C o l l i n s . 1982. I n v i t r o pro-

d u c t i o n o f h a p l o i d p l a n t s o f c o r n v i a a n t h e r CUT-
ture. Crop S c i . 22:1137-1144.

George, E. F. and P. D. S h e r r i n g t o n . 1984. P l a n t pro-

p a g a t i o n by t i s s u e c u l t u r e . Exegetics Limited,
London. 709 p.

Gunawan, L . W. 1987. Teknik k u l t u r j a r i n g a n . Laborato-

rium K u l t u r Jaringan, Pusat Antar U n i v e r s i t a s ,
B i o t e k n o l o g i , I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor, Bogor.
251 p .

Hartmann, H. T., W. J. F l o c k e r , and A. M. K o f r a n e k . 1981.

P l a n t Science. Growth, development, and u t i l i z a t i o n
o f c u l t i v a t e d plants. P r e n t i c e - H a l l , I n c . , Engle-
wood C l i f f s , New J e r s e y . 676 p .

Hu, C. Y. and P. J. Wang. 1983. Meristem, shoot t i p ,

and bud c u l t u r e , p . 177-227. P. V . Ammirato,
D. A. Evans, W . R . Sharp, and Y. Yamada ( e d s . )
Handbook o f p l a n t c e l l c u l t u r e . I. M a c m i l l a n
P u b l i s h i n g Co., New York.
Hu, H . and J. 2 . Zeng. 1984. Development o f new v a r i e -
t i e s v i a a n t h e r c u l t u r e , p . 65-90. P. V . .
Ammirato, D. A . Evans, W . R . Sharp, and Y . Yamada
(eds.) Handbook o f p l a n t c e l l c u l t u r e . 11. Mac-
m i l l a n P u b l i s h i n g Co., New Y o r k .

Kevers, C . , M. Coumans, M. F. Coumans-Gilles, and Th.

Gaspar. 1984. P h y s i o l o g i c a l and b i o c h e m i c a l e v e n t s
leading t o v i t r i f i c a t i o n o f plants cultured in v i t r o .
P h y s i o l . P l a n t . 61:69-74.

L i t z , R. E. 1984. Papaya, p . 349-368. I n P. V . Ammirato,

D. A . Evans, W . R . Sharp, Y . Yamada e d s . ) Handbook
o f plant c e l l culture. 11. Crop s p e c i e s . Mac-
m i l l a n P u b l i s h i n g Co., New Y o r k .

. 1986. Papaya ( C a r i c a papaya L . ) , p . 220-

232. I n Y . P. S. B a j a j ( e d . ) Biotechnology i n
a g r i c u l t u r e and f o r e s t r y . I. Trees. Springer-
Verlag, B e r l i n .

and R . A . Conover. 1978a. I n v i t r o propa-

g a t i o n o f papaya. H o r t S c i . 13(3):241-242.

.
1981. E f f e c t o f sex t y p e ,
season, and o t h e r f a c t o r s o n i n v i t r o e s t a b l i s h m e n t
and c u l t u r e o f C a r i c a papaya L . e x p l a n t s . J . Amer.
Soc. H o r t . S c i . 106(6):792-794.

Mauro, M. C l . , N e f , and J. F a l l o t . 1986. Stimulation o f

s o m a t i c embryogenesis and p l a n t r e g e n e r a t i o n f r o m
a n t h e r c u l t u r e o f V i t i s v i n i f e r a cv.. Carbenet-
Sauvignon. P l a n t C e l l R e p o r t 5:377-380.

Mehdi, A. A. and L. Hogan. 1976. Tissue c u l t u r e o f

C a r i c a papaya L. H o r t S c i . 11(3):311 ( a b s t r a c t ) .

Murashige, T . 1974. P l a n t propagation through t i s s u e

culture. Ann. Rev. P l a n t . P h y s i o l 25:135-166.

N i t s c h , C. 1981. Production o f isogenic l i n e s : Basic

t e c h n i c a l a s p e c t s o f a n d r o g e n e s i s , p . 241-252. In
T . A. Thorpe ( e d . ) P l a n t t i s s u e c u l t u r e methods and
application i n agriculture. Academic P r e s s , I n c . ,
New York.

and M. Godard. 1979. The r o l e o f hormones i n

p r o m o t i n g and d e v e l o p i n g t o s e l e c t new v a r i e t i e s i n
s t e r i l e c u l t u r e , p. 49-62. T. K . S c o t t ( e d . )
P l a n t r e g u l a t i o n and w o r l d a g r i c u l t u r e . Plenum
P r e s s , New York.
P i e r i k , R . L. M . 1987. I n v i t r o c u l t u r e o f higher
plants. M a r t i n u s N i j h o f f P u b l i s h e r , Dordrecht.
344 p .

Samson, J . A . 1980. Tropical f r u i t s . Longman, Inc.,

New York. 250 p .

Sink. K . C . and V . Padmanabhan. 1977. Anther and

p o l l e n c u l t u r e t o produce h a p l o i d s : P r o g r e s s and
a p p l i c a t i o n f o r t h e p l a n t breeder. HortSci. 12
( 2 ) : 143-148.

S o e d i r d j o a t m o d j o , M. D. S . 1985. Bertanam pepaya.

Badan P e n e r b i t Karya B a n i ? J a k a r t a . 70 p.

Tsay. H . S . and C. Y . Su. 1985. Anther c u l t u r e o f

papaya ( C a r i c a papaya L . 1. P l a n t C e l l Report
4: 28-30.
LAMPIRAN
 Tabel Lampiran 1 .
dan Skoog 11962) *r
Komposisi Media M r a s h i g e

Konsentrasi Pemakai an
Stok Bahan larutan m l stok/ mg/ 1
(!j/1) 1 media

Myo-inositol 10.000
Thiamin 0.010
Pyridoxin 0.050
Niacin 0.050
Glycin 0.200

Gula 30 000

*) Murashige, T . and F. Skoog. 1962. A r e v i s e d medium

f o r r a p i d g r o w t h and b i o a s s a y s w i t h t o b a c c o
tissue. P h y s i o l . P l a n t . 15:473-497.
 Tabel Larnpiran 2. K o m p o s i s i M e d i a T s a y dan S u
(1985)*)

Konsentrasi P e r n a k a i an
Stok Bahan larutan rnl s t o k / mg/l
(dl1 1 media

A NH4N03

B KN03

C KH2P04
H3B03
KI
Na2Mo04
CoCl2.6H20

0 CaCl2.2H20

E MgS04.7H20
MnS04. H 2 0
ZnSO4.7H20
CuS04.5H20

F Na2EDTA.2H20
FeS04.7H20

Myo-inositol
T h i arni n
Pyridoxin
Niacin
Gly c in

NAA
BA

*) Tsay, H. S . and C. Y . S u . 1985. Anther culture of

p a p a y a ( C a r i c a papaya L . ) . Plant Cell Report
4:28-30
 Tabel Lanipiran 3 . S i d i k Ragam T i n g g i Tunas pada
A k h i r I n i s i a s i Awal ( 1 2 MST)

Sumber db JK KT F-hitung P-hitung

lteraaaman

NAA 1 2.550 2.550 0.189 0.666

NAA x BA 2 50.842 25.421 1.887 0.165

Sisa 39 525.262 13.468

Tabel Lampiran 4 . S i d i k Ragam T i n g g i Tunas ~ a d a

A k h i r S u b k u l t u r I ( 8 MST)

Sumber db JK KT F-hitung P-hi t u n g

keragaman

NAA 1 0.272 0.272 0.025 0.877

BA 1 70.939 70.939 6.599 0.030

NAA x BA 1 1.250 1.250 0.116 0.741

S isa 9 96.750 10.750