KULTUR SUSPENSI SEL

RESUME
Untuk memenuhi tugas mata kuliah Kultur Jaringan Tumbuhan
yang dibimbing oleh Dr. Betty Lukiati, M.S. dan Rahmi Masita, S.Si, M.Sc.

Oleh :
Balqis Hanun Hanifah
170342615566
Offering Pangan

UNIVERSITAS NEGERI MALANG

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
JURUSAN BIOLOGI
April 2020
 Kultur jaringan merupakan salah satu metode perbanyakan tanaman secara vegetatif.
Menurut George dan Sherrington (1984) dan Yusnita (2003), kultur jaringan tanaman
merupakan teknik menumbuhkan bagian tanaman baik berupa sel, jaringan atau organ dalam
kondisi aseptik secara in vitro. Kultur suspensi sel merupakan salah satu tipe kultur jaringan,
kultur suspensi sel adalah kultur yang menggunakan media cair dengan pengocokan yang
terus menerus menggunakan shaker dan menggunakan sel atau agregat sel sebagai bahan
eksplannya, biasanya eksplan yang digunakan berupa kalus atau jaringan meristem.
Tujuan kultur jaringan adalah mengendalikan kondisi lingkungan di mana eksplan
yang dikulturkan tumbuh guna memanipulasi pertumbuhan eksplan tersebut ke arah yang
dikehendaki respon tanaman terhadap perubahan-perubahan kondisi pertumbuhan ditentukan
oleh perubahan-perubahan fisiologis di dalam jaringan. Selanjutnya kondisi fisiologis di
dalam jaringan dapat mempengaruhi responnya terhadap perubahan-perubahan kondisi
eksternal, yakni pola pertumbuhan yang dihasilkan ditentukan oleh kondisi fisiologis bersih
sebagai hasil pengaruh dari kondisi internal maupun eksternal (Taji et al, 1997).
Penggunaan kultur jaringan untuk pembiakan klonal didasarkan pada anggapan
bahwa jaringan secara genetik tetap stabil jika dipisahkan dari tumbuhan induk dan
ditempatkan dalam kultur. Pendapat ini sebahagian besar berlaku jika tumbuhan dibiakkan
dengan kuncup ketiak atau tunas liar yang secara langsung dipisahkan dari tanaman.
Walaupun demikian, apabila tunas terbentuk dari jaringan kalus, sering terjadi penyimpangan
(Chaleff, 1984).
Menurut Neumann et al (2009), sebagian besar kultur suspensi sel berasal dari kalus.
Metode untuk menentukan penangguhan sel  dicontohkan dengan eksplan pucuk Datura
innoxia untuk menghasilkan kalus untuk mempelajari sintesis metabolit sekunder. Eksplan
dari ruas paling atas (termuda) dipotong menggunakan pisau bedah yang tajam. Untuk
sterilisasi, ujung yang dipotong dicelupkan ke dalam parafin cair, selama 5-6 menit dilarutan
hipoklorida.
 Gambar 1. Karakterisasi histomorfologis kultur suspensi Datura innoxia (Kibler dan
Neumann 1980). a Inokulum (250 μm filtrat, ca. 25 ×), b mikrokluster (ca. 125 ×), c
histologis struktur klaster sekunder yang dikultur dengan kinetin (ca. 25 ×), d karakterisasi
histologis bahan sel dikultur tanpa kinetin, suspensi sel e Datura innoxia tanpa kinetin, dan f
dengan kinetin dalam medium (1 ×).

Segmen ruas sepanjang 1-2 cm dibilas 4-5 kali dengan air suling steril. Kemudian,
jaringan dipotong menjadi sekitar 1 mm, selanjutnya potong menjadi dua. Medium nutrisi
yang diberikan adalah media NL. Dalam 3 minggu kultur, kalus berkembang dari sel perifer
yang kemudian dipotong menggunakan pisau bedah. Sel ini dipindahkan ke media MS agar
ditambah dengan kinetin, dengan suhu 27 ° C pada ritme terang / gelap 12 jam. Setelah dua
subkultur di sebuah Interval 3-4 minggu, subkultur berikutnya dimulai setiap 2 minggu. Juga
untuk subkultur, hanya bahan sel tepi dari potongan kalus yang baru dikembangkan yang
digunakan.
 Gambar 2. Pertumbuhan suspensi
sel haploid (atas) dan diploid
(bawah) Datura innoxia (Kibler dan
Neumann 1980)

Dinamika Populasi Sel biasanya terdiri dari tiga fraksi, yaitu sel tunggal bebas dari
berbagai bentuk, agregat sel terdiri dari hingga sepuluh sel atau lebih, dan kelompok sel
dengan morfologi seperti benang. Fraksi ini dapat diisolasi dengan teknik pengayakan yang
cocok. Dalam suspensi sel beberapa spesies seperti Daucus dalam IAA (media NL), setelah
beberapa minggu kultur pembentukan tahap awal perkembangan embrio dapat diamati, dan
menjadi tanaman utuh (embriogenesis somatik).
Untuk menjaga strain sel dalam kondisi sehat untuk waktu lama, subkultur harus
sering dibuat, biasanya pada interval 1 - atau 2 minggu, dan dengan pengenceran 1: 5 setelah
1 minggu, dan 1:10 setelah 2 minggu dengan media nutrisi segar. Opti salah satu
pengenceran, dan frekuensi subkultur harus ditentukan untuk setiap industri. ketegangan
vidual. Cryopreservasi juga sering digunakan untuk mempertahankan suspensi sel (Neumann
et al, 2009).
 Menurut Bhojwani dan Razdan (1996) kadar garam anorganik yang rendah dalam
media mencukupi untuk pembentukan akar pada berbagai spesies tanaman sehingga kadar
garam anorganik yang berlebih menyebabkan hambatan pemanjangan akar.

DAFTAR PUSTAKA
Bhojwani, S. S and M. K. Razdan, 1996. Plant Tissue Culture : Theory and Practice, a
Revised Edition. Elsevier Science. Amsterdam. The Netherlands.
Kibler R, Neumann KH. 1980. On cytogenetic stability of cultured tissues and cell
suspensions of haploid and diploid origin. In: Sala F, Parisi B, Cella R, Ciferri O (eds)
Plant cell cultures: results and perspectives. Elsevier/North Holland, Amsterdam, pp
59–65.
George, E.F. dan P. D. Sherrington. 1984. Plant propagation by tissue culture. Handbook and
Directory of Comercial Laboratories. Exegetics. Ltd. Edington.
Neumann, K.H., Kumar, A., Imani, J. 2009. Plant Cell and Tissue Culture - A Tool in
Biotechnology. Basic and Application. Berlin: Springer -Verlag.
Taji, A. M., W. A. Dodd dan R. R. Williams. 1997. Plant Tissue Culture Practice. University
of New England, Armidale.
Yusnita. 2003. Kultur jaringan: Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisien. Agro Media
Pustaka, Jakarta.