2. Menjelaskan titik kritis dalam analisa vitamin! 3. Menjelaskan prinsip analisa karbohidrat! 4. Menjelaskan titik kritis analisa karbohidrat! 5. Menjelaskan prosedur penggunaan spektroforometer! Jawaban 1. Prinsip analisa kadar vitamin c dengan metode titrasi 2,6-diklorofenol indofenol dimana terjadi reaksi reduksi 2,6-diklorofenol indofenol dengan adanya vitamin c dalam larutan asam . Asam askorbat mereduksi 2,6-diklorofenol indofenol dalam larutan tidak berwarna . Titik akhir titrasi ditandai dengan perubahan warna merah muda dalam kondisi asam.
2. Titik kritis analisa vitamin C yaitu yaitu 23,16 mg/100 g. nilai kritis vitamin C adalah 10,9 mg/100g.
3. Metode Analisis Karbohidrat ada 2 jenis, yaitu:
A. Analisis Kualitatif B. Analisis Kuantitatif
A. Metode analisis kualitatif karbohidrat :
1) Test Molish Prinsip: Karbohidrat akan didehidrasi oleh asam sulfat pekat membentuk senyawa furfural atau turunannya. Furfural dan turunannya akan berkondensasi dengan alfanaftol (molish) menghasilkan senyawa kompleks berwarna merah ungu pada bidang batas antara larutan karbohidrat dan H2SO4 pekat. 2) Test Moore Prinsip: Uji Moore menggunakan NaOH (alkali) yang berfungsi sebagai ion OH- yang akan berikatan dengan rantai aldehid yang membentuk aldol aldehid (aldehida dengan cabang gugus alkanol) yang berwarna kekuningan. Pemanasan bertujuan untuk membuka ikatan karbon dengan hydrogen dan menggantikannya dengan gugus –OH. 3) Test Benedict Prinsip: Larutan CuSO4 dalam suasana alkali akan direduksi oleh gula yang mempunyai gugus aldehid sehingga CuO atau kupri tereduksi menjadi Cu2O yang berwarna merah bata (endapan). 4) Test Selliwanof Prinsip: Perubahan fruktosa oleh HCl panas menjadi levulinat dan hidroksimetil furfural, selanjutnya kondensasi hidroksimetil dengan resorsinol akaan menghasilkan senyawa sukrosa yang mudah dihidrolisa menjadi glukosa akan member reaksi positif berwarna oranye. 5) Test Barfoed Prinsip: Monosakarida akan mereduksi Cu2+ dalam suasana asam lemah (CH3COOH), menghasilkan endapan yang berwarna merah bata dari Cu2O. 6) Metode Fehling Prinsip : Metode fehling yaitu menggunakan gugus aldehid pada gula untuk mereduksi senyawa Cu2SO4 menjadi Cu2O (enpadan berwarna merah bata) setelah dipanaskan pada suasana basa (Benedict dan Fehling) atau asam (Barfoed) dengan ditambahkan agen pengikat (chelating agent) seperti Na-sitrat dan K-Na-tatrat. 7) Metode iodine Prinsip: Uji iodium digunakan untuk melihat pembentukan polisakarida. Penambahan iodium pada suatu polisakarida akan menyebabkan terbentuknya kompleks absorbsi berwarna spesifik. Amilum atau pati akan menghasilkan warna biru. Hasil yang postif hanya pada penambahan air dan HCl dengan iodine.
4. Titik kritis analisa karbohidrat
- Saat menuang H2SO4 untuk melarutkan sampel, harus hati-hati dan melalui dinding Erlenmeyer - Penetralan larutan menggunakan dengan NaOH harus diperhitungkan. Pertama, gunakan gelas ukur lalu setelah itu NaOH di pipet. Larutan harus benar-benar netral karena syarat metode Luff-Schoorl yaitu larutan netral - Perhatikan pada saat menyaring larutan sampel - Penambahan kanji dilakukan setelah menjelang titik akhir tercapai - Penambahan KI dilakukan setelah larutan diasamkan - Pengerjaan sampel dilakukan dengan menggunakan erlenmeyer basah karena nantinya akan ada penambahan KI yang melepaskan I2 bebas
5. Prosedur penggunaan Spektrofotometri yaitu :
1.) Hidupkan alat dengan menekan tombol on dan biarkan hinga 15 menit 2.) Setting panjang gelombang (nm) yang diinginkan dengan menekan tombol wavelength 3.) Setting alat dengan menggunakan hasil absorban (A) atau transmitan (%T) 4.) Kosongkan tempat kuvet 5.) Isi 1 kuvet dengan larutan blako dan tempatkan pada posisi B 6.) Isi kuvet yang lainnya dengan larutan standar dan tempatkan pada posisi 1,2,3 dst 7.) Tekan tombol B pada alat dan Run test untuk larutan blanko 8.) Tekan tomnol 1 pada alat dan Run test untuk larutan standar 9.) Catat hasil absorban atau transmitan yang dihasilkan 10.) Ulangi percobaan no.8 hingga selesai 11.) Alat dirapikan dan dibersihkan 12.) Tekan tombol off setelah selesai digunakan