4. Pemijaran (dengan api langsung): membakar alat pada api secara langsung, contoh
alat : jarum inokulum, pinset, batang L dan lain-lain.
5. Autoclave merupakan alat serupa tangki minyak yang dapat diisi dengan uap. Media
yang akan disterilkan ditempatkan dalam autoclave selama 15–20 menit, hal ini
tergantung kepada sedikit banyaknya barang yang akan disterilkan. Media yang akan
disterilkan itu lebih baik ditempatkan dalam beberapa botol yang kecil daripada
dikumpul dalam satu botol yang besar. Setelah pintu autoclave ditutup rapat, barulah
kran pada pipa uap dibuka dan temperatur akan terus- menerus naik. Biasanya
autoclave sudah diatur sedemikian rupa, sehingga pada suhu 121 0C akan ada tekanan
sebesar 15 lbs (pounds) per inch persegi yang berarti 1 atmosfer per 1 cm2 .
Perhitungan waktu 15 atau 20 menit itu dimulai sejak termometer pada autoclave
menunjuk 121 0C. Setelah cukup waktu maka kran uap ditutup dan dengan demikian
akan terlihat bahwa suhu mulai turun sedikit demi sedikit, demikian pula manometer.
Autoclave tidak boleh dibuka secara tiba-tiba. Jika dilakukan demikian, maka isi botol
yang ada di dalam autoclave akan meluap.