PERCOBAAN VII

PENENTUAN KADAR PROTEIN

A. Tujuan

Untuk mengetahui kadar protein dengan spektrofotometer

B. Pendahuluan

Penentuan kadar protein dapat dilakukan dengan berbagai metode bergantung

pada jenis sampel dan ketersediaan alat serta bahan (pereaksi). Metode yang umum

digunakan adalah metode Kjeldahl, Lowry dan Biuret. Pada percobaan ini akan

digunakan metode Biuret.

Penentuan protein secara Biuret didasarkan atas pengukuran absorban dari

senyawa kompleks antara protein dengan pereaksi Biuret yang berwarna ungu. Hal ini

terjadi apabila protein bereaksi dengan tembaga (salah satu komponen pereaksi Biuret)

dalam suasana basa. Absorbansi diukur pada panjang gelombang 540 nm dengan

spektrofotometer. Dengan menggunakan larutan standar, konsentrasi protein dapat

diketahui.

C. Peralatan dan perlengkapan yang diperlukan :

- Tabung reaksi

- Pipet skala 10 ml

- Spektronik-20

D. Bahan

- Reagen Biuret

- Larutan standar protein 10 mg/ml

- Larutan sampel protein

E. Cara Kerja

1. Pipet 1,0 ml larutan protein yang mengandung 1,0 sampai dengan 10,0 mg/ml.

Encerkan jika terlalu pekat

2. Tambahkan 4,0 ml reagen Biuret

3. Kocok dan diamkan selama 30 menit pada suhu kamar

4. Ukur absorban pada panjang gelombang 540 nm

5. Pengukuran blanko, sampel dan standar dilakukan serentak

Gunakan standar 2,0; 4,0; 6,0 mg/ml

F. Pengamatan/perhitungan

Pengukuran Blanko Sampel Standar

2,0 4,0 6,0

Absorbansi ……………. ……………..

Dari standar diperoleh regresi : A = …….. + C

Konsentrasi protein = ………………………….. mg\100 ml

= ………………………..... %

G. Pembahasan

………………………………………………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………………….
H. Kesimpulan

………………………………………………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………………………

Makassar,

Asisten Praktikan

…………………………….. ………………………………