Nama asisten : Dwi Nurhayati

Tanggal Praktikum : 13 November 2019

Tanggal Pengumpulan : 3 Desember 2019

PENGUJIAN AMILOLITIK, LIPOLITIK DAN PROTEOLITIK

FAKULTAS TEKNOLOGI INDUSTRI PERTANIAN
UNIVERSITAS PADJADJARAN

Hana Nur Layalia Hasya (240210180104)

Departemen Teknologi Industri Pangan Universitas Padjadjaran, Jatinangor

Jalan Raya Bandung-Sumedang Km. 21, Jatinangor, Sumedang 40600 Telp. (022)
7798844, 779570 Fax. (022) 7795780 Email : hana18008@mail.unpad.ac.id

ABSTRAK

Mikroorganisme sangat banyak jenisnya dan dikelompokkan berdasarkan

banyak hal, salah satunya dikelompokkan berdasakan kemampuannya memecah sebuah
nutrisi dan menghasilkan sebuah enzim, yang mana dikelompokkan menjadi tiga jenis
bakteri yaitu bakteri amilolitik, bakteri lipolitik dan bakteri proteolitik. Bakteri
amilolitik merupakan mikroorganisme yang mampu memecah pati menjadi menjadi
senyawa yang lebih sederhana, terutama dalam bentuk glukosa. Bakteri lipolitik adalah
bakteri yang memproduksi lipase, yaitu enzim yang mengkatalis hidrolisis lemak
menjadi asam-asam lemak dan dan gliserol dan yang terakhir adalah bakteri proteolitik,
yang merupakan bakteri produsen enzim protease ekstraseluler, yaitu enzim pemecah
protein yang diproduksi di dalam sel kemudian dilepaskan keluar dari sel. Dalam
praktikum ini dilakukan pengujian bakteri amilolitik, lipolitik, dan proteolitik.
Kesimpulan dari praktikum ini adalah mahasiswa dapat melakukan pengujian bakteri
amilolitik, lipolitik, dan proteolitik. Dalam pengujian amilolitik terdapat bakteri
Bacillus substilis pada tepung terigu segitiga dan tepung jagung, Clostridium butyricum
pada tepung beras putih, Bacillus aereus pada tepung tapioka, dan bakteri non amilolitik
(kontaminan) pada tepung ketan hitam dan tepung terigu kunci. Pada pengujian bakteri
lipolitik koloni yang terbentuk tidak dapat diamati karena koloni tumbuh di tengah
media. Dalam pengujian proteolitik terdapat bakteri Lactobacillus sp pada fresh milk,
Clostridium sp dan Streptococcus sp pada sarden, Pseudomonas sp pada telur, Bacillus
sp pada tempe, Pseudomonas flourescens pada yogurt, dan Pseudomonas aeuruginosa
pada susu skim.

Kata Kunci : Amilolitik, Lipolitik, Proteolitik.

PENDAHULUAN karakteristik, bentuk, sifat, tempat

Kehidupan kita sebagai makhluk
hidup tentunya memiliki keterkaitan
yang erat dengan makhluk hidup
lainnya, salah satunya makhluk yang
sangat kecil yang hanya dapat dilihat
melalui bantuan mikroskop bernama
mikroorganisme. Mikroorganisme
banyak diklasifikasikan menurut
tinggal hingga diklasifikasikan
berdasarkan kemampuannya untuk
memcah sebuah nutrisi. Menurut
kemampuannya untuk memecah sebuah
nutrisi, mikroorganisme dibagi menjadi
tiga golongan, yaitu amilolitik, lipolitik
dan proteolitik berdasarkan nutrisi yang
dipecahnya masing-masing.
 Bakteri amilolitik adalah bakteri
yang mampu memecah pati menjadi
senyawa yang lebih sederhana dengan
bantuan enzim yang dihasilkan.,
terutama dalam bentuk glukosa
(Sukarminah, 2010), dapat disimpulkan
bahwa bakteri amilolitik adalah bakteri
penghasil enzim amilase yang dapat
memecah pati menjadi senyawa yang
lebih sederhana. Beberapa bakteri
amilolitik telah diisolasi dari berbagai
tempat seperti sumber air panas dan
pada usus ikan (Sugita et al, 2009).
Bakteri amilolitik didominasi oleh
bakteri Gram positif terutama Bacillus
sp. (Bansode, 2010). Bakteri lain yang
mempunyai potensi menghasilkan
enzim amilase adalah Klebsiella sp.
Identifikasi dilakukan menggunakan
media padat dengan kandungan pati.
Enzim amilase adalah enzim
yang mampu menghidrolisis pati
menjadi senyawa lebih sederhana
seperti maltosa dan glukosa. Enzim ini
banyak digunakan untuk keperluan
industri. Enzim ini dapat memecah atau
menghidrolisis pati, glikogen, dan
turunan polisakarida dengan cara
memecah ikatan glikosidiknya. Enzim
amilase dibedakan menjadi 3 golongan
yaitu α- amilase yang di sebut juga
endoamilase, β-amilase yang di sebut
juga eksoamilase, dan glukoaminase
(Rehm & Reed, 1987).
Selain menghasilkan enzim
amilase yang memecah pati
menghasilkan monosakarida (glukosa),
bakteri amilolitik juga berkemungkinan
menghasilkan enzim ekstraseluler yaitu
enzim Siklodekstrin Glukanotransferase
(CGT-ase) yang memecah pati menjadi
oligosakarida. Siklodekstrin merupakan
oligosakarida berbentuk siklik yang
pada umumnya diproduksi dari pati oleh
enzim CGT-ase (Sukarminah, 2010).
Reaksi hidrolisis pati menyebabkan
pencairan pati sehingga dapat
mengakibatkan perubahan pada cita rasa
makanan
Bakteri Lipolitik memiliki fungsi
yang sebenarnya tidak jauh berbeda
dengan bakteri amilolitik. Bakteri
lipolitik adalah bakteri yang dapat
memecah lipid. Menurut Jaeger et al.
(1994), bakteri ini menghasilkan enzim
lipase, yang merupakan produk
metabolisme primer dari bakteri
tersebut, yang digunakan untuk
memecah lipid. Lipase dari bakteri
kebanyakan diproduksi secara
ekstraselular. Lipase dari bakteri
memainkan peranan yang penting dalam
kehidupan manusia seperti dalam
pembuatan yoghurt dan keju. Lipase
juga digunakan sebagai katalis yang
murah dan serbaguna untuk
mendegradasi lipid dalam aplikasi
modern seperti penggunaan enzim
lipase untuk pembuatan deterjen dan
biokatalis, serta juga dapat digunakan
sebagai energi alternatif untuk
mengubah minyak tumbuhan menjadi
bahan bakar. Dalam hampir semua
kasus, bakteri berfungsi dengan baik
pada emulsi minyak dalam air, dimana
kandungan air tinggi dan area
interfacial untuk degradasi tersedia luas
dan substrat trigliserida dapat digunakan
(Jaeger et al.,1994).
Lipase (triacyl glycerol
acylhidrolase EC 3.1.1.3) merupakan
enzim kelas hidrolase yang
mengkatalisis reaksi hidrolisis
trigliserida menjadi gliserol dan asam
lemak bebas pada permukaan air
dengan minyak. Bakteri penghasil
lipase memiliki peranan penting dalam
usaha komersial. Bakteri penghasil
lipase secara ekstraseluler sangat
penting dalam kepentingan komersial
karena untuk produksi massal tergolong
lebih mudah.
Kelimpahan bakteri lipolitik
sangat dipengaruhi oleh faktor gizi,
fisika dan kimia, seperti suhu, pH,
sumber nitrogen dan karbon, kehadiran
lipid, garam anorganik, agitasi dan
konsentrasi oksigen terlarut. Lipase
dalam industri enzim umumnya
diproduksi melalui teknologi DNA
rekombinan. Bakteri lipolitik ditemukan
dalam bermacam-macam habitat seperti
limbah industri, pabrik pengolahan
minyak sayur, perusahaan susu, tanah
terkontaminasi dengan minyak,
makanan yang busuk, dan kompos.
Bakteri proteolitik adalah
bakteri yang mampu memproduksi
enzim protease ekstraseluler, yaitu
enzim pemecah protein yang diproduksi
di dalam sel kemudian dilepaskan
keluar dari sel (Abraham et al., 1993).
Pada umumnya bakteri proteolitik
adalah bakteri dari genus Bacillus,
Pseudomonas, Proteus (Schlegel,1994),
Steptobacillus, Staphylococcus. 10
Tingkat aktivitas proteolitik dapat
dilihat dari keaktifan enzim dalam
menghidrolisis protein. Aktivitas bakteri
proteolitik dapat diketahui secara
kuantitatif dengan menggunakan
spektrofotometer pada panjang
gelombang ultra violet 280 nm. Panjang
gelombang tersebut dapat ditangkap dan
dipantulkan kembali oleh asam amino
suatu protein berdasarkan gugus
aromatik terutama asam amino tirosin,
triptofan dan fenilalanin. Kelebihan
metode ini yaitu sederhana, mudah serta
tidak memerlukan penambahan reagen
tertentu (Walker, 2002).
Protease disebut juga peptidase
atau proteinase, merupakan enzim
golongan hidrolase yang akan memecah
protein menjadi molekul yang lebih
sederhana, seperti menjadi oligopeptida
pendek atau asam amino, dengan reaksi
hidrolisis pada ikatan peptide. Enzim ini
diperlukan oleh semua mahkluk hidup
karena bersifat esensial dalam
metabolism protein. Protein ini
memiliki banyak struktur sekunder beta-
sheet dan alpha-helix yang sangat
pendek (Poliana, 2007).
Pada praktikum ini, diuji
beberapa sampel makanan seperti
bubur, fresh mil, margarin, mentega
putih, oat, sarden, soun, susu skim,
telur, tempe tempe, tepung beras putih,
tepung jagung, tepung ketan hitam,
tepung tapioka, tepung terigu kunci,
tepung terigu segitiga, tofu, dan yogurt
dan diuji kandungan bakteri jenis
apakah yang terkandung dalam produk
tersebut. Adapun tujuan dari praktikum
ini adalah agar dapat mengetahui
perbedaan dan karakteristik dari tiap-
tiap bakteri yang dikandung produk-
produk sampel tersebut juga
menggolongkannya kedalam jenis
bakteri amilolitik, lipolitik ataupun
proteolitik.
METODOLOGI
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada
praktikum kali ini adalah beaker glass,
cawan petri, pembakar spirtus, kapas,
mikroskop, neraca analitik, ose, pipet
ukur, rak tabung, spatula dan tabung
reaksi.
Bahan-bahan yang digunakan
pada praktikum kali ini adalah akuades,
alkohol 70%, bubur, buffer fosfat, fresh
milk, indikator Neeutral Red (NR),
kornet, larutan yodium 1%, lemak
(gliserol), margarin, media MRS, media
SMA, mentega putih, nutrient agar NA,
oat, sarden, soun, susu skim, telur,
tempe, tepung beras putih, tepung
jagung, tepung ketan hitam, tepung
tapioka, tepung terigu kunci, tepung
terigu segitiga, tofu, dan yogurt.
Prosedur
Amilolitik
Sampel diambil dan ditimbang
sebanyak 1 gram lalu dilakukan
pegenceran -1, -2, -3 an -4. Pada
pengenceran -3 dan -4, dimasukkan ke
dalam cawan petri. Kemudian
dimasukkan media NA. Sampel dalam
cawan petri diinkubasi dengan suhu
30ºC, selama 3 hari. Kemudian koloni
yang berhasil tumbuh ditetesi larutan
yodium 1%. Koloni yang berhasil
tumbuh diambil menggunakan ose lalu
dilakukan pewarnaan gram. Kemudian
diamati bentuk dan warna di bawah
mikroskop.
Proteolitik
Sampel diambil dan ditimbang
sebanyak 1 gram lalu dilakukan
pegenceran -1, -2, -3 an -4. Pada
pengenceran -3 dan -4, dimasukkan ke
dalam cawan petri. Kemudian
dimasukkan media SMA dan MRS.
Sampel dalam cawan petri diinkubasi
dengan suhu 37ºC, selama 2 hari.
Diamati zona bening yang dihasilkan.
Koloni yang berhasil tumbuh diambil
menggunakan ose lalu dilakukan
pewarnaan gram. Kemudian diamati
bentuk dan warna di bawah mikroskop.
Lipolitik
Sampel diambil dan ditimbang
sebanyak 1 gram lalu dilakukan
pegenceran -1, -2, -3 an -4. Pada
pengenceran -3 dan -4, dimasukkan ke
dalam cawan petri. Kemudian
dimasukkan media NA + indikator
Neutral Red (NR) dan NA + 1% lemak
(gliserol) + indikator Neutral Red (NR).
Sampel dalam cawan petri diinkubasi
dengan suhu 30ºC, selama 2 hari.
Koloni yang berhasil tumbuh diambil
menggunakan ose lalu dilakukan
pewarnaan gram. Kemudian diamati
bentuk dan warna di bawah mikroskop.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Praktikum kali ini membahas
tentang pengujian jenis bakteri sesuai
dengan nutrisi yang dapat dipecahkan
pada sebuah bahan pangan. Adapun
bahan pangan yang diuji dalam
praktikum ini adalah bubur, fresh milk,
margarin, mentega putih, oat, sarden,
soun, susu skim, telur, tempe tempe,
tepung beras putih, tepung jagung,
tepung ketan hitam, tepung tapioka,
tepung terigu kunci, tepung terigu
segitiga, tofu, dan yogurt.
Amilolitik
Amilolitik merupakan aktivitas
bakteri dalam merombak pati dengan
bantuan enzimamilase. Enzim amilase
adalah enzim yang mampu
menghidrolisis pati menjadi senyawa
lebihsederhana seperti maltosa dan
glukosa. Enzim ini banyak digunakan
untuk keperluan industri.Enzim ini
dapat memecah atau menghidrolisa pati,
glikogen dan turunan polisakarida
dengan cara memecah ikatan glikosidik
pati. Enzim amilase dibedakan menjadi
3 grup yaitu α-amilase yang disebut
juga endoamilase, β-amilase yang
disebut juga eksoamilase dan
glukoaminase (Lehninger, 1982)
Amilolitik tumbuh subur pada
bahan pangan yang banyak
mengandung pati atau karbohidrat,
misalnya pada berbagai jenis tepung.
Reaksi hidrolisis pati pada makanan
bersifat tidak menguntungkan karena
menyebabkan pencairan pati sehingga
selanjutnya dapat mengakibatkan
perubahan cita rasa makanan dan
tekstur dari makanan tersebut. Pati
merupakan salah satu karbohidrat
kompleks. Makanan dengan kandungan
karbohidrat tinggi akan lebih mudah
diserang mikroorganisme amilolitik
karena pemecahan karbohidrat yang
lebih mudah bila dibandingkan dengan
protein ataupun lemak.
Kebanyakan jenis
mikroorganisme amilolitik adalah
kapang, tetapi beberapa jenis bakteri
juga ada, jenis yang mempunyai spesies
bersifat Amilolitik misalnya
Clostridium butyricium dan Bacillus
subtilis. Spesies Clostridium dibedakan
menjadi dua, yaitu proteolitik dan
sakarolitik. Proteolitik dapat memecah
atau tidak dapat memecah gula, dan
sakarolitik dapat memecah gula tetapi
tidak dapat memecah protein. Sebagai
contoh, C.lentroputrescens bersifat
proteolitik tapi tidak memecah
karbohidrat, sedangkan C.butyricum
adalah nonproteolitik tetapi mampu
memfermentasi gula (Buckle, 1987).
Sampel yang digunakan untuk
menguji mikrooganisme amilolitik
dalam bahan pangan adalah tepung
jagung, tepung terigu, tepung tapioka,
dan tepung beras putih, tepung ketan
hitam, tepung kunci, oat, bubur dan
bihun. Cara kerja dalam praktikum
pengujian bakteri amilolitik ini yaitu
pertama–tama, sampel seberat 1 gram
dimasukkan ke dalam 9 ml larutan NaCl
fisiologis sebagai pengenceran pertama,
kemudian dilakukan pengenceran
sampai 10-4. Pengenceran ini dilakukan
agar diperoleh individu spesies yang
dapat dipisahkan dari organisme
lainnya. Setiap koloni yang terpisah
yang tampak pada cawan tersebut
setelah inkubasi berasal dari satu sel
tunggal. Karena konsentrasi sel-sel
mikroba di dalam eksperimen pada
umumnya tidak diketahui sebelumnya,
maka pengenceran perlu dilakukan
beberapa tahap sehingga sekurang-
kurangnya terdapat koloni-koloni
terpisah baik di atas permukaan maupun
di dalam agar pada salah satu cawan
tersebut.
Sebanyak 1 ml sampel dari
pengenceran 10-3 dan 10-4 diisolasikan
ke dalam cawan petri menggunakan
metode tuang, lalu masing-masing
ditambahkan medium NA sampai
setengah dari cawan petri, kemudian
dihomogenkan dengan menggerakkan
seperti angka 8. Setelah membeku,
inkubasi selama 2 hari. Suhu yang
digunakan yaitu 30 oC, karena pada
suhu tersebut semua mikroorganisme
dapat tumbuh, dan beberapa
mikroorganisme memiliki suhu
pertumbuhan yang optimum pada suhu
tersebut. Dalam mengisolasi bakteri ini
harus dilakukan dalam keadaan yang
aseptis, yaitu pekerjaan dilakukan di
dekat bunsen.
Indikator yang digunakan pada
uji amilolitik ini adalah yodium.
Yodium 1% diteteskan tepat di atas
koloni. Tujuan petetesan larutan yodium
1% adalah untuk membuktikan
ada/tidaknya bakteri amilolitik. Pati
yang tidak terhidrolisis akan
membentuk warna biru dengan yodium
yang menunjukkan tidak terdapatnya
enzim amilase yang dihasilkan oleh
bakteri selain bakteri amilolitik. Pati
yang terhidrolisis di sekeliling koloni
akan terlihat areal bening, sebagai
akibat aktivitas enzim amilase. Areal
berwarna coklat kemerahan disekeliling
koloni menunjukan hidrolisis sebagian
terhadap pati dengan kata lain, amilosa
sudah terhidrolisis dan amilopektinnya
belum terhidrolisis, yaitu polimer
glukosa kurang dari 20 sehingga
yodium bereaksi dengan amilopektin
membentuk warna cokelat kemerahan
Pati yang berikatan dengan Iodin
(I2) akan menghasilkan warna biru. Hal
ini disebabkan oleh struktur molekul
pati yang berbentuk spiral, sehingga
akan mengikat molekul Iodin dan
terbentuklah warna biru. Berdasarkan
hasil penelitian, diperoleh bahwa pati
akan merefleksikan warna biru bila
berupa polimer glukosa yang lebih dari
dua puluh, misalnya molekul amilosa.
Polimer yang kurang dari dua puluh
seperti amilopektin, maka akan dapat
dihasilkan warna merah. Sedangkan
dekstrin dengan polimer 6, 7, da 8
membentuk warna cokelat. Polimer
yang lebih kecil dari lima tidak akan
memberikan warna dengan Iodin
(Winarno, 1992).
Menurut Fardiaz, 1992, Bakteri
amilolitik yang biasa tumbuh adalah
Bacillus subtilis dan Clostridium
butyricum. Menurut Sukarminah, 2008,
Bacillus subtilis merupakan bakteri
berbentuk basil dan bergram positif.
Clostridium butyricum merupakan
bakteri berbentuk basil dan bergram
positif.
Tepung terigu merupakan
tepung yang berasal dari bahan dasar
gandum yang diperoleh dengan cara
penggilingan gandum yang banyak
digunakan dalam industri pangan.
Komponen yang terbanyak dari tepung
terigu adalah pati, sekitar 70% yang
terdiri dari amilosa dan amilopektin.
Besarnya kandungan amilosa dalam pati
ialah sekitar 20% dengan suhu
gelatinisasi 56 - 62 (Belitz and Grosch,
1987).
Kelompok 3A menguji sampel
tepung terigu dengan media NA dan
pengenceran 10-3 dan 10-4. Pada
pengengenceran 10-3 ditemukan bakteri
yang tumbuh sedangkan pada
pengenceran 10-4 tidak ditemukan.
Bakteri yang diamati merupakan bakteri
gram positif dengan bentuk basil yang
diduga merupakan jenis Bacillus
subtilis. Bakteri tadak tumbuuh pada
pengencera 10-4 kemungkinan karena
sampel terlalu cair sehingga terlalu
sedikit bakteri untuk dihitung.
Tepung beras mengadung
banyak pati dan protein tanpa gluten.
Tepung beras mengadung pati sekitar
80-85% .Kelompok 4A menguji sampel
tepung beras putih dengan media NA
dan pengenceran 10-3 dan 10-4. Terdapat
koloni bakteri yang tumbuh pada kedua
sampel pengenceran. Bakteri yang
diamati setelah dilakukan pewarnaan
gram berbentik basil dan termasuk jenis
gram positif. Bakteri tersebut diduga
merupakan jenis Bacillus subtilis.
Tepung tapioka merupakan
suatu jenis bahan pangan yang dibuat
dari ubi kayu. Kelompok 8A melakukan
pengamatan dengan sampel tepung
tapioka namun setelah ditetesi yodium
cawan petri berwarna biru yang
menandakan negatif bakteri amilolitik,
namun di tengahnya terbentuk koloni
bakteri. Ketika diamati bakteri tersebut
termasuk golongan gram negatif
sehingga diduga bakteri yang tumbuh
adalah bakteri kontaminan.
Tepung jagung merupakan
tepung yang berasal dari biji jagung
kering dan digiling halus menggunakan
mesin dengan ayakan atau saringan
sekitar 80 atau 100 mesh (Merdiyanti,
2008). Tepung ini memiliki kandungan
karbohidrat yang cukup tinggi dan biasa
digunakan sebagai pengental makanan.
n kandungan amilosa pada jagung
memiliki struktur yang kompak
sehingga sulit untuk ditembus oleh air.
Rendahnya tingkat kemampuan
mengikat air inilah yang menyebabkan
kemampuan granula pati untuk
menggelembung pada gelatinisasi
menjadi rendah.
Kelompok 9A melakukan
pengamatan dengan sampel tepung
jagung. Sampel dengan pengenceran
10-3 menunjuakn adanya koloni yang
tumbuh. Setelah ditetesi yodium media
berwarna merah menunjukan bakteri
tersebut positif amilolitik. Hasil
pengamatan didapatkan hasil bakteri
berbentuk basil dan termasuk gram
negatif.
Beras ketan (Oryza sativa
glutinous) mengandung karbohidrat
yang cukup tinggi, yaitu sekitar 80%.
Selain karbohidrat, kandungan beras
ketan adalah lemak sekitar 4%, protein
6%, dan air 10%. Kadar amilosa pada
ketan rendah (0-2%) sedangkan kadar
amilopektinnya tinggi (98-99%) hal
tersebut membuat ketan setelah di
masak menjadi sangat lengket dan
mengkilat (Haryadi, 2006).
Kelompok 12A melakukan
pengamatn menggunakan sampel beras
ketan hitam. Sampel dengan
pengenceran 10-3 dan 10-4 diamati
adanya koloni yang tumbuh namun
ketika ditetesi yodium media merubah
menjadi biru sehingga negatif
amilolitik. Bakteri yang diamati
berbentuk kokus dan berjenis gram
negatif yang merupakan bakteri
kontaminan.
Tepung kunci merupakan tepung
terigu berprotein rendah (low protein
flour) tepung ini memiliki kadar protein
sekitar 8-9 %, digunakan untuk kue
kering. Kelompok 3B mengamati
sampel ini dan pada pengenceran 10-3
terdapat koloni bakteri yang tumbuh..
bakteri tersebut berbentuk basil dan
termasuk gram negatif. Bakteri yang
terbentuk kemungkinan merupakan
kontaminan atau bakteri Bacillus
subtilis namun ketika proses pewarnaan
gram terlalu banyak ditambahkan
safranin sehingga ketika diamati
berwarna merah.
Oat adalah produk pangan
berbahan dasar gandum yang kaya akan
karbohidrat dan serat. Kelompok 4B
mengamati sampel oat. Bakteri yang
tumbuh pada pengenceran 10-3 dan 10-
4 berbentuk basil dan berjenis gram
negatif. Bakteri ini kemungkinan
adalah kontaminan, bukan bakteri
amilolitik. Bakteri amilolitik yang
mungkin akan tumbuh pada oat adalah
Bacillus subtilis dan Clostridium
butyricum.
Bubur merupakan olahan dari be
ras. Bubur dibuat dengan air yang cuku
p banyak sehingga teksturmya menjadi
cair. Kelompok 8B tidak menemukan ad
anya koloni bakteri yang tumbuh karena
bubur yang bersifat cair ini diencerkan l
agi sehingga terlalu sedikit bakteri untu
k diamati. Bakteri amilolitik yang dijum
pai pada pangan olahan beras adalah Cl
ostridium butyricum (Fardiaz, 1992).
Bihun adalah produk olahan ber
as yang berbentuk seperti mie. Sampel i
ni diamati oleh kelompok 9B namun tid
ak ada koloni bakteri yang terbentuk. Bi
hun dan bubur merupakan olahan beras
sehingga bakteri yang mungkn tumbuh
adalah Bacillus subtilis dan Clostridium
butyricum seperti pada beras.
Lipolitik
Lemak merupakan zat makan
yang penting untuk menjaga kesehatan
tubuh. Selain itu lemak juga merupakan
sumber energi yang lebih efektif
dibanding dengan karbonhidrat. Oleh
karena itu lemak banyak berada dalam
bahan pangan dengan kadar yang
berbeda-beda atau mungkin
ditambahkan dalam bahan pangan.
Lemak bersifat plastis pada suhu
tertentu, lunak, dan dapat dioleskan.
Plastisitas lemak disebabkan karena
lemak merupakan campuran trigliserida
yang masing-masing mempunyai titik
cair masing-masin (Herudiyanto, 2006).
Lemak dapat terhidrolisis menjadi asam
lemak dan gliserol. Reaksi ini dapat
dipercepat dengan adanya enzim lipase.
Dengan adanya lipase dalam bahan
pangan, lemak akan diuraikan sehingga
kadar asam lemak bebas lebih dari 10 %
(Winarno, 1992). Hidrolisis bersifat
menurunkan mutu bahan pangan. Asam
lemak bebas yang dihasilkan oleh reaksi
hidrolisis ini dapat memberikan rasa
dan bau tengik pada lemak atau minyak
tersebut (Herudiyanto, 2006).
Sampel yang digunakan pada
praktikum ini adalah mentega,
margarin, kornet, dan pindaknas. Cara
kerjanya hamper sama dengan
praktikum amilolitik, namun, setelah
media dituang, ditambahkan 1 tetes
Indikator Neutral Red (NR) untuk
mendeteksi apakah bakteri yang tumbuh
bersifat lipolitik atau tidak. Indikator
NR bersifat basa dan bakteri lipolitik
bersifat asam, sehingga warna yang
dihasilkan menjadi merah. Reaksi
positif terjadi bila pada bagian bawah
koloni berwarna merah. Hal ini terjadi
karena indikator NR ini akan
menghasilkan warna merah bila dalam
situasi asam. Suasana asam ini terjadi
akibat adanya reaksi hidrolisis menjadi
asam-asam lemak bebas dan gliserol
oleh bakteri lipolitik tersebut. Reaksi ini
disebut lipolisis (Murray, dkk., 1999).
Koloni mikroorganisme
pemecah lemak akan memecah lemak
menjadi gliserol dan asam-asam lemak
sehingga menurunkan pH medium,
yang mengakibatkan warna merah pada
bagian bawah koloni karena perubahan
warna indikator Neutral Red pada pH
rendah. Kemudian cawan petri yang
sudah diinokulasi, diinkubasi selama 2
hari pada suhu 30oC.
Bakteri yang bersifat lipolitik ini
biasanya kebanyakan (dominan)
merupakan bakteri yang bersifat aerobik
dan bakteri proteolitik aktif contohnya
adalah Pseudomonas, Alcaligens,
Staphylococcus, Serratia, dan
Micrococcus adalah genus bakteri yang
bersifat lipolitik (Fardiaz, 1992).
Mentega dihasilkan dari lemak
krim susu, yang umumnya berasal dari
susu sapi. Mentega 1 kg memiliki
kandungan lemak (dan lesitin) 82%, air
16%, putih telur 1%, laktosa atau gula
susu 0,5%, garam mineral 0,5% serta
vitamin A dan D.
Sampel mentega diamati oleh
kelompok 1A dan 2A. koloni bakteri
hanya ditemukan pada pengamatan
kelompok 2A dengan pengenceran 10-
3. koloni bakteri tumbuh di tengah
media sehingga tidak bisa diamati
jenisnya. Faktor yang mempengaruhi
tidak tumbuhnya sampel pada media
lainnya kemungkinan diakibatkan oleh
sampel dan pelarut tidak larut sempurna
ketika pegenceran sehingga tdak
terbentuk koloni setelah inkubasi.
Kornet memiliki kandungan
lemak yang tinggi. Sampel ini diamati
oleh kelompok 6A dan 7A. Semua
sampel ditumbuhi koloni bakteri.
Bakteri pada kelompok 6A tumbuh
meskipun pada media tidak ditambahi
lemak untuk tumbuh. Kandungan lemak
pada kornet cukup tinggi sehingga tanpa
adanya tambahan lemak, bakteri
lipolitik tetap bisa tumbuh. Pada semua
perlakuan koloni bakteri tumbuh di
tenah media sehingga bentuknya tidak
dapat diamati.
Margarin merupakan produk
turunan dari minyak kelapa sawit dan
mengandung lemak tak jenuh.
Pengamatan dengan sampel margarin
dilakukan oleh kelompok 6B dan 7B.
bakteri tumbuh pada keempat sambel
baik dengan penambahan lemak pada
media ataupun tidak. Koloni bakteri
dapat tumbuh tanpa adanya
penambahan lemak karena kadar lemak
pada sampel sudah tinggi dan
mencukupi untuk pertumbuhan bakteri
lipolitik. Bakteri tumbuh di tengah
media sehingga tidak dapat diamati.
Pindakas atau selai kacang meru
pakan salah satu olahan pangan yang m
engandung lemak nabati sehingga kand
ungan lemaknya tidak jenuh. Sampel ini
diamati oleh kelompok 1B dan 2B. Kol
oni bakteri tumbuh pada keempat cawan
petri. Kandungan lemak yang tinggi me
mungkinkan bakteri tumbuh tanpa adan
ya penmbahan lemak pada media. Pada
sampel pengenceran 10-3 bakteri terbila
s aquades sehingga tidak dapat diamati.
Sampel dengan pengenceran 10-4 tumb
uh di tengah media sehingga koloni ini j
uga tidak dapat diamati jenis bakterinya.
Proteolitik
Bakteri proteolitik adalah
bakteri yang memproduksi enzim
protease ekstraselular, enzim protease
ini diproduksi di dalam sel kemudian
dilepaskan ke mediumnya. Bakteri
mempunyai enzim protease di dalam
sel, namun tidak semua enzim protease
tersebut dilepaskan ke mediumnya
(Puspitasari dkk 2009). Dekomposisi
protein lebih sulit dibandingkan
pemecahan karbohidrat. Produk akhir
dari dekomposisi protein pun lebih
bervariasi, hal ini disebabkan struktur
protein yang lebih kompleks.
Mikroorganisme dengan sistem enzim
yang kompleks, memecah protein
menjadi senyawa-senyawa yang lebih
sederhana.. Bakteri proteolitik dapat
digolongkan menjadi beberapa
kelompok yaitu,  bakteri aerobik atau
anaerobik fakultatif tidak membentuk
spora, bakteri aerobik atau anaerobik
fakultatif membentuk spora, dan bakteri
anaerobik pembentuk spora. Aktivitas
proteolitik menghasilkan sedikit
penggumpalan. Bakteri  proteolitik
adalah bakteri yang memproduksi
enzim protease ekstraseluler, yaitu
enzim pemecah protein yang diproduksi
di dalam sel kemudian dilepaskan
keluar dari sel. Bakteri mempunyai
enzim protease di dalam sel, tetapi tidak
semua  bakteri mempunya enzim
protease ekstraseluler. Dekomposisi
protein oleh mikroorganisme lebih
kompleks daripada pemecahan
karbohidrat dan produk akhirnya juga
lebih bervariasi. Hal ini disebabkan
struktur protein yang lebih kompleks.
Mikroorganisme melalui suatu
sistem enzim yang kompleks, memecah
protein menjadi senyawa-senyawa yang
lebih sederhana. Contoh bakteri
proteolitik adalah Pseudomonas,
Bacillus, Streptococcus  dan
Staphylococcus. Enzim protease
dibedakan menjadi dua kelompok yaitu
proteinase yang menghidrolisis molekul
protein menjadi peptida dan peptidase
yang menghidrolisis fragmen peptida
menjadi asam amino. Metode yang
digunakan untuk mendeteksi adanya
aktivitas bakteri proteolitik adalah
dengan menggu nakan medium yang
mengandung kasein yaitu Skim Milk
Agar (Fardiaz, 1992). Kasein adalah
salah satu jenis protein. Hidrolisis
kasein digunakan untuk
memperlihatkan aktivitas hidrolitik
protease yang memutuskan ikatan
peptida CO-NH. Hidrolisis protein
ditunjukkan dengan adanya zona bening
di sekeliling  pertumbuhan bakteri.
Pengujian secara kualitatif dilakukan
dengan cara mengamati zona bening
yang berada di sekitar koloni bakteri,
kemudian membagi diameter zona
bening dengan diameter koloni bakteri.
Hasil bagi diameter tersebut dinyatakan
sebagai aktifitas protease secara relatif.
Bsarnya diameter zona bening
(halo) yang terbentuk menunjukkan
bahwa kedua isolat bakteri proteolitik
terpilih memiliki kemampuan dalam
menghidrolisis protein dan kasein yang
ada pada media Skim Milk Agar untuk
menghasilkan aktivitas protease.
Penggunaan media SMA
bertujuan untuk mengetahui
mikroorganisme proteolitik. Medium
SMA mengandung kasein sebagi
protein susu dimana akan dipecah oleh
mikroorganisme proteolitik menjadi
senyawa nitrogen terlarut sehingga pada
koloni dikelilingi area bening.
Menunjukkan mikroba tersebut
mempunyai aktivitas proteolitik
( Fardiaz,1992). Sedangkan penggunaan
medium MRS atau media de Mann
Rogose and Sharpe merupakan media
spesifik untuk pertumbuhan bakteri
asam laktat. Penggunaan media MRS
pada skala industri tidaklah efektif
dikarenakan harga yang relatif tinggi.
Untuk menangani masalah ini
diperlukan media pengganti yang
harganya relatif murah namun
mengandung sejumlah nutrisi penting
yang dapat menunjang pertumbuhan
bakteri asam laktat bertujuan untuk
menumbuhkan dan mengisolasi jenis
Lactobacillus dari seluruh jenis bahan.
Karena MRS mengandung polysorbat,
asetat, magnesium, dan mangan yang
bertindak sebagai faktor pertumbuhan
bagi Lactobacillus.
 Fresh milk secara alami,
mengandung mikroorganisme kurang
dari 5 x 103 per ml jika diperah dengan
cara yang benar dan berasal dari sapi
yang sehat (Jay 1996). Berdasarkan SNI
01-6366-2000, batas cemaran mikroba
dalam susu segar adalah Total Plate
Count (TPC) < 3 x 104 cfu/ml, koliform
< 1 x 101 cfu/ml, Staphylococcus
aureus 1 x 101 cfu/ml, Escherichia coli
negatif, Salmonella negatif, dan
Streptococcus group B negatif.
Beberapa bakteri seperti Listeria
monocytogenes, Camphylobacter jejuni,
E.coli, dan Salmonella sp. dilaporkan
mengontaminasi susu dengan prevalensi
kecil. Pengamatan ini menunjukkan
pada media SMA dengan pengenceran
10-3 ditumbuhi koloni di tengah media
sedingga tidak bisa diambil, sedangkan
pada pengenceran 10-4 dengan media
SMA ditumbuhi bakteri berbentuk basil
dan termasuk gram positif, diperkirakan
bakteri tersebut adalah lactobacillus sp.
Sampel pada media MRS baik
pengenceran 10-3 dan 10-4 tidak
ditumbuhi bakteri.
Tahu adalah gumpalan protein
kedelai yang diperoleh dari hasil
penyaringan kedelai yang telah digiling
dengan penambahan air. Penggumpalan
kedelai dilakukan dengan cara
penambahan biang atau garam-garam
kalsium, misalnya kalsium sulfat. Tofu
merupakan pangan sumber protein
nabati yang dikonsumsi untuk
memenuhi kebutuhan gizi sehari-hari.
Pada pengamatan ini menunjukkan
bahwa pada pengenceran 10-3 pada
media SMA tidak ditumbuhi bakteri,
sedangkan pada pengencera 10-4 dengan
media SMA tumbuh koloni di tengah
media, sehingga tidak dapat diambil.
Sampel dengan pengenceran 10-3 pada
media MRS ditumbuhi koloni di tengah
media, sehingga tidak dapat diambil,
sedangkan pada pengenceran 10-4
dengan media MRS tidak ditumbuhi
bakteri. Salah satu mikroorganisme dari
tahu atau tofu yang dapat menghasilkan
protease ekstraseluler diduga adalah
Staphylococcus sp.
Sarden merupakan olahan
pangan berbahan dasar ikan sarden.
Sarden umumnya dikemas dalam
bentuk kaleng. Hasil pengamatan
bakteri proteolitik, sampel sarden
kelompok 11A menghasilkan zona
bening yang menandakan terdapat
bakteri proteolitik. Bakteri tersebut
tumbuh pada medium SMA
pengenceran 10-4 dengan karakteristik
yang terlihat di bawah mikroskop ialah
bakteri berbentuk basil dan gram positif.
Bakteri juga tumbuh pada medium
MRSA dengan pengenceran 10-3 dengan
kenampakan di bawah mikroskop ialah
bakteri berbentuk kokus gram positif.
Berdasarkan morfologi tersebut bakteri
yang mungkin tumbuh ialah
Clostridium botulinum. Bakteri ini
mempunyai morfologi koloni yang
beragam, bersifat gram positif dan
berbentuk batang dengan spora di
daerah subterminal. Bakteri Clostridium
botulinum banyak ditemukan pada
kemasan sarden.
Telur adalah salah satu
bahan makanan hewani yang
dikonsumsi
selain daging, ikan dan susu. Umumnya
telur yang dikonsumsi berasal dari
jenis-jenis burung, seperti ayam, bebek,
dan angsa, akan tetapi telur-telur yang
lebih kecil seperti telur ikan kadang
juga digunakan sebagai campuran
dalam hidangan (kaviar).  Telur
memiliki sifat yang mudah rusak.
Pengenceran putih telur terjadi akibat
kerja enzim-enzim proteolitik yang
memecah protein, terutama protein
ovomucin yang menentukan kekentalan
putih telur. Hasil pengamatan bakteri
proteolitik, sampel telur kelompok 5B
mengahasilkan pertumbuhan bakteri
pada medium SMA dengan
pengenceran 10-3 dan 10-4. Sedangkan
pada medium MRSA tidak terdapat
bakteri yang tumbuh. Koloni yang
tumbuh pada medium SMA
pengenceran 10-4 tumbuh di bagian
tengah medium sehingga tidak
dilakukan pewarnaan gram. Koloni
yang tumbuh pada medium SMA
pengenceran 10-3, hasil pewarnaan gram
menunjukkan bakteri berbentuk basil
dan gram negatif. Bakteri proteolitik
dengan ciri ini dimiliki oleh jenis
Pseudomonas. Bakteri jenis
Pseudomonas yang biasa dijumpai pada
telur adalah Pseudomonas fluorescens. .
Tempe merupakan pangan
tradisional yang dihasilkan dari
fermentasi kedelai oleh kapang
Rhizopus sp. Tempe dengan
pengenceran 10-3 dan 10-4 pada media
SMA keduanya ditumbuhi bakteri yang
termasuk gram positif. Sampel dengan
pengenceran 10-3 dan 10-4 pada media
MRS keduanya ditumbuhi bakteri yang
termasuk gram positif, diperkirakan
bakteri tersebut adalah Bacillus sp.Jenis
bakteri proteolitik gram positif yang
dapat tumbuh pada tempe adalah
Bacillus aureus, Staphylococcus
aureus, Streptococcus, dan Clostridium
sp..
Yoghurt adalah salah satu
produk fermentasi berbahan dasar susu
dari bakteri asam laktat sebagai starter,
yakni Strepococcus thermophillus dan
Lactobacillus bulgaricus. Pada
pengamatan ini bakteri proteolitik,
yoghurt kelompok 11B pada pengujian
bakteri proteolitik menunjukkan hasil
positif bakteri proteolitik pada medium
SMA pengenceran 10-3 dan 10-4, dengan
karakteristik bakteri gram negatif,
sedangkan pada medium MRSA
hasilnya negatif terhadap adanya bakteri
proteolitik. Menurut Winarno (2002),
bakteri Lactobacillus bulgaricus
bersifat proteolitik pada susu dan
berkontribusi terhadap aroma dan
tekstur pada produk fermentasi susu.
Bakteri Lactobacillus bulgaricus dan
Streptococcus thermophilus merupakan
bakteri proteolitik dan homofermentatif
yang dijumpai pada yoghurt.
Sampel yang terakhir adalah
susu skim adalah susu yang bagian
lemak (krim) nya diambil sebagian atau
seluruhnya pada waktu didiamkan atau
dipisahkan dengan alat centrifugal
separator. Pengamatan ini
menunjukkan pada pengenceran 10-3
dengan media SMA tidak ditumbuhi
bakteri, sedangkan sampel dengan
pengenceran 10-4 pada media SMA
ditumbuhi bakteri dengan ciri berbentuk
kokus dan termasuk gram negatif,
diperkirakan bakteri tersebut adalah
Acetobacter yang berarti sampel
kemungkinan terkontaminasi bakteri
lain, karena Acetobacter bukan bakteri
proteolitik. Sampel dengan pengenceran
10-3 dan 10-4 pada media MRS keduanya
tidak ditumbuhi bakteri.
Tidak terdapatnya keberadaan
bakteri pada sampel uji dapat
disebabkan oleh beberapa faktor.
Pertama, sampel bisa saja memang
sudah steril dari pabriknya. Perlakuan
pemanasan atau pengawetan pada
industri diduga dapat mematikan bakteri
pada sampel. Kedua, perlakuan
percobaan yang lewat steril, maksudnya
perlakuan sterilisasi terhadap beberapa
operasi percobaan yang terlalu
berlebihan dan menggunakan panas
yang terlalu tinggi. Hal ini tentunya
dapat mematikan bakteri yang
sebelumnya telah ada pada sampel.
Ketiga, perlakuan inkubasi yang tidak
tepat, baik karena waktunya yang
singkat maupun karena suhu yang
digunakan tidak tepat. Percobaan ini
mungkin saja bakteri yang diharapkan
tumbuh tidak mendapatkan perlakuan
inkubasi yang sesuai. Kontaminasi dari
praktikan dan lingkungan memengaruhi
hasil pengujian yang berupa tumbuhnya
koloni bakteri kontaminan.
KESIMPULAN
Kesimpulan dari praktikum
pengujian bakteri amilolitik, lipolitik,
dan proteolitik ini adalah pada
pengujian amilolitik terdapat bakteri
Bacillus substilis pada tepung terigu
segitiga dan tepung jagung, Clostridium
butyricum pada tepung beras putih,
Bacillus aereus pada tepung tapioka,
dan bakteri non amilolitik (kontaminan)
pada tepung ketan hitam dan tepung
terigu kunci. Pada pengujian bakteri
lipolitik koloni yang terbentuk tidak
dapat diamati karena koloni tumbuh di
tengah media. Dalam pengujian
proteolitik terdapat bakteri
Lactobacillus sp pada fresh milk,
Clostridium sp dan Streptococcus sp
pada sarden, Pseudomonas sp pada
telur, Bacillus sp pada tempe,
Pseudomonas flourescens pada yogurt,
dan Pseudomonas aeuruginosa pada
susu skim.
DAFTAR PUSTAKA
Abraham, A.G., G.L. De Antoni dan
M.C. Anon. 1993.
Proteolitic activity of
Lactobacillus bulgaricus
grown in milk. J. Dairy Sci.,
76:1498–1505.
Bansode, S. D. 2010. Screening of
nutritional components for
amilase production in
submerged fermentation by
bacteria isolated from soil
using plackett-burman
design. International Journal
of Pharmacy and
Pharmaceutical Sciences, 2:
93-98.
Belitz, H.D. and W.Grosch. 1987. Food
Chemistry. Second Edition.
Springer Berlin. Berlin.
Buckle, K.A.,1987. Ilmu Pangan.
Universitas Indonesia
Press.Jakarta
Fardiaz, S. 1992. Mikrobiologi Pangan
I. Gramedia Pustaka Utama,
Jakarta.
Haryadi. 2006. Teknologi Pengolahan
Beras. Gadjah Mada University
Press.Jogjakarta
Herudiyanto, Marleen. 2006. Bahan
Ajar Pengantar Teknologi
Pengolahan Pangan,
Jatinangor.
Jaeger.K.E, S. Ransac, B.W. Dijkstra,
C. Colson, M. Van hauvel.
1994. Bacterial lipases,
FEMS Microbiol Rev, 15,
29 – 63.
Jay, J. M. 1996. Modern Food
Microbiology. 4th Edition.
Van Nostrand Company,
New York.
Merdiyanti, A. 2008. Paket Teknologi
Pembuatan Mie Kering
dengan Memanfaatkan
Bahan Baku Tepung
Jagung. (Skripsi). Fakultas
Teknologi Pertanian, IPB,
Bogor. Hal: 6-10.
Murray, Robert K., et al.1999. Biokimia
Harper Edisi 24. Jakarta
Lehninger, Albert L. 1982. Dasar-dasar
Biokimia. PT. Gelora
Aksara Pratama, Jakarta.
Poliana J dan Mac CAP. 2007.
Industrial enzymes:
structure, function, and
applications. Dordrecht:
Springer Hal: 24.
Rehm, H.J and G. Reed.1987.
Biotechnology Volume 7a
Enzyme Technology. VCH.
New York.
Schlegel Hans G,. 1994. Mikrobiologi
 Umum. Penterjemah Tedjo
Baskoro. Edisi keenam.
Gajah Mada University
Press. Yogyakarta
Sukarminah, Een, dkk. 2010.
.Mikrobiologi Pangan FTIP
Unpad, Jatinangor.

Sugita, et. Al. 2009. Kitosan : Sumber

Biomaterial Masa Depan.
IPB Press. Bogor
Walker, J., 2002. Teens in Distress
Series Adolescent Stress and
Depression, Minnesota
University.
Winarno, F.G. 1992. Kimia Pangan
dan Gizi. PT. Gramedia, Jak
arta.
LAMPIRAN
Tabel 1. Hasil Pengamatan Bakteri Lipolitik Kelas A
Bentuk dan
Kel. Sampel Pengenceran Media Warna Koloni, Gambar
Warna Media

NA + - NEGATIF
-3
10 2 tetes -Warna media
NR merah
Mentega
1.
putih
NA + - NEGATIF
-4
10 2 tetes -Warna media
NR merah

NA +
-Tumbuh koloni
1%
kecil di tengah
lemak
10-3 media
+2
-Warna media
tetes
merah
Mentega NR
2.
putih NA +
1%
-NEGATIF
lemak
10-4 -Warna media
+2
merah
tetes
NR

NA + Tumbuh koloni
-3
10 2 tetes bakteri di tengah
NR media
6. Kornet
NA + Tumbuh koloni
10-4 2 tetes bakteri di tengah
NR media

NA +
1% -Tumbuh koloni
lemak di tengah media
10-3
+2 -Warna media
tetes merah
7. Kornet NR
NA + - Tumbuh koloni
1% bakteri di tengah
10-4
lemak media
+2 -Warna media
 Bentuk dan
Kel. Sampel Pengenceran Media Warna Koloni, Gambar
Warna Media
tetes
merah
NR
(Sumber: Dokumentasi Pribadi, 2019)

Tabel 2. Hasil Pengamatan Bakteri Amilolitik Kelas A

Bentuk dan
Kel. Sampel Pengenceran Media Gambar
Warna Koloni
-Basil, gram
positif Bacillus
substilis
10-3 NA -Pewarnaan
yodium: positif
Tepung bakteri
3. terigu amilolitik
segitiga

10-4 NA NEGATIF

-Basil, gram
positif
Clostridium
butyricum
10-3 NA
-Pewarnaan
yodium: positif
bakteri
Tepung
amilolitik
4. beras
-Basil, gram
putih
positif
Clostridium
butyricum
10-4 NA
-Pewarnaan
yodium: positif
bakteri
amilolitik
8. Tepung 10-3 NA -Bakteri gram
tapioka negatif,
Staphylococcu
s aereus
-Pewarnaan
yodium:
(positif bakteri
amilolitik)
 Bentuk dan
Kel. Sampel Pengenceran Media Gambar
Warna Koloni
10-4 NA NEGATIF
-Basil, Gram
negatif
Bacillus
subtilis atau
Clostridium
10-3 NA
butyricum
-Pewarnaan
Tepung yodium: positif
9. bakteri
jagung
amilolitik

10-4 NA NEGATIF

-Bentuk kokus,
gram negatif
-Pewarnaan
10-3 NA
yodium: biru
(negatif bakteri
Tepung amilolitik)
12. ketan
hitam -Bentuk kokus,
gram negatif
-Pewarnaan
10-4 NA
yodium: biru
(negatif bakteri
amilolitik)
(Sumber: Dokumentasi Pribadi, 2019)

Tabel 3. Hasil Pengamatan Bakteri Proteolitik Kelas A

 Bentuk dan
Pengencera
Kel. Sampel Media Warna Gambar
n
Koloni
Tumbuh
-3
10 SMA koloni di
tengah media
-Bakteri
basil, gram
Fresh
5. positif
milk
10-4 SMA Lactobacillu
s sp.
-Tumbuh di
tengah media
10-3 MRS NEGATIF
10-4 MRS NEGATIF
10-3 SMA NEGATIF
Tumbuh -
10-4 SMA koloni di
tengah media
10. Tofu
Tumbuh -
10-3 MRS koloni di
tengah media
10-4 MRS NEGATIF

10-3 SMA NEGATIF

-Bentuk
basil, gram
10-4 SMA
positif

11. Sarden
-Bentuk
kokus, gram
10-3 MRS
positif

10-4 MRS NEGATIF

(Sumber: Dokumentasi Pribadi, 2019)

Tabel 4. Hasil Pengamatan Bakteri Lipolitik Kelas B
Bentuk dan
Kel. Sampel Pengenceran Media Warna Koloni, Gambar
Warna Media

Tumbuh bakteri,
saat pewarnaan
10-3 NA
gram bakterinya
terbilas akuades
1 Pindakas
Tumbuh bakteri,
tidak dapat
diamati karena
10-4 NA
tumbuh ditengah
(tidak dapat
diambil)

NA +
-3 Tidak tumbuh
10 1%
bakteri
Lemak

2 Pindakas Tumbuh bakteri,

tidak dapat
NA +
-4 diamati karena
10 1%
tumbuh di tengah
Lemak
(tidak dapat
diambil)

Ada bakteri tapi

10-3 NA tidak dapat
6 Margarin diamati
Ada bakteri tidak
10-4 NA
bisa diamati

NA +
-3 Ada bakteri tidak
7. Margarin 10 1%
bisa diamati
Lemak
 Bentuk dan
Kel. Sampel Pengenceran Media Warna Koloni, Gambar
Warna Media

NA +
-4 Ada bakteri tidak
10 1%
bisa diamati
Lemak

(Sumber: Dokumentasi Pribadi, 2019)

Tabel 5. Hasil Pengamatan Bakteri Amilolitik Kelas B

Bentuk dan
Warna
Kel. Sampel Pengenceran Media Koloni, Gambar
Warna
Media
Bentuk
basil, gram
10-3 NA negatif
(bakteri
Tepung kontaminan)
3
kunci

10-4 NA GAGAL

Koloni
terdapat
pada capet
namun
10-3 NA
terbilas
akuades saat
pewarnaan
gram
4 Oat
Koloni
terdapat
pada capet
namun
10-4 NA
terbilas
akuades saat
pewarnaan
gram
 Bentuk dan
Warna
Kel. Sampel Pengenceran Media Koloni, Gambar
Warna
Media

10-3 NA GAGAL

8 Bubur

10-4 NA GAGAL

10-3 NA GAGAL -
9 Bihun -4
10 NA GAGAL -
(Sumber: Dokumentasi Pribadi, 2019)

Tabel 6. Hasil Pengamatan Bakteri Proteolitik Kelas B

Bentuk dan
Warna
Kel. Sampel Pengenceran Media Koloni, Gambar
Warna
Media

Bentuk basil,
gram negatif
10-3 SMA
Pseudomona
s

tumbuh
bakteri, tidak
dapat
diamati
5. Telur 10-4 SMA karena
tumbuh
ditengah
(tidak dapat
diambil)

10-3 MRS GAGAL

 Bentuk dan
Warna
Kel. Sampel Pengenceran Media Koloni, Gambar
Warna
Media

10-4 MRS GAGAL

Gram positif
10-3 SMA
Bacillus sp

Gram positif
10-4 SMA
Bacillus sp

10. Tempe

Gram positif
10-3 MRS
Bacillus sp

Gram positif
10-4 MRS
Bacillus sp

Gram negatif
-3
10 SMA Pseudomona
s flourescens

11. Yogurt
Gram negatif
10-4 SMA Pseudomona
s flourescens

10-3 MRS GAGAL -

10-4 MRS GAGAL -
12. Susu 10-3 SMA GAGAL -
 Bentuk dan
Warna
Kel. Sampel Pengenceran Media Koloni, Gambar
Warna
Media

Bentuk
10-4 SMA kokus, gram
skim negatif

10-3 MRS GAGAL -

-4
10 MRS GAGAL -
(Sumber: Dokumentasi Pribadi, 2019)