MODUL 2

EKSTRAKSI
EKSTRAKSI DAN
DAN UJI
UJI AKTIVITAS
AKTIVITAS SENYAWA
SENYAWA
ANTIBAKTERI
ANTIBAKTERI DARI
DARI  MAKROALGA,
 MAKROALGA, LIMBAH PERIKANAN
LIMBAH PERIKANAN
DAN
DAN HEWAN
HEWAN INVERTEBRATA
INVERTEBRATA

Natasha Rizky M
26060118130076
Kelomppok 19
 PENANGANAN SAMPEL
Makroalga

Masukkan
kedalam Cool
Box
Sampel Cuci sampel
Sargassum sp. dan Ulva lactuca

Potong sampel Keringkan

menjadi 2-3 cm Sampel

Cangkang Kerang & Rajungan

Sampel Cuci sampel Rendam Sampel

Cangkang kerang dan rajungan Dengan larutan basa/asam

Potong dan
Hancurkan sampel
 Hewan Invertebrata

Masukkan
kedalam Cool
Box
Sampel Cuci sampel
Holothuroidea sp.

Potong sampel Keringkan

menjadi 2-3 cm Sampel

EKSTRAKSI
Sampel Kering
Sargassum sp., Ulva lactuca
dan Holothuroidea sp.
Meserasi Sampel
menggunakan n-heksana, etil asetat dan
methanol

Saring menggunakan Meserasi selama

Kertas Saring 24 jaml
 Meserasi kembali
hingga sampel berubah
warna
Pelarut pada filtrat
diuapkan
Menggunakan
rotary evaporator 37 °C

Saring menggunakan
Kertas Saring

Hasil disimpan di
Vial Kaca

Furnace
Suhu 900 °C, 2 Jam
Sampel yang sudah hancur
Cangkang kerang dan rajungan

Simpan dalam wadah Diamkan hingga

kedap udara dingin
PENYIAPAN MEDIA NA & NB
Panaskan
menggunakan
hotplate
NA 27 gram Larutkan dalam 1000 ml
dan aduk dengan pengaduk
aquades magnerik hingga homogen

Tuang larutan ke
petri dish (+ 10 ml)
Sterilkan di autoklaf
121 °C 1 atm
Petri dish disimpan dan sinari
15 menit
dengan UV
di laminary air flow sesering
24 jam mungkin untuk
menghindari
kontaminasi

Panaskan
menggunakan
hotplate
NB 1,3 gram Larutkan dalam 100 ml
aquades

Tuang larutan
tabung reaksi

dan sinari Sterilkan di autoklaf

dengan UV 121 °C 1 atm
Petri dish disimpan sesering 15 menit
mungkin untuk
di laminary air flow menghindari
24 jam kontaminasi
PENYIAPAN KULTUR BAKTERI
Ambil 5 lup kultur Tutup tabung
bakteri dengan rapat
Masukkan kedalam
10 mL NB
1 tabung = 1 Spesies

untuk memberi
waktu bakteri Masukkan Inkubator
berdaptasi dan
berkembangbiak 37 °C 24 jam

UJI KONTROL
Negatif Pelarut

Pelarut Ekstrak Diteteskan kedalam

50 µL lubang sumuran

Inkubasi selama
24 jam dan 48 jam
Note: Idealnya pelarut tidak boleh
mempunyai pengaruh terhadap bakteri uji.
 Positif

Inkubasi selama
48 jam
Antibiotik Amoksilin Diteteskan kedalam
50 µL lubang sumuran

Pengamatan 24 jam sekali

Hitung zona hambat yang
terbentuk disekitar sumuran
Note
Zona Hambat = diameter zona bening - diameter sumurn

Aktifitas Antibakteri
Tuangkan media
nutrient broth hard Tunggu hingga
agar mengeras

Tuang sof agar yang Letakkan pangkal

telah terisii kultur blue tip sesuai
bakteri jumlah sumur
Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus

Ambil pangkal blue tip Masukan 50 µl

dan akan menghasilkan ekstrak makroalga
lubang kelubang sumur

Inkubasi selama 2
Hitung D zona hambat hari dan amati setiap
dengan jangkar sorong 24 jam