PROSID]NG SEM]NAR ILAlIAH PBBMI (2015)

PEMBERIAN EKSTRAK BIJI KAKAO (Theobroma cacaoL')

TRRHADAP PROF.IL LIPID dAN KADARNOX TIKUS PUTIH
JANTAN (Rattus nomegiczs) DISLIPIDEMIA
Dewi Wiryanthini IAr, Sutadarma IwGl, Yulianaz
tBagian Biokimi4 'zBagian Anatomi
Fakultas Kedokteran Universitas Udayana Jln PB Sudirman Denpasar

E-mail: dew wiryanthini@Yahoo com

ABSTRAK
Latar Belakang: Dislipidemia adalah kelainan metabolisme lipid yang ditandai dengaa

peningkatan kadar kolesterol totd, Low Density Lipoprotein (LDL), trigliserida dan penurunar
Uuai nign Density Lipoproteih (HDL) yang mengakibatkan penurunan-enzim antioksidan dan
memicu ierjadinya stres o1'lAatlf, ditandai salah satunya dengan peningkatan
peroksidasi lipid,
Stres oksidatif menyebabkan menurunnya kadar nitat dan nitrit CNOX) damh sebagai
metabolii
ditafunitficolide'(No).Ekstrakbijikakaokayaakankandungananlioksidan/avalolsyarrg
lelditl dai catechih, epicdtechin danprocya idin.

Metode: Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental Pretest-Postest Contrcl Gfol.tp
Design.

Hssil: penelitian menunjukkan bahwa setelah pemberian ekstrak biji kakao terjadi penurunan
kadar kolesterol total, triglise da dan LDL pada kelompok P1, P2 dan P3 yang bermakna
(p=0,000), peningkatan kadar HDL yang bermakna pada kelompok- P.l, P?^gn P3 (p=0,000) serta
p'eningkai; tadar NOx yang tidak bermakna pada kelompok P1, P2 dan P3 (p=0,486)

Kesimpulan: Ekstak kakao dapat menghambat stres oksidatif yang ditandai dengan
biji
penuruian secara bermakna kadar kolestercl total, triglisedda, LDL disertai peningkatan secaxa
termakna kadar HDL, namun belum mampu memperbaiki kadar Nox darah tikus dalam keadaan
dislipidemia.

Kata h)nci: eksttqk b|i kakao, dislipidemia, profil lipid, NOx

PENDAHULUAN Penyakit jantung koroner (PJK) merupa'

Kejadian penyakit kardiovaskuler yang
sering mengakibatkan kematian saat ini sudah
banyak terjadi di negara berkembang seperti
di lndonesia. Penyakit kardiovasL:uler tidak
hanya menyerang pada usia lanjut namun
semakin banyak orang usia muda yang
mengidapnya. Hal ini didukung oleh data
Survei Kesehatan Rumah Tangga (SKRT)
2004. balwa sebanyak 2,2% Penduduk
Indonesia usia 15 tahun atau lebih menderita
I penwunan enzim antioksidan dan peningkatan
penyakit kardiovaskuler.
kan penyakit kardiovaskuler yang menyebab'
kan kematian terbesar, disebabkan gaqguan
aliran darah ke otot jantung karena tedadi
penyempitan pembuluh darah jantung dan
aterosklerosis akibat dislipidemia.2 Dislipi-
demia merupakan kelainan meta-bolisme lipid
ditandai dengan peningkatan kadar kolesterol
total, tdgliserida, Low Density Lipoprotein
(LDL) serta penurunan kadar High DensitY
Lipoprotein (HDL), menyebabkan terjadi
 IROSID|NG SEMINAR ILMUH PBBMI (2OI'
lgroksidasi lipid, yaog berperanan pada proses
hrjadirya aterosklerosis.3 Penelitian pada
lilos nenunjukkan terjadi induksi prooksidan
dan peningkalan peroksidasi lipid pada tikus
yaru mendapat diel tinggi kolesterol.a
Dislipidemia adalah suatu keadaan yang
nelipuli kenaikan kadar kolesterol total, LDL,
tlglnerida, dan atau penruunan kadar HDL.
Pada likus kadar normai kolesterol total tikus
adalah 10-54 mg/dl-5, kadar notmal
biglisedda tikus adalah 26-145 mg/dl.6
Kenaikan kolesteroi umumnya dicapai dalam
waltu 2 minggu, dikatakan dislipidemia bila
krjadi kenaikan berat badan > 2070 atau kadar
koiesreiol total serum > 240 mg/dl.7
Sejurnlah studi telah dilakukan untuk
nengevaluasi efek berbagai antioksidall
$rhadap stres oksidatif dan profil lipid.
Sullementasi vitamin E secara signifikan
dapat menurunkan peroksidasi lipid dan
penjngl€tan status antioksidan total dalam
plasma.s Suplomentasi jus sayuran dapat
nenJrunlan kadar trigliserida. rasio
HDL,4-DL darah dan senyawa malo
ldialdehide (MDA), serta dapat meningkatkan
aktivitas enzim antioksidan serum seperti
glulathione peroksidasc dan superoksid dis-
mutase.9 Penelitian epidemiologi menunjuk-
kan nakanan tinggi beta karoten dan vitamin
E menuunkan resiko aterosklerosis dengan
cara mencegah oksidasi LDL. Efek beta
karoten dan zea\anthin meniaga liposome dari
peroksidasi lipid.ro Peningkatan stres oksida-
t'i.ebanding dengcn penurunan mekanisme
antioksidan serta peningkatan akumulasi.
prcdnk Re.rcli,e Oxygen Species (ROS) yang
menyebabkan disfungsi endotel,lr yang
ditandai dengan penumr'an kadar Nittic oxide
(NO). 't
Nitric oxide merupakan ehdothelium-
derired relaxing /aclo/ (EDRI) untuk
relaksasi otot polos pembuluh darah, yang
mengalibatkan vasodilatasi pembuluh darah
dan meningkatkan aliran darah.rl NO di dalam
jaringan dibentuk oleh L-arginine dibanit
101
enzifi endothelial nilric oxide synthase
(eNOS) dengan kofaktor NADPH, oksigen
(Ot, dan tetrahydrobiopterin (BH4)
menghasilkan Z-citrl/ire serta nitat dan nitrit
sebagai metabolit antara.ll'I5 No yang tidak
digunakan dioksidasi menjadi nitdt, jika NO
diperlukan kembcli. nitrit dalam jaringan
direduksi menjadi NO dikatalisis oleh enzim
tanthine oxidase (XO). Kadar nitrat dan nitdt
dalam darah relatif stabil, sehingga total kadar
nitrit dan nitrat serum (No*) dipakai sebagai
I5
indikator sintesi s No tubuh.
Biji kakao (Theobroma cacao L.)
merupakan salah satu sumber antioksidan
alami yang banyak dibudidayakan di
Indonesia serta memiliki harga jual yang
relatif terjangkau. Biji kakao atau cokelat
merupakan slrmber bahan makanan yang kaya
kandungan antioksidan flavonoid. Jenis
flavonoid yang terdapat adalah monomer
flavan-3-ol (lavanols) melipvtl epicatechin
d,at catechifi, ser{a oligomer flavanols yaill.r
procyanidin. Konsumsi makanan yang kaya
kandungan flavonoidnya telal terbukti
memiliki manfaat untuk kesehatan j antung dan
pembuluh darah.l6 Kandungan fTalczols pada
biji kakao secara kualitatif sangat berrariasi
tergantung sumber dan proses fermentasinya
namun secala kuantitatif berbeda disebabkan
oleh perbedaan iklim tempat tumbuhnya
tanaman kakao.l?
Manfaat biji kakao telah banyak diteliti,
namun klasiatnya dalam mengatasi keadaan
stes oksidatif yane diakibatkan oleh
dislipidemia masih perlu dilakukan penelitian
Iebih lanjut, terutama biji kakao yang
bersumber dari daerah Bali. Oleh karena itu
penelitian ini ingin mengetahui pengaruh
pemberian ekstrak biji kakao (Theobroma
cacao L.) tethacfap profil lipid dan NOx darah
tikus jantan dislipidemia.
METODE
Penelitian ini merupakan penelitian
eksperimental mumi dengan desaln pre and
 PROSIDI]ft' SEMI'I IR II WAH IBDVT /2015) 1

,1
post test conlrol group design. Wak[t Pl diberikan ekstrak
P0, kelompok perlakuan
pcnelitirm selama 3 bulan yang berlangsung biji kakao 70 mg per ekor per hari, P2 pi
mulai bulan Juni 2012 sampai dengan Agustus diberikan 140 mg dan P3 diberikan 280 mg
d1
2012. Tempat penelitian adalah di Bagian selama 14 hari. Setelah 14 hari, dilakukan
Farmakologi dan Bagian Biokimia Fakultas pengambilan darah melalui medial canthus ."1

Kedokteran Udversitas Udayana. sinus orbitalis untuk pemeriksaan profil lipid

Populasi dalarn penelitian ini adalah tikus dan pemeriksaan NOx darah. Makanan tinggi
I

putih jantan g..lot llistar yang berumur 4-5 kolesterol adalah campuran khusus yang
bulan yang drpetoleh dali Animal Labordtory diperoleh dari Bagian Farmakologi FK Unud.
Unit (ALU) Bagiar Farmakologi FK Unud. Ekstrak biji kakao adalah hasil ekstraksi l

l
Besar sampel ditentukan dengan rumus dari biji kakao kering yang telah dikupas kulit
Pocock, masing-masing kelompok 5 ekor bijinya. Brji kakao diblender sampai halus, :

dengan berat badan 180-200 gram.
Variabcl bebas dalam penelitian ini
adalah ekstrak biji kakao, variabel tergantung
adaiah kadar profil lipid darah dan NOx darah,
variabel kendali adalah ienis kelamin,
kesehatan, berat badan, makanan, umur dan
lingkrngan. Semua tikus diberikan makanan
tinggi kolesterol sclama 2l hari, kemudian
dilakukan pre-test. Kemudian tikus
dislipidemia dibagi secara acak sederhana
menjadi 4 kelompok dan tetap diberikan
makanan tinggi kolesterol, kelompok control
500 gram bubuk kakao dimaserasi ,l
menggunakan etanol 96% selama 48 jam, lalu
diuapkm menggunokan eraporalor sarnpai :
dihasilkan ekstral biji kakao dan siap p
d
digunalan unruk penelitian. Penelitian ini
telah mendapatkan kelaikan etik dari Komite
Etik Litbang FK Unud/RSUP Sanglah.
Data )ang dipcroleh pada penelilian ini
dianalisis dengan u.ji. One Way Anova unitk
mengetalrui perbedaan anta.r kelompok,
dengan derajat signifrkansi ditetapkan dengan
nilai p<0,05.

l(olest€rolTotal

!-
!-
x'*

$-
d
Ill
*i
€d
s-^
I

i1 :i:
xx, *tr I
4:
'^ ^../ w
Gambar l. Kaddar Kolesterol fotal
T (A;, frigliserida Pj, }IDL
setelah pemberi
rian ekstrak bijil
i kakao dengan tiga variasi dosis
 PR'SIDING St:I,uNAIt TLMIAII PBBMI (2015)
HASIL
Hasil penelitian yang meliputi
pemeriksaan profil lipid dan kadar NOx darah
dapat dilihat pada gambar I dan 2.
NOx
Gambar 2. Kadar NOx sebelum dan setelah
pemhlridn eksrdk biji kakao dcngdn liga \aria.i
dosis
Pada Gambar 2 disalikan hasil
NOx antara
pemeriksaan pre-test berupa kadar
kelompok kontrol dan kclompok perlakuan
ekstrat biji kakao Pl, P2 dan P3 tidak ada
lerbedaaD secara statistik (P:0,577). Dari
gambar di atas dapat dilihat bahwa hasil
pemeriksaan NOx setelah perlakuan
mcnunjukkan perbedaan yang tidak bermakna
rP=0.480t. PaLla lelompok konrrol ;airu
kelompok yang diberikan makanan tinggi
kolcsterol selama lima minggu lanpa ekstak
biji kakao pada kadar NOx tidak mengalami
perubahzut sedangkan pada kelompok
perlirkrLan Pl, P2 dan P3 kadar NOx
nengalami peningkatan tidak
bemrakna secara statistik.
PIIMBAHASAN
llasil penelitian ini menunjukkan bahwa
ekstrak biji kakao mcmiliki efek hipolipi-
deniik namuntidak dapat meningkatkan kadar
NOx. Hasil pemeriksaan profil lipid dalam
pelelitian inirncnunjukkan kemampuan
ekstrdk biji kakao mernperbaiki profil lipid
dalam batas nonnal. Koiesterol total pada
103
kelompok kontrol sctelah diberikan makanan
tinggi kolesterol selama lima minggu tetap
tinggi dari 254,39 mg/dl menjadi 267,03
mg/dl. Sedangkar pada kelompok perlakuan
mengalami penurunan terutana pada
kelompok P3 (260,39 ng/dl menjadi 95,99
mg/dl). PenurunaD kolesterol total pada
kelompok perlakuan Pl, P2 dan P3 bermakna
secara statistik (P:0,000), hal yang serupa
terjadi pada variabel trigliserida dan LDL.
Untuk HDL berlaku sebaliknya yaitu terjadi
peningkatan kadar HDL pada kelompok
pcrlakuan P1, P2 dan P3 secara bern]akna
(1L0,000) sedangkan pada kelompok kontrol
tidak mengalami perubahan. Kandungan
llavonoid yang cukup Linggi pada biji LakaoL6
mampu menuunkan kadar kolesterol total,
lrigliserida, LDL dan meningkatkan HDL.
Hasil penelitian ini sesuai dengan pembcrian
bubuk kakao pada tikus hiperkolesterolemia
yang menunjukkan penurunan kadar
kolesterol total, triglise da, LDL dan MDA
r8
disertai peningkatan HDL.
Antioksidan Jlavarutls yang terdapat pada
ekstrak biji kakao bekerja di membran sel
dengzur menangkap radikal bebas yang
terbentuk di membran sel. Mekanisme kerja
flavanols pada membran sel menetralisir
radikal bebas asam lemak tidak jenuh (peroxyl
pobansaturated fatty acid) atan PUFA-OO.
pada membran phospholipid sel dan
mengubahnya menjadi hydroperoxy
polyunsaturated fatty acld (PUFA-OOH) yang
tidak lagi bersifat radikal bebas, sehingga
oksidasi lipid membran sel menurun.le Hasil
penclitian ini juga sesuai dengan bcberapa
penelitian lain sepefii pemberian ekstrak biji
lerlelai hitam lang mengandung anrosianin
dapat memperbaiki profil lipid, karena dapat
menurunkan kolestcrol total dan trigliscrida
secara bermakna dan meningkatkan I{DL.'?o
Ekstra-k air daun ubijalar ungu menunjukkan
fungsi hipolipidemik pada tikus yang
diberikan makanan tinggi kolesterol ditandai
 704
dengaLn penurunan kadar kolesterol total,
trigliscrida, LDL dan peningkatan kadar
1lDL.2!
-ferdapat
peningkatan kadar NOx plasma
yang secara statistik tidak berbeda bermakna
,cb.lum dan selelah intcnensi pada masing-
masing kelompok. llasil pcnelitian ini tidak
sesuai dcngan penelilian yang dilakukan oleh
Murphy dkk yaitu pemberian bubuk kakao
yang mengandung 891 mg.flalanols setelah 6
jun memiliki efck yang sama dengan
pembcrian bubuk kakao yang mengandung
231 mg Jlalanols selama 4 minggu, yaitu
sama-sdna menghambat aktivitasi dan fungsi
platelet sehingga dapat mencegah tedadinya
plak ateroklerosis. Hal ini dimungkinkan oleh
NO teroksidzui menjadi nitrat dan nitrit.22
SIMPUI-AN
lkstrak biji k.kao
dapat mencegah
terjadinya dislipidemia ditzurdai dengan
penurunan kadal kolesterol total, trigliserida
dan LDL disertai pcningkatan kadar HDL,
namrn belum efektif untuk meningkatkan
kadar NOx untuk mencegah terjadinya
dislungsi endotel.
UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti menyampaikan terima kasih
kepada Litbang FK Unud atas bantuannya
membedkan dana penelitian sehingga
pcnelitiar ini dapat dikerjal,an sebagalmara
n1estinya.
DAFTAR PUSTAI'A.
l. Profil Kesehatan Indonesia 2005. Jakafa:
Departemen Kesehatan Indonesia; 2007.
2. Mayes PA, and Botham, KM. Lipids of
Physiologic Significance. In: Muray RK,
Cranner DK, Mayes PA, and Rodwel VW
(editors). Harper's Illustratcd Biochemistry.
26th. Ed. New York: McGraw Hill.
2003 t1 1 1 -121 .
L K, Arjunan MM, and Pugalendi
Kaviarasan
KV. Lipid Profile, Oxidanlantioxidant Status
and Glycoprotein Components in llypcr-
PROSIDTNG SEMINAR N"MIAH PBBMI (2A] 5)
lipidemic Patients With/without Diabetes.
C I inica C hi n iLa Ac ta. 200 5 :3 62: 49- 5 6.
4. Vecera & el.d/. Antioxidant Status, Lipo-
pmtein Profile and Liver Lipids in Rats F€d
on High-Cholesterol Diet Containing Currant
Oil Rioh in n-l and n-6 Polyunsaturated Fatty
Acrds. Physiol. Res. 2003;5211'77 -187 .
5. Kusumawati D. Bersahabat de gdn |-Iev,an
a-ora Yogyakarta: Gadjah Mada Universily
Press. 2004;,12 - 43.
6. Nichols JL. I'he Laborator! ,Rdt. Florida
AtlanLic UDi\er.iry. 2001. lciLcd: 7 Jirnuari
20101. Ava;lable fromr
http://www.fau.ed t/research/ovs/VetData,/rat.
php.
7. Sunarsih ES, and Prasetyastuti. Pengaruh
Pemberian Juice Lidah Buaya terhadap Kadar
Lipid Peroksida (MDA) Pada Tikus Jantan
Hiperlipidenria. Majalah Obat liadisional
2008;,{5( l3):145- I s2.
8. Mortzzavimoghaddam SG, Zarban A, ard
Rezvani M. The Elfect Of Vitamin E
Supplementalion On Lipid Profile And
Oxidsri!e Strcss \4arksri ln IIemodiatl"L
Patients.,4RL.1 Atherosclercsis Joumal.
2007;3(3):139-142.
9. Jiyeon K, Yeon KS, Minsook L, and
Hongsco( Ahn. Lllccl of vegctable iuice
supplementation on scrurn lipid profilc and
antioxidant activity in college women-
Korean Journol of C,nmuniry Nurrition.
2005: l0(2):183-188
t0 McNulty.A. Diffcrcntial Effects of
Carot€noids on Lipid Peroxidation due to
Mcrnbranc lnremcrionr:X-ra1s Diffracrion
Aialysis. Biochimic.l etBiophysica Acta.
2007 ;17 68tl6'7 -'14 .
ll. Red6n J, Oliva MR, Tormos C, Giner V.
Chaves J, Iradi A, Siez GT. Antioxidant
Activities and Oxidative Stress By Products
jn Human Flypertension. Hlpertension- 2003i
4l:1096- I 101 .
12. Granger JP, Alexander BT, Llinas MT,
Bennet WA, Khalil R4. Pathophysiology of
Hypenension During Prceclampsia Link ing
Placental Ischemia With Endothelial
Dysfirnction- IIwertension. 2001;38(2):718-
'722
13. Cerielo A. Possible Role of Oxidative Strcss
in 'Ihe Pathogenesis of Hypertension.
Diabetes Care. 2008,3 I (2): S181-S I 84.
14. R&D Systems. Nitric Oxide Synthases. 2000
ldiakses 1 Ju i 201 ll; Diund[h dafl :
 PROSID|NG SEMINAR ILMIAII PBBM] (20]5)
hitpi//rndsystems.com/miDi_review ddail ob
jectname MR00 \OS.aspx
15. Lundberg JO, Weitzberg E. NO ceneration
Irom Nitrite and Its Role in Vascular Control.
A e oscler Thlotnb Vasc Biol. 2005;25..915-
22.
16. Mao TK, Van De Water J, Keen CL, Schirz
HH, Cershwin ME. Cocoa Flavanols and
Irocyanidins Promote Transfoming Grou4h
Factor-pr Homeostasis in Peripheral Blood
Mononuclear Cells. nrp Biol Med.
2003:228:93-9
17. Niemenak N, llohsius C, Ulwers S, Ndoumou
DO, dan Lieberei R. Original Article :
Comparative Study of Different Cocoa
(Theobrorna cacao L.) Clones In Tems Of
Their Phenolics and Anfiocyanins Contents.
Journal ol Food Compo,uion anJ Analytis.
2006119:6)2-619.
18. Lecumbeffi E, et lr/. Basic Nutdtional
Investigation : A Diet Rich In Dietary Fiber
From Cocoa Improves Lipid profile and
Reduces Malondialdehyde in Hypercholes_
terolemic Rats. ?y'rrtio n. 2007:23:332-341 .
19. Bender DA, and Mayes pA. Vitamins and
Minerals. In: Murmy RK, Granner DK,
Mayes PA, and Rodwel VW (editors).
Harper's Illustrated Biochemistry. 26rh. Ed.
New Yorki Mccraw Hill. 2003;481-497.
20. Kwon SH. Anli-obesity and Hypolipidemik
E[Iects ol Black Soybean Anthoc)aninr.
Journal of Medicinal Food. 2A07;10(3):552-
6.
21. Sumardika lW, Jawi IM. Ekstrak Air Daun
Ubijalar Ungu M€mp€rbaiki profil Lipid dan
Meningkatkan Kadar SOD Darah Tikus yang
Diberi Makanan Tinggi Kolesterol. Medicina.
2012;43:6'7 -7 1 .
22. Murphy KJ.et al. Diet Containing Cocoa
Powder With Flavanols and procyanidins
Inhibits platelet function. proceedings o.f The
Nutition Soc iety of Axtsrralia. 2001 :25:579 .