Aktivitas Antimikroba dan Sitotoksik dari Jamur Endofit yang Diisolasi dari Tanaman
Mangrove Sonneratia alba Sm
Dian Handayani 1 *, Harrizul Rivai Rizka Mulyana Netty Suharti Roslaili Rasyid Triana Hertiani
1, 2, 1, 3, 4
Sejarah artikel: Jamur endofit adalah jamur yang tumbuh intra atau interselular dalam jaringan tanaman tingkat tinggi tanpa menyebabkan penyakit. Penelitian ini
Diterima pada: 17/09/2017 bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas antimikroba dan sitotoksik jamur endofit dari daun, kulit kayu dan akar mangrove. Sonneratia alba Sm,
Diterima pada: 12/12/2017 dikumpulkan dari Bungus, Sumatra Barat, Indonesia. Isolasi jamur endofit dilakukan dengan menggunakan metode penanaman langsung dengan
Tersedia online: 27/02/2018 sabouraud dextrose agar (SDA) sebagai media pertumbuhan. Tiga belas isolat strain jamur diperoleh dari mangrove ini. Mereka dibudidayakan
dengan beras yang tidak dipoles sebagai media selama ± 4 minggu, dan diekstraksi dengan etil asetat. Ekstrak etil asetat dianalisis untuk
aktivitas antimikroba dan sitotoksik dengan menggunakan metode difusi agar dan uji MTT pada sel T47D dan Vero. Studi ini mengungkapkan
Kata kunci:
sembilan (69%) dari total ekstrak memiliki aktivitas antimikroba terhadap bakteri patogen dan jamur seperti, Staphylococcus aureus, Escherichia
Jamur endofit, mangrove, Sonneratia
coli dan Candida albicans. Sementara sembilan ekstrak (69%) adalah sitotoksik (Persentase viabilitas sel <50) terhadap sel T47D. Berdasarkan hasil
alba Sm, aktivitas antimikroba,
skrining aktivitas antibakteri, tiga isolat jamur dipilih sebagai yang paling aktif melawan S. aureus, E. coli dan C. albicans. Isolat jamur yang dipilih ini
aktivitas sitotoksik, Trichoderma
pertama kali secara makroskopis dan mikroskopis dan kemudian diidentifikasi secara molekuler sebagai Trichoderma koningiopsis, Aspergillus
koningiopsis, Aspergillus sydowii,
sydowii dan Trichoderma lixii
Trichoderma lixii.
masing-masing. Penelitian ini menyimpulkan bahwa jamur endofit dari Sonneratia alba Sm dapat dikembangkan sebagai sumber baru senyawa antibiotik dan
antikanker.
PENGANTAR banyak dilakukan. Sebagai kelanjutan dari pekerjaan kami pada bahan alami yang
Jamur endofit terestrial yang ditemukan pada daun, batang, dan berasal dari darat dan laut ( Handayani dan Artasasta, 2017 ;
akar bakau lebih banyak daripada jamur laut ( Latha dan Mitra 1998 ). Jamur Handayani dan Aminah, 2017 ; Handayani et al., 2016 , Handayani et al., 2015 ), kami memeriksa jamur
endofit dikenal sebagai sumber metabolit sekunder yang berlimpah. Banyak endofit dari mangrove S. griffithi Kurz dalam memproduksi
jamur endofit menghasilkan metabolit sekunder yang sangat menarik dalam hal senyawa antibakteri ( Handayani et al.,
aktivitas dan struktur kimianya. Metabolit sekunder seperti alkaloid, turunan 2017 ). Berdasarkan potensi ini, penelitian terus menerus tentang skrining untuk kegiatan
fenolik, terpenoid dan steroid memainkan peran penting sebagai kandidat antimikroba dan sitotoksik lainnya Sonneratia spesies, seperti S. alba Sm telah
potensial dilakukan.
Pemutaran aktivitas antimikroba dan sitotoksik dilakukan pada ekstrak jamur
senyawa obat, dan berguna dalam industri agro-kimia ( Strobel dan Daisy, 2003 ; Alfaro
yang
dan Boyman, 2011 ). Penelitian tentang metabolit sekunder yang diproduksi oleh diisolasi dari daun, kulit kayu, dan akar tanaman. S. alba Sm dikumpulkan dari
jamur endofit dari mangrove sebagai senyawa penghasil obat telah dilakukan Sumatra Barat, Indonesia.
*
Penulis yang sesuai
Dian Handayani, Fakultas Farmasi, Universitas Andalas,
Padang, Indonesia. E-mail: dianh_17 @ yahoo.com Untuk mengisolasi jamur endofit, daun segar, kulit kayu, dan akar
S. alba Sm dikumpulkan dari Pantai Nirwana, Barat
© 2018 Dian Handayani et al. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Lisensi Atribusi Creative Commons -NonCommercial- ShareAlikeUnported
Licence (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/).
Handayani et al. / Jurnal Ilmu Farmasi Terapan 8 (02); 2018: 049-
5 053
Sumatra, Indonesia. Sampel daun, kulit kayu, dan akar diambil sebanyak ± 100 kristal formazan terbentuk dan diinkubasi pada suatu malam pada suhu kamar.
gram dan kemudian dimasukkan ke dalam wadah plastik yang bersih dan Pelat kemudian dibaca oleh pembaca ELISA pada 540 nm ( Permanasari et al., 2016 ).
steril dan diangkut ke laboratorium.
% Viabilitas sel kemudian dihitung dengan persamaan
Isolasi, penanaman, dan ekstraksi metabolis sekunder dari jamur endofit
bovine (Gibco) dan streptomisin dan penisilin (2%, Sigma-Aldrich, USA). Garis penghambatan tertinggi pada pertumbuhan E. coli dan C. albicans dengan
suasana.
Larutan stok disiapkan dengan melarutkan sampel dalam DMSO dan
diberi konsentrasi 100.000 ppm. Sel
yang telah diinkubasi 24 jam,
kemudian dibagi menjadi beberapa Sel-sel yang telah dirawat dan
kelompok, yaitu perlakuan, kontrol diinkubasi 24 jam kemudian dibuang ke
positif, kontrol sel dan kontrol media seluruh media dan dicuci menggunakan PBS
(kosong). Dihapus media dan dicuci steril. Kemudian di setiap sumur
menggunakan PBS steril yang ditambahkan 100 mL MTT (5mg / ml) diikuti
masing-masing sumur ditambahkan oleh inkubasi 4 jam dalam inkubator pada
100 μl PBS. Kemudian, 100 μl masing- 37ºC, 5% CO 2. Untuk setiap sumur
masing bahan (ekstrak) ditambahkan ditambahkan 100μl SDS 10% untuk larut
ke setiap sumur dengan satu
konsentrasi (100 ppm). Sebagai kontrol
positif digunakan dengan doxorubicin.
Kemudian diinkubasi selama 24 jam
dalam inkubator pada suhu 37ºC, 5%
CO 2.
Handayani et al. / Jurnal Ilmu Farmasi Terapan 8 (02); 2018: 049-
053
5
Skrining
aktivitas sitotoksik
semua ekstrak pada
T47D dan Vero sel
dievaluasi seperti
yang disajikan pada
Gambar
1. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa 9
(69,2%) dari 13 ekstrak
yang diuji adalah
sitotoksik dan
menunjukkan persentase
nilai sel viabilitas ≤ 50%.
Dari jumlah tersebut, 6
ekstrak (46,1%) dari
semua ekstrak
ditemukan memiliki
persentase nilai sel
viabilitas ≤ 20%. Ekstrak
jamur dengan
persentase viabilitas
terendah (≤ 50%)
terutama terhadap sel
kanker T47D
diekstraksi SaDa1,
SaDa2, SaDa3, SaDa5,
SaDa6 dan SaKB3
(Gambar 1). Persentase
viabilitas ekstrak
terhadap sel kanker
T47D sangat bervariasi
dan beberapa di
antaranya tidak
beracun bagi sel
normal (Vero).
Tabel 1: Aktivitas antimikroba dari ekstrak jamur endofit yang diisolasi dari mangrove S. alba SM.
SA EC CA
1% - - -
3 SaDa3 3% - - -
5% - - -
1% 7,58 ± 0,10 - -
1% - - -
1% 7,70 ± 0,00 - -
1% - - -
Berdasarkan hasil BLAST pada database NCBI pada sampel gen memiliki kemampuan dalam memproduksi metabolit yang berbeda
RNA ribosomal urutan 18S SaKB4 diperoleh homologi 99% dengan tergantung pada faktor-faktor ekologis, dan strain tersebut menunjukkan
Trichoderma lixii mengisolasi gen RNA ribosomal F481RSF1518S, urutan
berbagai efek pada
parsial; internal transcription spacer 1, 5.8S gen RNA ribosom, dan internal
patogen. Jamur laut
transcription spacer 2, urutan lengkap; dan gen RNA ribosom 28S, urutan
Trichoderma Spesies dilaporkan signifikan dalam aktivitas anti kanker silico
parsial.
terhadap protein kanker kulit dan payudara manusia. Jamur laut Trichoderma
harzianum diisolasi dari pantai sedimen Teluk Arab di Fawregion di Irak selatan
memiliki potensi untuk aktivitas antibakteri dan antijamur ( Jafar et al., 2016 ). The
Berdasarkan penelitian dilaporkan bahwa pada setiap tanaman
koninginins NQ, empat polyketides jamur baru, dan empat analog yang
dapat ditemukan satu atau lebih jenis mikroba endofit ( Strobel dan Daisy, 2003 ).
diketahui diisolasi dari jamur endofit Trichoderma koningiopsis YIM PH30002 dari
Mikroba endofit telah tumbuh untuk menjajah batang, akar, tangkai daun, bagian
Panax notoginseng ( Liu et al.,
daun, gulma berbunga, buah, kuncup dan biji ( Stępniewska dan Kuzniar,
2013 ). Menurut Dudeja dan Giri, 2014, populasi endofit pada spesies tanaman sangat
bervariasi dan tergantung pada berbagai komponen, seperti spesies inang, 2016 ). Genus jamur dari Aspergillus dikenal sebagai sumber potensial senyawa
tahap pengembangan inang, kerapatan inokulum, dan kondisi lingkungan. bioaktif di bidang farmasi. Turunan aspergifuranone dan isocoumarin diproduksi
oleh jamur endofit bakau Aspergillus sp. 16-5B. Jamur diisolasi dari daun
Sonneratia apetala dari Cagar Alam Nasional Mangrove Dongzhaigang di
Jamur endofit telah diketahui menghasilkan beberapa obat Pulau Hainan,
antibiotik dan antikanker yang potensial. Sitotoksik jamur
Cina. Semua senyawa yang diisolasi dievaluasi untuk aktivitas
penghambatan α-glikosidase, dan Aspergifuranone
menunjukkan aktivitas penghambatan yang signifikan dengan IC 50 Nilai dari
Penapisan Jamur Simbiotik dari Marine Sponge Petrosia nigrans
9,05 ± 0,60 μM ( Liu et al., 2015 ). A. sydowii telah dilaporkan terutama dari
dikumpulkan dari Pantai Selatan Sumatra Barat Indonesia. International Journal of
sumber laut dan menghasilkan beberapa senyawa yang aktif secara Pharmacognosy and Phytochemical research, 2016; 8 (4): 623-
biologis. Satu
alkaloid baru, dinamai acremolin C, diisolasi dari kultur statis jamur Antartika,
Handayani D, Ahdinur, RF, dan Aktivitas Antimikroba Jamur Endofit Rustini
Aspergillus625.
sydowii SP-1, dan menunjukkan aktivitas penghambatan yang lemah terhadap
R. dari Spons Laut Haliclona fascigera.
MRSA dan MRSE ( Li et al., 2017 ). Jurnal App Pharm Sci, 2015; 5 (10): 154-156.
Jafar FN, Al-Kamil ML dan Al-Salihi NJ. Isolasi dan Identifikasi
Senyawa Bioaktif dari Strain Baru Trichoderma Harzianum dan Perkirakan
KESIMPULAN Bioaktivitasnya. Jurnal Ilmu Kimia, Biologi, dan Fisik. 2016; 6 (2): 459-468.
asetat jamur simbiotik dari spons laut Sumatera Barat Acanthrongylophora ingens. J App Cara mengutip artikel ini:
Pharm Sci, 2017; 7 (02): 237-240. Handayani D, Ornando R dan Rustini, Aktivitas Handayani D, Rivai H, Mulyana R, Suharti N, Rasyid R,
Hertiani T. Antimikroba dan Aktivitas Sitotoksik dari Jamur Endofit
Antimikroba
Terisolasi dari Tanaman Mangrove Sonneratia alba Sm. J App
Pharm Sci, 2018; 8 (02): 049-053.