Nama : Ni Made Novi Puji Widiastuti

NIM : P07134019030

Kelas : III A

Mata Kuliah : Hematologi

Topik : Pemeriksaan Hb Cyanmet

Tujuan Pembelajaran

Tujuan dari video ini adalah untuk memberikan informasi kepada penonton tentang estimasi
hemoglobin dengan metode Drabkins.

Dalam video membahas:

 Prinsip
 Prosedur
 Kontrol kualitas
 Interpretasi hasil

Estimasi Hb dengan Metode Cyanmet hemoglobin

 Metode yang direkomendasikan secara internasional atau menentukan hemoglobin

Prinsip:
Larutan darah + Reagen (Kalium sianida dan kalium ferrisianida)

Mengalir Hb menjadi methemoglobin

Cyanmethemoglobin

Absorbansi dipastikan dalam

- Spektrofotometer pada panjang gelombang 540 nm
- Colorimeter menggunakan filter kuning hijau

Peralatan yang digunakan :

 Mikropipet
  Colorimeter atau Spektrofotometer
- Prinsip diterapkan – Sama
- Estimasi tersedia Wavelenghts – Berbeda

Reagen yang dibutuhkan :

 Larutan Drabkins
- pH larutan 7.0-7.4
- Tidak stabil jika terkena cahay
- Simpan pada suhu kamar dalam botol borosilikat berwarna coklat
- Larutan harus bening dan berwarna kuning pucat
- Suhu kamar > 300 C kemudian simpan di lemari es tetapi dibawa
digunakan
- Tersedia secara komersial pada konsentrasi tertentu
- Simpan dalam botol coklat karena isi fotosensitif
- Paparan cahaya menyebabkan kerusakan pada kekuatan standar.
- Konsentrasi standar yang digunakan dalam demonstrasi ini adalah 14,
8 gram % ( turunan dari jumlah ini akan dibahas nanti)

Buang larutannya :
- Turbid
- pH di luar kisaran
- Jangan memipet larutan melalui mulut

 Larutan Hb Standar
- Tersedia secara komersial di konser tertentu
- Dicoreng dalam botol coklat karena fotosensitif
- Paparan cahaya menyebabkan kerusakan adalah kekuatan standar
- Konsentrasi standar yang digunakan dalam demonstrasi ini adalah 14,8
gm%
(Penurunan angka ini akan dibahas nanti)

 Sampel
- Darah vena dalam tabung EDTA
 - Darah kapiler dengan tusukan jari

 Prosedur
1. Ambil 5 ml pembatalan perangkap dalam tabung uji, campur sampel darah
dengan inversi lembut dan gambar titik 0,2 ml darah ke dalam hipot
menghapus permukaan luar pipet dengan kertas tisu untuk menghilangkan
kelebihan darah.
2. Tempatkan pipet ke dalam tabung yang mengandung pembatalan drop dan
perlahan-lahan mengeluarkan darah ke dalam larutan, aduk rata dan
biarkan berdiri terganggu selama 15 menit.
3. Ukur penyerap larutan ini pada 540 nanometer dalam spektrofotometer
setelah menyesuaikan kerapatan optik pada nol dengan menggunakan
larutan Ratkin kosong

 Hitung Konsentrasi Hemoglobin

Kons. dari Hb dalam sampel = Absorbansi sampel X Kons. standar
Absorbansi standar

- Konsentrasi standar tersedia pada sisipan kit

- Ukur absorbansi terhadap larutan Drabkin yang kosong
 Penyusunan kurva Standar untuk estimasi Hemoglobin dengan metode
Cyanmethemoglobin
- Konsentrasi standar yang digunakan dalam demonstrasi ini adalah 14,8
gm%
(Penurunan angka ini akan dibahas nanti)
- Standar HiCN referensi Internasional WHO juga tersedia secara
komersial sebagai ampul bersegel 10 ml & stabil selama bertahun-
tahun
- Buat pengenceran serial dari larutan standar dengan larutan Drabkins
Dalam tabung uji pertama mengambil 5 ml larutan Drabkin , dalam
tabung uji kedua membuat 1 ml standar dengan 4 ml larutan Drabkin.
Pengenceran pada standar adalah dengan demikian 1 dari 5 atau 0,2 ,
mari kita sebut ini faktor pengenceran, dalam tabung uji ketiga
membuat 2 ml standar 3 ml larutan Drabkin, faktor pengenceran di sini
 akan menjadi 0,4. Dalam tabung uji keempat, campuran 3 ml standar
dengan 2 ml konsesi drop, faktor pengenceran adalah 0,6. Dalam
tabung uji kelima, campur empat 4 ml standar dengan 1 ml larutan
Drabkin, faktor pengenceran adalah 0,8. Dalam tes keenam,
mengambil 5 ml solusi standar hanya karena ini adalah standar murni
faktor ilusi dapat diambil sebagai salah satu sebagai kekuatan standar
tahu bahwa adalah 14,8 gram / dl.
 Kekuatan standar = 14,8 mg / Dl
 Nilai Hb = Faktor pengenceran X Kekuatan standar

Setelah OD sampel diambil, nilai Hb yang sesuai dapat langsung terbaca,

dengan memplot pada grafik

Kurva kalibrasi baru harus disiapkan kapan pun

- Metode pengujian
- Colorimeter ada perubahan
- Jenis cuvette
- Banyak reagen

 Keuntungan :
- Semua bentuk Hb kecuali sulfhemoglobin diubah menjadi
cyanmethemoglobin
- Kesalahan visual dihilangkan karena tidak diperlukan pencocokan
warna
- Standar referensi yang andal dan stabil tersedia dari WHO untuk
perbandingan langsung

 Kerugian :
- Kalium sianida adalah zat beracun dan itulah alasan mengapa larutan
Drabkin tidak boleh diulang melalui mulut
- Tingkat konversi karbokshemoglobin contailing darah sangat
melambat, memperpanjang waktu reaksi menjadi 30 menit dapat
mengatasi masalah ini
- Protein plasma abnormal menyebabkan kekeruhan ketika darah
diencerkan dengan larutan Drabdin
- Jumlah leukosit tinggi menyebabkan kekerbuditas pada pengenceran
darah, centrifuging darah diencerkan dapat membantu mengatasi
kekeruhan