Abstrak

Ulasan ini memberikan distilat kemajuan dalam pengetahuan tentang fungsi neurotransmitter asetilkolin
selama periode 50 tahun antara 1967 dan 2017, bersama dengan informasi tambahan tentang reseptor
asetilkolin nikotinik dan muskarinik serumpun, dan beberapa komentar singkat tentang kemungkinan
kemajuan dalam waktu dekat. Teks tersebut dilengkapi dengan gambar garis waktu yang menunjukkan
tanggal dari beberapa kemajuan utama dalam pengetahuan tentang reseptor asetilkolin dan gambar
kotak memberikan gambaran singkat dari makalah yang dipilih tentang asetilkolin yang diterbitkan pada
tahun 1967.

Pendahuluan: penelitian lingkungan 50 tahun yang lalu

Untuk menghargai apa yang diketahui atau tidak diketahui 50 tahun lalu, dan jika tidak, mengapa tidak,
penting untuk mengetahui apa yang sekarang fasilitas yang digunakan tidak tersedia untuk ahli saraf
laboratorium sebelum 1967.

1. Jadi, meskipun komputer mainframe (diakses oleh kartu berlubang) masuk tanpa PC atau lab
komputer. (Laboratorium terbaik kami mampu membayar pada tahun 1967 adalah Kalkulator 64-
langkah yang dapat diprogram dengan biaya lebih dari PC lakukan sekarang.)

2. Meskipun struktur DNA sudah dikenal (tahun 1953) dan kode genetiknya telah diurai pada tahun
1962, ternyata ada tidak ada cara kloning gen atau manipulasi gen, dan tidak Tikus 'knock-out' atau
siRNA knock-down untuk menguji apa a gen melakukannya.

3. Juga tidak ada informasi kimia atau struktural Informasi tentang protein membran seperti reseptor
dan ion saluran, dan tidak ada cara untuk melihat lokasinya dengan antibodi atau hibridisasi mRNA.

4. Ahli elektrofisiologi dibatasi untuk menggunakan mikroelektroda (tanpa penjepit tambalan) untuk
merekam dan aplikasi obat kation, tanpa bantuan visual untuk melihat neuron seperti GFP, tidak ada
indikator kalsium untuk memantau aktivitas atau optogenetica untuk melacak sirkuit.

5. Dalam hal pencatatan data, ini biasanya dilakukan langsung pada film fotografi (tunduk pada bahaya
pengembangan kamar gelap, ketika semua hilang jika seseorang menyalakan lampu) - baik komputer
maupun koreksi peningkatan tersedia.

6. Makalah ditulis di atas mesin tik (dengan karbon salinan kertas - tanpa pengolah kata atau mesin
fotokopi), atau terkadang hanya dengan tangan, dan dikirimkan untuk dipublikasikan oleh pos. Tidak
ada email atau Internet, dan tidak ada elektronik jurnal - untuk membaca referensi berarti pergi ke
perpustakaan dengan buku catatan atau sekumpulan kartu indeks di tangan.

Dalam keadaan seperti itu, seseorang hanya bisa terkesan dengan caranya banyak yang ditemukan.
Apa yang diketahui pada tahun 1967

Asetilkolin sebagai neurotransmitter

Pada tahun 1967, asetilkolin (ACh) diterima dengan kuat sebagai jurusan neurotransmitter di sistem
saraf tepi, termasuk saraf motorik somatik dan bagian dari sistem saraf otonom (lihat, misalnya
Goodman dan Gilmam, 1965; Krnjevic, 1974). Enzim untuk sintesisnya ('choline acetylase' = choline
acetyltransferase) dan degradasi (cholinesterase) telah diisolasi dan dipelajari secara biokimia.
Pelepasan ACh setelah stimulasi saraf lasi telah terdeteksi dari saraf parasimpatis vagal, saraf simpatis
preganglionik, kolinergik postganglionik saraf simpatis dan saraf motorik somatik. Sebuah pemancar
fungsi juga didukung oleh penghambatan oleh tubocurarine (saraf motorik, saraf simpatis preganglionik)
atau atropin (saraf parasimpatis postganglionik).

Transmisi di persimpangan neuromuskuler Informasi lengkap mengenai detail somatik transmisi saraf-
ke-otot telah dihasilkan oleh pekerjaan Bernard Katz dan rekan-rekannya (Katz, 1966). Fatt dan Katz
(1951) menggunakan teknik mikroelektroda R.W. Gerard yang baru-baru ini diperkenalkan (Ling dan
Gerard, 1949: J. cell. Comp. Physiol, 34.383 383) kepada membuat rekaman intraseluler pertama dari
potensi pelat-ujung dari persimpangan neuromuskuler katak. Menggunakan aksi otot potensial sebagai
cara yang rapi untuk mengubah tegangan membran, mereka menyimpulkan bahwa epp muncul dari
peningkatan konduktansi ionik secara umum (kation dan anion) yang menyebabkan hubungan pendek
sebagian potensi. Atas dasar studi lebih lanjut dengan pelacak radioaktif (Jenkinson dan Nicholls, 1961)
dan pengukuran potensial pembalikan di bawah penjepit tegangan (Takeuchi dan Takeuchi, 1960)
perubahan konduktansi hanya terjadi pada kation Na + dan K +, bukan anion. Ini menjadi model untuk
bentuk lain dari transmisi sinaptik rangsang (Eccles, 1957; Ginsborg, 1967):

Terlepas dari fakta bahwa mereka dapat diaktifkan asetilkolin dan nikotin (dan karenanya
diklasifikasikan sebagai 'Nicotinic' mengikuti nomenklatur Dale (1914)), dan dihambat oleh tubocurarine
dan alkaloid terkait, secara fisik sifat reseptor plat ujung otot sama sekali tidak diketahui. [Fatt dan Katz
(1951) bahkan tidak menyebutkan reseptor - mereka hanya mengacu pada interaksi asetilkolin dengan
membran pelat ujung.] Salah satu pendekatan ke reseptor adalah dengan menggunakan mengikat ligan
untuk mengetahui lebih lanjut tentang itu. Demikianlah, Peter Waser (1960) menggunakan
tubocurarine berlabel radioaktif untuk memulai melokalisasi reseptor pelat ujung dengan
autoradiografi. Namun, resolusinya buruk dan resolusi mikroskopis harus menunggu pengenalan α-
bungarotoxin selanjutnya. Juga, Waser dan lainnya (misalnya, Chothia, 1970) mencoba menyimpulkan
bahan kimia tersebut sifat situs pengikatan asetilkolin dari studi membandingkan congeners kimia.

Pelepasan pemancar

Kemajuan penting lainnya dari pekerjaan Katz di persimpangan neuromuskuler katak adalah penemuan
epps miniatur (Fatt dan Katz, 1952), yang mengarah pada perkembangan teori kuantal rilis pemancar
(lihat Katz, 1969). Ini, ditambah dengan penemuan vesikel sinaptik (de Robertis dan Bennett, 1955),
menyediakan batu fondasi untuk hampir semua studi selanjutnya pada rilis pemancar di sinapsis.

Transmisi antar neuron

 Pra-1967, rekaman mikroelektroda intraseluler juga diperoleh dari neuron simpatis, situs prospektif lain
dari transmisi kolinergik nikotinik yang sensitif terhadap tubokurarin (Blackman et al., 1963a, 1963b;
Eccles, 1955; Nishi dan Koketsu, 1960). Ini mengungkapkan proses transmisi yang sangat mirip dengan
itu di pelat ujung otot katak - postynaptic rangsang depolarisasi potensi (epsp), menimbulkan potensi
aksi yang dilapiskan; dan mepsps spontan (meskipun dengan frekuensi rendah kecuali ditingkatkan
dengan menaikkan (K +) keluar) membentuk komponen kuantal epsp:

Meskipun demikian, eksperimen lain menggunakan ekstraseluler metode pencatatan, mulai

menyarankan kehadiran proses sinaptik yang lebih lambat mengikuti aferen berulang stimulasi yang
dimediasi oleh reseptor muskarinik (sensitif atropin) (lihat Phillis, 1970). Kehadiran a komponen
muskarinik lambat ke eksitasi kolinergik Sel Renshaw di sumsum tulang belakang (lihat di bawah) juga
muncul (Curtis dan Ryall, 1966). Rangsang muskarinik lambat efek menjadi sasaran studi intensif di
tahun-tahun berikutnya, menghasilkan konsep baru pemrosesan informasi saraf dan mekanisme
pensinyalan intraseluler (lihat Brown, 2010).

Perbedaan lain antara pelat-ujung motor dan ganglion simpatik sudah terlihat pada tahun 1967 terkait
sifat reseptor nikotinik. Meski keduanya sensitif untuk tubocurarine, dalam upaya untuk mengontrol
hipertensi esensial sejumlah obat penghambat ganglion selektif telah berkembang yang memiliki sedikit
efek pada reseptor otot. Ini termasuk heksametonium (Paton dan Zaimis, 1949), pentolinium (Mason
dan Wien, 1955), dan mekamilamina (Stone et al., 1956). Jauh kemudian (setelah kloning file reseptor
nikotinik terungkap bahwa perbedaan antara ini reseptor saraf dan otot terkait dengan perbedaan
mereka komposisi subunit (lihat nanti).

Transmisi di CNS

Pada tahun 1967, ada banyak bukti yang menunjukkan hal penting peran ACh di CNS (lihat Feldberg,
1954; Krnjevic, 1974; Phillis, 1970). Itu hadir di dalamnya dalam konsentrasi tinggi, seperti adalah
choline acetyltransferase dan cholinesterase (Hebb, 1957). Menggunakan uji histokimia, Shute dan
Lewis (1963 & di tempat lain) menjelaskan agregasi spesifik neuron dan saluran proyeksi saraf tertentu
yang mengandung asetilkolinesterase konsentrasi tinggi, menunjukkan bahwa mereka kolinergik
(sebutan kemudian didukung oleh ko-lokalisasi dengan choline acetyltransferase: Levey et al., 1983).
Ada juga bukti farmakologis untuk kemungkinan fungsi pemancar (Goodman dan Gilman, 1965). Jadi,
menyuntikkan ACh sendiri ke dalam otak melalui ventrikel serebral menghasilkan berbagai efek perilaku.
Anti-kolinesterase penembus SSP (termasuk gas saraf DFP, sarin dan tabun, dikembangkan selama
Perang Dunia II) menggunakan berbagai rangsangan sentral efek, secara masuk akal disebabkan oleh
peningkatan efek yang dilepaskan secara alami ACh karena bisa dihilangkan dengan atropin. Nikotin
juga jelas memiliki efek sentral, termasuk penghambatan sekresi ADH melalui hipotalamus (direplikasi
dengan injeksi ACh lokal). Itu agonis muskarinik lipofilik pilocarpine, muscarine dan arecoline
menghasilkan gairah EEG kortikal, sedangkan hyoscine (skopolamin) desinkronisasi EEG dan
menghambat efek gairah fotostimulasi atau aktivasi pembentukan retikuler; dan skopolamin
memberikan efek amnesik yang terkenal (saksikan penggunaannya dalam kebidanan atau pengobatan
pra-anestesi untuk menghasilkan 'senja' tidur'). Atropin dan skopolamin juga diketahui efektif dalam
mengurangi tremor penyakit Parkinson, dan, dengan lebih banyak turunan lipofiliknya seperti
benztropin, adalah pengobatan penyakit andalan Parkinson sampai munculnya levodopa. Terakhir,
keluarnya ACh dari permukaan serebral korteks, dan peningkatannya dengan stimulasi aferen, bisa jadi
terdeteksi (Mitchell, 1963; lihat juga Kotak 1).

Salah satu cara untuk mengetahui topik apa yang membebani pikiran ahli saraf kolinergik 50 tahun yang
lalu adalah dengan melakukan penelusuran PubMed untuk 'asetilkolin dan 1967'. Contoh beberapa
makalah terkait tahun 1967, dengan catatan penjelasan, diberikan di bawah ini.

1. Collier B, Mitchell JF. (1967). Pelepasan sentral asetilkolin selama kesadaran dan setelah lesi otak. J.
Physiol. 188 (1): 83–98.

2. Szerb, JC. (1967) Pelepasan asetilkolin kortikal dan gairah elektroensefalografi J Physiol. 192 (2):
329–43.

3. Krnjevic K. (1967). Transmisi kimiawi dan gairah kortikal. Anestesiologi. 28 (1): 100–105. PMID:
6017417

Pelepasan asetilkolin sebelumnya telah terdeteksi dari permukaan korteks serebral (lihat Mitchell,
1964, dan referensi di dalamnya). Dua makalah pertama membahas pertanyaan tentang asal-usul
asetilkolin dan signifikansi fungsionalnya. Kesimpulan luasnya adalah bahwa pelepasan spontan
bergantung pada keadaan gairah perilaku hewan, dan pelepasan itu meningkat dengan menstimulasi.
struktur subkortikal yang menghasilkan gairah EEG. Ulasan oleh Krnjevic dengan baik merangkum apa
yang diketahui pada tahun 1967 tentang hubungan antara sistem kolinergik, gairah, perhatian dan
kesadaran dan masih sangat relevan (lihat Thiele, 2013).

4. Yamamoto KI, Domino EF (1967) Interaksi agonis-antagonis kolinergik pada aktivasi EEG neokortikal
dan limbik. Int J Neuropharmacol. 6 (5): 357–373. PMID: 6069723

Rinaldi & Himwich (1957. Arch. Neurol. Psychiat. 73: 396-402) menggunakan komponen kolinergik ke
sistem aktivasi retikuler otak tengah dari pengamatan efek atropin. Ini menyebabkan kebingungan studi
lebih lanjut (misalnya Bradley & Elkes (1957: Brain 88: 77-l 17.). Yamamoto & Domino menunjukkan
bahwa desinkronisasi EEG kortikal pada dasarnya adalah respons terhadap stimulasi reseptor muskarinik
(sekali lagi lihat Thiele, 2013).

5. Deutsch JA, Rocklin KW. (1967). Amnesia yang disebabkan oleh skopolamin dan variasi temporal.
Alam. 216: 89–90. PMID: 4292965.

Makalah ini memperkuat poin bahwa skopolamin memiliki sifat amnesia (Goodman & Gilman, 1965)
dan karenanya sistem kolinergik muskarinik terlibat dalam pengkodean dan penarikan kembali memori
(lihat Hasselmo, 2006: Curr Opin Neurobiol. 16: 710–715).

6. Phillis JW, Tebĕcis AK, York DH. (1967). Sebuah studi tentang sel kolinoseptif di nukleus genikulat
lateral. J Physiol. 192 (3): 695–713.
7. Yamamoto C, Kawai N. (1967). Tindakan presinaptik asetilkolin di bagian tipis dari guinea pig dentate
gyrus in vitro. Exp Neurol. 19 (2): 176–87. PMID: 6054723

Makalah oleh Phillis et al. adalah contoh dari banyak penelitian yang cermat tentang respons neuron
individu dalam sistem saraf pusat hewan yang dibius terhadap aplikasi obat (lihat Phillis, 1970, untuk
survei komprehensif). Makalah oleh Yamamoto & Kawai menunjukkan kilasan awal dari pendekatan
baru untuk studi tentang otak menggunakan irisan otak yang terisolasi. dipertahankan in vitro.
Yamamoto mulai merekam dari irisan otak saat bekerja dengan Henry McIlwain, yang sebelumnya
hanya menggunakannya untuk studi biokimia (lihat Yamamoto & McIlwain, 1966: J. Neurochem,
13,1333–1343; lihat juga Richards & McIlwain, 1967: Nature, 215.704–707). Dalam percobaan ini
membangkitkan potensi dicatat dengan elektroda ekstraseluler, tetapi neuron dalam irisan tersebut
kemudian terbukti setuju dengan rekaman mikroelektroda intraseluler (misalnya oleh Schwartzkroin,
1975: Brain Res., 85, 423–436; Scholfield, 1978: J.Physiol., 275, 535–546). Awalnya, penggunaan irisan
otak itu sangat ditentang oleh sekolah fisiologi Canberra dan murid-muridnya sebagai tidak fisiologis,
tetapi akhirnya menjadi pendekatan dominan sampai baru-baru ini ketika metode optik ditingkatkan
seperti karena optogenetika telah memungkinkan eksperimen in vivo yang lebih tepat.

8. McKinstry DN, Koelle GB (1967). Efek obat pada pelepasan asetilkolin dari ganglion serviks superior
kucing oleh karbachol dan oleh stimulasi preganglionik. J Pharmacol Exp Ada. 157 (2): 328- 336. PMID:
6039824

9. Koketsu K, Nishi S (1967). Depolarisasi asetilkolin terminal saraf preganglionik simpatis katak
banteng. Life Sci. 6 (11): 1169–1177. PMID: 4291844

Sedikit latar belakang. George Koelle melakukan banyak pekerjaan perintis pada lokalisasi
asetilkolinesterase (AChE) dalam sistem saraf dan membuat pengamatan yang menarik bahwa pada
ganglion, kepadatan pewarnaan tertinggi ada pada serat dan terminal presinaptik, bukan pada membran
postsinaptik seperti pada pelat ujung motorik. Ini, ditambah bukti lain, membuatnya menyarankan itu
asetilkolin yang dilepaskan dari ujung presinaptik diumpankan kembali ke reseptor asetilkolin
presinaptik untuk memperkuat proses pelepasan, dan bahwa AChE presinaptik berfungsi untuk
membatasi umpan balik positif ini. efek (Koelle, 1962: J.Pharm.Pharmacol., 14, 65-90; lihat juga Bab 21
dalam Goodman & Gilman, 1965). Salah satu bukti yang mendukung kemungkinan ini adalah yang
dimiliki oleh penulis makalah tahun 1967 sebelumnya menunjukkan bahwa karbachol dapat melepaskan
asetilkolin dari ganglion simpatis kucing yang perfusi (Mc Kinstry et al., 1963: Canad J Biochem Physiol,
41, 2599-2609). Makalah ini menunjukkan efeknya karbachol dapat diblok oleh heksametonium dan
tubokurarin akibat stimulasi reseptor nikotinik.

Hipotesis Koelle tentang tautan kolinergik diparalelkan dengan saran Burn & Rand tentang tautan
kolinergik dalam pelepasan pemancar dari serat adrenergik (Burn JH & Rand MJ. Nature. 1959; 184:
163–165.) Kedua hipotesis tersebut menimbulkan banyak diskusi dan argumentasi pada saat itu, tetapi
sejak itu meninggal secara wajar. (Pukulan telak terhadap ide Koelle adalah asetilkolin itu sendiri tidak
melepaskan radiasi asetilkolin olabelled: Brown et al., 1970: Nature, 226, 878-879). Lebih penting lagi,
bagaimanapun, pengamatan Koelle, ditambah dari Koketsu & Nishi pada ganglia simpatik katak banteng,
mewakili beberapa dari penelitian pertama menunjukkan adanya reseptor nikotinik presinaptik pada
ujung saraf; ini kemudian diakui sebagai bentuk fungsi fisiologis yang dominan (mungkin dominan)
reseptor nikotinik di otak, di mana mereka memfasilitasi pelepasan neurotransmitter (lihat McGehee &
Role, 1996).

10. Douglas WW, Kanno T, Sampson SR (1967). Pengaruh lingkungan ionik pada potensi membran sel
chromaffin adrenal dan efek depolarisasi asetilkolin. J Physiol. 191: 107–121. Pada tahun 1967,
diketahui bahwa asetilkolin menstimulasi sekresi katekolamin dari medula adrenal dan hal ini
tergantung pada keberadaan kalsium ekstraseluler, tetapi alasannya tidak diketahui. Dalam percobaan
tahun 1967 ini Douglas et al. membuat rekaman mikroelektroda substansial pertama dari sel meduler
adrenal gerbil yang dipisahkan. Dengan merekam respons potensial membran terhadap asetilkolin
dalam larutan yang mengandung konsentrasi kation yang berbeda, mereka menyimpulkan bahwa
'depolarisasi bukanlah, dengan sendirinya, peristiwa kunci dalam kopling stimulus-sekresi. Bukti
dipegang untuk mendukung pandangan bahwa pergerakan kalsium ke dalam sel chromaffin pada
paparan asetilkolin bertanggung jawab untuk membangkitkan sekresi '. Konsep peran kalsium dalam
kopling sekresi stimulus adalah baru pada waktu itu dan diperluas oleh Douglas ke beberapa kelenjar
eksokrin lainnya dalam Kuliah Peringatan Gaddum ke British Pharmacological Society pada tahun 1968
(Douglas WW, 1968: Br J Pharmacol.34 (3): 451–474). Intinya, ini menempatkan sekresi vesikuler dari
sel kelenjar ke dalam kategori yang sama dari proses yang bergantung pada kalsium sebagai sekresi
pemancar dari ujung saraf.

11. Dodge FA Jr, Rahamimoff R. (1967). Aksi kooperatif ion kalsium dalam pelepasan transmitter di
sambungan neuromuskuler. J Physiol. 193 (2): 419–432. Berkat karya Bernard Katz dan rekan-
rekannya, pengetahuan tentang peran kalsium dalam pelepasan transmitter lebih maju daripada dalam
sekresi kelenjar, meskipun cara kerjanya saat berada di dalam terminal saraf masih belum diketahui.
Dalam makalah

ini (dari laboratorium Bernard Katz) penulis menyimpulkan bahwa jumlah kuanta asetilkolin yang
dilepaskan oleh impuls saraf adalah fungsi yang sangat curam dan sangat non-linear dari konsentrasi
kalsium eksternal, seolah-olah itu tergantung pada reaksi yang berlangsung sesuai. dengan kekuatan
keempat dari peningkatan konsentrasi kalsium intraseluler. Makalah ini banyak dikutip dan
kesimpulannya sering dimasukkan ke dalam studi dan diskusi tentang rilis pemancar hingga saat ini.

12. A. M. Brown, 'Jalur adrenergik simpatis jantung di mana transmisi sinaptik diblokir oleh atropin
sulfat', J. Physiol., 191, 271-288 (1967). Seperti yang ditunjukkan di atas, informasi yang muncul bahwa
neuron simpatis memiliki reseptor muskarinik, serta reseptor nikotinik, dan Takeshige & Volle (1962:
J.Pharmacol. Exper. Ther., 138, 66-73) melaporkan penundaan, sensitif atropin asinkron keluar dari
saraf simpatis postganglionik setelah stimulasi berulang saraf preganglionik. Dalam makalah tahun 1967
ini, Buzz Brown membuat kemajuan penting dalam menyarankan peran fisiologis potensial untuk
reseptor muskarinik ini. Dia menunjukkan bahwa peningkatan tekanan darah dan detak jantung pada
kucing dan anjing yang dihasilkan dengan menstimulasi saraf simpatis toraks preganglionik hanya dapat
dikurangi sebagian dengan memblokir transmisi ganglionik nikotinik, dan bahwa respon sisa, disertai
dengan pelepasan postganglionik asinkron, dapat dihilangkan. dengan atropin.
13. Larrabee MG. (1967). Pengaruh aktivitas saraf pada metabolisme saraf glukosa dan fosfolipid. Res
Publikasikan Assoc Res Nerv Ment Dis. 45: 64–85. PMID: 4295650. Hokin & Hokin (1958; J.Biol.Chem.,
233,818-821) melaporkan bahwa penerapan asetilkolin pada irisan kortikal sangat mempercepat sintesis
monofosfoinositida. Dalam makalah tahun 1967 ini dan yang sebelumnya (Larrabee et al, 1963: J.
Neurochem, 10, 549–570; 1965, J.Neurochem, 12,1–13) Martin Larrabee memperluas penelitian ini
untuk menunjukkan bahwa stimulasi saraf preganglionik berulang juga dapat mempercepat
penggabungan inositol berlabel radio ke dalam fosfatidylinositol monofosfat di ganglia simpatis tikus
yang diisolasi. Tidak ada yang menunjukkan bahwa efek ini secara khusus dimediasi oleh aktivasi
reseptor muskarinik, tetapi Larrabee kemudian menduga bahwa itu mungkin karena kurangnya
desensitisasi yang diharapkan untuk efek nikotinik (Burt & Larrabee, 1976: J. Neurochem., 27.753-763).
Sekarang juga diketahui (lihat Hille et al., 2014) bahwa efek stimulasi reseptor muskarinik adalah untuk
merangsang hidrolisis fosfoinositida yang lebih tinggi, fosfatidylinositol-4,5-bifosfat ('PIP2'), dan sintesis
yang dipercepat dari monofosfat adalah konsekuensi sekunder dari ini. Sekalipun demikian, ini adalah
eksperimen yang sangat baru, memimpin jalan menuju penemuan bentuk pensinyalan sel yang sama
sekali baru. Seperti yang dikatakan Martin Larrabee di akhir kuliah Universitas London di awal tahun
enam puluhan 'Phosphatidyl - dia tahu semuanya'. Melihat ke belakang, saya hanya berharap saya lebih
memperhatikannya pada saat itu.

Bagaimana dengan sinapsis kolinergik di SSP? Pengenalan teknik ejeksi elektroforesis muatan zat seperti
ACh dari mikropipet kaca ('iontophoresis') menyebabkan sejumlah besar eksperimen di mana ACh
diterapkan langsung ke neuron individu di SSP, dan perubahan dalam tingkat aktivitas mereka dicatat -
eksitasi atau percepatan atau penghambatan pelepasan yang sedang berlangsung (lihat Phillis, 1970
untuk detailnya survei). Meskipun demikian, hanya dalam satu kasus yang benar-benar jalur sinaptik
kolinergik didirikan. Ini melibatkan aktivasi sekelompok interneuron penghambat di sumsum tulang
belakang ('Renshaw sel ') oleh cabang kolateral berulang intraspinal dari motorik akson, yang sudah
dikenal kolinergik pada aksonnya ujung perifer ke otot rangka. Meskipun rekaman intraseluler langsung
dari sel-sel ini tidak memungkinkan pada saat itu, rekaman ekstraseluler fokal dari dalam sumsum tulang
belakang di anestesi mengungkapkan ledakan potensial aksi setelah stimulasi saraf motorik antidromik
yang ditingkatkan dan diperpanjang oleh obat antikolinesterase dan ditekan oleh dihydro-β-
erythroidine, analog dari penghambat nikotinik d-tubocurarine; obat ini menghasilkan efek yang
bersamaan pada potensi postsynaptic penghambatan berulang secara simultan (ipsp) direkam secara
intraseluler dari neuron motorik yang dihasilkan dari aktivasi sel Renshaw (lihat Eccles, 1957):

Meskipun dianalogikan dengan penularan kolinergik pada sambungan neuromuskuler dan di ganglia
otonom, lainnya dan penelitian selanjutnya mengungkapkan beberapa perbedaan. Pertama menyukai
neuron simpatis, sel Renshaw juga memiliki rangsang reseptor muskarinik (Phillis, 1970), meskipun
seberapa jauh mereka berkontribusi pada eksitasi sinaptik kolinergik tampaknya tidak jelas. Kedua,
pelepasan bersama glutamat dengan asetilkolin juga berkontribusi pada transmisi antara agunan akson
motor dan sel Renshaw (Lamotte d'Incamps dan Ascher, 2008) meskipun tampaknya tidak sampai
transmisi sinaptik di perifer ujung serat motorik ke otot rangka (Nishimaru et al, 2005) (Pelepasan
bersama dua pemancar tidak pernah terdengar pada tahun 1967, tetapi ikut melepaskan glutamat
dengan asetilkolin dari yang lain Neuron "kolinergik" di SSP seperti neuron otak depan basal (Allen et al.,
2006: J Neurosci 26: 1588-1595) sejak itu dilaporkan (lihat juga Lamotte d'Incamps dan Ascher, 2008,
untuk beberapa lebih banyak contoh) .. Bertentangan dengan kepercayaan umum, tidak bertentangan
dengan "Dale’s Principal" (bahwa bahan kimia yang sama seharusnya dilepaskan dari semua proses di
neuron yang sama; Dale, 1935: Proc. Roy.Soc.Med., 28: 319–332) karena Dale tidak menyebutkan hanya
satu pemancar. Namun, pelepasan glutamat yang selektif tampak jelas dari hanya terminal agunan yang
tampaknya melakukannya.)

Transmisi kolinergik rangsang cepat telah diidentifikasi di beberapa sinapsis lain di otak (lihat Lamotte
d'Incamps dan Ascher, 2008, misalnya) tetapi ini jarang terjadi. Kebanyakan nikotinik reseptor di otak
tampaknya presinaptik dan sebagian besar efek kolinergik postsynaptic dimediasi oleh muskarinik
reseptor. (lihat Brown, 2010)

Perkembangan 1967–2017

Reseptor nikotinik

Arus reseptor individu

1. 'Kebisingan' membran direkam selama depolarisasi ACh pelat ujung otot katak menggunakan
ekstraseluler fokal rekaman (Katz dan Miledi, 1972): '... perintah besarnya "efek bidikan" yang dihitung…
berikan a dasar untuk membahas pertanyaan-pertanyaan tertentu yang sebelumnya tampaknya tidak
terbuka untuk serangan eksperimental. Antara ini adalah: jumlah gerbang ionik yang terlibat dalam
produksi miniatur e.p.p.; konduktansi mutlak gerbang ion tunggal dibuka oleh molekul ACh; durasi dari
tindakan gating dan total transfer muatan melalui saluran ion; hubungan antara waktu perjalanan arus
dasar dan kinetika obat / tindakan reseptor; probabilitas tunggal atau berulang aksi molekul ACh
individu selama transmisi normal, dll. Fluktuasi arus yang diinduksi ACh adalah selanjutnya direkam di
bawah penjepit tegangan oleh Anderson dan Stevens (1973: J.Physiol., 235: 655–691).

2. Arus saluran tunggal reseptor ACh dicatat dari membran otot rangka denervasi (Neher dan Sakmann,
1976): 'Rekaman saluran tunggal arus akhirnya menyelesaikan tingkat kuantisasi ketiga dalam proses
transmisi neuromuskuler setelah penemuan arus endplate dan miniatur endplate arus '. Resolusi
ditingkatkan dengan perkenalan dari patch gigaseal (Hamill et al., 1981: Pflug. Arch., 391, 85–100). Ini
memungkinkan interaksi molekuler molekul ACh dengan reseptor nikotinik tunggal untuk diperiksa pada
resolusi temporal tinggi untuk mendapatkan konstanta laju realistis untuk skema kinetik yang
disarankan dari interaksi agonis-reseptor (Colquhoun dan Sakmann, 1985) dan dasar untuk konsep
misterius seperti 'Agonisme parsial' akan ditentukan (Lape et al., 2008: Nature, 454, 722–727; Gambar
1).

Klon dan gen

1. Menggunakan organ listrik (elektroplax) belut listrik Torpedo sebagai sumber reseptor nikotinik tipe
otot yang kaya, pada tahun 1980 seluruh struktur reseptor telah telah ditentukan oleh kimia protein
untuk terdiri dari pentamer mengandung empat subunit yang ditunjuk sebagai α2βγ∂ (mis. Raftery et al,
1980).
 2. Pada tahun 1982, menggunakan probe DNA yang diturunkan dari amino parsial urutan asam dari
reseptor Torpedo, Shosaku Numa dan rekannya mengkloning cDNA ukuran penuh dan menyimpulkan
urutan asam amino lengkap untuk α- subunit dari reseptor Torpedo (Noda et al., 1982); dan dalam
makalah berikutnya melaporkan cDNA dan urutan untuk tiga subunit lainnya (Noda et al., 1983: Nature,
301, 251–255, dan 302, 538–542).

3. Pengetahuan tentang komposisi reseptor otot diperbolehkan cDNA reseptor nikotinik saraf yang akan
diisolasi homologi skrining dari jaringan saraf (misalnya Boulter dkk., 1986, lihat Dani, 2015; McGehee
dan Peran, 1995 untuk yang lain). Seperti saluran otot, saluran saraf juga demikian pentamers, tetapi
hanya terdiri dari subunit α dan β, atau terkadang subunit-α homomer. Dalam saraf mamalia rons
delapan α-subunit (α1-α7, α9, dan α10) dan tiga β-subunit (β2-β4) telah diidentifikasi. Di ibu malian
CNS, kombinasi yang paling umum adalah α42β23, dengan dua situs pengikatan ACh pada antarmuka α-
β, atau α43 β22, dengan kemungkinan tiga situs pengikatan, atau lima subunit homomerik α7 dengan
hingga lima situs pengikatan (Dani, 2015). Uniknya di antara reseptor saraf, yang terakhir diblokir oleh
bungarotoksin. Mereka juga memiliki file permeabilitas kalsium lima kali lipat lebih tinggi daripada
heteromer α-β (dan 10 kali lebih banyak dari reseptor otot): ini mungkin berkontribusi pada aksi
presinaptik ACh (dan nikotin) dalam meningkatkan pelepasan pemancar (McGehee dan Peran, 1996).
Reseptor paling menonjol di sistem saraf perifer (termasuk ganglia simpatis) adalah heteromer α3β4,
meskipun ini juga ada inti habenular dan interpeduncular medial.

4. Mengetahui gen memungkinkan pembangunan knock-in atau subunit knock-out. Cordero-Erausquin

dkk. (2000) meringkas beberapa efek neuronal individu subunit reseptor knock-out pada tikus. Seperti
yang diharapkan, fungsi simpatis dan otonom terganggu pada α3 atau β4 tikus nol. Penghapusan α4
atau β2 mengurangi afinitas tinggi pengikatan nikotin dan beberapa pemancar presinaptik reseptor
nikotinik yang meningkatkan pelepasan tidak berfungsi pada tikus knockout β2. Lebih lanjut, subunit β2
tampaknya memiliki peran dalam pembelajaran dan perlindungan melawan penuaan.

Melihat reseptor nikotinik

1. Kemajuan penting awal pasca-1967 adalah penemuan oleh C.Y. Lee dari racun ular α-bungarotoxin,
yang mengikat reseptor nikotinik otot secara ireversibel (Miledi dan Potter, 1971). Ini tidak hanya
memfasilitasi isolasi dan identifikasi reseptor tetapi pengikatannya yang ketat memungkinkan
penggunaannya sebagai probe untuk melokalisasi reseptor di resolusi yang jauh lebih tinggi daripada
yang diperoleh dengan radiolabelled curare (Fertuck dan Salpeter, 1974). Pengikatan bungarotoxin yang
terus-menerus juga memungkinkan percobaan pada pergantian dan regulasi reseptor pelat ujung
(misalnya Levitt et al., 1980: Sains, 210, 550–551).

2. Struktur atom rinci dari reseptor ACh nikotinik belum ditentukan oleh kristalografi sinar-X, tetapi
penemuan ACh yang larut dalam air yang disekresikan protein pengikat (Smit et al., 2001: Nature, 411,
261-268 telah memungkinkan struktur kristal homolog domain pengikatan dalam reseptor nikotinik yang
akan ditentukan (Brejc et al., 2001).

3. Di sisi lain, kepadatan dan organisasi reseptor yang luar biasa di Torpedo electroplax telah terjadi
dieksploitasi dengan brilian untuk memberikan gambar yang utuh reseptor turun ke resolusi 4Å dengan
mikroskop cryo-elektron (Unwin, 2013) - sekarang molekul yang banyak disukai teknik pencitraan (lihat
Fernandez-Leiro dan Scheres, 2016: Nature, 537, 339–346).

Apa yang dilakukan oleh reseptor nikotinik saraf? Selain pra- 1967 sel Renshaw, hanya beberapa
sinapsis kolinergik fungsional dengan reseptor nikotinik postsynaptic telah diidentifikasi di CNS mamalia
(Jones et al., 1999). Sebaliknya, mayoritas reseptor nikotinik bersifat presinaptik, dan berfungsi untuk
meningkatkan pelepasan neurotransmitter lain seperti glutamat (McGehee and Role, 1996) - sama
seperti yang diprediksikan dari eksperimen dari Koelle dan Nishi pada ganglia simpatik (lihat Kotak 1)
(Dalam beberapa kasus, ini tampak benar-benar mengejutkan. Demikian seperti yang ditunjukkan
kepada kami oleh Dr M.J.Brownstein (Institut Kesehatan Mental Nasional (NIMH) salah satu saluran
"kolinergik" yang paling mencolok di otak (secara neurokimia berbicara adalah fasciculus retroflexus dari
Meynert (FRM), antara habenula medial dan interpeduncular inti (IPN). Ketika kami melihat saluran
putih berkilau di irisan otak yang dibedah hanya memohon untuk dirangsang, kami memikirkannya
harus menjadi homolog sentral yang sempurna dari sinaps ganglion simpatis. Namun tidak demikian:
meskipun agonis ACh dan nikotinik neuron IPN yang bersemangat, respon IPN terhadap stimulasi FRM
sama sekali tidak berkurang oleh antagonis nikotinik; sebagai gantinya dihambat oleh antagonis
glutamat, menunjukkan bahwa penularannya adalah glutamatergic (Brown et al., 1983: J.Physiol., 341,
655- 670) !!. Efek yang paling menonjol dari agonis ACh atau nikotinik Stimulasi FRM adalah untuk
mengurangi amplitudo potensial aksi yang direkam dari terminal FRM dalam IPN dan
memperlambatnya. konduksi (Brown et al., 1984: J.Physiol. 353, 101-109; kami menyarankan bahwa hal
ini disebabkan depolarisasi unmyelinated terminal serat, seperti yang terlihat pada serat-C perifer.
Dalam beberapa gaya elegan percobaan, McGehee et al (1995: Science, 260, 1692–1696) kemudian
mengkonfirmasi tindakan presinaptik ini, dan menunjukkan bahwa itu mengarah ke masuknya Ca2 +
melalui saluran nikotinik, dan konsekuensinya peningkatan epsc glutamatergic. Baru-baru ini, Pen et al
(2010: Neuron, 69, 445-452) telah menemukan bahwa stimulasi selektif serat pengekspres
asetiltransferase kolin di FRM lepaskan glutamat dan ACh: glutamat menggerakkan individu epscs cepat
di neuron IPN sedangkan ACh dilepaskan secara berulang Stimulasi FRM 20–50 Hz menyebabkan
amplitudo lambat yang lebih rendah nicotinic epsc di neuron IPN.). Sebagian besar presinaptik ini
reseptornya adalah α4β2, kadang-kadang α3β2 atau β4 (misalnya, habenula medial dan inti
interpeduncular, lihat catatan kaki), atau homomer α7. Beberapa petunjuk tentang signifikansi
fungsional secara keseluruhan mungkin yang diperoleh dari efek knock-out subunit yang disebutkan di
atas - untuk misalnya, gangguan pada beberapa bentuk pembelajaran, atau hilangnya respon terhadap
nikotin seperti antinociception (Cordero-Erausquin et al., 2000). Meskipun demikian, sangat sedikit (jika
ada) contoh sinapsis akson-aksonal kolinergik yang sebenarnya, jadi mungkin reseptor presinaptik ini
diaktifkan lebih jauh merilis ACh-the 'soup' theory of transmission (Sivilotti dan Colqhuoun, 1995:
Science, 269, 1681–1682).

Reseptor muskarinik (mAChR)

 Sifat reseptor. Seperti reseptor nikotinik, sifat fisik dari reseptor muskarinik tidak diketahui di 1967.
Reseptor muskarinik pertama diklon dari otak babi perpustakaan cDNA oleh Kubo et al. (1986). Asam
amino yang diprediksi urutan menunjukkan homologi yang jelas untuk reseptor β-adrenergik (Dixon et
al., 1986: Nature, 321, 75–79) dan pigmen visual rhodopsin (Ovchinnikov, 1982: FEBS Lett, 148 179–191)
dan karenanya bergabung dengan keluarga heptahelikal (7 transmembrane domain = 7TM) memberi
sinyal protein.

Studi farmakologis sebelumnya dan yang sedang berlangsung (misalnya Hammer et al., 1980)
menunjukkan bahwa mungkin ada lebih dari satu subtipe reseptor muskarinik. Akhirnya, lima subtipe
genetik ditetapkan M1 sampai M5, dikloning (Bonner et al., 1987: Science, 237, 527–532; Fukuda dkk.,
1987: Nature, 327, 623–625; diringkas dalam Bonner, 1989). Menariknya, setiap reseptor dikodekan
oleh yang terpisah gen intronless. Reseptor otak babi yang asli berhubungan dengan subtipe M1
farmakologis dijelaskan oleh Hammer et al (1980) - reseptor muskarinik paling melimpah yang
diekspresikan di otak.

Struktur M2 (Haga et al., 2012: Nature, 482 547– 551) dan M3 (Kruse et al., 2012: Nature, 482 552–556)
reseptor dalam keadaan istirahat mereka sekarang telah ditentukan dengan kristalografi sinar-X,
sehingga sekarang mungkin untuk membayangkan pengikatan ligan dan domain pengikat protein G, dan
kemungkinan konformasi perubahan yang menyertai ikatan ligan dan protein G, di beberapa detail
(Hulme, 2013).

Bagaimana cara kerja reseptor? Tidak seperti reseptor nikotinik, reseptor muskarinik bukanlah saluran
ion. Sebaliknya, mereka adalah anggota dari superfamili G protein-coupled receptor (GPCR), yaitu, kalau
diaktifkan oleh ACh, biasa saja (saya bilang 'biasa' karena ada mengumpulkan bukti bahwa GPCR
terkadang bisa menjadi alternatif rute melalui protein terkait lainnya seperti β-arrester (DeFea, 2008: Br
J Pharmacol, 153, 5298–5309). Utama responnya adalah untuk berlabuh, dan mengaktifkan, protein
pengikat nukleotida guanin trimerik yang disebut protein G (Oldham dan Hamm, 2008). Protein G
ditemukan pada tahun 1970-an melalui persyaratan guanosine triphosphate (GTP) dalam larutan ketika
mempelajari aktivitas GPCR dalam persiapan sel rusak (Rodbell dkk., 1971: J.Biol.Chem., 246, 1877–
1882).

Protein G terdiri dari subunit α, β, dan γ. Subunit α mengandung domain pengikat nukleotida guanin,
dan juga a Domain katalitik GTPase. Saat istirahat, α-subunit mengikat guanosin difosfat (PDB). GPCR
yang diaktifkan menginduksi kesesuaian perubahan nasional pada G-protein yang menyebabkan (a)
disosiasi dari trimer menjadi α- dan gabungan β coupl-subunit dan (b) disosiasi GDP dan penggantinya
dengan GTP. Hidrolisis GTP oleh Aktivitas GTPase dari α-subunit mengarah pada penggantian GTP oleh
GDP dan perakitan ulang trimer αβγ. Aktivitas GTPase menentukan tingkat pemulihan, dan dapat
dipercepat dengan bantuan tambahan Protein pengaktif GTPase (GAP). Pengurangan yang diinduksi
GPCR dalam afinitas pengikatan PDB ke subunit-α dicocokkan dengan pengurangan timbal balik dalam
afinitas pengikatan nyata agonis untuk GPCR (ditunjukkan untuk reseptor muskarinik oleh Berrie et al.
(1979: Biochem. Biophys. Res. Comm., 87 1000-1005).
 Ada sejumlah protein G yang berbeda, dibedakan menjadi hal struktur dan target hilir dari α-subunit
mereka. Reseptor muskarinik individu menunjukkan pola umum 'preferensi' protein G sebagai berikut
(Bonner, 1989; Caulfield, 1993):

Apa yang mereka lakukan pada neuron? Dalam jangka pendek, aktivasi mAChRs memodifikasi sifat
pensinyalan neuron dengan mengubah aktivitas saluran ion membran yang dipilih menggunakan protein
G apposite (atau salah satu efektor biokimia hilirnya) sebagai transduser saluran ion reseptor (lihat
Brown, 2010; Caulfield, 1993 untuk tinjauan.) Jadi, secara singkat, dan dengan penyederhanaan yang
cukup, aktivasi reseptor M1 / M3 / M5 cenderung meningkatkan rangsangan saraf dengan menghambat
satu atau lebih dari beberapa saluran kalium dan / atau dengan mengaktifkan saluran kation; sedangkan
aktivasi reseptor M2 atau M4 menghasilkan postsynaptic penghambatan dengan mengaktifkan saluran
kalium Kir, atau presinaptik penghambatan dengan menghambat saluran kalsium CaV2. Namun secara
tidak langsung jalur tersebut menghubungkan reseptor ke saluran ion mengurangi aturan keras dan
cepat yang menghubungkan reseptor ke respons, karena alasan berikut.

1. Saluran ion hanya 'melihat' transduser akhir, bukan reseptor, jadi pada prinsipnya tidak dapat
membedakan apakah (katakanlah) Go telah diaktivasi oleh reseptor muskarinik atau reseptor glutamat
metabotropik; atau, jika sebelumnya, oleh reseptor M2 atau M4. Membedah atau memprediksi
respons akhir dan jalur mekanistiknya ketika (katakanlah) ACh diterapkan ke neuron atau campuran ACh
dan glutamat dilepaskan ke neuron kemudian menjadi pertanyaan anatomi: yaitu, reseptor / protein G /
perantara yang mana transduser / saluran ion ada di neuron itu, dan di mana mereka berada di neuron.
Untuk yang terakhir, orang mungkin berpikir dulu tentang kompartemen neuron mana yang
menampung reseptor dan saluran. Jadi, Saluran kalsium CaV2 ditutup dengan menstimulasi M2 atau
M4 reseptor (dan karenanya oleh subunit Goβγ) sangat banyak terkonsentrasi di terminal presinaptik
pusat dan neuron perifer, di mana mereka menggerakkan pelepasan pemancar yang berpotensi memicu
aksi; jadi efek utama M2 atau stimulasi reseptor M4 adalah untuk menghambat pemancar rilis - salah
satu dari ACh itu sendiri (penghambatan otomatis umpan balik, misalnya, dari akson otak depan basal:
Allen dan Brown, 1996: J.Physiol., 492 453–466), atau dari lainnya pemancar (hetero-inhibisi). Di sisi
lain, file Saluran Kir3 yang dibuka oleh reseptor M2 atau M4 utamanya adalah postsynaptic dan
menghasilkan bentuk postsynaptic inhibisi. Sebagai contoh kompartementasi subseluler : di neuron
hipokampus saluran Kv7 dihambat oleh aktivasi reseptor M1 dilokalisasi ke akson segmen awal di mana
mereka terikat ke ankyrinG dan kontrol ambang potensi tindakan; karenanya, mereka dihambat oleh
ACh meningkatkan rangsangan dengan memfasilitasi lonjakan lokal generasi (Martinello et al., 2015;
Shah et al., 2008: Proc.Natl.Acad.Sci., AS, 105, 7869–7874). Di lain neuron di mana saluran Kv7 bersifat
somatik, penghambatannya oleh reseptor mAChR juga dapat meningkatkan rangsangan secara lebih
umum, dengan mendepolarisasi sel dan meningkatkan resistansi masukan. Lebih lanjut mikro-anatomi
asosiasi dan pemisahan reseptor muskarinik dengan protein G serumpun dan saluran ionnya mungkin
dicapai melalui asosiasi dengan protein perancah tambahan seperti A-kinase Anchoring Proteins (AKAPs;
Kosenko dkk., 2012: EMBO J., 31, 3147–3156).
 2. Tidak seperti reseptor nikotinik, atau gerbang pemancar lainnya reseptor ionotropik, respons
terhadap stimulasi otot reseptor karinik tidak langsung dan membutuhkan waktu, dari sekitar 30-50ms
untuk aktivasi gerbang protein G ke dalam penyearah saluran kalium Kir3 oleh reseptor M2, ke ⩾200ms
untuk penutupan kalium Kv7 tipe-M saluran oleh reseptor M1 (melalui Gq dan akibatnya jatuh dalam
membran PIP2 konsentrasi: Hille et al., 2014), detik atau menit untuk respon yang melibatkan hilir
fosforilasi atau defosforilasi, dan beberapa jam untuk perubahan transkripsi (mis. perubahan jumlah
Saluran tipe-M yang diinduksi oleh respons transkripsi yang bergantung pada kalsium terhadap eksitasi
saraf oleh M1-mAChRs (Zhang dan Shapiro, 2012: Neuron. 76 1133–1146).

Reseptor muskarinik dan saraf global fungsi sistem

Thiele (2013) memberikan pembaruan kontemporer tentang kontribusi reseptor muskarinik untuk
fisiologi sistem saraf pusat. Wess (2004) merangkum peran individu reseptor muskarinik untuk fungsi
sistem saraf pada tikus sebagai diungkapkan oleh penghapusan subtipe genetik. Beberapa tempat
menarik dari survei ini:

1. Sebagaimana diprediksikan oleh Krnjevic (1967, 1974 (lihat Kotak 1) sebuah jurusan kontribusi
eksitasi muskarinik neuron kortikal dan hipokampus terhadap gairah dan kognisi kortikal telah mapan.
Ini dimediasi secara substansial oleh reseptor M1, tetapi mungkin dengan masukan tambahan dari
reseptor M5, dan dengan efek umpan balik negatif dari autoreseptor M2 presinaptik ke aferen
kolinergik asendens.

2. Secara substansial lebih banyak informasi tentang mekanisme seluler dari eksitasi muskarinik neuron
kortikal dan hipokampus dan konsekuensinya terhadap jaringan perilaku telah diperoleh selama 50
tahun terakhir (lihat juga Brown, 2010; Martinello dkk., 2015: 346–353).

3. Juga, seperti yang diprediksikan dari pengetahuan farmakologi lama, aktivasi reseptor muskarinik
mempengaruhi basal fungsi lokomotor ganglion, mungkin melalui pelepasan ACh dari interneuron
striatal dan inhibisi tidak langsung pelepasan dopamin oleh reseptor M4. Peran tambahan untuk
reseptor M1 ditunjukkan dengan peningkatan striatal tingkat dopamin pada tikus M 1R k-o.

4. Masukan kolinergik juga meningkatkan pelepasan dopamin 'pusat penghargaan' ventral tegmental
melalui suatu tindakan pada reseptor M5. Ini tunduk pada penghambatan otomatis M4 Pelepasan ACh,
sehingga kadar dopamin dalam nukleus accumbens meningkat pada tikus M4 k-o.

5. Agonis muskarinik menyebabkan efek analgesi asal supraspinal saat disuntikkan intra-thecally. Ini
adalah dimediasi oleh kombinasi reseptor M2 dan M4, menawarkan prospek yang menarik untuk
pengembangan obat.

Prospek selanjutnya

1. Dengan informasi yang semakin tepat tentang struktur reseptor, kita dapat mengharapkan
perkembangan obat yang semakin selektif yang menargetkan subtipe reseptor muskarinik dan
kombinasi subtipe berbeda reseptor nikotinik. Untuk reseptor muskarinik, selektivitas subtipe mungkin
terjadi untuk dicapai terbaik dengan menargetkan situs alosterik (lihat Conn et al., 2009: Tren Pharmacol
Sci., 30: 148–155). Terlepas dari selektivitas yang lebih besar, modulator allosterik positif (PAMS)
memiliki keunggulan dibandingkan agonis langsung bahwa mereka hanya mempengaruhi aktivitas
kolinergik yang sedang berlangsung. Jadi, M1-PAMS menjanjikan untuk pengobatan gangguan kognitif
sementara M4-PAMS mungkin sesuai untuk pengobatan skizofrenia. Di masa lalu, banyak penelitian
tentang farmakologi reseptor nikotinik telah didorong oleh kebutuhan untuk mengendalikan kecanduan
nikotin, tapi ini akan menjadi pasar yang menurun di masa depan. Namun, obat yang berinteraksi
dengan reseptor nikotinik mungkin memiliki efek menguntungkan terlepas dari kerja nikotin. Sebagai
contoh, PAM untuk reseptor nikotinik α7 memiliki efek menguntungkan pada kognisi dan nyeri pada
penelitian hewan (Bagdas et al., 2017: Br. J. Pharmacol., 173 (16): 2506–2520; Potasiewicz dkk., 2017:
Neuropharmacol, 113: 188–197).

2. Teknik optogenetik digabungkan dengan perekaman halus tanggapan neuronal in vivo harus
memungkinkan lebih banyak deskripsi yang tepat tentang sirkuit kolinergik yang mendasari respon
perilaku terhadap stimulasi kolinergik di otak dan pengaruhnya pada pengkodean saraf, ke sejauh
mereka mungkin disimulasikan dalam realitas virtual dan efek lesi patologis di (misalnya) Alzheimer
Penyakit dan perbaikan farmakologis mereka sepenuhnya dipahami.