Antigen

Salmonella typhi O 5 ml
Salmonella typhi H 5 ml
Salmonella paratyphi AH 5 ml
Salmonella paratyphi BH 5 ml
Alat
Inkubator
Timer
Mikropipet
Tabung 36 buah

Semi kuantitatif
1. Dengan menggunakan mikropipet pipet, serum dipipet mulai 80 µL, 40 µL, 20 µL, 10 µL dan
5 µL ditambahkan di atas lingkaran slide berdiameter 3 cm.
2. Botol reagen dihomogenkan dengan baik, kemudian tambahkan satu tetes tepat suspensi
antigen ke dalam serum.
3. Campur dengan baik menggunakan batang pengaduk dan goyangkan slide dengan cara
memutarkannya selama satu menit.
4. Hasil yang terjadi diamati
Interpretasi hasil : titer pemeriksaan widal dilihat pada pengenceran yang masih memberikan
aglutinasi
Uji Aglutinasi Cara Tabung
Semua hasil positif yang diperoleh melalui uji slide dapat dikonfirmasi menggunakan teknik
berikut.
1. Disiapkan sebuah rak dengan 8 tabung plastik untuk setiap hasil antibodi yang positif.
2. Dengan menggunakan pipet, tambahkan 1,9 ml saline 0,85% ke dalam tabung pertama, dan
1,0 ml saline ke dalam tujuh tabung lainnya.
3. Pada tabung pertama ditambahkan 0,1 ml serum pasien. Campur dengan baik.
4. Dipipet 1,0 ml dari tabung pertama dan pindahkan pada tabung kedua. Campur dengan baik.
5. Dipipet 1,0 ml dari tabung kedua dan pindahkan pada tabung ketiga. Campur dengan baik.
6. Lanjutkan pengenceran serial hingga tabung ketujuh. Buang 1,0 ml dari tabung ketujuh.
Tabung kedelapan hanya akan berisi saline sebagai kontrol dan karena itu tidak mengandung
serum apapun.
7. Tambahkan 1 tetes suspensi antigen yang telah dicampur homogen pada masing-masing
tabung.
8. Inkubasi pada suhu berikut :
Antigen Salmonella ‘O’ dan Proteus = 500C selama 4 Jam
Antigen Salomnella ‘H’ = 500C selama 2 Jam
Dapat juga dilakukan dengan cara inkubasi semalaman di lemari es, lalu biarkan mencapai suhu
kamar sebelum di baca
Hal ini sangat penting bahwa ketika tabung ditempatkan dalam waterbath, tingkat air harus
sekitar 2/3 bagian ukuran tabung. Hal ini akan menjaga arus konveksi sehingga hasil akan
terhindar dari hasil negatif palsu.
9. Periksa tabung setelah waktu inkubasi yang telah ditentukan lalu cek aglutinasinya. ]\
Interpretasi hasil :
Pengenceran terakhir yang masih menunjukkan aglutinasi menunjukkan titer dari sampel
tersebut. Untuk Hasil negatif, tidak terjadi aglutinasi sedikitpun dari semua tabung
Titer diartikan sebagai konsentrasi antibodi yang ditentukan dengan mencari pengenceran serum
tertinggi yang masih dapat menyebabkan aglutinasi antigen.
1=x
x
dimana 1 = pengenceran seum tertinggi
x
x = titer antibodi