METODOLOGI

a. Alat dan bahan

 Alat
- mikrotube dan rak
- mikropipet dan tips
- spektrofotometer UV dan cuvet
- alat pengering rambut
- pipet Pasteur
- sentrifugator
- Vortex
- Incubator

 Bahan
- Darah
Kit isolasi DNA yang mengandung :
a. Larutan pelisis sel darah merah
b. Lartan pelisis sel
c. Larutan RNase A
d. Larutan pengendap protein
e. Larutan penghidrasi DNA
f. Isopropanol 100%
g. Etanol 70 %
h. EDTA
b. Cara kerja
 Lisis sel

dimasukkan kedalam tabung mikro 1,5 ml disentrifugasi dengan kecepatan 13.000

yang berisi 900 φ L darah, balik-balikkan dan -16.000 x g selama 20 detik dan buang
inkubasi 10 menit pada suhu ruang sambil supernatant dengan pipet hingga tersisa
balik-balikan tabung 5x setiap 2menit butiran endapan sel darah putih dalam sisa
supernatant sehingga membantu lisis sel

ditambahkan 300 φ L larutan polisis sel, Vortex kuat untuk mengapungkan kembali
kemudian dipipetkan turun-naik untuk sisa sel darah putih sehingga membantu lisis
melisiskan sel sel

Bila masih terlihat gumpalan sel, maka

inkubasi pada suhu 37℃ .

 Perlakuan dengan RNase

Ditambahkan 1,5 μL Kemudian sampel dicampurkan

larutan RNase A dengan membolak-balikkan tabung
kedalam lisat sel sebanyak 25x dan diinkubasi pada
suhu 37℃ selama 15 menit
 Pengendapan protein

Didinginkan sampel pada suhu Ditambahkan 100 μL larutan

ruang pengendap protein kedalam lisat
sel

Ditambahkan 100 μL larutan

pengendap protein kedalam lisat
sel

 Pengendapan DNA
-