PENUNTUN PRAKTIKUM
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SRIWIJAYA
2023
Dipindl dengan Camscanner BAGIAN BIOKIMIA DAN KINA MEDIK FR UNSRI 2023 e@
TIM BIOKIMIA
Drs. Sadakata Sinulingga, Apt, M.Kes
dr, Liniyanti D. Oswari, MN, M.Sc
Drs. Kusumo Haryadi, Apt. M.Si
dr. H. Safyudin, M.Biomed, CGA
Fatmawati, S.Si, M.Si
dr. Subandrate, M.Biomed
dr. Medina Athiah, SpA
dr. Eka Handayani Oktharina, SpOG
EDITOR
dr. Subandrate, M.Biomed
iijPenuntun Praktikum Biokimia Kedokteran
Dipindl dengan Camscanner BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDI FR UNSRI 2023 ©
KATA PENGANTAR
‘Segala puji bagi Allah swt yang mencurahkan rahmat dan nikmat-Nya schingga
kami dapat menyelesaikan buku penuntun prektikum biokimia kedokteran untuk
‘mahasiswa pendidikan dokter umum, Sholawat dan salam semoga selalu tercurah ke
junjungan Nabi Muhammad saw.
Buku panduan praktikum ini merupekan petunjuk ringkas pelaksanaan
praktikum biokimia kedokteran. Penuntun ini disusun dengan tujusn agar mahasiswa,
‘Khususnya mahasiswa pendidikan dokter umum, dapat memahami dan melaksanakan
praktikum dengan baik schingga dapat mencapai level kompetensi biokimi
kedokteran. Untuk pemahaman yang lebih dalam mengenai dasar teori uji biokimia,
‘mahasiswa bisa meryjuk ke buku referensi.
Buku penuntun ini, tentu saja jauh dari kata sempuma. Oleh karen itu kami
sangat mengharapkan saran dan kritik yang membangun guna penyempurmaan buku
‘Penuntun praktikum ini di masa yang akan datang.
Akhir kata, terima kasih untuk semua pihak yang telah membantu dan semoga
bbuku penuntun praktikum ini bermanfuat banyak.
Palembang, Januari 2023
Tim Penyusun
ii|Penuntun Praktikum Biokimia Kedokteran
Dipindl dengan Camscanner BAGIAN BIOKINIA DAN KiMIA MEDIK FK UNSRI 2023 eS
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR.
DAFTAR ISI ssn
‘TATA TERTIB PRAKTIKUM.
AUBEN...... ns
1, PENENTUAN BERAT JENIS URIN....
2. UNIDERAJAT KEASAMAN (pH),
3. UJLOBERMEYER, o
4. UJIGULA MEREDUKSI SECARA BENEDICT. - =
5. UJIPROTEIN URIN MENURUT HELLER... aerate
6. UJLROTHERA (NITROPRUSIDA).....
ENZIDM
1, PENGARUH KONSENTRASI ENZIM TERHADAP KECEPATAN REAKSI..
2. PENGARUH KONSENTRASI SUBSTRAT TERHADAP KECEPATAN REAKSI. 4
3. PENGARUH pH DAN AKTIVATOR TERHADAP KERJA ENZIM. z
©. BATU TRAKTUS URINARIUS 4
1, PEMERIKSAAN BATU TRAKTUS URINARIUS SECARA MAKROSKOPIS ...00cooo-IS
2, PEMERIKSAAN BATU TRAKTUS URINARIUS SECARA BIOKIMIA...
€. METABOLISME KMARBOHIDEAT
1, GLIKOLISIS PADA SEL...
D. METABOLIGME LIPID
1, REAKSI SALKOWSKL.....
2. PENENTUAN KADAR TRIASILGLISEROL,
3, PENENTUAN KADAR KOLESTEROL. sso o
E.METABOLIGME PROTEIN.......... - n
1, UJI DENATURASI PROTEIN OLEH SUHU. sonnei
2, UJ HIDROLISIS PROTEIN DENGAN PEPTIDASE...
¥.OKSIDASE BLOLOGI
1, UJISCHARDINGER.
2, UJI PEROKSIDASE
3, UJLANTIOKSIDAN VITAMIN C — oo
6. DARAHM KUALITATIE......... oe 8
iv|Penuntun Praktikum Biokimia Kedokteran
Dipindl dengan Camscanner BAGIAN BIOKINIA DAN Kinita MEDIK FK UNSRI 2023 ©
1. UJ SEL DARAH MERAH = TERHADAP—OKSIHEMOGLOBIN DAN
DEOKSIHEMOGLOBIN ....c ou 2 30
2, PENGARUH PELARUT KIMIA TERHADAP MEMBRAN SEL DARAH MERAH .c.o0.31
3. HEMOLISIS SEL DARAH MERAH... 32
H.DARAM KUANTITATIE. 33
1, PENETAPAN KADAR GULA DARA.
2. PENETAPAN KADAR PROTEIN SERUM.
J-EMPEDV.. eee
1, IDENTIFIKASISIFAT EMPEDU
2. UJIGMELIN.....
3. UJI PETTENKOFER... a
4. FUNGSI EMPEDU SEBAGATEMULGATOR,
M.CALRAN TUBUM: SALIVA.
1. PENETAPAN pH AIR LIUR,
2 UNBIURET....
3. UJLMILLON.
4. UNMOLISCH.
s
6
‘UJI PRESIPITASI
‘UJISULFAT.
7. UILFOSFAT se
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN,
viPenuntun Praktikum Biokimia Kedokte
Dipindl dengan Camscanner BAGIAN BIOKINIA DAN KIMIA MEDIK FK UNSRI 2023 ©
TATA TERTIB PRAKTIKUM.
1, Sebelum praktikum dimulai, praktikan tidak diperkenankan memasuki ruang,
praktikum, kecuali setelah mendapat izin dari instruktur atau asisten laboratorium
2. Praktikan harus hadir di ruang praktikum tepat pada waktunya dengan memakai
baju praktikum (terkancing), kartu tanda pengenal, dan sandal epit.
43. Praktikan yang memakai celana/rok bahan jeans, baju kaos tanpa kerah, baju
berlengan sangat pendek (1/3 lengan atas) dan rok mini (di atas lutut) tidak
diperkenankan mengikuti praktikum dan ujian sebelum menggantinya dengan
pakaian yang layak.
4, Semua mahasiswa diwajibkan mengiluti seluruh kegiatan praktikum,
5. Setiap kelompok harus menyediakan lap tangan (serbet) dan kertas tisu gulung
minimal 1 buah.
6. Apabila praktikan merusakkan, menghilangkan dan memecahkan alat dengan
alasan apapun, maka yang bersangkutan diwajibkan melapor ke instruktur dan
‘menggantialat tersebut paling lambat pada saat praktikum berikutnya,
7. Setiap kali praktikum akan diadakan responsi (pre tes) terkait praktikum pada hari
tersebut. Bila tidak lulus responsi, praktikan tidak diperkenankan mengikuti
praktikum pada har itu,
8, Pada waktu praktikum, praktikan tidak diperbolehkan meninggalkan ruang
praktikum tanpa seizin instruktur/asisten laboratorium.
9, Praktikan harus bekerja dengan sungguh-sungguh, teliti dan tenang dengan
‘mengikuti penuntun praktikum yang telah diberikan, Hati-hati terhadap basa
kuat, asam kuat, dan beberapa pereaks! karena bersifat korosif terhadap
kuliUsaluran nafas dan bersifat toksik. Segera cuci dengan air mengalir bila
terkena larutan pereaksi.
10. Setelah selesai praktikum, setiap kelompok wajib membuat laporan sementara dan
iparaf oleh dosen dengan menunjukkan hasil praktikum (format terlampir).
11. Setiap kelompok wajib mencuci bersih, mengeringkan dan menyerahkan peralatan
‘yang digunakan sclama praktikum. Meja praktikum harus bersih setelah praktikum
dilaksanakan.
12. Praktikan tidak diperkenankan meninggalkan ruang praktikum sebelum ada
instruksi dari instruktur/asisten laboratorium.
13, Setiap praktikan wajib membuat laporan praktikum tetap yang dikumpulkan pada
hari praktikum berikutnya (format terlampir).
vijPenuntun Praktikum Biokimia Kedokteran
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
A.UORIN
Pemeriksaan urin tidak hanya memberikan gambaran tentang ada atau tidaknya penyakit-
Penyakit ginjal dan saluran-kemih, tetapi juga dapat memberikan informasi tentang beberapa
Penyakit di bagian tubuh yang Jain. Pemeriksaan urin scharusnya diutamakan daripada
pemeriksaan kimiswi darah, Karena kemudahan memperoleh sampel yang banyak
2 piruvat +2 NADH + 2 ATP
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
Fermentasi, dari glukosa menjadi laktat:
Glukosa +2 ADP+2Pi > 2 laktat +2 ATP
Katabolisme secara anaerob glukosa menghasilkan 2 enengi tinggi sebagai ATP,
sedangkan katabolisme aerob glukosa menghasilkan 8 energi sebagai ATP.
Bahan dan alat
‘Tabung reaksi
Suspensi ragi dan suspensi ragi yang telah dididihkan
Larutan glukosa 1%
Inhibitor proses glikolisis: larutan fluorida atau arsen
Spektrofotometer
Cara kerja
1. Sediakan 3 tabung reaksi yang bersih dan kering.
‘Tabung 1: kontrol positif
Tabung 2: kontrol negatif
‘Tabung 3: pengaruh inhibitor fluorida
2. Pipetkan ke dalam tiap-tiap tabung larutan scinai
yaere
Larutan 2 3
‘Suspensi ragi 14 a : 13.5 mL
‘Suspensi ragi yang telah dididihkan : 14mL :
Larutan fluorida = = OSmL
Larutan glukosa 1% 2mL 2mL 2mL
3. Campurkan isi tabung dengan membolak-balikkannya 3-4 kali, Biarkan 10 menit dalam
‘suhu kamar,
4, Sctelah 10 menit, sentrifugasi dengan kecepatan 2000 rpm.
5. Lalu ambil supernatan (bagian atas) dan pipetkan ke dalam tabung baru seperti tabel
berikut,
Blangko | Standar Uji)
mien ® | © Prpzps
‘Supematan (ml) : : ar | or] o1
Standar glukosa 0.1 g/dl (mL) - 0,1 - - -
Akuades (mL) 2 19 19 19 19
Reagensia (mL) 0,25 0,25 0,25 | 0,25 | 0,25
‘Serapan (A)
6. Kadar glukosa ditentukan dengan:
Kadar glukosa = Au— Ab x 100 mg/dL.
As- Ab
Peranyaan
|. Mengapa hasil uji berbeda pada tiap tabung? Pada glikolisis, enzim apa yang dipengaruhi
oleh fluor atau arsen?
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
D. METABOLISME
LIPID
Lipid adalah suatu kelompok senyawa heterogen yang berhubungan dengan asam lemak,
secara aktual maupun potensial.
Sifat-sifat lipid,
1, Relatif tidak tarut dalam air
2. Larut dalam pelarut non polar
Berdasarkan hasil hidrolisisnya, lipid dikelompokkan menjadi lipid majemuk, lipid
sedethana dan turunan lipid. Contoh lipid majemuk adalah fosfolipid, contoh lipid sederhana
adalah trasilgliserol, dan contoh turunan lipid adaah kolesterol.
Karena sifat pelarut non polar yang mudah menguap dan mudab terbakar, maka ruangan
khusus bebas dari api (percobaan yang memakai pelarut-pelarut non polar segera dikerjakan
sebelum percobaan lain yang memakai api) dan bekas pelarut harus dibuang pada tempat
Kehusus!
1, REAKSI SALKOWSKT
Tujuan
Untuk membedakan sterol jenuh (seperti kolesterol) dan tak jenuh
Dasar
Reaksi dehidrasi dan oksidasi sterol jenuh oleh H:SOs pekat dan diikuti oleh reaksi warna.
Percobaan ini memerlukan alat-alat yang benar-benar kering.
Bahan
1, Larutan kolesterol 0,05% dalam kloroform
2. Larutan sterol tak jenuh (minyak kedelai) 0,05% dalam Kloroform
3, Larutan H:SO« pekat
Cara kerja
1. 1 ml larutan Kolesterol 0,05% dalam Kloroform dicampur secara hati-hati dengan 1 ml
H:S04 pekat.
2. Setelah kedua lapisan cairan berpisah lagi akan timbul berturut-turut warna merah, bira
dan ungu dalam lapisan Kloroform. Selain itu dalam lapisan asam akan tampak flouresensi
berwara kuning.
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
FAKULTAS KEDOKT IVERSITAS SRIWI
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
Pertanysan
1, Bagaimana ciri khas metabotisme kolesterol dibandingkan unsur lipid secara umum?
2, PENENTUAN KADAR TRIASILGLISEROL
Tujuan
Untuk menentukan kadar triasilgliserol berdasarkan indeks masssa tubuh (IMT).
Dasar
Lipid dari makanan sebagian besar dimetabolisme dan disimpan sebagai cadangan makanan
dalam bentuk triasilgliserol (TAG). Banyaknya timbunan triasil gliserol menyebabkan
peningkatan berat badan atau IMT. Semakin tinggi IMT, semakin tinggi pula kadar
triasilgliserolnya.
Bahan
1. Larutan RI:
Pipes buffer pH 7.8 $0 mmol
p-Chlorophenole 2mmoll
Lipoprotein lipase 150000 UA
Glycerolkinase 800UA
Glycerol - 3 - P- oxidase 4000 UA
Peroxidase 440UA
4-Aminoantipyrine 0.7mmol
ATP 0.3mmol/A
Mg2+ 40 mmol
‘Na-cholat 0.20 mmol/1
Potassium-Hexacyanoferrat(I!) InmolA
2. Larutan R4: Gliserol ~ 200 mg/dL. (2,28 mmol/L) triasilgliserol
3, Sampel 1: Serum seseorang dengan IMT tinggi (obesitas)
4, Sampel 2: Serum seseorang dengan IMT rendah (kurus)
Cara kerja
1. Lakukan prosedur menuruttabel berikut.
Bahan | Blanko (uL)| Standar (aL) | Sampel 1 (nL) [ Sampel 2 (iL)
Sampel : : 3 5
R4 : 3 i -
RI 500 500 500 500
Campur dan inkubasi pada subu ruang selama 10 menit. Ukur
absorbansi pada panjang gelombang 546 nm.
‘Absorbansi
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
R TUNNEY
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
2. Hitung kadar TAG menurut rumus berikut:
Asempet — Ai
Kadar TAG = Asampet = Astanto. . kadar Standar
stander ~ Abtenko
3, PENENTUAN KADAR KOLESTEROL
‘Tujuan
‘Untuk menentukan kadar kolesterol berdasarkan aktivitas.
Dasar
Salah satu faktor yang berpengaruh terhadap kadar Kolesterol darah adalah akivitas fisik.
Akaivita fsik yang cukup dapat memobilisasi kolesterol derah sehingga kadar kolesterol darah
tetap normal.
Bahan
1. Lanutan RI:
Pipes buffer, pH 6.9 90 mmol
Phenol 26 mmol
‘Cholesterol oxidase 200 UA
(Cholesterol esterase 300 UA
Peroxidase 1250 Un
4-Aminoantipyrine 0.4 mmol
2. Larutan R4: Cholesterol 200 mg/l (5.17mmolA)
3. Sampel 1: Serum seseorang dengan aktivitasfisik tinggi
4. Sampel 2: Serum seseorang dengan aktivitas fisik rendah
Cara kerja
1. Lakukan prosedur menurut tabel berikut:
Bahen | Blanko | Standar(GiL) ] Sampel1 (iL) | Sampel2
(ul) (nL)
‘Sampel : = 5 5
Ra - 3 eB =;
RI ‘500 500) 500) 300
‘Campur dan inkubasi pada subu ruang selama 10 menit. Ukur
_absorbansi pada panjang gelombang $46 nm.
“Absorbansi
2. Hitung kadar kolesterol menurut rumus berikut:
et = Aaa
Asampet—Abionte » yadar Standar
Kadar Kolesterol =
seen ere Astanaar — Atanko
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
EDOKTERAN UNIVERSITAS SRIWUAYA
2
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
E. METABOLISME
PROTEIN
Secara biokimia, protein adalah heteropolimer asam amino yang terhubung melalui
‘ikatan peptida yang merupakan hasil ekspresi dari gen. Protein tersusun dari 20 jenis asam
amino yang sama.
Protein merupakan Komponen utama dari makanan, Protein dicema pertama dalam
Jambung, dan kemudian di duodenum untuk menjadi. dipeptida dan asam amino. Protein diserap
menggunakan transpor akaif symport dengan natrium.
Protein tersimpan dalam hati dan otot.
Sintesis protein baru sangat penting selama pertumbuhan. Pada orang dewasa sintesis
protein baru diarahkan untuk penggantian protein yang rusak. Selian itu, protein juga digunakan
untuk sintesis berbagai senyawa lain seperti senyawa yang disintesis dari asam amino (purin
ddan pirimidin), katekolamin (adrenalin dan noradrenalin) dan neurotransmitter (serotonin).
‘Sebagai bahan bakar biologis, protcin menyumbang sekitar 10% dari produksi energi
pada manusia. Langkah pertama dalam katabolisme asam amino adalah pelepasan nitrogen
(gugus amino). Setelah gugus amino semuanya telah "dikumpulkan" dalam bentuk asam amino
glutamat, gugus amino yang dilepaskan dari glutamat melalui rekasi deaminasi oksidatif. Gugus
amino dilepaskan sebagai amoniak (NH,*). Amonia adalah racun bagi sistem saraf dan
akumulasinya cepat menyebabkan kematian. Oleh karena itu harus didetoksifikasi ke bentuk
yang dapat dengan mudah dikeluarkan dari tubuh. Amonia diubah menjadi urea, yang larut
dalam air dan mudah diekskresikan melalui ginjal dalam urin
1, UJI DENATURASI PROTEIN OLEH SURU
Tujuan
Untuk menunjukkan bahwa subu dapat memutuskan ikatan peptida potein.
Dasar
Protein memiliki suhu optimum tertentu. Pada suhu yang ekstrim tinggi, protein dapat
terdenaturasi melalui perusakan ikatan peptida. Resid ikatanpeptida yang ada dapat didetcksi
AN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
ENE
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN,
Cara kerja
1,_Lakcukan prosedur seperti pada tabel berikut!
Penambahan Zat PROTEIN DENATURASI
T
(Bienes) |? 3 4 5
Protein 5% (mL) > 2 2 2 2
‘Aquades (mL) 2 - - = e
Pemanasan (°C) 10 menit 37 37 40 50 a
‘Sentrifagasi 5000 rpm 2 menit. Ambil supermatan(bagian atas)
Biuret I (tetes) 5 5 5 5 5
‘Biuret Il (tetes) 5 5 5 5 5
‘Campur dengan baik, diamkan 3 menit untuk melarutkan CuO , kemudian baca
absorbansinya pada 550 nm
‘Serapan pada 550 nm (A)
2. Hitung kadar protein dari masing-masing tabung!
Kadar tabung 3 = (A3 — A blangko) / (A2~A blangko) X 1% =
Kadar tabung 4 = (A4— A blangko) / (A2—A blangko) X 1%:
Kadar tabung $= (AS - A blangko) /(A2 — A blangko) X 1%
2, UJI HIDROLISIS PROTEIN DENGAN PEPTIDASE
Tujuan
Untuk memunjukkan bahwa enzim peptidase dapat menghidrolisis ikatan peptida potein
Dasar
Peptidase akan menghidrolisis ikatan peptida protein. Residu ikatan peptida yang ada dapat
dideteksi dengan uji biuret secara kuantitatif.
Cara kerja
1, _Lakukan prosedur seperti pada tabel berikut!
‘Penambahan Zat PROTEIN PEPTIDASE
T
tangko) |? 3 4 5
Protein 5% (mL) = 2 2 2 2
‘Aquades (mL) 3 1 a7 | 05 =
Peptidase (mL) = = 025 | 05
Masukkan inkubator 37°C 10 menit. Sentrifugasi 5000 rpm 2 menit. Ambil
supernatan(bagian atas)
Biuret I (tetes) 3 5 3 3 3
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SRIWI
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
‘Biuret It (letes) 5 s_[ 5 5 5
‘Campur dengan baik, diamkan 3 menit untuk melarutkan CuO , kemudian baca
absorbansinya serapannya) pada 550-nm
‘Serapan pada 550mm (A) I
2. Hitung kadar protein dalam masing-masing tabung!
Kadar tebung 3 = (A3 A blangko) / (A2- A blangko) X 1%
Kadar tabung 4=(Ad—A blangko) / (A2~ A blangko) X 1%
Kadar tabung 5 = (AS - A blangko) / (A2~ A blangko) X 1% =.
Rex
Pertanyaan
1, Apa peran enzim peptidase dalam tubuh dan sebutkan enzim peptidase dalam tubuh?
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
AS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SRIWAYA
m
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
EF. OKSIDASI BIOLOGI
Secara kimia, oksidasi adalah pelepasan clektron dan reduksi adalah penerimaan
clektron. Reaksi oksidasi akan selalu disertai reaksi reduksi Prinsip reaksi oksidasi-reduksi juga
berlaku dalam sistem bickimia, Pada makhluk hidup proses oksidasi berperan dalam
metabolisme terutama pada reaksi yang menghasilkan energi. Proses oksidasi dapat
berlangsung secara enzimatik dan non-enzimatik, berlangsung dengan oksigen atau tanpa
oksigen (dehidrogenasi).
roses oksidasi di dalam tubuh dapat membentuk suatu radikal bebas atau oksidan. Oleh
‘karena itu, tubuh mempunyai senyawa untuk khusus untuk menangkal oksidan hasil proses
oksidasi yang disebut senyawa antioksidan. Contoh senyawa antioksidan endogen tubuh adalah
‘enzim superoksida dismutase, katalase, peroksidase. Antioksidan juga ada yang berasal dari
Iuar tubuh seperti vitamin C, vitamin E dan senyawa flavonoid.
1. UJISCHARDINGER
Tujuan
1. Memperlihatkan bahwa oksidasi dapat terjadi melalui dehidrogenasi suatu substrat, dalam
hal ini formaldehida
2. Memperlihatkan adanya enzim dehidrogenase acrob, yaitu aldehide dehidrogenase dalam
susu segar
Dasar
‘Aldehid debidrogenase mengoksidasi formaldehid dengan cara melepas hidrogen. Hidrogen
yang terbentuk dapat dipindahkan langsung ke oksigen udara menjadi HO» atau suatu senyawa
enerima misalnya riboflavin atau biru metilen, Pada akhimya senyawa penerima yang
tereduksi tersebut akan menyerahkan hidrogen ke oksigen udara membentuk H2Ox. Hal ini
tampak jelas bila menggunakan biru metilen sebagai penerima hidrogen. Biru metilen tereduksi
tidak berwamna (leuko biru metilen) pada permukaan larutan susu akan teroksidasi kembali
‘menjadi biru karena ada kontak dengan udara.
Bahan dan pereaksi
1, Susu segar dan susu pasteurisasi
2. Larutan biru metilen 0,02%
3. Larutan formaldehyde 0,4%
Cara kerja
1. Siapkan 2 tabung reaksi, satu tabung di isi 5 ml susu segar, tabung kedua di isi 5 ml susu
pasteurisasi
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVE AS SRIWNJAYA
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
2. Kemudian tambehkan berturut-turut 1 ml biru metilen dan 1 ml formaldehide pada masing-
masing tabung.
3. Campur dengan baik dan masukkan penangas air suhu 60~ 65°C
4. Catat apa yang terjadi dan bandingkan antara susu segar dan susu pasteurisasi
Pertanyaan
1. Tullis reaksi dehidrogenasi formal dehide menjadi asam format
2. Mengapa susu pasteurisasi memberi uji Schardinger berbeda
2. UJI PEROKSIDASE
Tujuan
‘Membuktikan adanya enzim peroksidase di dalam susu segar
Dasar
Hidrogen peroksida akan di reduksi oleh peroksidase di dalam susu segar menjadi HO. Pada
uji ini, larutan guaiak ditambahkan pada susu, kemudian gas O2 hasil reduksi hidrogen
peroksida oleh enzim peroksidase akan berikatan dengan larutan guaiak dan membentuk larutan
yang berwama merah atau jingga
Bahan dan pereaksi
1. Susu segar
2. Larutan guaiak 1% dalam alkohol atau KMnOs 1% dalam air
3, Larutan H202 3%
Cara kerja
1. Campur 2 ml susu segar dengan 8 ml air suling, bagilah dalam 2 tabung
2, Panaskan tabung pertama sampai mendidih dan dinginkan, Tabung kedua tidak
dipanaskan,
3. Teteskan 5— 10 tetes KMnO, dalam tiap tabung,
4, Tambahkan 2-3 tetes H2O2 ke dalam tiap tabung
5. Perhatikan apa yang terlihat,
Pertanyaan
1. Apa perbedaan susu yang dipanaskan dan susu segar? Mengapa?
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
FAKULTAS KEDOKTE UNIVERSITAS SRIWHUAYA
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
3. UJI ANTIOKSIDAN VITAMIN C
Tujuan
‘Memperlihatkan efek antioksidan vitamin C (asam askorbat)
Dasar
Senyawa fenol oleh adanya enzim polifenoloksidase (PPO) akan di oksidasi oleh oksigen udara
‘menjadi senyawa berwarna coklat dan HzO:. Dengan adanya vitamin C fenol yang ada dalam
‘buah-buahan terlindung dari oksidasi schingga warna coklat tidak terbentuk.
Bahan dan pereaksi
1, Larutan asam askorbat 1 mg/ml
2. Potongan pisang/ape!
Cara kerja:
Siapkan 2 gelas kimia, masing — masing diberi potongan pisang/apel
Tambahkan air 5 ml pada gelas kimia kesatu
‘Tambahkan 5 ml larutan asam askorbat pada gelas kimia kedua
Biarkan dalam beberapa menit
‘Amati perubahan wamanya dan catat waktunya
yaene
Pertanyaan
1. Mengapa vitamin C berperan sebagai antioksidan dan bagaimana reaksi kimianya?
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
N UNIVERSITAS SRIWIJAYA
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
6. DARAH
KUALITATIE
Darah merupakan jaringan tubuh yang berbentuk cair, yang beredar dalam system
pembuluh darah. Jumlah darah didalam tubuh kira-kira 57 % dari berat badan atau pada orang
dewasa kira-kira 4,5 — 5 liter. Darah terdiri dari berbagai sel seperti eritrosit atau sel darah
merah (SDM), sel darah putih (lekosit) dan trombosit. Eritrosit adalah sel yang terbanyak
didalam darah, jumlahnya mencapai 5 juta butir/ml, trombosit jumlahnya 250,000 — 400.000
bbutir/ml dan lekosit 5.000 — 10.000 /ml. Fungsi ketiga macam sel ini berbeda. Sel darah merah
berfungsi mengikat dan membawa oksigen dari paru — paru ke seluruh tubuh, serta membawa
dan melepaskan CO; dari seluruh tubuh ke paru. Untuk itu SDM dilengkapi dengan molekul
‘husus yang melaksanakan fungsi tersebut dan sekaligus memberi wama merah pada darah,
yaitu hemoglobin (HB).
Hemoglobin adalah suatu protein dengan berat molekul 64.450 didalam hemoglobin
terdapat atom besi dalam keadaan tereduksi (Fe). Dengan bantuan Fe"* ini hemoglobin dpat
mengikat oksigen, Hemoglobin yang mengikat oksigen disebut hemoglobin teroksidasi atau
‘oksihemoglobin (HbO2), sedang hemoglobin yang sudah melepas oksigen disebut hemoglobin
tereduksi atau deoksihemoglobin (deoksiHb)
Peristiwa tersebut dapat dituliskan dengan reaksi sebagai berikut:
pana
Hb + Q < > HbO:
jaringan
‘Atom besi dalam hemoglobin dapat teroksidasi bila muatan positif atom besi menjadi
3+ (Fe). Hemoglobin dengan besi teroksidasi (Fe™) disebut hemoglobin teroksidasi atau
‘methemoglobin (metHb) atau Hb (Fe). Dalam keadaan ini hemoglobin tidak dapat lagi
mengikat oksigen. Hemoglobin yang teroksidasi menjadi methemoglobin akan kehilangan
fangsinya, Perubahan Hb menjadi metHb dapat terjadi karena adanya senyawa pengoksidasi.
Bila ini terjadi dalam tubuh maka dapat timbul akibat yang fatal, misalnya karena pemberian
obat-obatan tertentu terutama pada orang yang berbakat untuk keadaan tersebut. Selain itu
hemoglobin juga dapat berikatan dengan suatu gas hasil pembakaran tidak sempuma dari dari
suatu bahan bakar yaitu CO (Karbon monoksida) schingga terbentuk HbCO. Ikatan hemoglobin
dan CO ini 200 kali lebih kuat dari pada ikatan Hb dengan O2 akibatnya hemoglobin tidak dapat
Jagi mengikat, membawa dan mendistribusikan 2.
Hemoglobin juga mempunyai sifat seperti enzim peroksidase, Hal ini berarti
hemoglobin dapat mengatalisis reduksi HzO; bila ada suatu reduktor, Berbeda dengan enzim,
pada hemoglobin sifat ini tidak hilang setelah pemanasan. Sifat ini dapat digunakan untuk
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
melacak adanya darah dalam ne nes
tedanyn gugos hera dalam, ghee eae ‘ji. Sifat seperti peroksidase ini disebabkan oleh
Sel darah merah seperti sel Iainnya akan mengkerut dalam larutan dengan tekanan
‘osmotik yang lebih tinggi (hipertonik) dari tekanan osmotik plasma. Dalam larutan dengan
‘ekanan osmotik lebih rendah (hipotonik) maka SDM akan membengkak karena cairan dari luar
Sel akan masuk kedalam sel dan kemudian terjadi isis membran (hemolisis). Hemoglobin dari
‘SDM yang mengalami lisis larut dalam plasma sehingga memberi warna merah pada plasma.
SDMnormal akan mulai mengslami lisis bila dimasukkan dalam NaCl 0,48% dan pada larutan
NaCl 0,33 % terjadi isis sempurna SDM juga dapat mengalami lisis oleh obat-obatan. Struktur
membran SDM mengandung lipid bilayer, bila SDM dimasukkan dalam pelarut organik
tmisalnya eter, toluene, maka membran SDM akan mengelami lisis karena larutnya lipid
‘membran schingga hemoglobin terlepas kedalam pelarutnya,
Hemoglobin dan derivat-derivatnya dapat dibedakan dengan menggunakan
spektroskop, yaitu berdasarkan perbedaan absorpsi wama-wama tertentu dari cahaya putih.
Bila suatu larutan berwama diletakkan antara alattersebut dan sumber cahaya, akan terlihat
aerah (pita) hitam pada spektrum dimana terjadi penyerapan wama tersebut. Oksihemoglobin
yang encer menunjukkan 3 pita absorpsi yaitu pita sempit absorpsi cahaya pada panjang,
gelombang 578 nm, pita yang lebih lebar pada 542 nm dan yang ketiga pada panjang gelombang
425 om.
Hemoglobin tereduksi (deoksihemoglobin) sebaliknya hanya menunjukkan satu pita
absorbsi lebar pada 559 nm. Bila pada darah ditambahkan zat pengoksidasi akan terbentuk
methemoblobin. Dalam larutan asam, methemoglobin mempunyai satu pita absorpsi dengan
pusat pada panjang gelombang 634 nm. Hemoglobin karbon monoksida menunjukkan dua pita
absorpsi yang pertama pada 570 nm dan yang kedua pada $42 nm,
Tujuan praktikum
1. Memperlihatkan sifat peroksidase Hb
2. Memperlihatkan Hb dapat mengikat dan melepas O2
3. Memperlihatkan Hb yang mengikat CO secara kuat tidak dapat mengikat O2
4, Memperlihatkan besi dalam Ho bila di oksidasi akan menjadi methemoglobin dan tidak
dapat mengikat oksigen lagi.
Memperlihatkan pengaruh larutan hiper/hipo tonik terhadap membran sel darah merah
‘Memperlihatkan pengaruh pelarut organic terhadap fragilitas sel darah merah.
7. Memperlihatkan bahwa Hb dan derivatnya dapat menyerap sebagian gelombang cahaya
putih yang melewatinya,
ae
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK.
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SRIWJAYA
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
1, UJISEL DARAH MERAH TERHADAP OKSIHEMOGLOBIN DAN
DEOKSIHEMOGLOBIN
Tujuan
Membuktikan bahwa hemoglobin dapat mengikat oksigen menjadi HbO: dan senyawa ini dapat
terurai kembali deoksi Hb dan O2
Dasar
Dalam keadaan tereduksi Fe dalam Hb dapat mengikat dan melepaskan Oz. Dalam lingkangan
udara biasa, Hb segera mengikat Oz menjadi HbOz, sedangkan didalam tabung reaksi HbOz
akan melepas O2 pada penambahan pereaksi Stokes (pereduksi).
Bahan dan pereaksi
1. Suspensi darah
2. Pereaksi Stokes
3. Larutan Amonium Hidroksida (NE.OH)
Cara kerja
A. OKSIHEMOGLOBIN
1. Masukkan 2 ml darah dan 6 ml air suling ke dalam tabung reaksi, campur dengan baik,
perhatikan dan catat terbentuknya HbO2 yang berwarna merah, kareana bereaksi
dengan oksigen.
2, Bagilah menjadi 2, tabung Al dan A2 masing-masing 4 ml. Tabung Al digunakan
sebagai kontrol. Tabung A2 untuk untuk reaksi selanjutnya
B. PEMBENTUKAN DEOKSIHEMOGLOBIN
1. Pipetkan kedalam tabung reaksi 0,2 mi pereaksi Stokes (Dalam pereaksi Stokes sudah
ditambahkan NH,OH untuk melarutkan endapan).
2. Pada tabung A2 yang berisi HbOz dari percobaan A teteskan 2 tetes pereaksi Stokes dari
percobaan (B.1.) Perhatikan dan catat wama deoksiH(b yang terbentuk dan bandingkan
dengan wama HbO2 dalam tabung Al (tabung kontrol).
C. PEMBENTUKAN KEMBALI HbO: DARI DEOKSI Hb
1. Kocok kuat-kuat tabung yang berisi deoksiffb tersebut (hasil percobaan B.2.)
2. Perhatikan dan catat waa HbO2 yang kembali terbentuk. Bandingkan dengan kontrol
tabung Al. O2 yang diikat olch Hb berasal dari udara. Deoksigenasi dan reoksigenasi
dapat dilakuken berulang-ulang
Catatan:
Pereaksl Stokes: cara buat, larutkan 20 g FeSOx (ferro sulfat) dan 30 g asam tartrat dalam air encerkan
sampai 1000 ml. Bila hendak dipakai, ambil 5 ml dan tambahkan ammonium hidroksida sampai
endapan yang terbentuk larut kemball,
ERD EN
DOKTERAN UNIVE
1S
Dipindl dengan Camscanner aa
PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
2, PENGARUH PELARUT KIMIA TERHADAP MEMBRAN SEL DARAH MERAH
Tojuan
Memperlihatkan bahwa membran sel darah merah dapat mengalami lisis dalam pelarut organi
Dasar
‘Memibran sel darah merah (SDM) antara lain mengandung lipid, Bila SDM dimasukkan ke
alam larutan yang mengandung pelarut orgenik, maka membran lipid akan larut, sehingga
terjadi hemolisis danah memberi warna merah jemnib.
Bahan dan Pereaksi
Suspensi darah
NaCl 0,9%
Kloroform
Eter
Aseton
Toluen
Alkohol
nrayaene
Cara kerja
1. Kedalam 6 tabung reaksi masing-masing dimesukkan 10 ml NaCl 0,9%
2. Tabung pertama digunakan sebagai kontrol (1)
3. Pada ke 5 tabung lainnya tambahkan:
‘a 2 tetes Kloroform pada tabung 2
b. 2 tetes eter pada tabung 3
c. 2ttetes aseton pada tabung 4
4. 2tetes toluene pada tabung 5
€. 2 tetes alkohol pada tabung 6
Setelah penetesan segera tutup tabung reaksi dengan plastik transparan dan lakukan
pengocokan agar pelarut tidak menguap.
4. Segera tambahkan Ke dalam tiap tabung 2 tetes suspensi darah, campur dengan
membaliknya perlahan-lahan (bati-hati, jangan sampai lisis karena goncangan), biarkan
setengah jam Gangan dikocok). Perhatikan warna yang terbentuk pada larutan bagian atas
dan bandingkan dengan kontrol.
RUNGE WE (OMY MENON IVI WNiTeP)IN9
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SRIWHAY
31
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
3, HEMOLISIS SEL DARAH MERAH
Tujuan
Memperlihatkan pengaruh larutan hipertonik dan hipotonik terhadap membran sel darah merah.
Dasar
‘SDM akan mengerut bila berada dalam larutan hipertonik terhadap tekanan osmotik plasma.
Dalam larutan yang hipotonik, cairan dari luar sel akan masuk ke dalam sel schingga SDM akan
membengkak, dan akhimya terjadi hemolisis. Hemoglobin dalam SDM akan larut dalam
Jarutan, sehingga memberi wama merah jernih pada larutan,
Bahan dan Pereaksi
1. Suspensi darah
2. NaCl2%
Cara kerja
1. Kedalam 10 tabung reaksi isikan campuran sebagai berikut:
Tabung Airsuling (ml) NaCl2% (al) %NaCl
T 10 0
2. 9 1
3. 8 2
4 78 2,5
5 7 3
6. 65 35
7 6 4
8 55 4s
9 5 5
10 45 55
2, Hitung Konsentrasi NaCl pada masing-masing tabungl
3. Campur dengan baik
4, Tambahkan 2 tetes suspensi darah ke dalam setiap tabung dan campur dengan
‘membalikanya perlahan-lahan, diamkan selama 1 jam.
Perhatikan dan catat derajat hemolisis pada tiap-tiap tabung reaksi. Tandai tabung yang
tidak hemolisis, hemolisis sebagaian dan hemolisis sempura.
Pertanyaan
1. Peristiwa faal apa yang ditiru pada percobaan uji oksiHB dan deoksiHib?
2. Apa yang terjadi bila orang keracunan gas CO?
3. Suspensi darah ditambah beberapa tetes K3Fe(CN)s di kocok kuat dan berdasarkan wama
yang terbentuk apakah HbO: dapat terbentuk kembali? Jelaskan!
4. Apakah yang dimaksud hemolisis?
5. Berapakah retensi osmotik minimum SDM?
AN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
SAE
iN
Ue
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
H. DARAH
KUANTITATIE
Analisa kuantitatif darah berguna untuk mengetahui fingsi tubuh pada keadaan schat
dan atau pada keadaan sakit, karena berbagai komposisi cairan tubuh termasuk darah akan
mengalami perubahan.
Faktor yang mempengaruhi komposisi kimia darah pada suatu penyakit secara umum
dibagi menjadi fisik dan metabolik. Faktor fisik antara lain retensi, dapat terjadi akibat
perubahan atau kerusakan membran permeabel seperti paru-paru, ginjal atau hati. Contohnya
akumulasi nitrogen akibat nefritis dan obstruksi saluran empedu oleh batu empedu akan
‘mengakibatkan hiperkolesterolemia, Pada gangguan metabolisme terjadi juga perubahan kimia
arab, misalnya peningkatan glukosa darah akibat diabetes melitus. Dapat dikatakan bahwa
pemeriksaan kimia darah dilakukan bila ada persangkaan gangguan pada proses pembentukan,
pemanfaatan dan eliminasi. Faktor fisik dan metabolik kadang-kadang tidak dapat dipisabkan,
seperti terlihat pada penyakit ginjal. Pada analisis Kuantitatif darah, protein dapat dapat
‘mengganggu terutama pada analisis senyawa yang mengandung nitrogen amin atau amida serta
reaksi yang melibatkan reduksi atau oksidasi ion metal, Scbclum analisis dilakukan, protein
darah harus dipisahkan terlebih dahulu dengan pengendapan. Pengendapan protein antara lain
dengan asam tungstat, seng hidroksida dan asam triklor asetat, tergantung keperluannya
Pemeriksaan faktor metabolik dapat dilakukan pada serum.
1, PENETAPAN KADAR GULA DARAH
Tujuan
‘Untuk menentukan kadar gula darah
Dasar
Glukosa dalam darah (serum) direaksikan dengan reagensia yang akan menghasilkan zat yang
berwama dan dapat dibaca pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 500 nm. Nilai
serapan yang diperoleh dibandingkan dengan standar.
Bahan dan pereaksi
1. Serum darah pasien sewaktu
2. Serum darah pasien puasa
3. Reagensia Glukosa
4, Larutan standar glukosa 100 mg/dL,
Cara kerja
1, Lakukan prosedur seperti pada tabel berikut!
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK.
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SRIM
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
A 7 2 3 4
Bahan (Blangto) | (Standar) | (Wit) _| (Wii2)
‘Ghukosa standar (mL) = Ot : :
‘Serum darah pasien sewaktu | — - Or 5
‘Serum darah pasien puasa = 5 ~ | Ot
‘Aquades (mL) 2 19 19 [19
Reagensia Glukosa 025 | 025 | 025 | 0.25
‘Campur dengan baik, inkubasi 10 menit pada suhu 37°C kemudian baca
absorbansinya pada 2. 550.nm
‘Serapan pada 420 nm (A)
2. Hiitung kadar glukosa dari masing-masing tabung!
Kadar tabung 3 = (A3 — A blangko) /(A2 ~ A blangko) X 1% =
Kadar tabung 4 = (A4 — A blangko) / (A2— A blangko) X 1% =.
2, PENETAPAN KADAR PROTEIN SERUM.
Tujuan
‘Untuk menetapkan kadar protein serum
Dasar
Protein tersusun atas asam amino-asam amino melalui ikatan peptida. Ikatan peptida yang ada
dapat dideteksi dengan uji biuret secara kuantitatif, Banyaknya ikatan peptida yang dideteksi
‘menunjukkan kadar protein dalam suatu larutan (serum).
Cara kerja
1. Lakukan prosedur seperti pada tabel berikut!
5 7 2
BahawPereaksi canon | aan! ° 4
Protein standar 1% (mL) : 2 : -
‘Serum Pasien I : : 2 -
‘Serum Pasien Il (KEP) E E 7
‘Aquades (mL) 2 E :
Sentrifugasi 5000 rpm 2 menit, Ambil supematan(bagian atas)
Biuret I (tetes) 5 5 5 3
Biuret I (tetes) 3 5 3 3
‘Campur dengan baik, diamkan 3 menit untuk melarutkan Cuz0 , kemudian
‘aca absorbansinya serapannya) pada 550 nm
‘Serapan pada 550 nm (A)
3. Hitung kadar protein dari masing-masing tabungl
ry
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITA:
AN BIOKIMIA DAN RIMIA MEDIK
ARDS
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
Kadar tabung 3 = (A3—- A blangko) / (A2 ~ A blangko) X 1%
‘Kadar tabung 4 = (Ad — A blangko) / (A2— A blangko) X 1%
Kadar tabung 5 = (AS - A blangko) / (A2~A blangko) X 1 %:
A MEDIK
BAGIAN BIOKIMIA DAN Ki
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
J. EMPEDU
Empedu diproduksi olch hati dan disimpan sementara dalam kandung empedu sebelum
dikeluarkan ke duodenum, diperkirakan hati menghasilkan 500— 1000 ml empedu per hari.
Empedu manusia berwara kuning keemasan, namun bila dibiarkan pada udara terbuka
maka wamanya akan berubah menjadi hijau, biru dan coklat karena pigmen empedu ter
oksidasi, Empedu bereaksi alkalis (pH 7,8 —8,6).Kandungan empe4du yang penting antara Lain
adalah garam-garam empedu, pigmen-pigmen empedu, lesitin, kolesterol dan garam-garam
anorganik. Empedu tidak mengandung protein kecuali musin, yang di sekresi oleh dinding
‘kandung empedu, dan sejumlah kecil enzim seperti fosfatase alkali.
Empedu merupakan campuran hasil sekresi dan ekskresi. Bahan-bahan yang disekresi
miselnya garam-garam empedu, sedangkan yang di ekskresi misalnya pigmen empedu dan
kolesterol.
‘Asam-asam empedu utama dalam empedu manusia adalah asam kolat dan asam
kanodeoksikolat. Asam empedu mengaktifkan lipase dan mempengaruhi emulsifikasi lipid,
‘yang diperlukan untuk hidrolisis dan absorpsi lipid, selain itu asam empedu juga penting untuk
penyerapan kolesterol dan pembentukan ester kolesterol.
Garam-garam empedu membantu pencemaan dan penyerapan lemak serta vitamin-
‘vitamin yang larut dalam lemak (vitamin A, D, B, K). Aktivitas ini melalui 2 cara, yakni
a. Garam empedu menurunkan tegangan permukean dan meningkatkan emulsifikasi lemak
sehingga mudah dicemakan oleh lipase.
. Garam mepedu berikatan dengan asam lemak membentuk suatu komplek yang lebih
‘mudah larut dan diserap.
Pigmen-pigmen empedu sebagian besar merupakan hasil katabolisme hemoglobin yang
berasal dari penghancuran sel-sel darah merah oleh sistem retikuloendotelial dari hati, limpa
ddan sumsum tulang. Pigmen empedu yang utama adalah biliverdin yang berwama hijau, dan
bilirubin yang berwamna jingga atau kuning coklat. Oksidasi pigmen empedu oleh berbagai
reaksi akan menghasilkan suatu turunan yang berwama misalnya mesobiliverdin (berwarna
hijau hingga bir), mesobilirubin (berwama kuning) dan mesobilisianin (berwama biru hingga
‘ungu).
‘Tujuan praktikum ini adalah untuk mempelajari sifat-sifat dan susunan empedu.
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
NESEY
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
1, IDENTIFIKASI SIFAT EMPEDU
Tujuan
‘Mengetahui wama, bau, konsistensi dan pH empedu.
Bahan dan alat
1, Empedu kental
2. Gelas kimia
3. Batang pengaduk
4. Kertas indikator
Cara kerja
1, Masukkan sedikit empedu asli dalam gelas kimia,
2. Periksa warna empedu, bau, konsistensi, pH (dengan kertas indikator pH)
2. UJLGMELIN
Tujuan
‘Membuktikan adanya pigmen empedu
Dasar
Penambaban asam nitrat pada pigmen empedu akan menghasilkan senyawa hasil oksidasi yang
berwama.
Bahan dan alat
1, Larutan empedu encer
2. Larutan asam nitrat pekat
3. Tabung reaksi
4. Pipet volumetrik
Cara kerja
1. Masukkan 2 ml asam nitrat pekat dalam tabung reaksi
2. Miringkan tabung reaksi, dengan pipet alirkan secara hati-hati 2 ml larutan empedu encer
‘melalui dinding tabung schingga kedua larutan tidak bercampur
3. Perhatikan wama yang terbentuk pada perbatasan kedua cairan
AN BIOKIMIA DAN KIMIA MED!
KEDOKTERAN UNIVERSITAS SRIWNJAYA
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
3. UJIPETTENKOFER
Tujuan
‘Membuktikan adanya asam empedu
Dasar
Asam empedu, yang terdapat dalam empedu terutama sebagai garam empedu, merupakan
senyawa aromatik komplek. Asam empedu bereaksi dengan furfural (yang terbentuk pada
‘penambahan asam pekat dan karbohidrat) membentuk turunan yang berwara.
Bahan dan alat
Larutan asam empedu encer
Larutan sukrosa 5%
‘Asam sulfat pekat dalam buret
Tabung reaksi
Pipet volumetrik
Pipet tetes
ae eee
Cara kerja
1. Masukkan 3 ml larutan empedu encer dalam tabung reaksi
2. Tambahkan 3 tetes larutan sukrosa 5%
3. Miringkan tabung reaksi lalu alirkan dengan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat melalui
dinding tabung schingga membentuk 2 lapisan cairan, perhatikan cincin yang terbentuk
pada perbatasan antara 2 lapisan
4, FUNGSI EMPEDU SEBAGAI EMULGATOR
Tujuan
‘Membuktikan empedu bersifat sebagai emulgator (bahan penstabil emulsi)
Dasar
Emulsi adalah suatu suspensi metastabil yang terbentuk dari dua atau lebih zat cair yang tidak
dapat larut satu sama lain. Untuk menstabilkan dibutuhkan emulgator yang berguna untuk
‘menurunkan tegangan permukaan antar kedua fase cairan. Garam empedu dapat menurunkan
tegangan permukaan sehingga ia berperan pada proses emulsifikasi lemak dalam usus.
Bahan dan alat
1. Larutan empedu encer
2. Minyak goring
3. Airsuling
4, Tabung reaksi
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
LAE IKTI LONI SUA SAW eas
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
Cara kerja
Sediakan 2 tabung reaksi, pada masing-masing tabung masukkan 3 ml air suling
Pada kedua tabung tambahkan 1 tetes minyak
Pada tabung pertama tambahkan 3 ml air
Pada tabung kedua tambahkan 3 m! larutan empedu encer
Kocok kedua tabung, catat dan perhatikan bentuk kedua emulsi dalam tabung
paeeyr
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
PAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SRIWNAYA
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
K. CALIBAN TUBUH:
SALIVA
Saliva (Air liur) disekresikan oleh 3 pasang kelenjar besar yaitu parotis, submaksilaris
dan sublingualis. Air liur parotis merupekan cairan hipotonis yang sangat encer dengan
konsentrasi zat padat yang rendah, Sedang air liur submaksilaris dapat kental maupun encer
tergantung pada rangsang simpatis atau parasimpatis, dan air Iiur sublingualis mengandung
‘banyak musin
Selain itu air liur juga di sekresi oleh beberapa kelenjar kecil dalam mukosa mulut seperti
labialis, lingualis, bukal dan palatal, Sekresi air liur dari kelenjar dalam mulut dapat disebabkan
oleh rangsangan lokal dalam mulut atau oleh perangsangan pusat akibat rangsang psikis atau
somatik.
‘Air liur dalam rongga mulut berfungsi sebagai pelicin dan untuk membasahi makanan
saat dikunyah sehingga mudah ditelan, Air ur juga merupakan tempat ekskresi obat — obatan
tertentu seperti alkohol dan morfin.
Air liur mengandung air kira-kira 99,5%., Sekitar 2/3 dari bahan yang terlarut dalam air liur
merupakan bahan organik dan 1/3 nya merupakan bahan anorganik. Komponen anorganik
dalam air iur antara lain adalah Natrium, Kalium, Kalsium, Magnesium, Fosfat dan Bikarbonat.
Sedang kandungan senyawa organik dalam air liur terdiri atas musin dan enzim amylase. Bahan
forganik lain yang juga terdapat dalam jumlah sedikit adalah urea, Kolesterol dan hormon-
hhormon tertentu. Saliva juga mengandung berbagai macam sel seperti sel epitel mukosa mulut,
Teukosit dan bakteri.
PH air liur antara 5,6 — 7,6 biasanya pH mendekati 6,8. Pada saat makan pH meningkat
ddan sesudah makan pH akan turun
‘Air liur dari Kelenjar parotis mengondung sejumlah besar enzim amilase, lizozim,
fosfatase asam, aldolase dan kolinesterase. Namun yang penting untuk proses fisiologis tubuh
adalah amilase dan lizozim.
‘Amilase air liur juga disebut ptyalin, Amilase bekerja mengatalisis pencemaan pati
‘menjadi dekstrin (amilodekstrin, eritrodekstrin dan akrodekstrin) dan maltosa dengan dengan
hidrolisis ikatan glukosidik alfa 1,4 pati.
Enzim ini tidak aktif pada pH 4 atau lebih rendah sehingga pencemaan air lu segera
terhentisetelah makanan berada dalam suasana asam lambung,
Tujuan
Untuk mempelajar sifat dan susunan air liur
Pengumpulan air liur
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK
Dipindl dengan Camscanner pues Ee
PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
‘Untuk percobaan air liur inj tisp mahasiswa mengumpulkan air liumya sendiri kira-kira 20 ml
dalam sebuah gelas kimia. Sebelum menampung sr liur, berkumur-kumurlah terlebih dahl.
‘Untuk merangsang sekresi air liur kunyahlah sepotong paraffin (lilin) yang telah disediakan.
‘Kemudian saringlah sebagian air liur tersebut.
1, PENETAPAN pH AIRLIUR
Tujuan
‘Menetapkan pH air liur sewaktu
Dasar
ada kisaran pH tertentu suatu indikator akan memberikan perubshan wama sesuai dengan
kadar H* dalam larutan yang diperiksa.
Bahan dan alat
1, Airliur yang tidak disaring
2. Indikator universal
Cara kerja ;
1. Celupkan sepotong indikator universal ke dalam air liur yang tidak disering
2. Cocokan wama indikator tersebut pada standar wama pH untuk indikator tersebut.
‘Tentukan pH nya!
2. UJIBIURET
Tujuan
‘Membuktikan adanya senyawa dengan ikatan peptida (protein) dalam air ur secara kualitatif
Dasar
‘Biuret adalah senyawa yang terbentuk dengan 2 ikatan peptida yang terbentuk pada pemanasan
urea, Reaksi biuret adalah reaksi terhadap adanya paling sedikit 2 ikatan peptida. Reaksi biuret
(larutan CuSO« alkalis) terdiri atas larutan NaOH dan larutan CuSO., Cu pada larutan alkalis
‘bereaksi dengan protein membentuk suatu komplek koordinasi antara ion Cu** dengan gugus
‘C=O dan N-H pada ikatan peptida. Komplek tersebut memberi wana lembayung.
‘Semua zat dengan 2 atau lebih ikatan peptida memberi reaksi positif. Zat—zat Iain yang
mengandung gugus karbamil (-CONH) seperti ~CSBH2, -C(NH)NH2 atau ~CHsNH2 juga
memberirekasi yang sama,
Bahan dan alat
1. Airliur yang tidak di saring
2. Lanutan NaOH 10%
BAGIAN BIOKIMIA DAN KIMIA MEDIK:
PAKULTAS KE
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
3. Larutan CuSO,
4. Tabung reaksi
5. Pipet volumetrik
6. Pipettetes
Cara kerja
1. Masukkan 2 ml air liur yang tidak di saring dalam tabung reaksi
2. Tambahkan 2 ml NaOH 10% campur dengan baik
3. Tambahkan 1 tetes larutan CuSOs. Campur dengan baik, bila belum terbentuk wamna
Jembayung tambahkan lagi | tetes CuSOs hingga maksimum 10 tetes.
3. UJIMILLON
Tujuan
‘Mengidentifikasi asam amino tirosin secara kualitatif’
Dasar
Tirosin yang merupakan asam amino yang mengandung gugus hidroksi fenil (fenol) akan
mengalami nitrasi dengan pereaksi Millon yang mengandung ion-ion merkuri/merkuro dalam
asam nitrat/nitrit membentuk wama merah
Bahan dan alat
L
2)
Noavew
‘Air liur yang tidak di saring
Pereaksi Millon terdiri atas 100 g merkuri dalam 140 m! asam nitrat pekat, dan diencerkan
dengan air sampai volumenya 3X
Tabung reaksi
Pipet volumetrik
Pipet tetes,
Penangas air
Gelas kimia
Cara kerja
Masukkan 2 mi air liur yang tidak di saring dalam tabung reaksi
Tambahkan 2~ 3 tetes pereaksi Millon, campur dengan baik
Panaskan hingga terbentuk wama merah
1
2.
3.
Dipindl dengan Camscanner PENUNTUN PRAKITKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN
4, UJIMOLISCH
Tujuan
‘Membultikan adanya karbohidrat dalam air ur secara kualitaif
Dasar
Reaksi ini disebabkan oleh daya dehidrasi asam anorganik pekat terhadap karbohidrat,
membentuk furfural atau turunannya seperti hidroksi metil furfural. Pereaksi Molisch yang
terdiri atas alfa naftol akan bereaksi dengan furfural membentuk senyawa ungu.
Bahan dan alat
1. Air liur yang tidak di saring
2. Pereaksi Molisch yang terdiri dari 25 g alfa naftol dalam alcohol 95% sampai S00 ml dan
Anda mungkin juga menyukai
- Kisi-Kisi Materi Ujian Praktikum Fisiologi Blok 6 PSPD TA 2022-2023Dokumen2 halamanKisi-Kisi Materi Ujian Praktikum Fisiologi Blok 6 PSPD TA 2022-2023sitalasari 1Belum ada peringkat
- Kementerian Pendidikan, Kebudayaan, Riset, Dan Teknologi: Universitas Sriwijaya Fakultas KedokteranDokumen1 halamanKementerian Pendidikan, Kebudayaan, Riset, Dan Teknologi: Universitas Sriwijaya Fakultas Kedokteransitalasari 1Belum ada peringkat
- Kementerian Pendidikan Dan Kebudayaan: Universitas Sriwijaya Fakultas KedokteranDokumen1 halamanKementerian Pendidikan Dan Kebudayaan: Universitas Sriwijaya Fakultas Kedokteransitalasari 1Belum ada peringkat
- Laporan Praktikum Blok 6 "Fisiologi Muskuloskeletal Dan Pengukurannya"Dokumen7 halamanLaporan Praktikum Blok 6 "Fisiologi Muskuloskeletal Dan Pengukurannya"sitalasari 1Belum ada peringkat
- TATIB IBADAH NAMAPOSO JwsDokumen2 halamanTATIB IBADAH NAMAPOSO Jwssitalasari 1Belum ada peringkat
