Formulasi
dan karakterisasi Nanoemulsi
Minyak Dedak Gandum dalam Air (O/W)
Sara Rebolleda, Mara Teresa Sanz, Jos Manuel Benito, Sagrario Beltrn, Isabel Escudero,
Mara Luisa Gonzlez San-Jos (Food Chem 2015)
Department of Biotechnology and Food Science, University of Burgos, Plaza Misael
Bauelos s/n, 09001 Burgos, Spain
Oleh:
Gustria Ernis
G451130141
Pendahuluan
Permintaan
Konsumen
Jenis dan
Untuk mengatasi ketidakstabilan konsentrasi
emulsi dan meningkatkan surfaktan
bioavaibilitas
Optimasi
Konsentrasi dengan
minyak RSM
(CCD)
Nanoemulsi
(10-200 nm) Kondisi
proses
percobaan Ukuran
droplet
kecil
Metode Penelitian
Persiapan sampel
Minyak dedak gandum diperoleh dengan SFE pada 25,0 0,1 MPa, 40
2 0C dan 8 1 kg CO2/jam. Co-ekstraksi air dipisahkan dari WBO dengan
sentrifugasi pada 12,857g selama 30 menit.
Desain eksperimen
Pemilihan pengemulsi
Blender kecepatan
tinggi (29.000
rpm)selama 5
menit Emulsi WBO
Desain eksperimen
Emulsi WBO
Desain eksperimen
RSM digunakan untuk mempelajari pengaruh konsentrasi minyak (X1: 1-10% b/b),
konsentrasi emulsifier (X2: 1-10% b/b) dan waktu ultrasonikasi (X3: 50-300 s) dengan
ukuran droplet nanoemulsi (Y).
Karakterisasi Nanoemulsi
Sampel pertama diencerkan 1: 100 untuk menghindari beberapa efek hamburan dan
kemudian 2 ml sampel dituangkan ke kuvet persegi DTS0012 polystyrene. Pengukuran
dilakukan pada 20 0C.
Zeta potensial, f, dihitung dari tetesan minyak pada pengukuran mobilitas elektroforesis
dalam medan listrik yang diterapkan, menggunakan pendekatan Smoluchowski.
Pengukuran dilakukan untuk masing-masing sampel pada 200C
Analisis Kekeruhan
mengukur absorbansi sampel murni pada 600 nm (Hitachi Spektrofotometer U-2000, Tokyo,
Jepang)
Evaluasi stabilitas nanoemulsi
Stabilitas nanoemulsi minyak dedak gandum dalam air diukur dalam hal
ukuran droplet mereka. Sejak emulsi cenderung agregat selama
penyimpanan, diukur ukuran tetesan dari emulsi pada 15 dan 30 hari.
Dua kondisi penyimpanan yang berbeda dievaluasi: 40C dalam kondisi gelap
dan 200C dalam kondisi terang .
Evaluasi aktivitas antioksidan
nanoemulsi
0,5 mM L-DOPA disiapkan dalam 100 mM dapar fosfat pH 7, 0,1 mg/ml jamur
tirosinase, juga disiapkan dalam 100 mM buffer fosfat pH 7, dan konsentrasi yang
berbeda (0,5-2,5%, v/v) dari nanoemulsi tersebut. Absorbansi pada 490 nm terus
dipantau selama periode waktu 5 menit (Labsystems Multiskan MS microplate
reader). Laju reaksi awal dengan adanya atau tidak adanya nanoemulsi dihitung
dari kemiringan kurva reaksi dan penghambatan (%) dari nanoemulsi yang
dihitung mengikuti:
di mana Vi dan Vo adalah laju reaksi awal adanya atau tidak adanya nanoemulsi, berututan, dan V
adalah laju reaksi awal tanpa adanya jamur tirosinase. Konsentrasi nanoemulsi yang
menyebabkan penghambatan 50% enzim (IC50) diperkirakan dengan memplot data eksperimen
inhibisi (%) vs konsentrasi nanoemulsi.
Hasil dan Pembahasan
Pengaruh jenis surfaktan pada
ukuran tetesan nanoemulsi
Pengaruh metode emulsifikasi
pada ukuran tetesan
nanoemulsi
Pengaruh minyak dan konsentrasi surfaktan dan waktu ultrasonikasi
pada ukuran tetesan nanoemulsi. Pencarian kondisi optimal dilakukan
dengan RSM
(a) Konsentrasi minyak dan surfaktan (b) Konsentrasi minyak dan waktu
pada waktu ultrasonikasi selama 175 s ultrasonikasi pada konsentrasi surfaktan
5,5%
(a) distribusi ukuran tetesan setelah 0, (b) profil backscattering selama 60 hari
15, dan 60 hari dengan penyimpanan dengan penyimpanan pada suhu 250C
pada suhu 40C dan kondisi gelap dan dalam keadaan gelap
Evaluasi aktivitas antioksidan
Aktivitas antioksidan dari nanoemulsi optimal dievaluasi oleh ABTS +., DPPH. dan metodologi
FRAP. Nilai-nilai yang diperoleh yang ditemukan 2729 89 mol dari trolox /l emulsi, 222
7 mol dari trolox/l emulsi dan 471 9 mol Fe (II) /l emulsi, masing-masing. Dalam rangka
untuk membandingkan aktivitas antioksidan dari nanoemulsi O/W dengan aktivitas
antioksidan minyak tanpa emulsifikasi
Nilai FRAP diperoleh untuk emulsi jauh lebih rendah dari yang diperoleh untuk minyak non-
emulsi (sekitar 49 mol dari Fe (II)/g minyak yang terkandung dalam nanoemulsi, terhadap
228 mol dari trolox/g minyak tanpa emulsifikasi). Namun, hasil yang sama diperoleh untuk
ABTS+. nilai-nilai (sekitar 278 mol dari trolox/g minyak yang terkandung dalam nanoemulsi
dan 270 mol dari trolox/g minyak tanpa emulsifikasi) dan DPPH . nilai-nilai (sekitar 23 mol
dari trolox/g minyak yang terkandung dalam nanoemulsi dan 26 mol dari trolox/g minyak
tanpa emulsifikasi).
Penentuan aktivitas
penghambatan tirosinase
Minyak dedak gandum dapat berhasil dimasukkan ke dalam sistem air dengan
formulasi nanoemulsi. Optimalisasi kondisi proses dengan RSM menunjukkan
bahwa nanoemulsi dengan ukuran tetesan dari 40 nm dapat diperoleh dengan
kombinasi blender kecepatan tinggi (29.000 rpm-5 menit) dan waktu
ultrasoniki (50 s), menggunakan 1% WBO dan 7,3% campuran surfaktan (Span
80 (37,4%) dan Tween 80 (62,6%)). Nanoemulsi menunjukkan stabilitas yang
baik ketika disimpan pada 40C selama 60 hari dan hanya destabilisasi kecil
diamati pada hari-hari terakhir penyimpanan ketika disimpan pada 250C
selama 60 hari. Nanoemulsi pada kondisi optimal dilaporkan menunjukkan sifat
antioksidan yang relevan ketika mereka dievaluasi dengan metode yang
berbeda. Selanjutnya, hasil penelitian menunjukkan bahwa nanoemulsi bisa
memiliki efek penghambatan pada aktivitas jamur tirosinase.