ENZIM

Prof. Dr. Sutyarso, M.Biomed

Program Studi Biologi Fakultas MIPA
Universitas Lampung
sutyarso@yahoo.co.id
Hp 081379145091
12/4/2017 sty-ENZIM 1
 ENZIM
Berfungsi sebagai KATALIS Seluruh reaksi kimia
(Metabolisme) di dalam semua sel hidup (tubuh)
Katalis; adalah zat yang dapat memper-cepat jalannya
reaksi tetapi zat tersebut tidak ikut bereaksi
ENZIM merupakan protein fungsional yang dihasilkan
oleh GEN
Enzim bekerja pada substrat yang spesifik
Spesifitas dalam hal STRUKTUR dan AKTIVITASNYA,
yang ditentukan oleh jenis asam amino penyusunnya

12/4/2017 sty-ENZIM 2
 ENZIM
Aktivitas katalitik dinyatakan dalam: jumlah
molekul substrat perdetik yang berinteraksi
dengan satu mol enzim utk menghasilkan satu
mol produk
E + S ES E+P
Sejumlah enzim tertentu aktivitas katalitiknya
memerlukan KOFAKTOR

12/4/2017 sty-ENZIM 3
 KO-FAKTOR/CO-ENZIM
BIOMOLEKUL KECIL PADA ENZIM
DISEBUT CO-ENZIM
CO-ENZIM BAGIAN AKTIF DARI
APOENZIM
KOFAKTOR DAPAT JUGA
BERBENTUK LOGAM/ION

12/4/2017 sty-ENZIM 4
 FUNGSI KOENZIM
1. PEMINDAHAN ATOM H
1. NAD+, NADP+
2. FMN, FAD
3. ASAM LIPOAT
4. KOENZIM Q
2. PEMINDAHAN SELAIN ATOM H PADA
GUGUS LAIN
1. ATP dan jenisnya
2. Gula fosfat
3. Tiamin pirofosfat
4. Vit B6 fosfat
12/4/2017 sty-ENZIM 5
 5. Koenzim folat
6. Biotin
7. Koenzim kobamida (vit B12)
8. Asam Lipoat

KOFAKTOR JENIS ENZIM

LOGAM/ION
Ca2+ Protein kinase C, Troponin, Fosfo-
diesterase
Fe2+/Fe3+ Sitokrom, Katalase, Peroksidase
Mg2+ Fosfohidroksilase, fosfotransferase
Mn2+ Arginase, Fosfotransferase
Zn2+ Alkaohol dehydrogenase
K+
Piruvat fosfokinase

Na+
ATP-ase dalam membran sel
12/4/2017 sty-ENZIM 6
Koenzim: molekul organik non-protein spesifik yang
diperlukan oleh enzim dalam katalisis substrat
Koenzim kebanyakan mengandung Vit B sbg
bagian dari strukturnya
Banyak enzim selama metabolisme asam amino
memerlukan vit B6
Vit B, nikotinamida, tiamin, riboflavin, asam
pantotenat, asam lipoat; unsur penting dari
koenzim untuk oksidasi biologi dan reduksi.

12/4/2017 sty-ENZIM 7
Contoh; fungsi, kerja koenzim

12/4/2017 sty-ENZIM 8
Metaloenzim
Enzim yang
aktivitasnya
ditentukan oleh:
Ion logam terikat
pada enzim
Ion logam yang
bebas ESM ME-S
MODEL
EMS M
E
12/4/2017 sty-ENZIM
S 9
 Contoh:
ESM EMS MES
Kreatin kinase Piruvat kinase Sitrat liase

Heksokinase PEP karboksi-lase Glutamin sinte-tase

Tetrahidrofolat PEP sintetase UDPG-pirofosfo-

sintetase rilase

12/4/2017 sty-ENZIM 10
 Spesifitas Enzim

Enzim bekerja pada substrat yang spesifik

(Sukrosa sukrase Glukosa + fruktosa)
Mengkatalisis ikatan spesifik dari substrat
(Tripsin=enzim proteolitik, mengkatalisis
ikatan peptida dari protein)
Bekerja pada suhu optimal
Bekerja pada pH optimal

12/4/2017 sty-ENZIM 11
Mekanisme Katalisis enzim

1. Menangkap reaktan (substrat) kemudian

diorientasikan pada bagian enzim yang
memiliki aktivitas katalitik (active site)
2. Enzim berikatan dengan substrat kemudian
membentuk molekul intermediet yang tidak
stabil dan siap memasuki reaksi tahap kedua
untuk menghasilkan produk

12/4/2017 sty-ENZIM 12
Mekanisme katalitik enzim
3. Di bagian active site dari enzim
berfungsi sebagai donor atau akseptor proton
sehingga mengubah sifat asam- basa dari substrat
4. Ikatan substrat-enzim (ES) mungkin
menyebabkan kepekaan ikatan
molekul substrat sehingga mening-
katkan kemungkinan terjadinya
PERPECAHAN

12/4/2017 sty-ENZIM 13
12/4/2017 sty-ENZIM 14
12/4/2017 sty-ENZIM 15
12/4/2017 sty-ENZIM 16
12/4/2017 sty-ENZIM 17
Kecepatan Reaksi oleh Enzim;
dipengaruhi oleh:
1. Konsentrasi enzim [E]: kecepatan awal (V0)
berbanding lurus dengan konsentrasi enzim [E].
Kecuali:
E+S E+P

[E] [P] [P]

K(eq) = =
[E] [S] [S]
jadi: [E] tidak berpengaruh terhadap K(eq)

12/4/2017 sty-ENZIM 18
2. Konsentrasi Substrat [S]; Bila konsentrasi substrat [S]
meningkat sedangkan semua keadaan lainnya dipertahankan
tetap, Vo yg diukur meningkat sampai V maksimal dan tidak
naik lagi

12/4/2017 sty-ENZIM 19
Pada titik A dan B

Tidak semua enzim bergabung dengan substrat

(ES), karena reaksi keseimbangan memiliki
konsentrasi terbatas
Kenaikan/penurunan [S] akan
menaikan/menurunkan jumlah [ES], sehingga V
tergantung [S]
Km = konstanta Michaelis-Menten; konstrasi
substrat yang menghasil-kan setengah kecepatan
maksimal
12/4/2017 sty-ENZIM 20
 V [S]

Vo =
Km + [S]
1. Bila [S] < Km (Titik A); kecepatan awal
tergantung konsentrasi substrat
2. Bila [S] > Km (Titik C); Km sedikit=0 maka
kecepatan awal sama dengan kecepatan
maksimal
3. Bila [S] = Km (Titik B)
Vo = V/2 1/Vo = Km/V x 1/[S] + 1/V
Jadi y = ax + b

12/4/2017 sty-ENZIM 21
 KINETIKA ENZIM
Mempelajari kecepatan reaksi enzimatik dg
faktor yg mempengaruhi.
Kecepatan reaksi secara proporsional seban-
ding dg kadar zat yg bereaksi.
E + S < ==== > ES E + P
Kurva berbtk hiperbola diekspresikan
secara aljabar sbg persamaan Mechaelis
Menten :
V mak. [ S ]
V = ---------------------
[ S ] + Km
12/4/2017 sty-ENZIM 22
 Persamaan Mechaelis Menten :
V mak. [ S ]
V = ---------------------
[ S ] + Km
V = kecepatan reaksi enzimatik pd t = 0
V mak = kecepatan reaksi enzimatik
maksimum
Km = tetapan MM, dinyatakan dlm mol/L
Km menunjukkan ukuran kuat lemahnya
ikatan ( afinitas ) mol. S thdp E
12/4/2017 sty-ENZIM 23
 Harga Km utk E antara 10-1 - 10-7 mol
Km rendah berarti ikatan ES kuat E sulit
melepas S aktivitas E tsb rendah.
KM tinggi berarti ikatan ES lemah E mudah
melepas S aktivitas E tsb tinggi.
T.O.N. Banyaknya mol substrat yg diubah jadi P
oleh mol E dlm satuan waktu pd keadaan jenuh
Km tinggi T.O.N. enzim tinggi
Km rendah T.O.N. enzim rendah

12/4/2017 sty-ENZIM 24
Contoh : Km beberapa enzim.
Enzim Substrat Km
Carbonic anhidrase CO2 8.000
Lysozim Asetil glukosamin 6
Beta Galaktosidase Laktose 4.000
Pinisilinase Benzil pinisilin 50
Pyruvat karboksilase Pyruvat 400
ATP 60
HCO3- 1.000
12/4/2017 sty-ENZIM 25
 Pengaturan aktivitas enzim dlm
tubuh

1. Mekanisme allosterik : Jalur katalisis tahap

awal dihambat oleh produk akhir.
2. Protein pengatur ( Calmodulin ) : protein yg
dpt menstimulir atau menghambat
3. Oleh modifikasi kovalen : fosforilasi
defosforilasi.

12/4/2017 sty-ENZIM 26
 Mekanisme allosterik
a. Langkah metabolisme yg reversibel
b. Feed back inhibition.
c. Feed forward stimulation
Produk akhir menekan sintesis enzim :
a. Peningkatan hasil produk / metabolit, dpt
menekan sintesis enzim yg bersangkutan (
inhibisi umpan balik )
b. Sebaliknya penurunan produk akan
memacu kembali biosintesis enzim.
Mekanisme ini disbt produk menekan secara
umpan balik = product feedback repression
12/4/2017 sty-ENZIM 27
 CALMODULIN

Bersama dg ion Ca++, dpt menstimuli fosforilasi

melalui suatu ion Ca / Calmodulin dependent
multiprotein kinase

KOVALEN MODIFIKASI
Melalui fosforilasi defosforilasi yaitu :
Pengaturan reversibel dari aktivitas enzim dg
ikatan kovalen dari ggs fosfat dg satu atau lebih
pd residu AA-Ser, Thr, atau His.

12/4/2017 sty-ENZIM 28
Another covalent modification control
(instead of phosphorylation ):

ADP- Ribosylation
Nucleotidylation
Methylation

12/4/2017 sty-ENZIM 29
Example :

ATP ADP

Kinase

ENZ-Ser --OH ENZ-Ser -- O-PO3=

Phosphatase

Pi H2O

12/4/2017 sty-ENZIM 30
 Pembentukan Proenzim

Enzim pencernakan.
Faktor pembekuan darah Semuanya
dapat diaktifkan setiap saat diperlukan.
Enzim yg melakukan modifikasi kovalen
dengan seperti modulasi pada aktivitas-
nya disebut enzim interconvertibel

12/4/2017 sty-ENZIM 31
 CLINICAL DIAGNOSIS
Enzim sbg alat bantu diagnosis
-. Enzim yg diproduksi oleh berbagai sumber
dlm tubuh dpt dideteksi dlm plasma.
Ada 2 kemungkinan :
1. Enzim disekresikan dlm plasma dan berfung-
si di situ ( fungsional plasma enzim )
Misal :
-. Enzim koagulasi / faktor pembekuan darah
-. Kolin esterase

12/4/2017 sty-ENZIM 32
 Fungsional plasma enzim

Arti klinis :
Bila organ yg memproduksi rusak
produksi enzim turun aktivitas enzim
serum turun.

12/4/2017 sty-ENZIM 33
2. Enzim yg berperan pada proses metabolisme,
yg hanya berperan dlm sel ( enzim intra sel )
non fungsional plasma enzim.
-. Enzim ini terdeteksi dlm plasma bila sel yg
memproduksi rusak.
-. Bila sel rusak enzim bocor disekresi
dlm plasma aktivitas enzim dlm plasma
meningkat.
Kedua fenomena tsb dipakai dlm klinik utk
membantu diagnosis & prognosis penyakit

12/4/2017 sty-ENZIM 34
 Enzim sbg alat bantu diagnosis
Enzim Diagnostik penyakit
Acid fosfatase Ca Prostat
Alkali fosfatase Tulang, Paratiroid
Aldolase Otot jantung, lurik
CPK Otot jantung, lurik
alfa Amilase Pankreatitis akut
GOT Jantung, Hepar
GPT Hepar, Jantung
gamma GT Hepar

12/4/2017 sty-ENZIM 35
 Pola distribusi enzim dalam jaringan
dan serum
Untuk mengetahui tingkat kerusakan jaringan
Bila secara fisiologis dlm jaringan selalu besar
ada kerusakan jaringan -> dlm plasma
jumlah besar, walaupun kerusakan kecil
berarti : Aktifitas enzim naik tinggi tidak
berarti linier dg kerusakan jaringan hebat.
Sebaliknya : kerusakan hebat pd jaringan yg
secara fisiologis mengandung sedikit enzim
enzim bocor masuk plasma aktifitasnya
tidak meningkat banyak.
12/4/2017 sty-ENZIM 36
 Sehingga perlu mengenal pola distribusi enzim
dlm jaringan dan plasma.
Contoh : Pola aktivitas enzim dlm jaringan.
-. ALT ( GPT ) >> hepar drpd jantung
-. AST ( GOT ) >> jantung drpd hepar
-. Fosfatase asam >> Prostat
-. CPK >> otot
Contoh : pola aktivitas enzim dlm sitosol &
organel sub-seluler : bila ada kerusakan sel
enzim sitosol keluar lebih dulu drpd enzim
organel sub-seluler
12/4/2017 sty-ENZIM 37
 Biasanya enzim dibebaskan akibat ada
kerusakan sel, yg tergantung dimana
lokasi adanya kerusakan.
Kerusakan sedikit hanya enzim sitoplas-
ma yg keluar sel.
Kerusakan berat, enzim mitokondria
akan dibebaskan / dilepas ke dlm plasma

12/4/2017 sty-ENZIM 38
 NASIB ENZIM dlm PLASMA

Dibersihkan dlm plasma dg :

-. Diekskresi lewat urine ( Enim. dg BM kecil,
misalnya : amilase )
-. Enzim dg BM besar, didegradasi melalui
berbagai jalur metabolisme.

12/4/2017 sty-ENZIM 39
 gambar
a b c
Slight
Damage

Severe
Damage

Cytoplasm
Mitochondria
Nucleus

Fig.39.7. Comparison of effect of slight and severe damage on

enzyme release.
(a) Glutamate dehydrogenase : (b) Glutamate Pyruvate
transaminase : (c) Glutamate oxaloacetate transaminase.

12/4/2017 sty-ENZIM 40
 Patterns of activities in human organs.

Examples :
1. Glutamate dehidrogenase can be found in
liver,brain,heart,eritrhrocyte etc. But, this
enzyme is much more active in liver than in
heart or in lung.

12/4/2017 sty-ENZIM 41
2. Lactate dehydrogenase is found in a great
amount in muscle and in liver, but is very
minimal in lung.
Oleh karena itu :
Menentukan banyaknya enzim akan dpt
digunakan untuk memberikan informasi
tentang telah terjadinya dan luasnya
penyakit.

12/4/2017 sty-ENZIM 42
 Gambar LDH
180

160

140

120
Activity U/g organ

100

80

60
40

20

Skeletal Liver Heart Kidney Lymph Pancreas Lung

nodes Erythrocytes

Fig.39.5. Lactate dehydrogenase activities in human organs.

12/4/2017 sty-ENZIM 43
 Example of the use of serum enzymes in
diagnosis.

Enzyme Disease
Glutamate oxaloacetate Myocardial infarction
transaminase (SGOT)
Glutamate pyruvate Viral hepatitis
transaminase (SGPT)
Amylase, lipase Acute pancreatitis
Creatine kinase Muscle disease
Acid phosphatase Prostate carcinoma
Alkali phosphatase Bone disease
12/4/2017 sty-ENZIM 44
 Half life of several plasma enzymes.

Enzyme Half life

GOT Circa 20 h
GPT Circa 50 h
GLDH Circa 18 h
LDH Circa 140 h
CPK Circa 15 h
Cholinesterase Circa 10 d
Lipase Circa 5 h
12/4/2017 sty-ENZIM 45
 ISO ENZIM = ISOZIM
38

14

12
Activity U/g organ

10

6 4.4
3.2
4 2.5

1.1
2 0.5
< 0. 01

Liver Kidney Brain Lung Heart Skeletal Erythrocyte

Muscle

Fig.39.5. Glutamate dehydrogenase activities in human organs.

12/4/2017 sty-ENZIM 46
 Gambar GLDH

Bentuk polimer enzim yg memiliki reaksi katalisnya

sama / serupa tetapi sifat fisik dan kimianya berbeda,
mis : gambaran elektro-foresisnya.
Mekanisme terjadinya bentuk isozim :
-. Dikendalikan oleh lokus genetik yg berlain-
an yg diekspresikan dlm berbagai jaringan
utk membtk polimer enzim aktif.
Beberapa isoenzim :
-. Laktat dehidrogenase
-. Kreatin fosfokinase, & Fosfo fruktokinase

12/4/2017 sty-ENZIM 47
 LAKTAT DEHIDROGENASE

Suatu enzim tetramerik.

Terdiri empat protomer dg dua type : H(eart)
type dan M(uscle) type.
Hanya molekul tetramerik yg punya aktivitas
katalitik protomer ini dpt menyusun jadi 5
type :

12/4/2017 sty-ENZIM 48
 These two subunits are combined in
five different types :
Tipe Composition location
LDH1 HHHH Myocard& RBC

LDH2 HHHM Myocard& RBC

LDH3 HHMM Brain & Kidney

LDH4 HMMM Brain & Kidney

LDH5 MMMM Liver & Skeletal muscle

12/4/2017 sty-ENZIM 49
 Phosphofructokinase

A tetrameric enzyme
Consists of two types of subunits : M
(Muscle) and L (Liver type).

These two types are combined to form five

tetramer : M4, M3L, M2L2, ML3 & L4

12/4/2017 sty-ENZIM 50
 Creatine Kinase (CK)

A dimer enzyme
Consists of two types of subunits I.E :
M (Muscle type) and B (Brain type).

12/4/2017 sty-ENZIM 51
 These two subunits are combined in three
different types :

Type Compositio Location

n
CK1 BB Mostly in brain

CK2 MB Only in myocardium

CK3 MM Mostly in skeletal

muscle
12/4/2017 sty-ENZIM 52
 Hubungan kelainan genetik dg
aktivitas enzim
Kelainan genetik memberi efek pd sintesis &
aktivitas enzim, yg dpt menimbulkan penya-
kit.
Misalnya :
1. Def. Anti elastase destructive lung disease
2. Cacad F.VIII (anti hemofili) hemofilia
3. Cacad aktivitas tirosin kinase gangguan
pertumbuhan & kelainan sel ca. mammae

12/4/2017 sty-ENZIM 53
 Abnormalitas alfa globulin, pada
Thalasemia

12/4/2017 sty-ENZIM 54
 Enzim dapat berfungsi utk
pengobatan
Streptokinase digunakan pd trombosis
Plasminogen oleh streptokinase plasmin
Fibrin oleh plasmin komponen mudah
larut
Streptokinase

Plasminogen Plasmin

fibrin More Soluble

Components.
12/4/2017 sty-ENZIM 55
 Asparaginase utk pengobatan
Leukemia

Asparagin oleh asparaginase asparagin

turun
Asparagin merupakan faktor nutrien sel
tumor asparagin turun viabilitas sel
tumor turun (pertumbuhan tumor terganggu)

12/4/2017 sty-ENZIM 56
 Note : not all of the enzymes are protein :
E.G : RNA molecules (I.E. L-19 RNA)
function as Ribonuklease and as RNA-
Polymerase.
L-19 RNA has characteristics as an enzyme :
1. Has a substrate spesificity (I.E. on
oligoribonucleotide)
2. Has a saturation phenomenon
3. It follows michaelis menten kinetic.

12/4/2017 sty-ENZIM 57
 SELESAI

TERIMA KASIH

12/4/2017 sty-ENZIM 58