ANA NUR YASIN

ANASDA AMAL
ANISHA PUTRI
AYU NOVIA KRISTIANI
FAKHRI AFIAN ZULFI
FATMAWATI
FATMA SARI
MAUDY NUR RIZQY
NURUL KHOTIMAH
TINA DWI RAHAYU

1
 Pirogen merupakan substansi yang
m a m p u m e n y e ba b k a n de m a m d a n
sering mencemari sediaan
farmasi.Sampai saat ini, substansi
pirogenik yang diketahui paling aktif dan
paling sering mencemari sediaan
farmasi adalah endoktoksin, selain itu
masih banyak substansi pirogenik
lainnya seperti bakteri, fungi, DNA-RNA
virus, protein, polipeptida dan lain
(Usman,1988).
2
 Termostabil, sehingga hanya dapat dihilangkan dengan
pemanasan pada suhu 650oC selama 1 menit

 Larut dalam air

 Tidak dipengaruhi oleh bakterisida biasa

 Tidak menguap

 Berat Molekul (BM) antara 15.000-4.000000

 Ukuran umumnya 1-50 millimikron

3
PIROGEN

EKSOGEN

4
 PIROGEN ENDOGEN
Pada intinya, semua pirogen endogen adalah sitokin, molekul yang merupakan bagian dari sistem
kekebalan tubuh. Mereka diproduksi oleh sel-sel kekebalan tubuh diaktifkan dan menyebabkan
peningkatan titik thermoregulatory set di hipotalamus. Pirogen endogen terdapat pada :

a. interleukin 1 (α dan β),

b. interleukin 6 (IL-6).

Pirogen endogen kecil termasuk :

a. interleukin-8,

b. tumor necrosis factor-β,

c. makrofag inflamasi protein-α

d. makrofag inflamasi protein-β

e. interferon-α, interferon-β, dan interferon-γ.

5
 Salah satu model untuk mekanisme demam yang disebabkan oleh pirogen
eksogen meliputi LPS, yang merupakan komponen dinding sel bakteri
gram negatif. Sebuah protein kekebalan yang disebut protein
lipopolisakarida mengikat (LBP) mengikat LPS. LBP-LPS kompleks
maka berikatan dengan reseptor CD14 dari makrofag dekatnya. Hasil ini
mengikat dalam sintesis dan pelepasan berbagai faktor endogen sitokin,
seperti interleukin 1 (IL-1), interleukin 6 (IL-6), dan tumor necrosis factor-
alpha. Dengan kata lain, faktor-faktor eksogen menyebabkan pelepasan
faktor endogen, yang, pada gilirannya, mengaktifkan jalur asam arakidonat
(Walter F. 2003; 1300).

6
7
 Endotoksin merupakan suatu produk miroorganisme
terutama dari gram negatif yang terdiri atas suatu senyawa kompleks
lipopolysakarida yang pyrogenic, suatu protein dan suatu lipid yang
inert.Pada saat ini endoktoksin diketahui merupakan pirogen yang
paling kuat, namun kehadiran pirogen lain dalam suatu sediaan perlu
diperhitungkan karena manusia tidak hanya dipengaruhi endoktoksin
saja tetapi juga pirogen yang lain (Gennaro et al., 1990).

8
Depirogenasi merupakan proses penghilangan pirogen dengan berbagai cara,
baik secara fisik maupun kimia.

9
 Destilasi

Menghilangkan pelarut, seperti air dari endotoksin dan

bahan tidak murni lainnya dan ini sangat efektif. Hal ini
dimungkinkan untuk menenggelamkan/menghilangkan beban
endotoksin atau "Beban pyro" yang terlalu tinggi.

Osmotik Balik

Dalam depyrogenation air dengan reverse osmosis (RO), air

dipaksa melalui pori-pori yang sangat kecil dalam membran
melawan gradien osmotik; air melewati membran, tetapi endotoksin
tidak.

10
 Ultrafiltrasi

Ultrafiltrasi adalah proses yang efektif yang mengandalkan

larutan atau molekul menjadi depyrogenation yang secara
signifikan lebih kecil dari endotoksin.
Resin Penukar
Ion
Resin penukar anion akan menghapus endotoksin
bermuatan negatif. Penggunaan teknologi ini untuk menghilangkan
endotoksin dan memurnikan enzim.

11
 Karbon
Teraktifasi
Karbon aktif mengikat dan menghilangkan molekul organik,
termasuk endotoksin, dan dapat efektif dalam depyrogenasi
larutan. Karbon aktif dapat didepirogenasi oleh panas kering
sebelum digunakan untuk depyrogenasi
Perangkat
Afinitas
Perangkat dengan afinitas khusus untuk endotoksin yang
tersedia untuk menghilangkan endotoksin. Ini termasuk Polymyxin
B di sepharosa atau kolom kromatografi agarosa, perangkat
afinitas heparin, dan histamin sepharosa.

12
 Mencuci atau
Membilas
Mencuci atau membilas dapat digunakan untuk
menghilangkan endotoksin dari partikel padat yang tidak dapat
depyrogenation oleh panas kering

13
 Hidrolisis Asam

Hidrolisis asam ringan pada hubungan glikosidik antara

lipid A dan bagian struktur gula. Lipid A bebas maka agregat dan
relatif nonpyrogenic sampai itu dilarutkan.

• Hidrolisis Basa

Perawatan dengan larutan alkali yang digunakan dalam

pembersihan dan perawatan untuk mengurangi kontaminasi
endotoksin, terutama peralatan seperti tank dan tabung.
Mekanisme depyrogenation adalah dengan saponifikasi asam
lemak dari lipid A.

14
• Oksidasi

Hidrogen peroksida telah terbukti menjadi agen efektif untuk

depyrogenation dikonsentrasi tinggi pada suhu yang tinggi (27%
pada 1000C).

15
 Radiasi

Dosis sterilisasi dari radiasi (radiasi γ) tidak efisien untuk

mengurangi secara signifikan konsentrasi endotoksin. Dosis yang tinggi
akan menghancurkan endotoksin tetapi mungkin dapat mempengaruhi
bahan, terutama plastic.

• Panas Lembab

Autoklaf umumnya tidak dianggap sebagai cara yang efektif

untuk depyrogenation, tetapi memiliki beberapa efek. Siklus panjang,
terutama pada suhu tinggi dan tekanan, akan merusak endotoksin,
misalnya, 5 jam pada 20 psi dan pH 8,2, atau 2 jam pada pH 3,8. Pada
15 p.s.i. (tekanan biasanya digunakan dalam otoklaf), penurunan yang
signifikan dalam konsentrasi endotoksin telah dilaporkan setelah tiga
jam.

16
 Panas Kering

Panas kering adalah metode yang paling efektif dan sering digunakan
untuk depyrogenasi banyak partikel. Asalkan partikel dapat mentolerir
paparan panas, itu adalah metode pilihan.

17