Gas Chromatography

Mass Spectrometry
(GCMS)

by Adi putra
• GC = memisahkan komponen yang bersifat
volatil pada suhu oven yang diterapkan atau
komponen nonvolatil yang dapat diubah
menjadi volatil dengan derivatisasi.
• MS = Mengionisasi molekul dengan di tembak
eletron dan menghasilkan spektrum massa yang
menunjukkan massa molekul dan massa pecahan
dari molekul.
 Oven
Injection
port
He

Detector

Recorder-
computer
Carrier Gas
Column
 Gas Chromatography
• Faktor yang dipertimbangkan pada pemisahan GC :
– Gas pembawa (Fase Gerak)
– Jenis kolom (fase diam termaksud suhu kolom)
– Jenis detektor
– Jenis sampel.
Fase Bergerak (Gas Pembawa)
Syarat :
• Nonreaktif, nonflammable, murah.
• Kompatibilitas dengan detektor, keamanan, keterbatasan
kisaran suhu untuk mendapatkan efek yang diinginkan.
• Lebih berfungsi sebagai pendorong
• Pemilihan lebih didasarkan pada harga, ketersediaan,
kompatibilitas detektor.
• Dapat berbeda dalam laju difusi solut dalam gas pembawa
yang bersangkutan ---> mempengaruhi efisiensi kolom
• Gas pembawa terbaik pada kecepatan aliran umum : gas
hidrogen, tetapi :
- Mudah terbakar (bercampur dengan oksigen)
- Dapat bereaksi dengan sampel --> hydrogenated
artefacts
• Purifikasi gas pembawa sangat diperlukan untuk :
mengurangi kerusakan fase diam dan mengurangi noise
yang berasal dari detektor ( mengurangi kekotoran
detektor).
• Harus ada trap untuk oksigen dan air:
- Karbon aktif : untuk mengurangi impuritas senyawa
organik.
HETP effisiensi kolom
Jenis Sampel
• Dapat berupa gas atau cairan, untuk padatan harus
dilarutkan dulu dalam pelarut volatil.
• Harus stabil terhadap panas dan mempunyai tekanan
uap yang sesuai dengan suhu kolom.
• Usahakan untuk menghilangkan komponen nonvolatil
dari sampel -----> terdeposit pada injektor.
 Oven
Pengaturan suhu untuk optimasi pemisahan
molekul (sesuai kebutuhan)
• Isothermal (suhu konstan)
• Temperature programming (gradiasi)mulai
dari temperatur rendah menuju temperatur
tinggi
 Typical Temperature Program
220C

160C

50C

0 60
Time (min)
GC – Isothermal vs Temperature Programming
Sistem Introduksi Sampel
• Sistem inlet harus menerima dan mengirim sampel
dalam jumlah tepat, tidak melebihi kapasitas kolom dan
kisaran linier detektor.
• Sampel harus terevaporasi cepat dan dibawa komponen
ke kolom sebagai band yang tajam.
• Tidak terjadi kerusakan selama sampel berada dalam
injektor.
• Umumnya sampel dibawa ke injektor dengan
menggunakan syringe
• Berbagai teknik injeksi syringe: on-column, hot needle,
cold needle, filled needle, solvent flush; pilih syringe
dengan panjang yang tepat.
 Injector
• Ketika proses inject Syringe menembus
septum hingga kedalam liner
• Sampel harus segera di uapkan (di ubah
menjadi gas) biasanya d set dg suhu tinggi (
+250)
• Terjadi proses split atau splitless
• Carrier gas mendorong sampel masuk ke
dalam kolom
 Splitless (100:90) vs. Split (100:1)
Syringe Syringe

Injector Injector

He
He

Purge valve
closed Purge valve
GC column GC column open
Figure Injection port operation for (a) split, (b) splitless, and
(c) on-column injection into an open tubular column.
 Kolom GC
Tabung kolom dapat terbuat dari : gelas, stainless steel (untuk packed column)
dan fused silica (untuk kolom kapiler).

Jenis kolom berdasar kan kepolaran : kolom polar , semipolar dan non polar

Jenis kolom berdasarkan ukuran:

Microbore Open Open Megabore Open
Packed Tubular Tubular Tubular

Panjang (m) 0.5 - 3 5 - 50 5 - 100 5 - 100

Internal diam 2-4 > 0.1 0.18-0.32 0.53-1.00
(mm) (i.d.)
Film thickness (µm) 1 - 10 0.1 0.2-2 1-5
Packed column masih banyak digunakan untuk beberapa aplikasi khusus seperti
analisis gas (CO2, N2, O2, etilen, dan lain-lain). ---> karena kapasitasnya yang
besar -----> pemisahan dapat terjadi.
Untuk aplikasi lainnya ----> kebanyakan kolom kapiler

Kolom Kapiler

Lapisan polimer poros

Support dan stationary

Packed WCOT PLOT phase
column
SCOT
 Capillary Tube GAS CHROMATOGRAPHY
Liquid Stationary Phase

A ABA A
A B
BA B B B B
B A A
He Carrier gas He Carrier gas B
AA B A B B B A
A BA A A B B
B A
0 Time

Immediately after injection After several minutes Resulting chromatogram

Terbentuk gaya Van der Waals ( gaya dipol-dipol termaksut ikatan hidrogen) antara
komponen (A dan B) dengan fasa diam
 Polar vs. nonpolar
• Prinsip “Like disolve like”
• Pemisahan terjadi karena sifat kepolaran
sampel dan tekanan uap.
 C16:0 C18:2
C18:1

C16:1 C18:0

Polar column RT (min)

C18:2

C18:1
C16:0

C16:1 C18:0

RT (min)
Non-polar column
 SPEKTROMETRI MASSA
• Molekul diionisasi sehingga terbentuk ion-ion yang
dapat dianalisis lebih lanjut.

dihasilkan spektrum massa : menunjukkan massa

molekul dan massa pecahan dari molekul.
Ionisasi molekul

• Diusahakan untuk membentuk ion positif dengan cara

menarik satu e - dari molekul awalnya dilakukan dengan

electron bombardment terhadap molekul

Ion positif yang terbentuk terfragmentasi lebih lanjut

Jenis Ionisasi
• Ada 2 jenis ionisasi :
1 Hard ionisation : EI
2 Soft ionisation meminimumkan fragmentasi
lebih lanjut
 CH3OH + e - CH3OH +• ( m/z 32) + 2 e -

CH3OH +• CH2OH + (m/z 31) + H•

CH3 + ( m/z 15 ) + • OH

CH2OH + CHO + ( m/z 29 ) + H2

Simbol +• → ion radikal • = radikal

= Odd electron (OE)
Ion yang mempunyai pasangan e- = even electron (EE)
• Produk radikal (netral atau ionik) terbentuk dari ion
OE +•
Ion dihasilkan melalui teknik EI (Electron Ionisation)
dan reaksi yang bersifat unimolekuler (Elektron
Impact)
CH3 OH •+ ion molekul
(molecular ion)
Ion (m/z) dengan intensitas relatif 100 % yang
dsebut dg base peak.
• m/z ion molekul menunjukkan massa relatif dari molekul
berat molekul
Fragmentasi
• Untuk membentuk ion molekul dibutuhkan energi
minimal sama dengan potensial ionisasi pertama dari
molekul.
• Kebanyakan molekul organik mempunyai potensial
ion.  8 - 15 eV ( 1 eV = 9.649 x 10 4 J mol -1)
• Ionisasi pada MS dicapai melalui berbagai cara yang
melibatkan energi lebih besar dari energi yang cukup
untuk pembentukan ion EI ( 20 - 70 eV )
• Proses fragmentasi menghasilkan sejumlah ion
spektrum massa
pola fragmentasi

Karakteristik dari suatu komponen

• Ada 4 faktor yang menentukan pathway fragmentasi :

• Kekuatan ikatan yang pecah
• Stabilitas fragment, baik ion maupun netral
• Energi internal ion fragment
• Time interval antara pembentukan ion dan deteksi
ion
 QQQ Mass Spectrometer

Precursor ion (parent ion) vs. Product ions (daughter ion)

m/z Int (%)
13 1.7
14 2.4
15 13.0
17 1.0
28 6.3
29 64.0
30 3.8
31 100.0
32 66.0
33 1.0
 SIM vs SCAN

• SCAN Analisis masaa memantau berbagai rasio

(biasanya kualitatif)
• SIM Analisa Massa hanya untuk beberapa rasio yang
di inginkan (biasanya kuantitatif)
1. Hidrokarbon

43

29 87
71 85
114
 57

43
 83

55

41

112
TERIMAKASIH

Adi putra