• Sentrifugasi metode sedimentasi untuk memisahkan partikel-partikel dari suatu
fluida berdasarkan berat jenisnya dengan memberikan gaya sentripetal
• Prinsip melawan gaya gravitasi dengan kekuatan sentrifugal sehingga partikel
yang terlarut dalam cairan akan terlempar keluar dari pusat putaran dengan berat paling besar akan terlempar lebih dulu disebut Relative Centrifugal Force (RCF) dalam satuan g PRINSIP KERJA
• Partikel yang tersuspensi akan mengendap (bersedimentasi) ke dasar karena
gaya gravitasi • Hasil sentrifugasi terbagi dua : supernatan dan pellet • Supernatan substansi hasil sentrifugasi yang memiliki bobot jenis yang lebih rendah berada pada lapisan, warnanya lebih jernih • Pelet substansi hasil sentrifugasi yang memiliki bobot jenis yang lebih tinggi KECEPATAN PUTARAN • Diukur dalam rpm tidak menggambarkan daya pemisah alat • Terminologi yang benar Relative Centrifuge Force dalam satuan g Rumus : BAGIAN-BAGIAN ALAT SENTRIFUS JENIS ROTOR
ROTOR SWING OUT
• Selongsong tabung melekat secara bebas • Saat diputar selongsong akan mendatar/ horizontal • Kecepatan putaran rendah, sekitar 3000 rpm JENIS ROTOR
ROTOR ANGLE ATAU FIXED
• Selongsong tabung melekat secara tetap • Membentuk sudut kemiringan 45˚ • Kecepatan putaran dapat lebih cepat disbanding rotor swing out sekitar 7000 rpm JENIS-JENIS SENTRIFUS
• General purpose centrifuge (table top) untuk pemisahan sampel urin, serum atau cairan lain • Microcentrifuge • Speciality centrifuge • Ultra centrifuge, contoh : microhematrocit centrifuges, blood bank centrifuges ULTRASENTRIFUS
• Memiliki kecepatan tinggi
• Umumnya memakai rotor fixed • Dilengkapi pendingan • Kecepatan dapat mencapai 20.000 x g atau 15.000 rpm • Contoh penggunaan ultrasentrifus adalah pemisahan lipoprotein dengan kilomikron PENGGUNAAN SECARA BENAR
• NCCLS kecepatan pemutaran 1000-1200 g selama 5-15 menit
• Gunakan tabung sesuai dengan anjuran pabrik pembuat sentrifus • Untuk kecepatan di atas 5000 g gunakan tabung polipropilen • Jangan dioperasikan bila belum tertutup rapat atau dalam keadaan tabung belum seimbang • Kecepatan dinaikkan secara bertahap, tidak dibenarkan langsung memasang kecepatan tinggi • Tunggu sampai berhenti, jangan diperlambat menggunakan tangan • Setelah berhenti diamkan sekitar 5 menit PERAWATAN
• Keseimbangan diperlukan selama sentrifugasi akan terjadi
getaran bila tidak seimbang
• Getaran sedimen yang sudah terbentuk dapat terurai,
mempercepat kerusakan alat KALIBRASI
• Kalibrasi paling sedikit setiap 3 bulan sekali
• Alat : Tachometer (kontak dan optik) • Tachometer kontak mengukur rpm dengan menempelkan alat ke bagian sentrifus yang berputar • Tachometer optik mengukur rpm berdasarkan pantulan permukaan yang sedang berputar KALIBRASI
• Bila sentrifus memiliki pengatur waktu periksa secara berkala
dengan stopwatch (perbedaan tidak boleh > 10%)
• Bila memiliki pendingin periksa suhu perbulan, tidak boleh