Oleh:

Vilya Syafriana, M.Si.

Berikut adalah beberapa istilah
dalam pengendalian mikroorganisme

A. BIOCIDE
• Istilah umum yang menggambarkan agen kimia,
biasanya spektrum luas, yang menginaktivasi
mikroorganisme.
• Biocides bisa berupa antiseptik, desinfektan,
atau pengawet.
Aktivitas biocides terhadap mikroorganisme
bergantung pada:
1. lingkungan fisik eksternal;
2. Sifat, struktur, komposisi, dan kondisi
mikroorganisme itu sendiri
3. kemampuan mikroorganisme untuk
menurunkan atau menonaktifkan biosida.
B. BAKTERIOSTATIK
• Istilah spesifik yang mengacu pada properti
dimana biosida mampu menghambat perkalian
bakteri; multiplikasi dilanjutkan setelah
pengangkatan agen.
• Istilah "fungistatic" dan "sporostatic" mengacu
pada biocides yang menghambat pertumbuhan
jamur dan spora.
C. BAKTERISIDA
• Istilah khusus yang mengacu pada properti dimana biosida
mampu membunuh bakteri.
• Tindakan bakterisidal berbeda dari bakteriostasis hanya jika
tidak dapat diubah; yaitu, organisme "terbunuh" tidak dapat
lagi bereproduksi, bahkan setelah dikeluarkan dari kontak
dengan agen tersebut.
• Dalam beberapa kasus, agen menyebabkan lisis
(pembubaran) sel; Dalam kasus lain, sel tetap utuh dan
bahkan mungkin terus aktif secara metabolik.
• (Istilah "fungisida", "sporicidal," dan "virucidal" mengacu
pada properti dimana biocides mampu membunuh jamur,
spora, dan virus, masing-masing).
D. STERILISASI
• Proses fisik atau kimiawi yang benar-benar menghancurkan
atau menghilangkan semua kehidupan mikroba, termasuk
spora.
E. DISINFEKSI
• adalah penghancuran mikroorganisme patogen dengan proses
yang gagal memenuhi kriteria sterilisasi.
• Disinfeksi menggunakan agen kimia untuk membunuh patogen
dengan efisiensi bervariasi yang dikenal sebagai
DISINFECTANTS.
• Desinfektan tidak harus bersifat sporicidal, namun bersifat
sporostatik, menghambat perkecambahan atau pertumbuhan.
F. SEPTIC
• Ditandai dengan adanya mikroba patogen dalam
jaringan hidup.
G. ANTISEPTIC
• adalah agen desinfektan yang dapat digunakan
pada permukaan tubuh seperti kulit atau saluran
vagina untuk mengurangi jumlah flora normal
dan kontaminan patogen.
• Mereka memiliki toksisitas lebih rendah daripada
desinfektan yang digunakan secara lingkungan
namun biasanya kurang aktif dalam membunuh
organisme vegetatif.
H. ASEPTIK
• Ditandai dengan tidak adanya mikroba patogen.
• menggambarkan proses yang dirancang untuk
mencegah mikroorganisme mencapai
lingkungan yang terlindungi.
I. SANITASI
• adalah istilah yang kurang tepat dengan makna
di suatu tempat antara desinfeksi dan
kebersihan. Hal ini digunakan terutama dalam
konteks persiapan rumah tangga dan makanan.
J. PRESERVASI
• Pencegahan perkalian mikroorganisme dalam
produk olahan, termasuk obat-obatan dan
makanan.

K. ANTIBIOTIK
• Senyawa organik alami atau alami yang
menghambat atau menghancurkan bakteri
selektif
Modes of Action

A. KERUSAKAN PADA DNA

• Sejumlah agen fisik dan kimia bertindak dengan
merusak DNA; Ini termasuk radiasi pengion, sinar
ultraviolet, dan bahan kimia reaktif DNA.
• Di antara kategori terakhir adalah agen alkilasi
dan senyawa lainnya yang bereaksi secara
kovalen dengan pangkal purin dan pirimidin
untuk membentuk adukan DNA atau interstrand
cross-link.
B. PROTEIN DENATURATION

• Denaturasi dikenal sebagai gangguan struktur

tersier protein.
• Protein ada dalam keadaan tiga dimensi terlipat
yang ditentukan oleh hubungan disulfida kovalen
intramolekuler dan sejumlah hubungan nonkovalen
seperti ikatan ionik, hidrofobik, dan hidrogen.
Keadaan ini disebut struktur tersier protein;
• itu mudah terganggu oleh sejumlah agen fisik atau
kimia, menyebabkan protein menjadi tidak
berfungsi.
C. DISRUPTION OF CELL MEMBRANE OR WALL
Banyak senyawa secara aktif diangkut melalui
membran, terkonsentrasi di dalam sel.
Zat yang berkonsentrasi pada permukaan sel dapat
mengubah sifat fisik dan kimia membran, mencegah
fungsi normalnya dan karena itu membunuh atau
menghambat sel.

Dinding sel berfungsi sebagai struktur korset,

melindungi sel terhadap lisis osmotik. Dengan
demikian, agen yang menghancurkan dinding
(misalnya lisozim) atau mencegah sintesis normalnya
(misalnya penisilin) dapat menyebabkan lisis sel.
D. REMOVAL OF FREE SULFHYDRYL GROUPS
• Protein enzim yang mengandung sistein memiliki rantai
samping yang berakhir pada kelompok sulfhidril.
• Selain itu, koenzim seperti koenzim A dan
• dihidrolipoat mengandung gugus sulfhidril bebas.
• Enzim dan koenzim semacam itu tidak dapat berfungsi
kecuali kelompok sulfhidril tetap bebas dan berkurang.
• Agen pengoksidasi dengan demikian mengganggu
metabolisme dengan membentuk hubungan disulfida
antara kelompok sulfhidril yang berdekatan: Banyak logam
seperti ion mercurik juga ikut campur dengan
menggabungkan dengan sulfhydryls: Ada banyak enzim
sulfhydryl di dalam sel; Oleh karena itu, zat pengoksidasi
dan logam berat melakukan kerusakan luas.
E. CHEMICAL ANTAGONISM
• Interferensi oleh agen kimia dengan reaksi normal
antara enzim spesifik dan substratnya dikenal
sebagai "antagonisme kimiawi."
• Antagonis bekerja dengan menggabungkan
beberapa holoenzyme (baik protein apoenzyme,
aktivator mineral, atau koenzim), sehingga
mencegah pelekatan substrat normal.
• Sebagai contoh, karbon monoksida dan sianida
bergabung dengan atom besi dalam enzim yang
mengandung heme dan mencegah fungsinya dalam
respirasi.
Sterilisasi
Sterilisasi merupakan proses penghancuran atau
penghilangan mikroorganisme, termasuk
bakteri dan sporanya.
Sterilisasi medium kultur dan peralatan kerja
dalam kerja mikrobiologi sangatlah penting untuk
isolasi dan perawatan mikroorganisme.
Dalam proses pengobatan dan operasi,
sterlisasi alat, obat-obatan dan barang lainnya
penting untuk pencegahan infeksi.
Sterilisasi dapat dilakukan secara
I. Fisika
A. Heat/Pemanasan
1) Dry heat = pemanasan kering
2) Moist heat = pemanasan basah
B. Radiations /Radiasi
1) Ultraviolet radiations = UV
2) Ionizing radiations
C. Filtration/Penyaringan
II. Kimia
A. Ethylene oxide
B. Disinfectants
I. Sterilisasi Fisika:
A. Pemanasan
Sterilisasi panas merupakan metode yang
paling dipercaya dan banyak digunakan untuk
bahan yang tahan panas.
Metode sterilisasi panas dengan penggunaan
uap air disebut sterilisasi panas lembap/basah;
sedangkan tanpa kelembapan (tanpa
penggunaan uap air) disebut sterilisasi panas
kering.
Panas kering: suhu 160 C – 180 C
Panas basah: suhu 115 C – 134 C
• Proses sterilisasi panas ini terdiri atas tiga tahap,
yaitu:
1. Tahap pemanasan (heating stage): peningkatan
suhu bahan yang disterilisasi
2. Tahap sterilisasi (holding stage): waktu yang
diperlukan untuk proses sterilisasi
3. Tahap pendinginan (cooling stage): waktu yang
diperlukan untuk penurunan suhu bahan yang
disterilisasi
FAKTOR-FAKTOR YANG MEMPENGARUHI
STERILISASI OLEH PANAS
1. Suhu dan waktu: berbanding terbalik, waktu
yang lebih singkat cukup pada suhu tinggi.
2. Jumlah mikroorganisme dan spora: Jumlah
korban hilang secara eksponensial dengan
durasi pemanasan
3. Bergantung pada jenis, strain dan
kemampuan pembentukan spora mikroba.
4. Titik kematian termal adalah suhu terendah
untuk memberikan pembunuhan lengkap dalam
suspensi berair dalam waktu 10 menit.
5. Bergantung pada sifat bahan: kandungan zat
organik yang tinggi umumnya cenderung
melindungi spora dan organisme vegetatif
terhadap panas.
6. Kehadiran disinfektan organik atau anorganik
memfasilitasi pembunuhan karena panas
7. pH juga berperan penting dalam membunuh
mikroorganisme
1. Sterilisasi Panas Kering (Dry Heat)
Mechanism of killing by dry heat
Mematikan organisme dengan cara mengoksidasi
komponen sel ataupun mendenaturasi enzim.
Dry heat is employed for glassware; syringes, metal
instruments and paper wrapped goods, which are not
spoiled by high temperatures.
It is also used for anhydrous fats, oils and powders
that are impermeable to moisture.
Tidak dapat digunakan untuk bahan-bahan yang
terbuat dari karet atau plastik.
Metode ini tidak memerlukan air sehingga tidak ada
uap air yang membasahi alat atau bahan yang
disterilkan
Ada dua metode sterilisasi panas kering, yaitu
dengan insinerasi (pembakaran menggunakan api
bunsen, suhu 350 C), dan panas Oven (suhu 160-170
C).
STERILIZATION BY DRY HEAT: INSINERASI

 TEMPERATUR TINGGI
• Inokulasi kabel, titik forceps dan spatula yang membakar
disterilkan dengan menahannya di api pembakar Bunsen sampai
mereka terlihat panas merah.

 MENYALA
• Metode ini digunakan untuk sterilisasi pisau bedah, mulut
tabung budaya, kaca slide dll.
• Ini melibatkan pelepasan sebuah artikel melalui api Bunsen
tanpa membiarkannya menjadi merah-panas.
STERILIZATION BY DRY HEAT: OVEN
 Ini adalah sarana utama sterilisasi dengan
panas kering.
 Paparan pada suhu 160 ° C selama 2 - 3
jam umumnya digunakan.
 Rendah menembus
2. Sterilisasi Panas Basah (Moist Heat)
Mekanisme membunuh dengan panas yang lembab
• Panas yang melembabkan membunuh
organisme dengan menggumpalkan dan
mendenaturasi enzim dan protein strukturalnya.
• Panas lembab digunakan untuk sterilisasi media
kultur, dan semua bahan lain yang bisa ditembus
oleh uap
• Panas lembab lebih efektif daripada panas kering
METHODS OF STERILIZATION BY MOIST HEAT
Moist heat can be employed at:
 Temperature below 100 °C:
 Industri makanan: 60-800 C

 Susu: 630 C selama 30 menit atau 720 C, 15

menit
 Plasma manusia: pasteurisasi 600 C, selama 10 menit

 Temperature of 100 °C
 Peralatan dan cairan: selama 5-10 menit

 Perebusan menggunakan air mendidh 1000 C selama

10 menit efektif untuk sel-sel vegetatif dan spora

eukariot, tetapi tidak efektif untuk endospora bakteri.
 Temperature above 100 °C
o In Pasteurization of milk the temperature employed is
either 63 °C for 30 minutes or 72 °C for 20 seconds.
o All nonspore-forming pathogens in milk like
Salmonellae, M.tuberculosis are killed.
High temperatures
can cause damage to
the taste, texture and
nutritional value of
many food
substances and in
such instances, it is
sufficient to destroy
vegetative cells by a
process of
pasteurisation.
[Sumber: Barraquio, 2014]
Autoklaf
 It is the method most widely used for sterilization of
culture media and surgical supplies
 Prinsip: terjadi koagulasi yang lebih cepat dalam
keadaan basah dibandingkan kering.
 Dapat membunuh mikroorganisme dengan cara
mendenaturasi enzim atau mengkoagulasi protein
pada enzim dan membran sel mikroorganisme.
 Normally autoclaving: 115 °C for 15 minutes
Tindalisasi
Efek yang serupa dengan yang dicapai oleh
autoklaf dapat diperoleh dengan metode yang
disebut mengukus intermiten atau
tyndallisation.
Ini digunakan untuk bahan atau bahan yang
mungkin rusak oleh suhu tinggi yang digunakan
dalam otoklaf.
Bahan dipanaskan sampai antara 90 dan 1000 C
selama sekitar 30 menit pada masing-masing
tiga hari berturut-turut, dan tertinggal pada
suhu 370 C pada periode intervensi.
Sterilisasi Pengeringan (Desikasi)
Metode sterilisasi dengan
menghilangkan kandungan
air
A desiccator is used for
the cooling of heated
objects and for the
storage of dry objects that
must not be exposed to
the moisture normally
present in the
atmosphere.
Ultraviolet Light and Ionizing
Radiation
1. Ultraviolet Light
Cahaya ultraviolet (UV) pada rentang panjang
gelombang 240 sampai 280 nm diserap oleh
asam nukleat dan menyebabkan kerusakan
genetik, termasuk pembentukan dimer timin.
Radiasi UV memiliki daya tembus yang sangat
buruk; Lapisan tipis kaca, kertas atau kain
mampu menghalangi jalannya sinar.
Lampu UV biasanya ditemukan di area
persiapan makanan, bioskop operasi dan area
spesialis seperti fasilitas kultur jaringan,
dimana penting untuk mencegah kontaminasi.
Karena mereka juga berbahaya bagi manusia
(terutama kulit dan mata), lampu UV hanya
bisa dioperasikan di area seperti saat orang
tidak hadir.
2. Ionizing Radiation
Radiasi pengion membawa energi jauh lebih besar
daripada sinar UV. Ini juga menyebabkan kerusakan DNA
langsung dan menghasilkan radikal bebas beracun dan
hidrogen peroksida dari air di dalam sel mikroba.
Radiasi pengion memiliki panjang gelombang yang lebih
pendek dan energi yang jauh lebih tinggi, memberi
mereka kekuatan penetrasi yang lebih besar.
Gunakan untuk perlengkapan bedah, makanan
Sinar katoda dan sinar gamma dari kobalt-60
banyak digunakan dalam proses industri,
termasuk sterilisasi banyak persediaan bedah
sekali pakai seperti sarung tangan, jarum
suntik plastik, wadah spesimen, beberapa
bahan makanan, dan sejenisnya, karena bisa
dikemas sebelum dipaparkan ke radiasi
tembus.
Radiasi gamma telah disetujui untuk digunakan di
lebih dari 40 negara untuk pelestarian makanan,
yang tidak hanya dengan membunuh bakteri
patogen dan pembusukan tetapi juga dengan
menghambat proses yang menyebabkan tumbuh
dan matang.

Iradiasi tidak sesuai untuk beberapa bahan

makanan, seperti makanan dengan kadar lemak
tinggi, yang rasanya enak dan berbau tidak sedap.
Radiasi pengion memiliki keuntungan besar
dibandingkan metode sterilisasi lain sehingga bisa
menembus kemasan.
Cairan yang akan rusak akibat panas seperti
larutan serum dan antibiotik dapat
disterilkan dengan penyaringan
Ketika cairan dilewatkan melalui filter
penghilang bakteri, bakteri tersebut bebas
dari bakteri.
Hal ini berguna untuk membuat persiapan
produk larut pertumbuhan bakteri seperti
toksin
Filter yang efisien harus bisa
mempertahankan Serratia marcescens
Filter dulu terbuat dari bahan seperti asbes
dan kaca sinter, namun sebagian besar telah
diganti dengan filter membran, umumnya
terbuat dari nitroselulosa atau polikarbonat.
Ukuran pori 0.22μm biasa digunakan; Ini akan
menghilangkan bakteri plus, tentu saja, sesuatu
yang lebih besar, seperti ragi; Namun,
Mycoplasma dan virus mampu melewati pori-
pori seukuran ini.
Dengan ukuran pori 10 kali lebih kecil dari ini,
hanya virus terkecil yang bisa melewatinya, jadi
penting agar ukuran pori yang sesuai dipilih
untuk setiap tugas yang diberikan.
TYPES OF FILTERS
There are different kinds of filters
1. Earthenware candles - called Berkfield &
Chamberland filters
2. Asbestos and asbestos-paper discs filters -
called Seitz filters
3. Sintered glass filters
4. Cellulose membrane filters
5. Fibre glass filters.
 SEITZ FILTER

SINTERED GLASS FILTER

ASBESTOS DISCS
 Membrane filters
 Made up of nitro-cellulose membranes
 Made with different grades of porosity by
adjusting the concentration of constituents
1. Sterilisation using ethylene oxide
• Penggunaan gas etilen oksida, bagaimanapun,
adalah
• efektif melawan bakteri, spora dan virus mereka.
• Ini digunakan untuk mensterilkan peralatan medis
dalam jumlah besar, dan bahan seperti plastik yang
akan rusak akibat perlakuan panas.
• Etilen oksida sangat efektif dalam mensterilkan
barang seperti pembalut dan kasur, karena kekuatan
penetrasi yang besar.
• Di industri makanan, digunakan sebagai fumigan
antijamur, untuk pengobatan buah kering, kacang-
kacangan dan rempah-rempah.
Bahan yang akan dirawat ditempatkan di ruang khusus
yang disegel dan diisi dengan gas di atmosfer lembab pada
suhu 40-50 ◦C selama beberapa jam.
Etilen oksida sangat mudah meledak, jadi harus digunakan
dengan sangat hati-hati; penggunaannya diberikan lebih
aman dengan memberikannya dalam campuran (10 persen)
dengan gas yang tidak mudah terbakar seperti karbon
dioksida.
Hal ini juga sangat beracun, sehingga semua barang harus
benar-benar dimerah dengan udara steril setelah
perawatan untuk menghilangkan bekasnya.
Etilen oksida adalah zat alkilasi; itu mendenaturasi protein
dengan mengganti hidrogen labil seperti pada kelompok
sulfidril dengan radikal hidroksil etil
2. Disinfection
Disinfeksi adalah penghilangan atau penghambatan
mikroorganisme patogen pada atau pada suatu
benda sehingga tidak lagi menimbulkan ancaman.
Desinfektan adalah zat kimia yang digunakan untuk
mendisinfeksi benda mati seperti permukaan kerja
dan lantai.
Desinfektan tidak mampu membunuh spora dalam
jangka waktu yang wajar, dan umumnya efektif untuk
mendapatkan kisaran organisme yang lebih sempit
daripada sarana fisik.
Dekontaminasi adalah istilah yang kadang-
kadang digunakan secara bergantian dengan
desinfeksi, namun ruang lingkupnya lebih luas,
meliputi pemindahan atau inaktivasi produk
mikroba seperti toksin dan juga organisme itu
sendiri.

Tindakan mematikan desinfektan terutama

disebabkan oleh kemampuan mereka untuk
bereaksi dengan protein mikroba, dan karena itu
enzim.
a. Alcohols
Etanol dan isopropanol paling banyak digunakan
pada konsentrasi 70 persen.
Serta protein denaturasi, alkohol dapat bertindak
dengan melarutkan lipida, dan dengan demikian
memiliki efek mengganggu pada membran, dan
pada selubung virus tertentu.
Baik bakteri dan jamur dibunuh dengan pengobatan
alkohol, namun spora sering resisten karena masalah
dalam rehydrating mereka; Ada catatan spora
antraks yang bertahan dalam etanol selama 20
tahun!
Penggunaan alkohol lebih terbatas pada bahan yang
dapat menahan tindakan pelarutnya.
b. Halogens
Klorin adalah desinfektan yang efektif sebagai gas
bebas, dan sebagai komponen senyawa pelepasan
klorin seperti hipoklorit dan kloramina.
Gas klorin, dalam bentuk terkompresi, digunakan
dalam desinfeksi persediaan air kota, kolam
renang dan industri susu.
Sodium hipoklorit (pemutih rumah tangga)
mengoksidasi ikatan sulfida (-SH) dan disulfida (S-
S) dalam protein.
Iodine bekerja dengan menggabungkan residu
tirosin pada protein; Efeknya ditingkatkan
dengan dilarutkan dalam etanol (1 persen I2
dalam 70 persen etanol) sebagai tinktur yodium,
desinfektan kulit yang efektif.
Penggunaannya digantikan oleh iodophores
(Betadine, Isodine), dimana yodium digabungkan
dengan molekul organik, biasanya berupa
deterjen, untuk melawan bakteri, virus dan
jamur, namun tidak spora.
c. Phenolics
Karena sangat beracun, penggunaan fenol dalam
desinfeksi luka telah lama dihentikan, namun
turunannya seperti cresols dan xylenols terus
digunakan sebagai desinfektan dan antiseptik.
Ini sama sekali tidak beracun bagi manusia dan
lebih efektif melawan bakteri daripada senyawa
induknya.
Phenolics bekerja dengan menggabungkan
protein denaturasi, serta mengganggu membran
sel.
Keuntungan mereka meliputi retensi aktivitas
dengan adanya zat organik dan deterjen, dan
kemampuan mereka untuk tetap aktif selama
beberapa waktu setelah aplikasi; maka efeknya
meningkat dengan penggunaan berulang.
Disinfektan yang familiar seperti Dettol, Lysol
dan chlorhexidine (Hibitane, Hibiscrub)
semuanya adalah turunan fenol.
d. Surfactants
Surfaktan mengurangi ketegangan antara dua
molekul pada sebuah antarmuka.
Bahan aktif permukaan atau surfaktan, seperti
sabun dan deterjen, memiliki kemampuan
untuk mengorientasikan dirinya di antara dua
antarmuka untuk mendekatkan mereka ke
kontak yang lebih dekat.
Nilai sabun kurang berhubungan dengan sifat
disinfektannya dibandingkan dengan
kemampuan untuk memfasilitasi penghilangan
kotoran dan mikroorganisme secara mekanis.
Hal ini dilakukan dengan mengemulikan sekresi
minyak, sehingga kotorannya harus dibilas.
Deterjen mungkin anionik (bermuatan
negatif),kationik (bermuatan positif) atau
nonionik.
Detergen kationik seperti senyawa amonium
kuartener bertindak dengan menggabungkan
dengan fosfolipid untuk mengganggu membran
sel dan mempengaruhi permeabilitas seluler.
Mikroorganisme memiliki sensitivitas
berbeda- beda terhadap metode sterilisasi
tertentu.
Endospora bakteri resisten terhadap
panas, iradiasi dan detergen.
Mycoplasma dan virus tidak dapat
dihilangkan dengan filter steril (0,2 μm)