TEKNIK ISOLASI

DNA
F1D016024 Djuita Harti A.
F1D017001 Mai Awbina
F1D017005 Zera Trisna
F1D017009 Candika Illona S.
F1D017011 Leni Maryana
F1D017021 Ema Kurnia
F1D017053 Nopi Lestari Dosen Pengampu
F1D017054 Ismi Indriya N. Dr. Sipriyadi, S.Si., M.Si
 01
PENDAHULUAN
GOALS
 INTRODUCTION

Identifikasi molekuler memerlukan tahapan

awal yaitu isolasi DNA genom.
Prinsip isolasi DNA adalah mendapatkan DNA
murni yang tidak tercampur dengan komponen
sel lainnya seperti protein dan karbohidrat.
Kualitas DNA genom yang
baik merupakan hal penting
yang dibutuhkan dalam
aplikasi biologi molekuler
 DNA
DNA (DeoxyriboNucleat Acid) merupakan
struktur biomolekul komplek yang ada
disetiap sel prokariotik dan eukariotik yang
menyusun gen di dalam inti sel.

DNA berperan dalam pewarisan informasi

genetika makhluk hidup, sebagai perantara
duplikasi diri dan pewaris sifat, serta
berfungsi dalam membentuk ekpresi
informasi genetika.
DEFINISI ISOLASI DNA
Isolasi DNA merupakan langkah awal
yang harus dilakukan dalam proses
rekayasa genetika sebelum memasuki
proses selanjutnya.
Secara umum,
Tahapan Isolasi DNA
1. Isolasi Sel
2. Lisis dinding dan membran sel
3. Ekstraksi dalam larutan
4. Purifikasi
5. presipitasi
 02
PRINSIP ISOLASI DNA
 Prinsip dasar isolasi DNA/RNA dari jaringan adalah dengan
memecah dan mengekstraksi jaringan tersebut sehingga akan
01 terbentuk ekstrak sel yang terdiri DNA, RNA dan substansi
dasar lainnya.

Prisnsip isolasi DNA pada berbagai jenis sel atau jaringan pada
02 berbagai organisme pada dasarnya sama namun memiliki
modifikasi dalam hal teknik dan bahan yang digunakan.

Prisnsip utama dalam isolasi DNA ada tiga yakni penghancuran

03 (lisis), ektraksi atau pemisahan DNA dari bahan padat seperti
selulosa dan protein, serta pemurnian
 03
TAHAPAN ISOLASI DNA
 METHODS Isolasi
Jaringan

Tahap Lisis
CARA
α Penggerusan
α Sentrifugasi Tahap Ekstraksi
α Larutan pelisis sel

Tahap Purifikasi

Tahap Presipitasi
Memberikan larutan
amonium asetat
 04
CONTOH ISOLASI DNA
 ISOLASI DNA CABAI

Sample Metode

- Daun cabai diambil

- Ditimbang
- Dilakukan isolasi DNA
Daun Segar “Isolasi DNA tanaman cabai dilakukan
dengan teknik penggerusan di dalam
mikrotube dan mortar”
- Analisis data
“Hasil isolasi DNA dilihat
dengan elektroforesis gel
agarosa 0,8% pada tegangan
Daun di 20°C 100 V selama 30 menit”
HASIL ANALISIS DAUN CABAI

Perbedaan Kualitas Daun

hasil isolasi DNA dari daun
yang telah didinginkan (D)
menunjukkan pita yang lebih
tebal dibandingkan dengan
DNA dari daun segar (S) yang
hanya sedikit.
HASIL ANALISIS DAUN CABAI
adanya
perbedaan
hasil isolasi
DNA antara
perlakuan
penggerusan
dalam
mikrotube
(Mt) dan
penggerusan
dalam
mortar (Mr).
KESEIMPULAN
Prinsip dasar isolasi DNA/RNA dari jaringan dengan
memecah dan mengekstraksi jaringan tersebut sehingga
akan terbentuk ekstrak sel yang terdiri dari DNA,RNA,
dan subtansi lainnya.
Prinsip dasar DNA mendapatkan DNA murni yang tidak
tercampur dengan komponen sel lainnya.

Prosedur isolasi DNA adalah mengisolasi sel, kemudian

melisiskan dinding dan membran sel, lalu ekstraksi dalam
larutan, purifikasi, terakhir melakukan presipitas
THANKS!