Kelompok 6 :

1. Haerudin
2. Dita Fahira
3. Alifiya Syafira Ayuningsih
2021

KROMATOGRAFI
GAS DAN HPLC
2021

DEFINISI DAN TEORI KROMATOGRAFI GAS

Kromatografi Gas adalah proses pemisahan campuran menjadi

komponen-komponennya dengan menggunakan gas sebagai fase
bergerak yang melewati suatu lapisan serapan (sorben) yang diam.
Kromatografi gas termasuk dalam salah satu alat analisa (analisa
kualitatif dan analisa kuantitatif), kromatografi gas dijajarkan sebagai
cara analisa yang dapat digunakan untuk menganalisa senyawa-senyawa
organic.
RANCANGAN KROMATOGRAFI GAS

Fase Mobil (Gas Detektor

01 Pembawa) 04

02 Sistem Injeksi Sampel 05 Pencatat (Recorder)

03 Kolom
2021

CARA KERJA KROMATOGRAFI GAS

1.Mencuci jarum suntik dengan aseton dengan mengisi jarum suntik mendepak sepenuhnya
dan aseton limbah ke kertas handuk. Cuci 2-3 kali.
2.Tarik beberapa sampel Anda ke dalam jarum suntik
3.Pastikan tabel perekam dan diatur ke kecepatan grafik yang sesuai (Arrow A). Mengatur
baseline menggunakan nol pada tabel perekam (Arrow B). Dengan pena di tempat,
menyalakan bagan (Arrow D), pastikan pena ke bawah (yang menandai kertas) dan
kertas bergerak.
4.Menyuntikkan sampel Anda baik ke kolom A atau kolom B sesuai instruksi. Pegang tingkat
jarum suntik dan mendorong jarum sepenuhnya ke injector.
5.Menandai waktu injeksi Anda pada tabel perekam. Ini dapat dilakukan dengan
menyesuaikan nol tepat setelah sampel disuntikkan
6.Bersihkan jarum suntik Anda segera setelah injeksi. Jarum suntik sering tersumbat dengan
cepat dan harus diganti jika mereka tidak dibersihkan setelah setiap penggunaan.
7.Catatan pengaturan perekam grafik Anda selama berjalan. Anda perlu mengetahui
kecepatan grafik dan pengaturan skala penuh.
KELEBIHAN

a.Waktu analisis yang singkat dan ketajaman pemisahan yang tinggal.

b. Dapat menggunakan kolom lebih panjang untuk menghasilkan
efisiensi pemisahan yang tinggi.
c.       Gas mempunyai vikositas yang rendah.
d.      Kesetimbangan partisi antara gas dan cairan berlangsung cepat
sehingga analisis relatif cepat dan sensitifitasnya tinggi.
e.       Pemakaian fase cair memungkinkan kita memilih dari sejumlah
fase diam yang sangat beragam yang akan memisahkan hampir segala
macam campuran.
KEKURANGAN

a.Teknik Kromatografi gas terbatas untuk zat yang mudah menguap

b. Kromatografi gas tidak mudah dipakai untuk memisahkan campuran
dalam jumlah besar. Pemisahan pada tingkat mg mudah dilakukan,
pemisahan pada tingkat gram mungkin dilakukan, tetapi pemisahan dalam
tingkat pon atau ton sukar dilakukan kecuali jika ada metode lain.
c. Fase gas dibandingkan sebagian besar fase cair tidak bersifat reaktif
terhadap fase diam dan zat terlarut.
2021

SAMPEL YANG DAPAT DIANALISIS DENGAN GC

1.      Produk Gas Alam 6.      Alkohol
2.      Kemurnian Pelarut 7.      Steroid
3.      Asam Lemak 8.      Minyak Atsiri
4.      Residu Pestisida 9.      Flavor
5.      Polusi Udara 10.  Ganja (mariyuana)
2021

Kromatografi cair
kinerja tinggi

Kromatografi cair kinerja tinggi merupakan salah satu metode pemisahan

komponen-komponen campuran berdasarkan distribusi diferensial dari perbedaan
sifat fisik komponen-komponen sampel diantara dua fase, yaitu fase gerak dan fase
diam. Kromatografi dapat digunakan untuk analisa kualitatif maupun kuantitatif.
2021

kepolaran fase gerak KCKT

Fase normal
Pada fase normal, kolom diisi oleh senyawa polar seperti partikel silika yang
berukuran sangat kecil dan fase gerak yang digunakan adalah senyawa non-polar
seperti n-heksan. Senyawa-senyawa polar dalam campuran yang melewati
kolom akan terelusi lebih lama daripada senyawa non-polar, sehingga senyawa
non-polar akan semakin cepar melewati kolom. Semakin non-polar fase gerak,
semakin lama waktu yang dibutuhkan senyawa polar untuk terelusi. Fase normal
digunakan untuk sampel dengan sifat non-polar sehingga proses analisisnya akan
cepat.
2021

Fase balik

Pada fase balik, kolom diisi dengan partikel silika yang telah dimodifikasi menjadi non-
polar melalui pelekatan hidrokarbon dengan rantai panjang pada permukaannya secara
sederhana baik berupa atom karbon 8 atau 18. Sedangkan fase gerak yang digunakan
merupakan senyawa polar. Pada kondisi ini, akan terjadi interaksi yang kuat antara pelarut
polar dengan molekul polar pada campuran yang melalui kolom. Namun interaksi yang
terjadi tidak sekuat interaksi antara rantai hidrokarbon yang berlekatan pada silika dan
molekul non-polar dalam campuran. Oleh karena itu senyawa polar akan lebih cepat
terelusi melalui kolom sedangkan senyawa non-polar akan bergerak lambat karena adanya
interaksi dengan gugus hidrokarbon.
2021
Komponen kromatografi cair kinerja tinggi
Fase gerak
berfungsi untuk membawa komponen-komponen
campuran menuju ke detektor, fase gerak juga
berinteraksi dengan solut-solut.
Kolom
Kolom utama berisi fase diam dimana terjadinya
pemisahan campuran menjadi komponen-
komponen. Berdasarkan keperluannya, kolom
utama dapat digunakan untuk analisis ataupun
preparatif.
Pompa
pompa berfungsi untuk mengalirkan fase gerak melalui
kolom yang berisi sebuk halus. Pompa yang digunakan
merupakan pompa bertekanan tinggi karena fase gerak
akan sukar mengalir dalam kolom yang depadatkan
dengan serbuk halus oleh karena itu perlu adanya
tekanan tinggi untuk mengalirka fase gerak dalam
kolom.
Injektor sampel
Sampel-sampel cair dan larutan disuntikkan secara
langsung kedalam fase gerak yang mengalir dibawah
tekanan menuju kolom menggunakan alat penyuntik
yang terbuat dari tembaga tahan karat dan katup
teflon yang dilengkapi dengan sample loop internal
atau eksternal.
2021
Detektor
Detektor universal merupakan detektor yang
dapat mendeteksi golongan senyawa apapun
kecuali pelarutnya sedangkan detektor
selektif adalah detektor yang peka terhadap
golongan senyawa tertentu saja.
Rekorder
Rekorder adalah suatu alat yang digunakan
untuk mencetak hasil analisis pada lembar
berupa kumpulan puncak (kromatogram).
Kromatogram yang didapat inilah yang
digunakan untuk analisis kualitatif dan
kuantitatif suatu sampel.
2021

Jenis- Jenis HPLC

1.Kromatografi 4. Kromatografi
Adsorbsi Pasangan ion

2.Kromatografi 5. Kromatografi
fase terikat Eksklusi Ukuran
(Kromatografi
Partisi) 6. Kromatografi
Afinitas
3.Kromatografi
penukar ion
2021
Kelebihan dan Kekurangan Kromatografi Cair kinerja Tinggi :
Kelebihan :
• Mampu memisahkan
molekul-molekul dari suatu
campuran
• Mudah melaksanakannya
• Resolusinya yang baik
• Dapat digunakan bermacam-
nacam detektor
• Kolom dapat digunakan
kembali Mudah melakukan
sampel recovery
Kekurangan :
• Larutan harus dicari fase
diamnya terlebih dahulu
• Hanya bisa digunakan untuk
asam organik
• Harus mengetahui kombinasi
yang optimum antara pelarut,dan
gradient elusi
2021

SEKIAN DAN
TERIMA KASIH