Bioteknologi

Dosen Pengampu :
Rahmadya Kusuma Putri, M.Pd
 Kelompok 5
Yulisna Lismana ACD 118 033
Onesima Marianne Tamba ACD 118 035
Rossa ACD 118 043
Juleha ACD 118 044
Windy Melanie ACD 118 054
Nova Tri Kusuma Dewi ACD 118 059
 Pemaparan

3. 7 Inisiasi Kultur
3. 8 Evolusi Garis Sel
3. 9 Pengembangan Garis Sel Terus Menerus
3. 10 Asal Usul Sel Yang Dikultur
3.7
Inisiasi Kultur
Kultur sel primer merupakan kultur yang dimulai dari sel, jaringan, organ yang diperoleh langsung dari
organisme asalnya, sedangkan cell line ialah kultur yang diperoleh dari subkultur pertama dari kultur
primer.

Kultur jaringan diturunkan oleh pertumbuhan sel yang bermigrasi dari fragmen jaringan atau oleh
penyebaran enzimatik atau mekanis jaringan. Sedangkan kultur primer adalah yang pertama dalam
serangkaian proses selektif yang dapat menimbulkan kesamaan pada cell line.

Setelah pertemuan tercapai, sel yang pertumbuhannya sensitif terhadap kontak dan kepadatan yang
terbatas dari sel proliferations sel-sel yang pertumbuhannya sensitif terhadap penghambatan kontak dan
pembatasan kepadatan proliferasi sel, akan berhenti membelah, sementara sel-sel yang berubah, yang
tidak peka terhadap batasan kepadatan, akan cenderung tumbuh terlalu cepat
3.8
Evolusi Garis Sel
Evolusi Garis Sel. Sumbu vertikal (Y) mewakili pertumbuhan sel total (dengan asumsi tidak ada
reduksi saat lewat) untuk kultur sel hipotetis. Jumlah sel total (hasil sel) diwakili pada sumbu ini
pada skala log, dan waktu dalam budaya ditampilkan pada sumbu X pada skala linier. Meskipun
garis sel kontinu digambarkan muncul pada 14 minggu, dengan sel yang berbeda itu bisa muncul
kapan saja. Demikian juga, penuaan dapat terjadi kapan saja, tetapi untuk fibroblas diploid
manusia kemungkinan besar akan terjadi antara 30 dan 60 penggandaan sel, atau 10 hingga 20
minggu, tergantung pada waktu penggandaan. Ketentuan dan definisi yang digunakan adalah
seperti pada glosarium.
Kultur primer dikenal sebagai garis sel dan mungkin diperbanyak dan disubkultur beberapa kali.
Dengan masing-masing subkultur berturut-turut, komponen populasi dengan kemampuan untuk
berkembang biak paling cepat akan secara bertahap mendominasi, dan tidak berkembang biak atau
berkembang biak perlahan sel akan diencerkan. Ini paling mencolok terlihat setelah subkultur
pertama, di mana perbedaan proliferatif kapasitas diperparah dengan berbagai kemampuan untuk
bertahan trauma tripsinisasi dan transfer.

Meskipun beberapa seleksi dan penyimpangan fenotipik akan lanjutkan, pada bagian ketiga budaya
menjadi lebih stabil dan ditandai oleh yang agak kuat, berkembang biak dengan cepat sel.
Ketidakcukupan kondisi budaya sebagian besar harus disalahkan untuk masalah ini, dan kemajuan
yang cukup besar sekarang telah dibuat dalam penggunaan media dan substrat selektif untuk
pemeliharaan dari banyak garis sel khusus.
3.8.1 Penuaan
Sel normal dapat membelah beberapa kali; karenanya, garis sel yang berasal dari
jaringan normal akan mati setelah jumlah tetap dua kali lipat populasi. Ini secara
genetik peristiwa tertentu yang melibatkan beberapa gen yang berbeda dan dikenal
sebagai penuaan. Diperkirakan ditentukan, sebagian, oleh ketidakmampuan urutan
terminal DNA dalam telomer untuk bereplikasi pada setiap pembelahan sel. Hasilnya
adalah pemendekan telomer secara progresif sampai akhirnya sel tidak dapat
membagi lebih lanjut. Pengecualian untuk aturan ini adalah sel germinal, sel induk,
dan sel yang diubah, yang sering mengekspresikan enzim telomerase, yang mampu
mereplikasi urutan terminal DNA di telomer dan memperpanjang masa hidup sel,
tanpa batas dalam kasus ini sel germinal dan beberapa sel tumor.
 3.9
Pengembangan Garis Sel
Terus Menerus
Upaya awal kultur jaringan dilakukan pada tahun 1885 oleh ahli zoologi Jerman Wilhelm Roux , yang
membudidayakan jaringan dari embrio ayam dalam larutan garam hangat. Keberhasilan nyata pertama
datang pada tahun 1907, bagaimanapun, ketika ahli zoologi Amerika Ross G. Harrison menunjukkan
pertumbuhan proses sel saraf katak dalam media getah bening yang menggumpal .
Ahli bedah Prancis Alexis Carrel dan asistennya Montrose Burrows kemudian memperbaiki teknik
Harrison, melaporkan kemajuan awal mereka dalam serangkaian makalah yang diterbitkan pada tahun
1910–11. Carrel dan Burrows menciptakan istilah kultur jaringan dan mendefinisikan konsep tersebut.
Setelah itu, sejumlah peneliti berhasilbudidaya sel hewan, menggunakan sebagai media kultur berbagai
cairan biologis, seperti getah bening, serum darah, plasma, dan ekstrak jaringan. Pada 1980-an dan 90-
an, metode dikembangkan yang memungkinkan para peneliti berhasil menumbuhkan sel induk
embrionik mamalia di bawah kondisi buatan.
Sel dapat ditumbuhkan dalam media kultur yang berasal dari biologi seperti serum darah atau ekstrak
jaringan, dalam media sintetis yang ditentukan secara kimia , atau dalam campuran keduanya. Sebuah
media harus mengandung proporsi yang tepat dari nutrisi yang diperlukan untuk sel-sel yang akan
dipelajari dan harus asam atau basa yang tepat. Kultur biasanya ditumbuhkan baik sebagai lapisan
tunggal sel pada permukaan kaca atau plastik atau sebagai suspensi dalam media cair atau semipadat.

Untuk memulai kultur, sampel kecil jaringan didispersikan pada atau di dalam medium, dan labu,
tabung, atau pelat yang berisi kultur kemudian diinkubasi, biasanya pada suhu yang mendekati suhu
lingkungan normal jaringan. Kondisi steril dipertahankan untuk mencegah kontaminasi dengan
mikroorganisme. Kultur terkadang dimulai dari sel tunggal, menghasilkan produksi populasi biologis
seragam yang disebut klon . Sel tunggal biasanya menimbulkan koloni dalam waktu 10 sampai 14 hari
ditempatkan di bawah kondisi kultur. Ada dua jenis kultur utama: kultur primer (fana) dan kultur garis sel
yang mapan (abadi). Kultur primer terdiri dari sel, jaringan, atau organ normal yang diambil langsung
dari jaringan yang dikumpulkan melalui biopsidari organisme hidup.
Kultur primer menguntungkan karena pada dasarnya memodelkan fungsi alami sel, jaringan, atau organ
yang diteliti. Namun, semakin lama sampel dipertahankan dalam kultur, semakin banyak mutasi yang
terakumulasi, yang dapat menyebabkan perubahan struktur kromosom dan fungsi sel. Selain itu, budaya
primer umumnya fana. Sel mengalami proses penuaan dimana mereka berkembang biak hanya untuk 50
sampai 100 generasi, setelah itu tingkat menurun tajam. Titik di mana sel-sel dalam kultur primer berhenti
tumbuh, atau mengalami penuaan replikatif, menandai apa yang disebut batas Hayflick.

Sebaliknya, garis sel yang mapan dapat diabadikan tanpa batas. Garis sel tersebut umumnya berasal
dari biopsi tumor dari pasien, atau mungkin dihasilkan dari sel primer yang telah mengalami mutasi yang
memungkinkan mereka untuk mengatasi batas Hayflick dan melanjutkan replikasi. Mirip dengan sel-sel
dalam kultur primer, sel-sel dalam garis yang mapan mengakumulasi mutasi dari waktu ke waktu yang
dapat mengubah karakternya.
3.10
Asal Usul Sel Yang
Dikultur
Kapasitas untuk mengekspresikan penanda yang berbeda di bawah pengaruh kondisi
penginduksi dapat berarti baik bahwa sel yang dikultur sudah matang dan hanya
membutuhkan induksi untuk melanjutkan sintesis protein khusus atau bahwa kultur
terdiri dari prekursor atau sel induk yang mampu berproliferasi tetapi tetap tidak
berdiferensiasi sampai kondisi menginduksi yang benar diterapkan, dimana beberapa
atau semua sel menjadi matang dan berdiferensiasi.

Sumber budaya juga akan menentukan komponen seluler mungkin ada. Oleh karena
itu, garis sel diturunkan dari embrio mungkin mengandung lebih banyak sel induk dan
prekursor sel dan mampu memperbaharui diri lebih besar daripada budaya dari orang
dewasa.
Selain itu, kultur dari jaringan yang mengalami pembaruan terus menerus in vivo mungkin masih
mengandung sel induk, yang, di bawah kondisi yang sesuai, akan memiliki umur yang panjang
rentang, sedangkan kultur dari jaringan yang memperbaharui hanya di bawah stres mungkin
hanya mengandung sel prekursor dengan rentang hidup terbatastukan komponen seluler
mungkin ada.

Jadi identitas sel yang dikultur tidak hanya ditentukan oleh garis keturunannya in vivo, tetapi juga
oleh posisinya dalam garis keturunan itu.

Ketika sel dibiakkan dari neoplasma, mereka membutuhkan: tidak mematuhi aturan tersebut.
Jadi hepatoma dari tikus mungkin berkembang biak secara in vitro dan masih mengekspresikan
beberapa fitur yang berbeda, tetapi semakin dekat mereka dengan fenotipe normal, lebih banyak
induksi diferensiasi dapat menghambat proliferasi.
 Kesimpulan
1. Inisiasi adalah pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan dikulturkan, Kultur
jaringan diturunkan oleh pertumbuhan sel yang bermigrasi dari fragmen jaringan atauoleh
penyebaran enzimatik atau mekanis jaringan. Sedangkan kultur primer adalah yang pertama
dalam serangkaian proses selektif yang dapat menimbulkan kesamaan pada cell line.
2. Garis sel yang berasal dari jaringan normal akan mati setelah jumlah tetap dua kali lipat
populasi. Ini secara genetik peristiwa tertentu yang melibatkan beberapa gen yang berbeda
dan dikenal sebagai penuaan. Diperkirakan ditentukan, sebagian, oleh ketidakmampuan
urutan terminal DNA dalam telomer untuk bereplikasi pada setiap pembelahan sel. Hasilnya
adalah pemendekan telomer secara progresif sampai akhirnya sel tidak dapat membagi lebih
lanjut
3. Sel-sel dalam garis yang mapan mengakumulasi mutasi dari waktu ke waktu yang dapat
mengubah karakternya, . Identitas sel diverifikasi melalui proses yang dikenal sebagai
otentikasi, di mana profil DNA dari sel yang dikultur dibandingkan dengan profil yang diketahui
atau profil standar untuk garis sel tersebut.
4. Jadi identitas sel yang dikultur tidak hanya ditentukan oleh garis keturunannya in vivo
(hematopoietik, hepatosit, glial, dll.), tetapi juga oleh posisinya dalam garis keturunan itu (sel
induk, sel prekursor, atau sel dewasa yang berdiferensiasi). Meskipun perkembangan turun
jalur diferensiasi telah dianggap sebagai ireversibel.
Thank!