Daun jeruk sambal yang akan digunakan sebagai eksplan dipilh daun muda yang tidak terdapat bercakbercak

hama, dikarenakan bercak hama akan memudahkan kontaminasi pada kultur yang dilakukan daun yang diambil pada daun ketiga. Kemudian dilakukan sterilisasi eksplan yaitu daun muda dicuci dengan air mengalir kemudian ditambah sabun sunligt beberapa tetes direndam Selama 15 menit. Perendaman dangan sabun pecuci agar membunuh kontaminan seperti mikroba yang menempel di daun.Setelah itu eksplan di aliri dengan air mengalir agar sabun yang digunakan tidak terdapat lagi pada daun . Daun muda yang telah disterilisasi di bawa keruang Penanaman dengan ,dimana ruang penanaman ini si setting secara aseptis.