UJI AKTIVITAS ANTIHIPERLIPIDEMIA DAN ANTIATEROSKLEROSIS ISOLAT ANDROGRAFOLID DAN EKSTRAK TERPURIFIKASI HERBA SAMBILOTO (Andrographis paniculata (Burm.

f) Ness) PADA TIKUS DIABETES MELLITUS TIPE 2 RESISTEN INSULIN

TESIS Diajukan untuk memenuhi sebagian persyaratan mencapai derajat Master of Science (M.Sc.) Magister Farmasi Sains dan Teknologi

Oleh: Ni Kadek Warditiani 10/306382/PFA/963

Kepada PROGRAM PASCASARJANA PROGRAM STUDI ILMU FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS GADJAH MADA YOGYAKARTA 2012

Pernyataan

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam tesis ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya ataupun pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Yogyakarta, Januari 2012 Yang membuat pernyataan

Ni Kadek Warditiani

ii

KATA PENGANTAR Puji syukur saya panjatkan kehadapan tuhan Yang Maha Esa karena berkat dan rahmat-Nya lah, saya dapat menyelesaikan tesis ini yang berjudul Uji Aktivitas Antihiperlipidemia dan Antiaterosklerosis Isolat Andrografolid dan Ekstrak Terpurifikasi Herba Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f) Ness) pada Tikus Diabetes Melitus Tipe 2 Resisten Insulin tepat pada waktunya. Penyusunan tesis ini tidak lepas dari dukungan, saran, bimbingan dari berbagai pihak. Maka dari itu, pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Bapak Prof. Dr. Marchaban, DESS., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada. 2. Bapak Dr. Agung Endro Nugroho, M.Si., Apt., selaku Dosen Pembimbing I yang telah membimbing dan membantu penulis dalam penyusunan tesis ini. 3. Bapak Prof. Dr. Suwidjiyo Pramono, Apt. selaku Dosen Pembimbing II yang telah membimbing dan membantu penulis dalam penyusunan tesis ini. 4. Bapak Prof. Dr. Lukman Hakim, M.Sc., dan Bapak Dr.rer.nat. Nanang Fakhrudin, M.Si., Apt selaku Dosen Penguji yang telah memberi masukan dan saran kepada penulis dalam menyusun tesis ini. 5. Seluruh Dosen dan Staf Pegawai Program Pasca Sarjana Farmasi Universitas Gadjah Mada yang telah memberi bantuan dan bimbingan kepada penulis. 6. Seluruh keluarga besar di Bali, terima kasih atas doa dan bantuan selama ini, sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal tesis ini. 7. Seluruh teman Sainstek Pasca Sarjana Angkatan 2010, terima kasih atas bantuan dan kerjasamanya selama ini. 8. Terima kasih untuk Suamiku dan Anakku tersayang. Terima kasih atas doa dan dukungannya selama ini, sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal tesis tepat pada waktunya.
ii

iii

9. Terima kasih kepada teman seperjuangan Eka Siswanto, Muhammad Andre dan Irfan Setiawan atas kerja sama dan semangatnya. 10. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan proposal tesis ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.

Penulis menyadari bahwa penyusunan tesis ini masih jauh dari sempurna. Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Harapan penulis semoga tesis ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang memerlukan.

Yogyakarta, Januari 2012

Penulis

iv

DAFTAR ISI

Pernyataan ....................................................................................................... Kata Pengantar ................................................................................................. Daftar Isi .......................................................................................................... Daftar Gambar ................................................................................................. Daftar Tabel ..................................................................................................... Daftar Singkatan ............................................................................................. Abstract ........................................................................................................... Intisari ............................................................................................................. BAB I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang ..................................................................................... B. Rumusan Masalah ................................................................................ C. Keaslian Penelitian............................................................................... D. Tujuan Penelitian ................................................................................. E. Manfaat Penelitian................................................................................ BAB II. TINJAUAN PUSTAKA A. Tinjauan Pustaka ................................................................................. 1. Tinjauan tentang sambiloto ........................................................... 2. Tinjauan tentang ekstrak terpurifikasi ........................................... 3. Tinjauan tentang isolasi andrografolid .......................................... 4. Tinjauan tentang diabetes melitus (DM) tipe 2 resisten insulin .... 5. Tinjauan tentang lemak darah ........................................................ 6. Tinjauan tentang aterosklerosis ..................................................... 7. Tinjauan tentang HPLC ................................................................ 8. Tinjauan tentang hewan uji DM tipe 2 resisten insulin ................. B. Landasan Teori .................................................................................... C. Hipotesis............................................................................................... D. Formulasi Hipotesis ............................................................................. BAB III. CARA PENELITIAN A. Variabel Penelitian ..............................................................................
iv

i ii iv vi ix x xi xii

1 4 4 5 5

6 6 9 10 12 16 22 24 26 27 28 28

29

B. Alat dan Bahan Penelitian ................................................................... C. Jalannya Penelitian .............................................................................. BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil Penelitian ................................................................................... 1. Identifikasi simplisia ............................................................................ 2. Hasil ekstraksi....................................................................................... 3. Isolasi andrografolid ............................................................................ 4. Identifikasi isolat andrografolid .......................................................... 5. Standarisasi ekstrak terpurifikasi herba sambiloto .............................. 6. Uji pendahuluan ................................................................................... 7. Uji resistensi insulin ............................................................................ 8. Uji aktivitas farmakologi ..................................................................... B. Pembahasan Penelitian ........................................................................ BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan .......................................................................................... B. Saran .................................................................................................... Daftar Pustaka ................................................................................................. LAMPIRAN ................................................................................................... RINGKASAN TESIS .................................................................................... SUMMARY ................................................................................................... NASKAH PUBLIKASI ................................................................................

29 30

55 55 55 58 59 66 70 76 78 87

99 99 101 110 154 184 209

vi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Gambar 2. Gambar 3.

Tanaman sambiloto beserta bunga dan biji ............................... Struktur kimia andrografolid...................................................... Mekanisme molekuler asam lemak menginduksi terjadinya resisten insulin pada otot .............................................................

6 7

18

Gambar 4.

Alternatif mekanisme molekuler asam lemak menginduksi terjadinya resisten insulin pada otot ............................................ 19

Gambar 5.

Oksidasi dan agregasi LDL yang dimediasi makrofag dan pembentukan sel busa (foam cells) .............................................. 23

Gambar 6.

Histopatologi aorta yang telah diwarnai dengan pewarna hematocylin-eosin ....................................................................... 23

Gambar 7.

Aksi hipoglikemi glibenklamid yang diberikan pada kelompok normal dan resisten insulin........................................................... 26 51 52

Gambar 8. Gambar 9. Gambar 10.

Skema kerja pembuatan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto ...

Skema Kerja Isolasi dan Identifikasi Andrografolid .....................

Skema pengujian resistensi insulin pada tikus diberi asupan fruktosa dan makanan kaya lemak................................................ 53

Gambar 11.

Skema

pengujian

aktivitas

antihiperlipidemi

dan 54

antiaterosklerosis ........................................................................ Gambar 12. Profil KLT andrografolid standar dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto yang dibuat dengan menggunakan etil asetat dan tanpa etil asetat...................................................................... Gambar 13. Profil KLT ekstrak terpurifikasi herba sambiloto di bawah sinar UV 254 ........................................................................................ Gambar 14. Profil spektrum FTIR isolat andrografolid (a) dan andrografolid standar (b)..................................................................................... Gambar 15. Profil KLT andrografolid standar (1) dan isolat andrografolid (2) dilihat di bawah sinar UV 254 (a) dan 366 (b)...................... Gambar 16. Profil KLT 2 dimensi isolat andrografolid dengan melakukan dua kali pengembangan menggunakan dua jenis fase gerak
vi

57

58

60

63

vii

dengan kepolaran yang berbeda................................................... Gambar 17. Gambar 18. Grafik kurva baku andrografolid standar ................................... Grafik kurva baku andrografolid standar. Hubungan luas area puncak terhadap variasi konsentrasi andrografolid standar ....... Gambar 19. Profil KLT ekstrak terpurifikasi herba sambiloto (1) dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto yang terhidrolisis (2) dibawah sinar UV 366 sebelum disemprot dengan pereaksi sitro borat (a) dan sesudah disemprot (b)........................................................... Gambar 20. Pengaruh pembebanan fruktosa dan makanan kaya lemak selama 50 hari terhadap berat badan tikus .................................. Gambar 21. Pengaruh pembebanan fruktosa dan makanan kaya lemak selama 50 hari terhadap kadar glukosa darah preprandial ........... Gambar 22. Pengaruh pembebanan fruktosa dan makanan kaya lemak selama 50 hari terhadap kadar glukosa darah postprandial ......... Gambar 23. Pengaruh pembebanan fruktosa dan makanan kaya lemak selama 50 hari terhadap kadar kolesterol darah ........................... Gambar 24. Pengaruh pembebanan fruktosa dan makanan kaya lemak selama 50 hari terhadap kadar trigliserida darah ......................... Gambar 25. Pengaruh pembebanan fruktosa dan makanan kaya lemak selama 50 hari terhadap kadar LDL darah .................................. Gambar 26. Aksi hipoglikemi glibenklamid yang diberikan pada tikus kelompok normal dan tikus fruktosa lemak................................. Gambar 27. Ekspresi protein GLUT-4 pada otot skeletal tikus normal (a) dan tikus fruktosa lemak (b)........................................................ Gambar 28. Perubahan kadar kolesterol darah pada tikus kelompok kontrol (negatif dan positif) dan perlakuan ............................................. Gambar 29. Perubahan kadar trigliserida darah pada tikus kelompok kontrol (negatif dan metformin) dan perlakuan ..................................... Gambar 30. Daya penurunan trigliserida darah yang diberikan pada tikus kelompok resisten insulin ............................................................ Gambar 31. Perubahan kadar LDL darah pada tikus kelompok kontrol

63 65

68

69

70

71

72

73

74

75

77

77

79

80

81

viii

(negatif dan metformin) dan perlakuan ...................................... Gambar 32. Daya penurunan LDL darah yang diberikan pada tikus kelompok resisten insulin ........................................................... Gambar 33. Histologi aorta kelompok tikus yang mengalami perlemakan dan tidak......................................................................................

82

82

85

ix

DAFTAR TABEL

Tabel I. Tabel II.

Tahapan analisis uji kualitatif andrografolid secara KLT ........... Posisi puncak dan ikatan iteratomikspektrum IR dari kristal andrografolid standar dan isolat andrgrafolid ..............................

32

61

Tabel III.

Data konsentrasi andrografolid standar dan luas area puncak hasil analisis menggunakan HPLC .............................................. 64

Tabel IV.

Data konsentrasi isolat andrografolid dan luas area hasil analisis menggunakan HPLC ................................................................... 65

Tabel V.

Ekstrak

terpurifikasi

yang

dibuat

selanjutnya

dicek 66 67

parameternya dan disesuaikan dengan standar yang ada ............ Tabel VI. Tabel VII. Data konsentrasi andrografolid standar dan luas area puncak ... Data konsentrasi ekstrak terpurifikasi herba sambiloto dan luas area puncak hasil analisis dengan menggunakan densitometri winCATS .................................................................................... Tabel VIII. Hasil Histopatologi Aorta Tikus .................................................

68 84

ix

DAFTAR SINGKATAN

asetil-CoA AS ACC2 A. paniculata CAD CMC-Na DM GLUT4 GOD-PAP HDL HPLC HE IRS-1 KLT LDL NADPH NF-B oxLDL PKC- RIA Rf STZ SEM UV VLDL

: Asetil Coenzim A : Andrografolid Standar : Asetil-CoA Karboksilase 2 : Andrographis paniculata : Cardiac Attact Disease : Carboxymethyl Cellulose-Natrium : Diabetes mellitus : Glucose Transpoter 4 : Glucose Oxidase Phenol Aminoantipyrine : High Density Lipoprotein : High Performance Liquid Chromatography : Hematocylin-Eosin : Insulin Receptor Substrat 1 : Kromatografi Lapis Tipis : Low Density Lipoprotein : Nicotinamide Adenine Dinucleotide Hydrogenase : Nuclear Factor kappa B : oxidasedLDL : Protein Kinase C tetha : Radioimmunoassay : Retention factor : Streptozotosin : Standar Error of the Mean : Ultraviolet : Very Low Density Lipoprotein

xi

ABSTRACT ANTIHYPERLIPIDEMIA AND ANTIATHEROSCLEROSIS ACTIVITIES OF ANDROGRAPHOLIDE AND PURIFIED EXTRACT BITTER HERB (Andrographis paniculata (Burm.f) Ness) IN INSULIN RESISTANT TYPE 2 DIABETES MELLITUS RATS Ni Kadek Warditiani(1), Agung Endro Nugroho(2), Suwidjiyo Pramono(3)
(1) Master Programme, Faculty of Pharmacy, Gadjah Mada University (2) Pharmacology and Toxicology Departement, Faculty of Pharmacy, Gadjah Mada University (3) Pharmaceutical Departement, Faculty of Pharmacy, Gadjah Mada University

Diabetes mellitus (DM) is a degeneratif disorder that highly happens in Indonesia community due to increasing blood sugar level above normal level. Insulin resistance type 2 DM is one of type 2 DM that marked not only by hyperglicemia but also hyperlipidemia (LDL, triglyceride and cholesterol level increases in bloods). The main objective of this investigation is to antihyperlipidemia and antiatherosclerosis activity of andrographolide (1.5 and 4.5 mg/kg bw twice daily) and purified extract of bitter herb (434.6 and 1303.8 mg/kg bw) in insulin resitance type 2 DM rat and also influence of fructose 1,8 g/kg bw and food high fat (15% lard and 5% yolk) will made plaque in vein rat. First step was to isolation andrographolide and to make purified extract bitter herb. Insulin resistant type 2 rat was prepared by inducing with fructose 1.8 g/kg bw and high fat food for 50 days. Andrographolide and purified extract were given for 5 days after that treatment, and then measure lipid level in bloods (LDL, triglyceride and cholesterol), last take aorta organ for atherosclerosis test. By HPLC analysis the purity of andrographolide (88.29 1.94)% was found. By HPTLC analysis the purity of purified extract (16.13 0.50)% was found. On other hand, administration of fructose and high fat food for 50 days has brought about plaque fat in vein rat. Administration andrographolide and purified extract of bitter herb decreased blood LDL and triglyceride levels (p<0.05), but not cholesterol when compared with control diabetic rat (p>0.05). Andrographolide and purified extract did not appear to give antiatherosclerosis effect.

Key words: andrographolide, bitter herb, atherosclerosis, insulin resistant, hyperlipidemia

xii

INTISARI

UJI AKTIVITAS ANTIHIPERLIPIDEMIA DAN ANTIATEROSKLEROSIS ISOLAT ANDROGRAFOLID DAN EKSTRAK TERPURIFIKASI HERBA SAMBILOTO (Andrographis paniculata (Burm.f) Ness) PADA TIKUS DIABETES MELLITUS TIPE 2 RESISTEN INSULIN Ni Kadek Warditiani(1), Agung Endro Nugroho(2), Suwidjiyo Pramono(3)
(1) (2) (3)

Program Pasca Sarjana Fakuktas Farmasi Universitas Gadjah Mada Bagian Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Bagian Biologi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada

Diabetes mellitus (DM) merupakan salah satu penyakit degeneratif yang banyak diderita oleh masyarakat Indonesia yang ditandai dengan terjadinya peningkatan kadar glukosa darah di atas nilai normal. Salah satu tipe DM adalah DM tipe 2 resistensi insulin. Pada penderita DM tipe 2 resistensi insulin, selain terjadi peningkatan kadar glukosa darah juga mengalami peningkatan kadar lemak darah (LDL, trigliserida dan kolesterol meningkat). Ingin dilakukan penelitian aktivitas penurunan lemak darah pada isolat andrografolid (1,5 dan 4,5 mg/kg BB, 2 kali sehari) dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto (434,6 dan 1303,8 mg/kg BB, 2 kali sehari) pada tikus DM tipe 2 resisten insulin dan juga pengaruh pemberian fruktosa 1,8 g/kg BB dan makanan kaya lemak (15% lemak babi dan 5% kuning telur bebek) dapat membentuk plak-plak lemak pada aorta tikus. Sebelum dilakukan perlakuan pada hewan uji, dibuat dahulu isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto. Tikus DM tipe 2 resisten insulin dibuat dengan memberikan asupan fruktosa dan makanan kaya lemak selama 50 hari. Pada hari ke-51 sampai 55 diberikan senyawa uji (isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto), baru diukur kadar lemak darah (kolesterol, trigliserid dan LDL) dan diambil aorta tikus untuk melihat terjadi aterosklerosis. Hasil penelitian diperoleh data sebagai berikut: kemurnian isolat andrografolid yang diperoleh adalah (88,29 1,94)% sedangkan kandungan andrografolid dalam ekstrak terpurifikasi herba sambiloto adalah (16,13 0,50)%. Pemberian fruktosa dan makanan kaya lemak dapat menimbulkan plak-plak lemak pada aorta tikus. Berdasarkan hasil uji farmakologi diketahui bahwa pemberian ekstrak terpurifikasi dan isolat andrografolid dosis mampu menurunkan kadar trigliserid dan LDL darah (p<0,05) dan tidak untuk kadar kolesterol darah (p>0,05). Sedangkan untuk hasil uji aktivitas antiaterosklerosis, isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi belum menunjukkan efek antiaterosklerosis.

Kata

kunci:

andrografolid, hiperlipidemi

sambiloto,

aterosklerosis,

resisten

insulin,

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Diabetes mellitus (DM) merupakan salah satu penyakit degeneratif yang banyak diderita oleh masyarakat Indonesia yang ditandai dengan terjadinya peningkatan kadar glukosa darah di atas nilai normal. Terdapat beberapa jenis diabetes mellitus berdasarkan atas gejala dan penyebabnya, salah satunya adalah diabetes melitus tipe 2 resisten insulin. Kebanyakan diabetes mellitus tipe 2 resitensi insulin terjadi pada pasien yang memiliki kadar asam lemak plasma tinggi, biasanya terjadi pada pasien obesitas (DepKes, 2005). Berdasarkan penelitian Randle (1998) menyatakan bahwa tingginya kadar asam lemak bebas plasma, akan menyebabkan terjadinya kompetisi antara asam lemak dengan glukosa untuk mengalami oksidasi, sehingga oksidasi asam lemak lebih banyak terjadi. Lambat laun, hal ini akan menyebabkan penurunan penyerapan glukosa menuju sel, sehingga kadar glukosa dalam darah tinggi (Randle, 1998). Mekanisme terjadinya diabetes akibat tingginya kadar asam lemak bebas plasma dipostulasikan sebagai berikut yaitu meningkatnya oksidasi asam lemak bebas menyebabkan terjadinya peningkatan rasio asetil-CoA/CoA dan NADH/NAD intramitokondrial, sehingga menyebabkan inaktivasi piruvat dehidrogenase. Kondisi ini menyebabkan konsentrasi sitrat meningkat yang menyebakan penghambatan fosfofruktokinase dan akumulasi glukosa 6 fosfat yang akan menghambat heksokinase II sehingga menyebabkan terjadinya penurunan penyerapan glukosa (Gerald, 2000). Selain itu, tingginya kadar asam
1

lemak bebas dalam plasma akan menyebabkan meningkatnya asam lemak bebas yang menuju ke hati, sehingga sintesis kolesterol VLDL meningkat, yang mengakibatkan terjadinya peningkatan kadar trigliserida, apoB dan kolesterol LDL serta menurunkan ketersediaan kolesterol HDL (Bo, dkk., 2005). Jenis DM yang disebabkan oleh tingginya kadar trigliserid, kolesterol dan LDL dalam darah adalah resistensi insulin (Wolf, 2008). Kondisi terjadinya peningkatan kadar LDL, trigliserida darah dan penurunan HDL darah merupakan penyebab utama terjadinya aterosklerosis dan kondisi aterosklerosis tersebut merupakan faktor resiko terjadinya penyakit CAD (cardiac attact disease) (Eddy, dkk., 2009). Tikus dapat dibuat menjadi DM tipe 2 resisten insulin yaitu diinduksi dengan memberi fruktosa minimal 180 mg/100 g BB dan makanan kaya lemak (Zavaroni dkk., 1980). Metode ini juga diharapkan dapat menyebabkan timbulnya plak-plak pada aorta yang merupakan manifestasi dari terjadinya aterosklerosis. Di Indonesia, banyak terdapat tanaman obat yang diyakini dapat menurunkan kadar glukosa darah dan menormalkan kadar lemak dalam darah, salah satunya adalah Andrographis paniculata (Burm.f) Ness atau yang dikenal dengan sebutan sambiloto. Dalam daun sambiloto mengandung diterpenoit lakton yaitu andrographolid, yang merupakan komponen fitokimia yang paling aktif dan kandungannya paling tinggi dalam daun sambiloto. Isolat andrografolid dapat diperoleh dengan cara melakukan kristalisasi. Ingin dilakukan isolasi

andrografolid terhadap herba sambiloto karena isolat andrografolid yang berada dipasaran harganya mahal, juga karena sambiloto banyak terdapat di Indonesia

dengan harga yang relatif murah dan untuk penelitian secara in vivo pada tikus diperlukan jumlah isolat andrografolid yang relatif banyak. Terdapat banyak penelitian yang menguji efek farmakologi tanaman sambiloto secara in vivo, yaitu diantaranya: a. Yulinah, dkk., (2001) melaporkan bahwa ekstrak etanolik Andrographis paniculata dengan dosis pemberian 2000 mg/kg mampu menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang diinduksi aloksan, b. Subraiman dkk., (2008) menyatakan bahwa ekstrak etanolik sambiloto dan isolat andrografolid dapat menghambat atau menunda absorbsi glukosa melalui inhibisi enzim glukosidase dan enzim amilase, c. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Patel, dkk., (2011) dan Zuraini, dkk., (2006) bahwa ekstrak air sambiloto pada dosis 100 dan 200 mg/kg dapat berperan menormalkan kadar kolesterol total plasma, trigliserida dan LDL pada tikus, d. Berdasarkan penelitian Zhang dan Tan, menyatakan bahwa ekstrak air sambiloto juga memberikan efek antiaterosklerosis yaitu kemampuan ekstrak untuk menurunkan tekanan darah sitolik pada tikus hipertensi spontan (Zhang dan Tan, 1996). Belum ada penelitian ekstrak terpurifikasi herba sambiloto dan isolat andrografolid terhadap kadar trigliserida, LDL dan kolesterol pada tikus DM tipe 2 resisten insulin dan efek antiaterosklerosisnya, hanya informasi bahwa ekstrak etanolik sambiloto dapat menormalkan kadar kolesterol total plasma, trigliserida dan LDL pada tikus dan ekstrak airnya dapat berefek sebagai antiaterosklerosis.

Belum banyak dilakukan penelitian isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto terhadap kadar trigliserida, LDL dan kolesterol pada tikus DM tipe 2 resisten insulin dan efek antiaterosklerosisnya, hanya informasi bahwa ekstrak etanolik sambiloto dapat menormalkan kadar kolesterol total plasma, trigliserida dan LDL pada tikus dan ekstrak airnya dapat berefek sebagai antiaterosklerosis. Sehingga ingin diketahui apakah isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi dari herba sambiloto dapat menurunkan kadar trigliserida, LDL dan kolesterol darah pada tikus diabetes mellitus tipe 2 resisten insulin dan efek antiaterosklerosis. B. Rumusan Masalah 1. Apakah isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto dapat menurunkan lipid darah (trigliserida, LDL dan kolesterol) pada tikus DM tipe 2 resisten insulin? 2. Apakah isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto dapat berkhasiat sebagai antiaterosklerosis pada tikus DM tipe 2 resisten insulin? C. Keaslian Penelitian Sepanjang penelusuran pustaka, belum ada penelitian andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto dalam aktivitasnya sebagai antihiperlipidemi dan antiaterosklerosis pada tikus DM tipe 2 resisten insulin. Pada penelusuran literatur diketahui bahwa andrografolid dan ekstrak etanolik sambiloto sudah diuji efeknya pada enzim glikolisis liver, glukoneogenetik dan lipolisis pada tikus DM tipe 2 defisiensi insulin (Subramanian dkk., 2008).

D. Tujuan Penelitian 1. Untuk mengetahui pengaruh isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto dalam menurunkan lipid darah (trigliserida, LDL dan kolesterol) pada tikus DM tipe 2 resisten insulin. 2. Untuk mengetahui khasiat isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto sebagai antiaterosklerosis pada tikus DM tipe 2 resisten insulin. E. Manfaat Penelitian Untuk memberikan informasi akan pengaruh isolat andrografolid dan ekstrak terpurifikasi herba sambiloto dalam menurunkan kadar lipid darah (LDL, kolesterol dan trigliserida) dan aktivitasnya sebagai antiaterosklerosis.

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Tinjauan Pustaka 1. Tinjauan tentang sambiloto

Gambar 1 . Tanaman sambiloto beserta bunga dan biji

a. Taksonomi tanaman Berikut ini adalah klasifikasi dari tanaman sambiloto (Baecker dan Bakhuizen, 1963) : Divisi Sub Divisi Classis Ordo Familia Genus Species : Spermatophyta : Angiospermae : Dicotyledoneae : Solanaceae : Acanthaceae : Andrographis : Andrographis paniculata Ness.
6