Kematian Neonatal Mendadak yang Berhubungan dengan Kelahiran di Dalam Air Pada Kamar Mandi Spa Domestik

Case Report

Pada bulan Juni 1999, bayi 3,5 kg lahir setelah periode kehamilan 42 minggu di bak mandi yang menggunakan sistem yang selalu siap di rumahnya untuk melahirkan di air dengan ketiadaan dokter dan bidan. Ibu tidak memiliki masalah kesehatan selama kehamilan. Bidan tiba 15 menit setelah kelahirannya. Pada waktu itu bayi dalam keadaan normal, namun pada hari ke-4, dia mendaptkan demam dan ikterus. Dia dirawat di rumah sakit kebidanan-ginekologi swasta dan menerima fototerapi. Hari berikutnya bayi diperbolehkan meninggalkan rumah sakit karena demam dan ikterus juga mulai menghilang. Pada hari ke-7, bayi mendapat gejala demam dan muntah yang berulang, meskipun dia minum susu dengan baik pada malam itu. Pada siang hari berikutnya, dia tiba-tiba menunjukkan apnea dan dibawa ke ruang gawat darurat kami dengan cardio-pulmo arrest. Pada akhirnya, bayi tidak dapat diselamatkan.

Autopsi dilakukan 3 jam setelah kematian. Ada beberapa nodul kuning, berukuran kurang dari 5 mm dan tersebar di seluruh kedua parenkim paru-paru. Pada Lesi nodular paru-paru, alveoli menunjukkan infiltrasi neutrofil yang berat dengan karyorrhexis yang menonjol dan agregasi makrofag dengan eksudat fibrin. Banyak bakteri Gram-negatif berwarna merah terang tapi Gimenezpositif ditemukan dalam makrofag. Oleh karena itu, bayi tersebut diduga terkena legionellosis, DNA diekstraksi dari homogenat jaringan paru-paru tetap dalam formalin post-mortem (10) dan diuji dalam PCR dengan primer spesifik untuk DNA rRNA 5 s Legionella dan Legionella pneumophila MIP gen (menurut pedoman dalam memasukkan paket untuk EnviroAmp Legionella, Perkin Elmer Cetus Corporation, Norwalk, Connecticut). Fragmen DNA diamplifikasi dengan ukuran yang diharapkan untuk setiap gen L. pneumophila terdeteksi dalam sampel menggunakan dua set primer (gambar 1). Urutan nukleotida fragmen gen diperkuat MIP ditentukan dengan menggunakan kit BigDye Ter-minator Siklus reaksi sekuensing siap V2.0 dan ABI PRISM DNA 310 genetik Analyzer (Applied Biosystems) dengan primer maju dan mundur untuk gen MIP. Urutan nukleotida adalah 100% kompatibel dengan area antara primer gen MIP pada L. pneumophila, serogrup 1 2, dan 6 (nomor aksesi GenBank / EMBL / DDBJ S42595, AF022316, dan AF022320, masing-masing).

Paru-paru homogenat juga disaring dengan tes antibodi fluoresen langsung dengan 10 spesies Legionella-spesifik antiserum monovalen (Denka Seiken, Tokyo, Jepang). Legionella spesies ini termasuk individu jenis strain L. pneumophila serogroup 1 sampai 6, Legionella bosemanii, dumoffii Legionella, Legionella gormanii, dan Legionella micdadei. Homogenat ditempatkan pada kaca objek, udara kering, dan diproses untuk mikroskopi imunofluoresensi. Spesimen hanya positif dengan antiserum untuk L. pneumophila serogrup 6. Banyak bakteri berbentuk batang lesi nodular dalam makrofag paru-paru juga diwarnai oleh antibodi fluoresen tidak langsung (Gambar 2). Karena kita tidak bisa mendeteksi adanya temuan makro/mikroskopik lain yang abnormal pada otopsi, kami mempertimbangkan lesi paru-paru adalah penyebab utama kematian. Selama penyelidikan lingkungan, beberapa organisme Legionella yang hidup (14 640 CFU/100 ml) telah terdeteksi dalam air yang diperoleh dari bak mandi yang sama seminggu setelah kematian bayi. Sayangnya, kita tidak bisa mengkarakteristikkan organisme Legionella terisolasi lebih lanjut. Sejak wabah di Philadelphia pada tahun 1976, Legionella telah diakui sebagai agen etiologi penting dari rumah sakit dan komunitas-pneumonia. Tapi hanya 10 kasus sporadis penyakit legionaire pada neonatus telah dilaporkan. Selain kasus-kasus yang diterbitkan tersebut, pada tahun 1996 ada wabah penyakit legionaire nosokomial 'di Jepang di mana L. pneumophila serogrup 1 dan 6 menyebabkan pneumonia pada empat neonatus dan menyebabkan salah satunya meninngal dunia. Kasus tebaru adalah bayi yang baru lahir terinfeksi oleh L. pneumophila serogroup 1 setelah melahirkan di dalam air di sebuah rumah sakit di Italia pada bulan Desember 1999. Berbeda dengan semua kasus infeksi nosokomial, kasus kita adalah contoh yang jarang dari komunitasLegionella pneumonia pada neonatus.

Pada tahun 1984, sistem mandi yang siap 24 jam muncul di jepang, dan pada tahun 2001, 1,5 juta sistem telah diproduksi dan dikirim di Jepang. Selama bertahun-tahun, perbaikan inkremental telah banyak dibuat di fasilitas mandi, dan kamar mandi yang selalu siap untuk menyajikan yang muat ke dalam bak mandi adalah salah satu yang paling terakhir. Air pada bak dipelihara untuk menjadi bersih dan hangat sekitar 40 C tanpa mengubah air selama beberapa hari sampai satu bulan. Sistem pembersihan air pada bak bervariasi dari penyaringan, pemanasan, dan disinfektan kimia untuk sinar UV, tetapi beberapa organisme dapat bertahan hidup dari pembunuhan atau penghapusan.

Sejak kasus penyakit legiuner karena aspirasi air panas dilaporkan pada tahun 1993, perhatian telah ditarik ke risiko infeksi dengan spesies Legionella dan mikroorganisme lainnya, karena pemurnian produk sampingan manusia dalam air mandi dieksekusi terutama

dengan pembersihan biologis dengan menggunakan mikroorganisme yang secara alami muncul dalam alat filter mereka. Air yang dibersihkan oleh sistem-selalu-siap untuk mandi mungkin cukup bersih selama beberapa hari sampai beberapa minggu pada mandi yang normal, tapi tidak cukup bersih untuk minum dan tentu saja tidak cukup bersih untuk digunakan oleh bayi baru lahir atau orang immunocompromised. Bahkan, mikroorganisme, seperti Legionella, mikobakteri, pseudomonas aeruginosa, dan amuba yang hidup bebas, telah terdeteksi dalam air dan sistem filter 24jam mandi spa.

Selanjutnya, sekelompok keluarga dari infeksi Mycobacterium avium kulit dilaporkan baru-baru ini di Jepang terkait dengan sejumlah besar asam-cepat basil dalam ekstrak cair dari unit pemanas bak saringan. Teknik kelahiran dalam air telah dikembangkan terutama di Eropa dan Amerika Serikat, tetapi belum populer di Jepang (hanya 0,05% dari 44.730 kelahiran dilakukan dalam air dilaporkan lahir di Prefektur Aichi pada tahun 2000). Akibatnya, tidak ada cukup bukti untuk mengevaluasi penggunaan perendaman dalam air selama persalinan. Pergerakan tekhnik kelahiran dalam air sebagian besar telah didorong oleh permintaan untuk kenyamanan dan relaksasi yang ditawarkan oleh tekhnik ini untuk sang ibu dan anaknya. Namun, kami percaya bahwa melahirkan bayi di dalam air membutuhkan langkah-langkah keamanan yang didirikan dalam rangka untuk menghindari risiko pada bayi. Selain itu, mandi spa untuk melahirkan di air dianjurkan menggunakan filter sekali pakai untuk penggunaan sendrii seperti yang ditunjukkan oleh Global Ibu / Asosiasi Kesehatan Anak. Laporan kami adalah kasus pertama dari komunitas neonatal yyang mengidap penyakit legionnaire, dan memperingatkan bahwa ada risiko infeksi neonatal Legionella bila melahirkan dalam air dilakukan dengan sistem 24-jam, kecuali telah ada desinfeksi yang sangat hati hati sebelumnya. GAMBAR 1 - Hasil analisis PCR dengan DNA polimerase AmpliTaq (Terapan Biosystems) dan GeneAmp PCR System 2400 (Terapan Bio-sistem). (A) Primer (Perkin Elmer Cetus) dirancang untuk memperkuat genus Legionella-spesifik rRNA 5S. B) Primer dirancang untuk mendeteksi hanya gen pneumophila L. MIP. parameter untuk PCR adalah sebagai berikut: 94 C selama 1 menit, 30 siklus dari 94 C selama 1 menit, 55 C selama 1 menit, dan 72 C selama 1 menit, dan akhirnya, 72 C selama 7 menit dan 4 C selama penyimpanan. Deteksi MIP gen, sekunder PCR dengan volume yang diperlukan 1 / 100 dari produk PCR pertama sebagai template. Templat yang digunakan untuk PCR adalah sebagai berikut. 1, formalin-fixed jaringan paru-paru pasien, 2, formalin-fixed A / J tikus paru-paru terinfeksi oleh L. pneumophila serogroup 1, 3, terinfeksi formalin-fixed A / J paru-paru tikus, 4, kromosom L. pneumophila serogrup 1 . 5, menunjukkan DNA penanda ukuran 100-bp tangga. DNA-ekstraksi informasi dari

jaringan paru-paru dan bakteri dilakukan dengan metode yang telah dijelaskan sebelumnya.

GAMBAR 2 Temuan mikroskopis di paru-paru dengan menggunakan pewarnaan imunoflourosens. Slide dengan bagianbagian dari paru-paru dilapisi parafin dengan antiserum kelinci terhadap setiap organisme L. pneumophila dalam dilusi dari 1:25 dan diinkubasi pada 37 C selama 30 menit dalam ruang kelembaban. Setelah dibilas dengan phosphate-buffered saline (pH 7,2) untuk menghapus globulin yang tidak terikat, slide diinkubasi pada 37 C selama 30 menit dengan fluorescein terkonjugasi imunoglobulin G kambing (IgG) ke kelinci IgG. Pada pengenceran 1:50, dibilas, dipasang di gliserol 90% (pH 9,0) dan coverslip, dan diperiksa di bawah mikroskop laser scanning confocal (Olympus IX70 FluoView) dengan lensa objektif 40 . Pembesaran dari fagosit mononuklear tunggal ditampilkan di sudut kanan atas. Imunoflourosensi yang spesifik terhadap L. pneumophila serogrup 6 terdeteksi.