forensik mikroba untuk insiden alam dan penyakit menular yang disengaja yang melibatkan hewan Forensik mikroba

adalah suatu disiplin ilmu yang relatif baru yang didedikasikan untuk menganalisis bukti dari kejahatan mikrobiologi untuk tujuan atribusi. Hal ini didasarkan pada mikrobiologi tradisional dan epidemiologi, tetapi dalam kerangka hukum. Motif adalah penting untuk penyelidikan forensik, termasuk penjahat larangan, penuntutan keadilan, dan idealnya, pencegahan orang melakukan tindakan serupa. Kemampuan forensik di bidang kesehatan hewan harus fokus pada pembangunan kapasitas untuk deteksi dan pelaporan peningkatan morbiditas dan mortalitas penyakit menular antara hewan yang mungkin mencerminkan pelepasan rahasia patogen. Kecurigaan harus muncul ketika pola epidemiologi yang berbeda dari yang diharapkan untuk populasi hewan dan patogen dalam pertanyaan. Kapasitas yang ada untuk deteksi dan pelaporan epidemi dan penyakit endemik bahkan harus menjadi prioritas internasional untuk pencegahan kerugian bencana pada hewan dan berpotensi dalam kehidupan manusia. Kebutuhan masyarakat veteriner untuk lebih menyadari persyaratan hukum terkait dengan penyelidikan forensik, sehingga dokter hewan akan siap menghadapi dengan hak bukti di lahan mereka sendiri. Introdutction Sebagian besar infeksi pada hewan dan infeksi zoonosis pada manusia terjadi secara alami, tanpa kelalaian, kriminal atau niat jahat. Namun, ada insiden langka paparan ilegal dan sengaja dari populasi rentan terhadap infeksi zoonosis dan hewan. Pada tahun 1997, misalnya, virus penyakit hemoragik kelinci dari orang tak dikenal secara ilegal diperkenalkan ke Selandia Baru, seolah-olah untuk mengendalikan populasi kelinci liar yang besar dan menimbulkan masalah bagi petani (30). Manusia juga menjadi sasaran paparan sengaja zoonosis. Pada tahun 1984, sekte sengaja terkontaminasi pasokan Rajneeshee makanan di The Dalles, Oregon (31). Wabah telah mempengaruhi setidaknya 751 orang dan 45 di antaranya dirawat di rumah sakit. Keyakinan yang diperoleh untuk beberapa penulis. Pada tahun 2001, spora Bacillus anthracis sengaja didistribusikan melalui sistem pos di Amerika Serikat (AS) dalam insiden "surat Anthrax", yang mengakibatkan setidaknya 22 kasus Anthrax, dengan lima kematian (1). Sejauh ini, tidak ada keyakinan yang diperoleh dalam kasus Anthrax. Di atas adalah contoh paparan sengaja agen infeksius, bagaimanapun, aktivitas ilegal juga dapat menyebabkan eksposur disengaja. Misalnya, elang Thailand terinfeksi H5N1 yang sangat patogen diselundupkan ke Belgia pada tahun 2004 (33). Mikrobiologi kedokteran hewan dan epidemiologi yang akrab dengan penyelidikan alami wabah penyakit menular, namun sebagian besar memiliki sedikit pengalaman dengan pemeriksaan forensik bukti untuk investigasi kasus kriminal, meskipun beberapa dipanggil untuk memberikan kesaksian ahli di pengadilan. Salah satu karakteristik unik dari bioterorisme (penggunaan patogen dalam terorisme) dan biocrime (penggunaan patogen dalam kejahatan) insiden seperti yang disebutkan

di atas dan bahkan ancaman yang sifatnya serupa, adalah kebutuhan untuk atribusi tanggung jawab. Atribusi didefinisikan sebagai "informasi yang diperoleh mengenai identifikasi atau asal material sejauh dapat ditentukan '(26). Alasan penting untuk penyelidikan forensik termasuk larangan penjahat, penuntutan keadilan dan, idealnya, menghalangi orang lain dari melakukan tindakan yang serupa (8). Ketika mendeteksi biocrime hewan, agen yang menular diisolasi, bersama-sama dengan tes tambahan akan informasi penting untuk penuntutan kasus dan penerapan penanggulangan medis (1). Kekhawatiran tentang bioterorisme, diperbanyak oleh insiden pada tahun 2001 "surat anthrax" di Amerika Serikat, yang tercermin dalam beberapa laporan terbaru tentang sifat masalah dan peluang untuk meningkatkan deteksi, pengendalian dan pencegahan bioterror masa depan dan biocrime insiden (1, 7 , 8, 9, 19, 25, 26). Sejumlah laporan (1, 8, 9, 25) memberikan pembahasan yang lebih lengkap dari isu-isu dari perspektif kesehatan forensik mikroba manusia daripada ada ruang dalam makalah ini. Sementara laporan ini memusatkan perhatian terutama pada aspek kesehatan manusia, termasuk beberapa patogen pertanian dalam daftar mereka patogen bioterror potensial. Laporan ini mencatat penghancuran terhadap perekonomian nasional yang bisa terjadi dari pengenalan beberapa patogen ke dalam populasi hewan rentan. Kebutuhan masyarakat veteriner untuk lebih menyadari persyaratan hukum terkait dengan penyelidikan forensik, sehingga dokter hewan akan siap untuk menangani bukti di lahan mereka sendiri. Apakah laboratorium hewan atau mereka siap untuk menghadapi biocrime di posisi yang sama dengan Laboratorium Kesehatan Masyarakat (PHL) dari Amerika Serikat pada tahun 2001? Diane Barden, senjata pemusnah massal koordinator untuk Connecticut State PHL, menyatakan: "Ada satu peristiwa sebelum awal saya [Maret 2001]. ... Sebuah surat ancaman itu dikirim ke sebuah klinik aborsi dan Biro Investigasi Federal (FBI) yang menyampaikan surat ke laboratorium. Itulah kontak pertama kami dengan FBI dan penanganan bukti kriminal. Seperti yang Anda bayangkan, itu tidak akan sangat baik '(4). Hewan laboratorium harus disiapkan untuk mengatasi masalah seperti penyimpanan yang aman, rantai-balak bukti, diikuti oleh potongan individu dari bukti dan turunannya dan semua persyaratan hukum lainnya untuk penanganan bukti (26). Setiap laboratorium yang baik dapat forensik mikroba, kasus mungkin hilang jika bukti tersebut tidak diterima di pengadilan karena masalah dengan dokumentasi rantai (28). Tujuan utama dari makalah ini adalah untuk meningkatkan kesadaran forensik mikroba antara mereka tertarik pada penyakit hewan menular dan zoonosis. MICROBIAL FORENSICS Forensik didefinisikan sebagai 'penggunaan ilmu pengetahuan dan teknologi untuk menyelidiki dan menetapkan fakta-fakta dalam hukum pidana atau perdata' (2). Ini adalah upaya multidisiplin yang melibatkan patologi, toksikologi, investigasi komputer, analisis sidik jari, antropologi, teknologi DNA dan elemen lainnya. Ini berfokus pada orang atau orangorang yang berbuat jahat, dan juga pada korban dan yang terkait

mikrobiologi. Mikroba forensik adalah cabang baru dari ilmu forensik dan belum banyak diketahui, meskipun peristiwa bioterror terakhir, khususnya kejadian antraks 2001 di Amerika Serikat, telah menyoroti pentingnya. Pada saat yang sama, tindakan cepat diperlukan untuk membatasi skala wabah apapun dan meyakinkan publik saat kejadian berada di bawah kontrol. Mikroba forensik telah didefinisikan sebagai "suatu disiplin ilmiah yang didedikasikan untuk menganalisis bukti-bukti dari tindakan bioterorisme biocrime, atau sengaja mikroorganisme / racun rilis untuk keperluan atribusi '(7, 19).Forensik mikroba didasarkan pada mikrobiologi tradisional dan epidemiologi dalam kerangka hukum. Investigasi Biocrimes diduga memiliki banyak kesamaan dengan penyelidikan epidemiologi yang terjadi secara alami wabah penyakit menular, tetapi juga beberapa perbedaan (Tabel I). Dalam forensik konvensional, pengujian dan karakterisasi DNA manusia dari sampel TKP sangat penting untuk identifikasi individu. Forensik mikroba juga mengambil keuntungan dari materi genetik, tapi sekali lagi ada perbedaan penting. Investigasi manusia yang diturunkan spesimen hanya melibatkan satu spesies, dan ahli forensik dapat menggunakan satu set hanya 10 sampai 17 lokus mikrosatelit pada genom untuk mengidentifikasi yang paling (8). Sebaliknya, forensik mikroba jauh lebih rumit karena sejumlah besar spesies bakteri atau virus yang berpotensi terlibat, dan kompleksitas mikroba, evolusi dinamika dan menyebar. Sejumlah besar mikroba yang biocrimes bioterror kandidat dan tempat praktis batasan pada pengembangan tes forensik tanda tangan, arsip spesimen dan database untuk digunakan dalam penyelidikan forensik. Need for collaboration and partnerships Sebagian besar dokter hewan dan pejabat kesehatan masyarakat telah sedikit penelitian atau tidak ada pengalaman atau kejadian biocrime bioterror dan oleh karena itu tidak mungkin akrab dengan kedokteran forensik. Apakah perlu untuk perubahan ini? Sejauh bahwa risiko seperti hewan yang disengaja insiden sosial rendah (yaitu, tetap langka dan terbatas dalam skala) mungkin cukup di beberapa negara mengandalkan kemampuan analisis forensik lembaga tradisional. Hal ini tidak diketahui apakah hal itu meningkatkan kemungkinan insiden dimaksudkan atau tidak, tetapi diketahui bahwa dampak potensial dari pengenalan sengaja penyakit hewan (misalnya penyakit kaki dan mulut) atau zoonosis (misalnya, mikroorganisme ini adalah Yersiniosis) cukup besar. (Untuk informasi lebih lanjut, lihat artikel dalam publikasi ini oleh Hugh Jones, Wilson dkk, Ackerman., Lyra, Woolridge, Ozawa dkk. Domoradskiy dan Orent Davies). Oleh karena itu, di negara-negara yang rentan, pengawasan kesehatan yang ada dan kapasitas pengendalian penyakit harus direvisi untuk meningkatkan deteksi dan pengelolaan insiden bioterorisme dan biocrime dan link dengan ahli forensik dalam mikroba manusia. Adalah logis bahwa obat tradisional spesialis forensik dan bioterror / biocrime harus membantu dan bekerja sama erat. Sebuah sinergi antara dua akan meningkatkan dan memperluas pengalaman kolektif dan keahlian mereka, membangun sumber daya untuk masa depan. Ini juga merupakan kebutuhan mendesak untuk integrasi yang lebih baik dan kerjasama antara kesehatan masyarakat dan program pengawasan kesehatan (18).

Kapasitas kesehatan hewan harus fokus pada penguatan kapasitas untuk mendeteksi dan melaporkan peningkatan morbiditas dan kematian pada hewan yang dapat mencerminkan pelepasan seorang agen rahasia. Kecurigaan harus muncul ketika tren epidemiologi berbeda dari yang untuk populasi hewan dan patogen dalam pertanyaan. Kemampuan yang ada untuk deteksi dan pelaporan penyakit endemik bahkan harus menjadi prioritas internasional untuk pencegahan kerugian bencana pada hewan dan kehidupan manusia yang berpotensi. Dalam kasus sebuah rahasia serangan (rilis sengaja tak terduga), otoritas atau kesehatan hewan masyarakat awalnya akan memesan penyelidikan. Investigasi secara rutin harus dilakukan dengan cara yang melindungi integritas dari TKP potensi dan bukti untuk investigasi forensik dan kriminal di masa depan. Adalah penting bahwa para peneliti harus mempertimbangkan kemungkinan pengenalan disengaja penyakit pada tahap awal, jika tidak kesempatan untuk menyelidiki insiden tersebut benar dapat ditunda atau panggilan tidak terjawab. Hewan laboratorium harus siap untuk menangani isu-isu seperti rantaibalak, penyimpanan bukti aman, pelacakan item individu dari bukti dan turunannya, dan semua persyaratan hukum lainnya untuk penanganan bukti (26). Rantai-balak protokol untuk menyediakan sebuah rantai yang tak terputus catatan didokumentasikan menunjukkan bukti memiliki kontrol dan setiap transfer kepemilikan di tempat yang aman dan dapat dilacak. Proses ini dimulai dengan sampel asli, yang harus diberi label dengan tanggal dan waktu pengumpulan, dan inisial orang yang mengumpulkan dan pengidentifikasi (misalnya, kode atau sistem penomoran yang akan membedakan sampel ini dari lain berkumpul di TKP). Satu individu dalam rantai-tahanan-dapat dipanggil ke pengadilan untuk bersaksi kepada identitas sampel (28). Setelah di laboratorium bukti harus disimpan aman untuk mencegah akses tidak sah dan risiko kontaminasi, misidentifikasi atau perubahan (26, 28). Ada beberapa tingkat keamanan untuk dipertimbangkan, mulai dari tingkat keamanan dalam bangunan itu sendiri (zona keamanan yang tinggi dan daerah terlarang, misalnya), metode kontrol akses untuk personil yang berwenang di daerah-daerah (keyboard elektronik misalnya atau tombol) dan fitur keamanan dari unit penyimpanan yang memegang sampel itu sendiri (misalnya ruang ganti, kulkas). Misalnya, unit penyimpanan itu sendiri harus dikunci dengan tingkat keamanan dan bahwa harus ada hanya dua kunci per kunci. Sebuah kunci ditandatangani oleh orang yang bertanggung jawab untuk sampel dan yang lainnya disimpan dalam amplop tertutup dalam brankas. Contoh-contoh ini hanya mewakili sebagian kecil dari persyaratan hukum yang diperlukan untuk mempertahankan penerimaan bukti di pengadilan. Rantai-balak adalah serangkaian kejadian yang rumit dengan potensi kesalahan pada titik apapun. Komunitas hewan melihat masalah ini dari sudut pandang memberikan bukti kuat bagi pengadilan atau proses hukum, namun, melihat situasi dari perspektif seorang pengacara kriminal dapat memberikan wawasan yang berguna kelemahan mungkin dalam prosedur laboratorium. Berbagai taktik dapat digunakan untuk

mendiskreditkan para ahli forensik dan hasil laboratorium. Ini mungkin termasuk: - Meninjau penilaian laboratorium terakhir untuk kekurangan - menunjukkan konflik kepentingan bagi para ilmuwan dan staf yang memiliki atau memiliki saham di laboratorium, atau pada perusahaan yang memproduksi tes diagnostik digunakan di sana - laboratorium untuk mendapatkan dokumentasi tentang jaminan kualitas (QA) dan kualitas kontrol - untuk mendapatkan catatan laboratorium bangku dan menggunakannya untuk mengembangkan pertanyaan-pertanyaan yang akan sulit bagi setiap ahli untuk menjawab (17). Ketika kejahatan secara terbuka - yaitu, diidentifikasi seperti dari awal atau penulis diumumkan sebelumnya, petugas hukum segera menganggap kepemimpinan penyelidikan, namun dapat meminta bantuan dari pejabat kesehatan masyarakat atau hewan. Jika rilis sengaja patogen dan wabah berikutnya antara hewan-hewan yang rahasia dan terbuka, komunikasi yang jelas dan langsung antara pejabat penegak hukum dan kesehatan hewan diperlukan. Juga, pelayanan kesehatan masyarakat dapat terlibat dalam mengurangi efek memulai penanggulangan medis. Sebuah laporan oleh American Academy of Mikrobiologi diusulkan untuk diberikan kepada personil yang bertanggung jawab untuk respon awal untuk serangan pada populasi manusia (1) pelatihan forensik. Jika pelatihan tersebut akan berguna dalam praktek untuk dokter hewan masih diperdebatkan, mengingat kelangkaan hewan biocrimes. Dampak potensial dari kejahatan tersebut lebih tinggi untuk pengenalan penyakit hewan asing, sehingga akan bijaksana untuk tingkat pelatihan forensik dokter hewan bertanggung jawab atas respon awal terhadap serbuan penyakit hewan asing. Sebagai "perang permainan" praktek arus Respon Wabah Protokol mungkin kehilangan baru mereka, skenario sesekali dan tak terduga adalah kesempatan untuk pelatihan bioterorisme pada intervensi peradilan. Laboratorium forensik tidak memiliki kemampuan mikrobiologi dan khususnya fasilitas untuk menangani sampel yang terkontaminasi dengan patogen berbahaya atau untuk mengisolasi dan mengkarakterisasi patogen ini. Ini adalah area logis untuk Aliansi, sebuah laboratorium hewan dilengkapi dengan baik atau PHL menyediakan fasilitas untuk pekerjaan mikrobiologi dan ahli forensik menawarkan pengalaman praktis dalam forensik dan merusak barang bukti (8). Di AS, kemitraan ini telah dibentuk di bidang manusia dan melibatkan FBI dan pusat Bioforensics analisis di Fort Detrick, Maryland. Asosiasi ini juga akan mencakup Pulau Hewan penyakit Plum laboratorium Asing. Di bidang kedokteran hewan, AS telah memulai sebuah proyek percontohan untuk jaringan nasional laboratorium kesehatan hewan laboratorium federal dan negara untuk meningkatkan kecepatan respon terhadap keadaan darurat kesehatan hewan (32).

Laboratory Techniques Peran penting dari pengujian mikrobiologi adalah untuk membandingkan karakteristik isolat (spesies misalnya, serotipe, jenis fag, profil genetik) antara sampel dan bukti referensi budaya dan strain, untuk menentukan apakah berbagai isolat dari sumber yang sama atau keturunan , atau setidaknya untuk mengkonfirmasi asal independen (7). Perbedaan yang diamati mungkin atau mungkin tidak cukup untuk menunjukkan bahwa mikroba dari sumber yang sama atau asal keturunan atau independen, tergantung pada keakuratan dan ketepatan prosedur pengujian, karakteristik organisme uji (misalnya laboratorium atau liar strain) dan diharapkan tingkat mutasi. Sebagai contoh, perbedaan kecil di lokasi yang berkembang pesat dalam genom tersebut tidak hanya membenarkan kesimpulan bahwa organisme berasal dari garis keturunan yang berbeda dari strain diketahui referensi atau pemulihan, atau secara signifikan berbeda dari isolat bidang lain. Menambah potensi kebingungan, wabah alami kadang-kadang dapat melibatkan beberapa strain; contoh akan anthrax terkontaminasi pakan ternak dari bonemeals berisi (8). Pemeriksaan forensik mikroba berbagi banyak teknik dengan tes diagnostik konvensional atau studi, termasuk budaya dan isolat spesiasi, fenotipe, Fag mengetik, analisis komposisi asam lemak dan karakterisasi genetik (9). Teknik-teknik baru seperti analisis microarray dan isotop juga mungkin penting. Misalnya, dalam menyelidiki insiden bioterorisme Anthrax Amerika Serikat pada tahun 2001, sejumlah variabel pengulangan tandem analisis identitas digunakan untuk mengidentifikasi spora B. anthracis sebagai milik strain Ames (8). Teknik lain yang dapat digunakan mencakup minisatellites dan mikrosatelit menulis lokus dan polymerase chain reaction (PCR real-time) (8). Meskipun forensik mikroba menggunakan alat genetik untuk mengidentifikasi strain, adalah penting untuk membedakan antara itu dan menggunakan analisis DNA manusia dalam forensik konvensional. Analisis DNA manusia adalah alat penting dalam forensik modern. Mereka digunakan untuk pengenalan beberapa orang ketika pertandingan ditemukan antara DNA dalam sampel dari TKP dan contoh kejahatan yang dicurigai. Sebaliknya, analisis DNA mungkin penting dalam penghapusan tersangka ketika perbedaan ditemukan. Namun, kekuatan analisis DNA forensik mikroba lebih terbatas, karena sifat klonal populasi mikroba dan kurangnya mikroba kualitas penduduk yang tinggi dan database filogenetik (8, 10), tidak mungkin untuk membedakan antara anggota klon yang dapat tersebar dan database mikroba tidak terorganisir dengan forensik dalam pikiran. Namun, seperti yang ditunjukkan pada contoh dijelaskan di bawah ini, dapat memperoleh informasi kualitatif yang berguna mengenai alokasi dan kesenjangan yang sangat berguna dalam penghapusan individu atau daftar lokal tersangka. Genomics adalah untuk meningkatkan kekuatan forensik mikroba untuk membantu dalam desain tes diagnostik dan interpretasi gen rektor. Telah mengurutkan genom dari beberapa patogen zoonosis penting (misalnya, Salmonella typhimurium dan Escherichia coli O157: H7), karena mereka memiliki strain yang berbeda tingkat tinggi ancaman agen biologis (misalnya, B. anthracis) (1, 8). Namun, biaya dan tuntutan teknis

sequencing dan kesulitan membedakan penanda genetik, menempatkan batasan praktis tentang teknik-teknik untuk digunakan dalam wabah penyakit hewan menular. Bioinformatika alat (misalnya perangkat lunak) adalah penting untuk menemukan terkait genetik diwakili dalam menghubungkan database dan batas-batas kepercayaan statistik partai (8). Metode memadai divalidasi jelas lebih disukai untuk tujuan forensik karena mereka lebih cenderung untuk diakui di pengadilan. Kesalahan pengujian forensik telah menjadi semakin jelas, karena manusia memiliki DNA pengujian untuk mendukung keyakinan yang salah dari banyak individu didasarkan pada bukti forensik tidak tepat digunakan (yang melibatkan rambut, balistik, sidik jari dan tes serupa). Kasus seperti meragukan beberapa lama diterima prosedur, banyak yang belum sepenuhnya divalidasi (25). Ada juga pengakuan terlambat standar miskin di laboratorium individu, sayangnya, kadang-kadang berdiri lama. Di Amerika Serikat menerima standar saat ini untuk bukti ilmiah di ruang sidang adalah yang disebut "Daubert test ', yang menyatakan bahwa penerimaan kesaksian ilmiah harus didasarkan pada fakta atau data yang cukup, dan bahwa data ini harus menjadi produk dari handal, metode divalidasi internal yang telah diterapkan secara ketat (25). Jadi, penekanan besar ditempatkan pada metode yang digunakan dalam forensik. Information Networks Wabah penyakit lokal dapat dengan cepat diidentifikasi melalui peringatan pejabat kesehatan hewan dan masyarakat. Namun, sistem khusus dapat berguna untuk deteksi dini wabah tersebar dalam ruang atau dalam waktu dan untuk mengidentifikasi kelompok lokal sebagai bagian dari wabah yang lebih besar, seperti makanan ditanggung epidemi yang tersebar di seluruh Nasional oleh distribusi luas dari sebuah produk yang terkontaminasi. Beberapa sistem tersebut telah dikembangkan untuk penyakit alami. Contohnya adalah sistem PulseNet untuk subtyping patogen bawaan makanan (mis. e. coli O157: H7) dengan gel elektroforesis bidang berdenyut (PFGE) (29). PulseNet adalah jaringan nasional US lokal, negara bagian dan LSP nasional berkantor pusat di Pusat Pengendalian Penyakit (CDC) di Atlanta, dengan jaringan kerja sama di negara lain dan wilayah seperti Kanada, Amerika Amerika dan Eropa. Menggunakan protokol standar untuk PFGE, laboratorium yang berpartisipasi dapat mengirimkan profil DNA dari strain E. coli O157: H7, Salmonella, Shigella, Listeria atau Campylobacter ke database CDC. Database terbuka untuk digunakan oleh peserta, yang memfasilitasi perbandingan pola PFGE cepat. Ada kebutuhan pada hewan dan kesehatan manusia untuk sistem tambahan yang dapat melacak timbulnya penyakit menular dalam waktu nyata untuk meningkatkan kemampuan deteksi dan kecepatan respon. Quality assurance Jaminan Kualitas merupakan aspek penting dari pemeriksaan forensik dan munculnya baru dalam bidang forensik mikroba telah memetik manfaat dari pengalaman dalam pengujian QA DNA manusia (19). Baru-baru ini, Kelompok Kerja Ilmiah Genetika Mikroba dan Forensik telah didirikan

untuk mengembangkan pedoman untuk laboratorium (26). Rekomendasi mencakup akrab dengan laboratorium diagnostik konvensional, termasuk dokumentasi organisasi dan dokumentasi manajemen, kualifikasi staf dan pelatihan, sampel kontrol, prosedur analitis, prosedur operasi standar, kalibrasi dan pemeliharaan, laboratorium dan laporan tertulis dan audit, antara aspek-aspek lain dari banyak fitur. Pertimbangan Khusus untuk forensik memahami kebutuhan untuk keamanan staf otorisasi, fasilitas penyimpanan yang aman untuk pengujian, prosedur yang lebih ketat untuk sampel kontrol (misalnya, mencatat nama-nama orang yang terlibat dalam transportasi dan pengumpulan sampel) dan rantai di laboratorium. Validasi metode ini sangat penting bagi kredibilitas forensik data dalam proses pengadilan. Examples involving animal or zoonotic infections "Surat anthrax" insiden pada tahun 2001 di Amerika Serikat telah disebutkan sebagai menekankan pentingnya forensik mikroba adalah contoh yang baik dari jenis situasi yang penerapan UU dan pejabat kesehatan publik harus mempersiapkan ( 1). Untungnya, tidak seperti baru-baru ini telah terdeteksi di bidang kesehatan hewan. Namun ada insiden historis dan terakhir yang melibatkan hewan di mana aktivitas kriminal atau kelalaian kriminal mungkin langsung atau tidak langsung mengancam kesehatan populasi ternak atau publik. Beberapa secara singkat dirangkum di sini. Deliberate infection of animals in time of war Selama Perang Dunia Pertama, Jerman melakukan berbagai serangan biologis pada berbagai jenis ternak. Tidak seperti program senjata kimia, program biologis tidak terdokumentasi dengan baik dan diperdebatkan (27). Contoh paling terkenal adalah kasus Dr Anton Dilger, seorang kelahiran Jerman dokter Amerika yang tinggal di pinggiran kota barat laut Washington, DC disediakan dengan stok benih dari b. anthracis (Anthrax) dan Burkholderia mallei (sakit ingus) oleh pemerintah Jerman Imperial, ia mendirikan sebuah laboratorium kecil di rumah dan berpikir aku punya liter produk di agen. Dibantu oleh Kapten Frederick Hinsch, upaya ini telah diklaim telah menyebabkan infeksi 3500, bagal kuda dan ternak, menunggu untuk dikirim ke pasukan Sekutu di Eropa (13, 34). Jerman juga dilaporkan telah terinfeksi dengan keberhasilan 4500 bagal di Mesopotamia dengan sakit ingus. Upaya lain oleh agen Jerman untuk ternak di Rumania, Perancis, Norwegia dan Argentina (5, 13, 16). Selama Perang Dunia Kedua, dalam "Operasi Vegetarian" Inggris (Inggris) dikembangkan dan diproduksi 5 juta minyak biji rami Anthrax sarat 'kue memenangkan' berpura-pura akan diluncurkan dari pesawat Jerman pada rumput untuk menginfeksi dan membunuh daging sapi perah (16, 24). Setiap kue adalah 2,5 cm, beratnya 10 g dan Gambar 5 & # 1113088, 108 spora Antraks di sebuah tabung kaca kapiler (6, 14, 24). Pengujian sebelumnya menunjukkan bahwa ternak akan mati dalam waktu 5,25 hari setelah makan kue dan diperkirakan bahwa sekitar 80% dari kue terdistribusi dapat dikonsumsi dalam waktu dua minggu mereka airdropped (14). Meskipun semuanya berada di tempat untuk melaksanakan rencana pada musim panas tahun 1944, invasi Normandia

telah terjadi dan membatalkan operasi. Pada tahun 1945-an, kue sapi dibakar di Porton Down di Inggris (24). Setelah Perang Dunia II Amerika Serikat Program senjata biologis diuji demam babi (CSF) dan penyakit Newcastle, menggunakan bom nasib eksperimental virus dilapisi bulu yang melayang operasi (16). Wabah biasa batubara berlangsung di Zimbabwe 1978-1980, mungkin karena penyebaran yang disengaja. Nass menyarankan bahwa: '[] untuk menjelaskan lonjakan tiba-tiba antraks pada awal Land Trust Tribal pada bulan November 1978, adalah bahwa satu atau lebih unit melekat tentara Rhodesia mungkin telah diterjunkan spora antraks di wilayah tersebut. Tindakan ini akan mengekspos ternak terhadap penyakit melalui konsumsi atau inhalasi (atau keduanya) dari spora antraks '(20). Namun, juga mungkin bahwa wabah itu disebabkan oleh fenomena alam seperti curah hujan yang berlebihan, diperparah oleh konflik sipil (misalnya Kegagalan vaksinasi yang tepat) dan tidak adanya pelayanan kesehatan hewan atau inspeksi. Isolat Bacillus anthracis dari wabah ini tidak mungkin telah ditandai, menunjukkan peran yang mungkin untuk forensik mikroba. Kasus ini merupakan contoh dari kesulitan kontaminasi atau keputusan yang disengaja, terutama di masa perang. Bird smuggling and influenza Pada Oktober 2004, petugas bea cukai di Bandar Udara Internasional Brussel menyita dua elang elang jambul diselundupkan dari Thailand (33). Virus berbudaya dari burung euthanised diidentifikasi sebagai virus influenza H5N1 yang sangat patogen berdasarkan penghambatan haemagglutination dan RT-PCR pengujian. Tindak lanjut penyelidikan dan tindakan yang mengakibatkan kerusakan lebih dari 650 burung di karantina, dan pemeriksaan medis lebih dari 25 orang yang telah berada dalam kontak langsung atau tidak langsung dengan unggas, diikuti oleh profilaksis oseltamivir. Kasus ini menunjukkan pentingnya potensi penyelundupan hewan dalam penyebaran penyakit menular internasional penting yang disengaja. West Nile virus in north America Virus West Nile (WNV) adalah zoonosis, yang pertama kali muncul di New York City pada tahun 1999 (11). Dalam retrospeksi, terbukti bahwa infeksi pertama menyebabkan kematian pada beberapa spesies burung liar, maka penyakit dan kematian pada manusia. Investigasi wabah pada manusia dan burung dilakukan secara independen, dan kurangnya kerjasama awal dan efektif antara kesehatan masyarakat dan program kesehatan hewan mungkin telah menunda pengakuan yang tepat waktu serangan (15). Sebelumnya, virus hanya ditemukan di belahan bumi bagian timur, terutama di Asia, Afrika, Timur Tengah dan Eropa. Sejak tahun 1999, WNV telah mapan di sebagian besar Amerika Serikat dan Kanada (22). Strain epidemi virus West Nile berhubungan erat dengan strain beredar di Israel antara tahun 1997 dan 2000, Timur Tengah adalah sumber yang paling mungkin (21).

Bagaimana virus tiba di Amerika Utara tidak diketahui, tetapi subyek banyak spekulasi, termasuk kemungkinan pengenalan yang disengaja (23). Probabilitas termasuk wisatawan terinfeksi manusia untuk bagian lain dunia, penyelundupan unggas yang terinfeksi, atau tanpa sengaja oleh serangga vektor transportasi di dalam pesawat terbang. Sejarah serangan dari virus West Nile di Amerika Utara adalah penting karena menunjukkan bahwa penundaan dalam efektivitas kolaborasi antara program pemantauan kesehatan hewan dan kesehatan masyarakat menghambat deteksi cepat epidemi. Escherichia coli and campylobacter from cattle and contamination of municipal water supply Pada Mei 2000, wabah penyakit ditularkan melalui air di Walkerton, Kanada, karena e. coli O157: H7 dan Campylobacter jejuni, menyebabkan sekitar 2.300 kasus penyakit dan tujuh kematian (3). Dilakukan penyelidikan epidemiologi dan hidrologi untuk mengidentifikasi sumber kontaminasi. Ada bukti kontaminasi bakteri di salah satu sumur memasok kota. Sampel kotoran dikumpulkan dari 13 peternakan dan lingkungan dekat sumur kota. Sementara sembilan pertanian diidentifikasi untuk Campylobacter spp. dan e. coli O157: H7 ditemukan di dua peternakan, hanya dua peternakan ditemukan kedua patogen, termasuk peternakan yang berdekatan dengan sumur terkontaminasi. Karakterisasi isolat strain Campylobacter spp (panas stabil dan panas - klasifikasi mengetik fag labil, biotyping, fla-fragmen restriksi panjang mengetik polimorfisme dan pengujian PFGE) dan e. coli O157: H7 (fag mengetik dan PFGE) menunjukkan bahwa sampel dari peternakan ini identik dengan yang ditemukan dalam kebanyakan kasus manusia (3, 12). Sebuah penyelidikan yudisial berikutnya publik atas insiden tersebut menyimpulkan bahwa sumber utama wabah itu tersebar pupuk di pertanian berdekatan dengan sumur terkontaminasi. Penelitian ini menemukan bahwa petani itu tidak bersalah, karena ia telah mengikuti praktik pertanian yang baik. Faktor lain yang diyakini telah memberi kontribusi kontaminasi itu hujan baik luar biasa berat, konstruksi yang sangat miskin dan kegagalan untuk memastikan kualitas air dan pengawasan yang memadai klorinasi (21). Disengaja pengenalan penyakit calicivirus kelinci (penyakit hemoragik kelinci) di Selandia Baru Pada bulan Agustus 1997, didiagnosis penyakit kelinci calicivirus (RCD) oleh Laboratorium Kesehatan Hewan di Wallaceville, Selandia Baru oleh enzim assay antigen menangkap linked immunosorbent dari Organisasi Dunia untuk Kesehatan Hewan (OIE) laboratorium referensi di Brescia, Italia (lihat dokumen oleh Peter O'Hare dalam publikasi ini, 30). Respon penyakit eksotis diprakarsai oleh Pejabat Kepala Hewan, dan sekitar wabah itu ditetapkan sebagai daerah yang dikontrol, dengan pembatasan gerakan hewan dan manusia. Sebuah penyelidikan kriminal dimulai untuk menentukan apakah virus telah diperkenalkan sengaja. Pada pertemuan berikutnya petani dan staf dari Departemen Pertanian, petani mengakui meluasnya penggunaan RCD dalam wortel diinokulasi dan gandum sebagai kontrol biologis kelinci. Dalam hitungan hari, wabah tambahan

terdeteksi di wilayah lain dari Pulau Selatan. Departemen Pertanian pejabat menyimpulkan bahwa itu tidak mungkin dan penahanan pemberantasan infeksi, dan kontrol terangkat. Penyakit ini pertama kali terdeteksi hanya beberapa minggu setelah pengumuman pemerintah yang RCD virus tidak akan secara hukum diimpor ke Selandia Baru sebagai agen kontrol biologis untuk kelinci (30). Rupanya tidak ada biaya telah dibebankan. salmonella kontaminasi yang disengaja dari makanan pasokan oregon Dalles Pada bulan September dan Oktober 1984, setidaknya 751 orang terjangkit salmonella gastroenteritis di The Dalles, Oregon (31). Sepuluh restoran diidentifikasi sebagai sumber infeksi pada kebanyakan kasus. Makan salad bar adalah faktor risiko utama, meskipun bar makanan terlibat salad berbeda dari restoran. Penyelidikan epidemiologi menunjukkan tidak ada mekanisme umum, seperti makanan tertentu atau penjamah makanan yang bertanggung jawab atas kontaminasi. Terkait dengan pecahnya insiden yang mencurigakan dilaporkan ke polisi lokal, negara bagian dan Federal. Polisi dengan bantuan dari Oregon PHL, fasilitas penelitian dan komune lokal Rajneeshee agama mengambil sampel Salmonella typhimurium (dibedakan dari strain wabah dan kemudian memutuskan itu diperoleh dari pemasok komersial) dari klinik komune. Penyelidikan menunjukkan bahwa anggota komune sengaja kontaminasi bar salad. Alasan yang jelas adalah untuk menguji program untuk melumpuhkan para pemilih dalam pemilu daerah lokal di samping. Pada tahun 1986, dua anggota masyarakat mengaku bersalah atas tuduhan konspirasi untuk penanganan produk makanan dari keracunan makanan dan dihukum 4,5 tahun penjara. Perlu dicatat bahwa penyelidikan epidemiologi awal tidak mengakui sumber epidemi. Itu lebih dari setahun kemudian ia memperoleh cukup bukti untuk menghubungkan kota untuk wabah. Kemungkinan kontaminasi disengaja dianggap awal penyelidikan epidemiologi, tapi awalnya ditolak karena beberapa alasan: tidak ada alasan jelas tidak ada yang mengaku bertanggung jawab, menunjukkan bahwa kurva epidemi terkontaminasi bar salad beberapa kali selama beberapa minggu; penyelidikan polisi ke dalam kegiatan awal dipertanyakan tidak mendirikan sebuah pola, tidak ada karyawan yang tidak puas telah diidentifikasi, dan peneliti mengakui bahwa kadang-kadang tunas sumber tetap tidak teridentifikasi (31). Insiden ini menunjukkan tantangan yang terlibat dalam identifikasi awal kontaminasi yang disengaja. Conclusion Insiden wabah penyakit menular yang terkait dengan hewan yang disengaja jarang, meskipun potensi kesehatan dan dampak ekonomi insiden tersebut pada hewan dan masyarakat cukup besar. Meningkatkan kemampuan untuk menyelidiki insiden dan biocrimes bioterror memperkuat keamanan nasional dan internasional. Kemampuan yang paling maju dalam forensik mikroba harus terkonsentrasi pada tingkat nasional dan fokus dari bioterorisme dan agroterrorism. Kerjasama

diperlukan antara laboratorium forensik tradisional dan laboratorium dilengkapi untuk menangani dengan tingkat 3 dan 4 tingkat patogen hewan dan manusia yang dapat digunakan oleh teroris atau penjahat. Hanya beberapa negara memiliki infrastruktur untuk forensik mikroba kemampuan canggih, sehingga ada kebutuhan untuk kerjasama internasional mengenai metode dan sistem untuk pemrosesan cepat dan dalam bukti forensik mikroba. Ada juga kebutuhan untuk integrasi yang lebih besar dan kerjasama antara kesehatan masyarakat dan program surveilans untuk kesehatan hewan. Organisasi internasional seperti OIE, Organisasi Kesehatan Dunia dan Organisasi Pangan dan Pertanian memiliki peran penting dalam memfasilitasi kerjasama tersebut. Sementara pelatihan forensik khusus adalah nilai dipertanyakan sebagian besar dokter hewan, pejabat kesehatan publik dan laboratorium diagnostik, individu-individu harus menyadari kemungkinan keterlibatan pidana di wabah penyakit menular yang terkait dengan hewan dan mengenali mana mereka perlu bekerja sama dengan penegak hukum dan penyelidik forensik pada tahap awal tradisional. Jaminan Kualitas sangat penting untuk laboratorium diagnostik dan forensik, dokter hewan sama. Oleh karena itu, penerapan QA laboratorium hewan kredibel, terutama dalam kaitannya dengan rantai sampel balak, harus memperkuat peran laboratorium ini untuk membantu penyelidikan kejahatan.