4. pengendapan protein secara denaturasi ireversibel a.

Pengendapan dengan pereaksi alkaloid

tujuan : memisahkan protein dengan memisahkannya dengan senyawa yang bereaksi dengan protein tersebut Dasar : Pereaksi alkaloid adalah asam-asam organik yang dapat mengendapkan alkaloid serta protein. Pengendapan terjadi karena alkaloid dan protein mengandung nitrogen trivalen. Asam trikloroasetat (TCA=tricgloracetic acid ) sering dipakai untuk deproteinisasi (penyingkiran protein) dari suatu bahan. Asam sulfasalisilat sering dipakai unatuk melacak ada tidaknya protein dalam urin patologis. Bahan dan pereaksi : 1. SERUM 2. Asam triklosasetat (TCA: trichlos acetic acid) 10% 3. Asam sulfasalisilat 3% Cara kerja dan hasil : Siapkan dua tabung reaksi yang bersih dan kering. Lakukan prosedur yang tertera dalam table 4.a. Tabel 4.a. Pengendapan protein dengan menggunakan pereaksi alkaloid Tabung Serum TCA 10% As. Sulfasalisilat Endapan ada / tidak ada 1 1 ml 1 ml Ada 2 1 ml 1ml Ada

Kesimpulan :

Dari percobaan ini dapat disimpulkan bahwa serum merupakan protein yang mengandung nitrogen trivalent yang apabila bereaksi dengan TCA atau asam sulfasalisilat akan mengendap.

b. Pengendapan protein dengan logam berat

tujuan : memperlihatkan, bahwa logam berat mengendapkan protein secara denaturasi ireversibel. Dasar : Protein bermuatan negatif membentuk garam dengan kation logam berat menjadikan protein terdenaturasi dan mengendap Bahan dan pereaksi : 1. Putih telur 2. larutan H9CL2 1% 3. Larutan Pb-asetat Cara kerja dan hasil : Siapkan dua buah tabung reaksi, lakukan prosedur yang tertera dalam table 4.b. Table 4.b. Pengendapan protein dengan logam berat Tabung Putih telur H9CL2 Pb-asetat Endapan ada/tidak ada Kesimpulan : 1 1 ml Tetes demi tetes Ada 2 1 ml Tetes demi tetes Ada

Protein apabila bereaksi dengan logam berat maka akan mengendap.