Anda di halaman 1dari 1

Bakteri strain dan kondisi pertumbuhan Strain yang digunakan dalam penelitian ini terdiri dari 13 monocytogenes L.

strain termasuk 4 strain yang diperoleh dari koleksi Listeria dari Institut Pasteur, Paris, Perancis (KLIP 74.902, CLIP 74.903, CLIP 74.904, CLIP 74.910) dan 9 strain yang diisolasi di laboratorium kami dari berbagai sumber (lima dari sampel klinis: SL-A, SL-B, SL-C, SL-mf2, SL-4425, dua dari makanan SL-I, SL-K, dan dua dari sumber hewan: SL-D, SL-E). Lima L. innocua strain (CLIP 74.915, CLIP 74.916 ditambah tiga strain baru diisolasi dari sampel makanan, SL-G, SL-H, SL-56) digunakan sebagai kontrol negatif. Masing-masing Strain yang diisolasi diidentifikasi dengan pewarnaan Gram, reaksi katalase, motilitas pada suhu 25 C dan menggunakan perangkat Api Listeria (bioMrieux, Marcy I'toile, Prancis) (Donnelly, 1999). Mereka dikonfirmasi lebih lanjut dan diserotipe oleh Institut Pasteur, Paris, Perancis (Seeliger dan Hhne, 1979, Doumith et al, 2004).. Bakteri yang disimpan di laboratorium kami di Luria Bertani, kaldu yang mengandung gliserol 20% pada suhu -70 C. strain disubkultur pada agar yang telah diinfusi oleh brain heart dan diinkubasi padasuhu 37 C selama 24 jam sebelum digunakan. Aktivitas Hemolitik pada agar darah Aktivitas hemolitik dari strain Listeria diseleksi pada agar Mueller Hinton yang mengandung darah kuda 5% (MHBA) dan MHBA dilengkapi dengan arang aktif 0,2% dan 1 mmol / L CaCl2 (MHBAAC + Ca +2) (Lemes-Marques dan Yano, 2004). Ada dua prosedur plating digunakan: Metode plat Peluruhan agar Inokulum disusun oleh goresan tipis sel massa dalam saline 0,9% solusi (SS) dan diratakan dengan kekentalan berkisar 0,5 dari skala standar kekentalan McFarland (sekitar 1,5 x 108 cfu / ml). Masing-masing lima mikroliter suspensi dinodai pada kedua media kultur. Semua piring diinkubasi pada suhu 37 C dan dilihat pada 24 dan 48 jam setelah diinokulasi. Aktivitas hemolitik dinyatakan sebagai rasio diameter halo yang jelas disekitar koloni dengan diameter koloni itu sendiri. Ketika strain Listeria menunjukkan tidak ada aktivitas, nilai dianggap nol. Ketika sebuah halo transparan yang khas ditampilkan hanya di bawah koloni, rasio ini adalah sama dengan satu.

Anda mungkin juga menyukai