BORAN/

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 1 #ar! $$

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN

Disusun Oleh : Rini Nur Azizah Is!i "u!ia#i Nurria Mar(i)ah +e,ar I(a)u K Tri Nur Hi,!ah An--i Mus#i,a +e,ar Aru! .ere!ia /eral( A0ri(a Ni,en Des) N12iana ( 12/ (12/ $11/BI/$%%%&' (12/ (12/ 1%2 /BI/$%%%*'

LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN 3AKULTA+ BIOLO/I UNI4ER+ITA+ /A.AH MADA

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 2 #ar! $$

"O/"AKARTA 2$1

KATA PEN/ANTAR
%uj! #an s&ukur 'en&usun 'anjatkan ke(a#!rat )u(an *an+ Ma(a ,sa karena atas ra(mat #an karun!a-N&a se(!n++a 'en&usun #a'at men&elesa!kan 'rakt!kum M!krotekn!k )um-u(an te'at 'a#a .aktun&a. /a'oran !n! #!susun untuk melen+ka'! tu+as 'rakt!kum M!krotekn!k )um-u(an ta(un ajaran 20130201$ #! /a-orator!um M!krotekn!k #an ,m-r!olo+! )um-u(an1 Fakultas B!olo+!1 Un! ers!tas Ga#ja( Ma#a &an+ -ertujuan untuk men+enal #an men+eta(u! 2ara 'em-uatan 're'arat or+an tum-u(an #em! ke'erluan !#ent!3!kas! #an untuk mem'elajar! (u-un+an stru2tural #ar! jar!n+an tum-u(an. Den+an terselesa!kann&a 'enul!san !n!1 'en&usun !n+!n men&am'a!kan u2a'an ter!ma kas!( ke'a#a4 1. Ba'ak0I-u Dosen 5e'ala /a-orator!um M!krotekn!k #an ,m-r!olo+! )um-u(an 2. Ba'ak Drs. 6ut!kno1 6.U. selaku 5oor#!nator 'rakt!kum 3. 6emua '!(ak &an+ t!#ak #a'at 'en&usun se-utkan %en&usun men&a#ar! -a(.a #alam 'enul!san 'enul!san la'oran !n!1 mas!( -an&ak kekuran+an #an kelema(an. Ole( karena !tu untuk kesem'urnaan la'oran !n!1 'en&usun men+(ara'kan kr!t!k #an saran &an+ -ers!3at mem-an+un. %en&usun -er(ara' semo+a la'oran !n! #a'at mem-er!kan man3aat -a+! 'em-a2a. *o+&akarta1 17 Desem-er 2013 la'oran

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 3 #ar! $$

%en&usun

LEMBAR PEN/E+AHAN
/a'oran %rakt!kum M!krotekn!k )um-u(an !n! #!susun untuk melen+ka'! tu+as ak(!r %rakt!kum M!krotekn!k )um-u(an1 #! /a-orator!um M!krotekn!k #an ,m-r!olo+! )um-u(an Fakultas B!olo+!1 Un! ers!tas Ga#ja( Ma#a1 *o+&akarta.

)ela( #!sa(kan 'a#a4 "ar! 4 )an++al 4

*o+&akarta1 Men+eta(u!1 Dosen 'em-!m-!n+

Desem-er 2013

%rakt!kan1

8 Drs. 6ut!kno1 6.U.9

8 kelom'ok 9

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 $ #ar! $$

DA3TAR I+I
"alaman :u#ul ............................................................................................................. ! 5ata %en+antar;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;; !! /em-ar %en+esa(an;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;; !!! Da3tar Is! ....................................................................................................... ! %en#a(uluan .................................................................................................. 1 Meto#e <. <lat .................................................................................................... 2 B. Ba(an ................................................................................................ 3 =. =ara 5erja.......................................................................................... 7 /at!(an I %re'arat 5eseluru(an 8>(ole Mount9 ....................................... 7 /at!(an II 6?uas( ........................................................................................ 11 /at!(an III %re'arat %ollen ........................................................................... 1@ /at!(an IA %re'arat %enam'an+ tan'a B,m-e##!n+C ................................. 20 /at!(an A %re'arat %enam'an+ 86e2t!on9 ................................................... 2$ /at!(an AI Maseras! ..................................................................................... 28 /at!(an AII M!krometr! ................................................................................ 32

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 @ #ar! $$

Da3tar %ustaka ............................................................................................... 3@

PENDAHULUAN M!krotekn!k tum-u(an meru'akan tekn!k atau 2ara &an+ 'a#a 'r!ns!'n&a mel!'ut! 4 1. %em-uatan 're'arat 'ermanen #ar! -a(an tum-u(an &an+ mel!'ut! -er-a+a! meto#e 8.(ole mount1 se2t!on9. 2. %en+amatan 're'arat m!krosko'!k #en+an men++unakan alat k(usus 8=amera /u2!#a9. 3. %en+ukuran 'anjan+ #an le-ar sel atau -a+!an sel tum-u(an #en+an men++unakan m!krometer 8M!krometr!9. $. %en+enalan s!3at D s!3at anatom!s 8'al!sa#e rat!o1 !n#eks stomata1 #s-.9. @. %en+enalan -erma2am Eat 'en&usun -a+!an D -a+!an sel tum-u(an #en+an 'em-u-u(an -a(an D -a(an k!m!a 8m!krok!m!a9. %re'aras! #a'at #!-uat se2ara se2t!on mau'un non-se2t!on. %a#a 're'aras! non- se2t!on #a'at #!kelom'okkan menja#! F a. %re'aras! ker!n+ -eru'a (er-ar!um1 r!ker mount1 #an s'e2!men -atan+1 -. %re'aras! -asa( -eru'a 're'aras! museum jar #an -a(an -ulk !ntuk #!sse2t!on1 2. >(ole mount #an maseras! untuk stu#! m!krosko'!k 3!s!olo+!s.

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 7 #ar! $$

%re'aras! #!-uat #en+an tujuan su'a&a tum-u(an #a'at #!'elajar! #en+an le-!( -a!k #an men#eta!l. %em!l!(an jen!s atau meto#e 're'aras! #!sesua!kan #en+an s!3at -a(an tum-u(an1 tujuan 'em-uatan1 #an asal -a(an1 m!saln&a -a(an akuat!k. %a#a 'rakt!kum M!krotekn!k )um-u(an !n! #!lakukan 're'aras! se2t!on1 .(ole mount1 s?uas(1 're'aras! tan'a em-e##!n+1 koleks! 'ollen1 #an maseras!.

METODE A5 ALAT <lat D alat &an+ #!'er+unakan1 'a#a 'rakt!kum M!krotekn!k )um-u(an a#ala( 4 1. Gelas -en#a 1 2. Gelas 'enutu'1 3. Gelas ukur1 $. %!'et ke2!l1 @. %!'et -esar1 7. 6kal'el1 7. :arum 're'arat1 8. 5uas1 G. Gunt!n+1 10. %!nset1 11. %ena (alus 8run2!n+9 #en+an t!nta1 12. Gelas jam1 13. )em'at D tem'at 'e.arnaan1 1$. -otol D -otol tem'at -a(an k!m!a1 1@. Botol atau ta-un+ untuk 3!ksas!1 17. /am'u s'!r!tus1 17. Botol -alsam #en+an -atan+ +elas1 18. Gelas D +elas %etr!1 1G. %om'a 'en+(!sa'1 20. %ens!l1 21. M!krosko'1 22. /ou'e1 23. 5ertas 'en+(!sa'1 2$. M!krotom1 2@. %!sau 2ukur atau s!let1 27. %ara3!n O en 0 )(ermostat1

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 7 #ar! $$

27. )em'at 'en&!m'an 're'arat1 28. Meja 'emanasan1 2G. Gelas -en#a -erlekuk1 30. =amera /u2!#a1 31. %r!sma 'ro&eks!1 32. =erm!n +am-ar1 33. Okuler D m!2rometer1 3$. O-&ek D m!2rometer1 3@. Meja +am-ar1 37. <lat 'emotret1 37. /a' -!asa1 38. /a' 3lannel1 3G. )em'at untuk mem-ers!(kan alat D alat #ar! +elas.

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 8 #ar! $$

B5 BAHAN Ba(an D -a(an k!m!a &an+ laE!m #!'er+unakan 'a#a 'rakt!kum M!krotekn!k )um-u(an a#ala(F 1. Rea+ens!a untuk #e(!#ras!1 &a!tu 4 - <seton1 - ,t!l <lko(ol 1 - "!+ro-utol1 - Iso D 'ro'el al2o(ol1 - But!l al2o(ol normal1 2. Rea+ens!a untuk 'enjern!(an1 &a!tu 4 - Bensol1 )uluol1 - 5reosot1 - M!n&ak Ber+anot1 - M!n&ak =e#ar1 - =(loro3orm1 3. Rea+aens!a untuk 'emut!(an1 &a!tu 4 - "&#ro+en 'eroH!#e1 - %roH!#a ammon!a1 - #ll. $. Me#!a untuk 'en&elu-un+an1 &a!tu 4 - %ara33!n1 - =ello!#!n1 =ollo!#!n1 %arlo#!on1 - Gl&2ol stearat1 - #ll. @. Ba(an untuk 'erekat1 &a!tu 4 - M!n&ak 2en+ke(1 - )er'!neol1 - )ro2(loroet(&len1 H!lol1 - #ll. - %ro'!l al2o(ol normal1 - But!l al2o(ol sekun#er1 - But!l al2o(ol ters!er1 - #ll

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 G #ar! $$

- "au'Is a#(es! e1 - Ma&erIs a#(es! e 8+l!ser!n #an al-um!n91 - =ello!#!n1 - Ullr!2(Is a#(es! e. 7. Me#!a untuk 'enutu'an 're'arat1 &a!tu 4 - Balsem 5ana#a1 - ,u'aral1 - 6t&raH1 - "&raH1 - M!n&ak 2e#ar1 7. /arutan D larutan untuk 3!ksas!1 &a!tu 4 a. Bers!3at asam =am'uran asam asetat D al2o(ol1 &a!tu larutan =arno& 8al2o(ol a-solute 3022F asam asetat +la2!al @22F 2(loro3orm 1@2291 =am'uran 3ormal!n D asam asetat D al2o(ol1 &a!tu Formal!n D aseto al2o(ol atau F<< 8<lko(ol @0J atau 70J G0 22F asam asetat +la2!al @ 22F 3ormal!n @ 2291 =am'uran asam k(romat D asam asetat1 &a!tu me#!um <sam 5(romat 8 larutan 10 J asam 5(romat 8a!r9 722F larutan 10J asam asetat 8a!r 10 22F #an akua#es sam'a! 100 2291 =am'uran asam k(romat D asam asetat D asam asm!at1 &a!tu larutan Flem!n+ 8larutan 10 J asam k(romat 311 22F larutan 10 J asam asetat 8a!r9 30 22F 2J asam osm!at #alam 2J asam k(romat 12 22F #an akua#es 111G2291 - Aenet!an tur'ent!ne1 - /a2to'(enol1 - Gl!ser!n jel!1 - #ll.

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 10 #ar! $$

=am'uran asam k(romat D asam asetat D 3ormal!n1 &a!tu larutan Na as(!n &an+ ter#!r! atas #ua larutan F larutan < 8<sam 5(romat 7 22F asam asetat +la2!al 722F akua#es G2 229 #an larutan B 8Formal!n 3022F akua#es 70 229. 5e#ua larutan !n! #!2am'ur #en+an 'er-an#!n+an 1 4 1j!ka akan #!ak'a!1

=am'uran &an+ men+an#un+ 5 D -!k(romat1 &a!tu larutan )ell&esn!2k& 85--!k(romat 3 +F asam asetat +la2!al @ 221 #an akua#es 1G22291

=am'uran &an+ men+an#un+ <sam '!krat1 &a!tu larutan Bou!n 8alrutan jenu( asam '!krat #alam akua#es 7@ 221 3ormal!n 2@221 asam asetat +la2!al @2291

=am'uran &an+ men+an#un+ "+ D klor!#a1 &a!tu /arutan >or2ester 8larutan jenu( "+ D klor!#a #alam akua#es G7221 3ormal!n $ 221 larutan 10J asam asetat +la2!al #alam akua#es 10 229.

-. Bers!3at alkal!sF /arutan K!rkle D ,erl!k!F 5 D-!kromat 112@ +F <mmon!um -!k(romat 112@ +F =u sul3at 1 +F #an akua#es 20022. 8. Kat .arna untuk 'e.arnaan1 &a!tu 4 a. Kat .arna alam!F BraE!l!n1 "ematoks!l!n1 =o2(!neal #an #er! ate. -. Kat .arna s!ntet!sF <2!# 3u2(s!n1 <l!Ear!n Re#Is1 <n!l!n Blue 8=otton B1 >ater B1 =(!na B91 Bas!2 Fu2(s!n 8%ararosan!l!n91

10

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 11 #ar! $$

B!smar2k Bro.n1 =on+o Re#1 =r&stal A!olet1 Gent!an A!olet1 ,os!n1 ,r&t(ros!n1

Fast +reen1 :anus Green1 /!+(t Green 8<2!# Green9 Ma+#ala Re#1 Mala2(!t Green1 Met(&l Green1 Met(&lene -lue1 met(&lene +reen1 Neutral re#1 N!+ros!n1 Oran+e G1 6a3ran!n1 6u#an III1 6u#an IA1 62(arla2( R1 A!tal re#1 Dll.

11

BORAN/
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN LABORATORIUM MIKROTEKNIK DAN EMBRIOLO/I TUMBUHAN

No. Dokumen Berlaku sejak Re !s! "alaman

FO-UGM-BI-07-13 03 Maret 2008 00 12 #ar! $$

G. Kat D Eat untuk 'en&el!#!kan m!krok!m!a1 &a!tu 4 - :o#!um 0 5 D :o#!#a1 - %(loro+lu2!n1 - <n!l!n1 65 6ARA KER.A =ara kerja untuk set!a' lat!(an akan #!jelaskan -ersama #en+an 'em-a(asan 'a#a set!a' to'!k lat!(an1 &a!tu lat!(an 're'arat keseluru(an 8whole mount91 s?uas(1 're'arat 'ollen1 're'arat 'enam'an+ tan'a Bem-e##!n+C1 're'arat 'enam'an+ 8section91 m!krometr!1 #an maseras!. - Kn D 5lor!#a1 - <sam n!trat 0 "+1 - #ll.

12

LATIHAN 1 PREPARAT KE+ELURUHAN (7HOLE MOUNT' A5 METODE Ba(an %re'arat Meto#e 4 Spirogyra sp. 4 6eluru( tu-u( tum-u(an ke2!l. 4 Gl!ser!n-L!lol.

B5 HA+IL DAN PEMBAHA+AN a5 Hasil

/a!8ar 15 %re'arat >(ole Mount #ar! Spirogyra sp. #en+an 'er-esaran 10H$0. 85 Pe!8ahasan %em-uatan 're'arat tan'a se2t!on atau 'en+!r!san 8kalau'un a#a 'en+!r!san1 tujuann&a untuk men+e2!lkan -a(an9 #a'at #!kelom'okkan menja#!4 1. %re'arat ker!n+F (er-ar!um1 r!ker mount1 #an s'es!men -atan+.

2. %re'arat -asa(F 're'arat #alam -otol 8museum91 meter! &an+ terlalu -esar untuk #!sse2t!on. 3. >(ole mount1 smear1 #an maseras!.

%er2o-aan !n! #!lakukan #alam 3 (ar!. Ba(an &an+ akan #!+unakan tela( terse#!a #an tela( #!3!ksas! #en+an F<< 8Formal!n-<seto-<lko(ol9 selama 2$ jam. F!ksat!3 &an+ #!+unakan !n! tersusun atas4 <lko(ol 70J;;;;;.G0 -a+!an1 <sam asetat +la2!al;;;.@ -a+!an1 #an Formal!n;;;;;;;.@ -a+!an.

%roses 3!ksas! !n! #!lakukan untuk men+a.etkan kom'onen-kom'onen sel0jar!n+an semaks!mal mun+k!n su'a&a kon#!s!n&a men#ekat! kon#!s! se.aktu mas!( (!#u' serta men+uatkan 'ra'arat a+ar ta(an ter(a#a''eru-a(an 3!s!ka 8su(u9 #an k!m!a &an+ akan #!lakukan 'a#a ta(a' -er!kutn&a . Dalam 3!ksas!1 'rote!n &an+ men&usun sel0 jar!n+an akan men+alam! 'eru-a(an kom'os!s!0 struktur #an men+alam! 'eru-a(an s!3at k!m!a1 3!s!ka1 #an -!olo+!. 5arena 'eru-a(an-'eru-a(an !tu1 maka 'r!te!n akan men+alam! #enaturas! &an+ -erart! sel !tu mat!. Dalam kon#!s! ter#enaturas!1 'rote!n akan men+alam! koa+ulas! se(!n++a sel menja#! kuat. %rote!n !tu kemu#!an akan men+en#a' se(!n++a akan teta' -era#a 'a#a tem'atn&a 8sama se'ert! saat mas!( (!#u'9. Pen9u9ian Ba(an &an+ tela( #!3!ksas! !tu #!2u2! #en+an alko(ol se2ara -erta(a' 70J1 @0J1 20J mas!n+-mas!n+ selama 30 men!t. Dalam 'en2u2!an #!'!l!( -a(an &an+ 'al!n+ -an&ak terkan#un+ #alam 3!ksat!3 8#alam F<< -an&ak men+an#un+ alko(ol9. %en2u2!an !n! #!lakukan #en+an konsentras! alko(ol &an+ mak!n men+e2!l karena #alam 'e.arnaan akan #!+unakan 'e.arna #en+an 'elarut akua#es. )a(a' terak(!r 'en2u2!an a#ala( #en+an akua#es selama 30 men!t. %roses 'en2u2!an !n! #!maksu#kan untuk men+(!lan+kan 3!ksat!3 &an+ mas!( ters!sa karena 3!ksat!3 !tu #a'at -ereaks! #en+an -a(an--a(an &an+ akan #!+unakan #alam 'roses selanjutn&a. Pe:arnaan 6etela( 'roses 'en2u2!an selesa!1 #!lakukan 'e.arnaan #en+an Fast Green 1J #alam akua#es selama 2$ jam. %e.arna Fast Green #!+unakan a+ar .arna 'ra'arat sama se'ert! asl!n&a 8(!jau9. Dehi(rasi

%ertama-tama1 -a(an &an+ tela( #!.arna! selama 2$ jam !tu #!2u2! terle-!( #a(ulu #en+an akua#es se-an&ak #ua kal!1 mas!n+-mas!n+ selama @ men!t. %en2u2!an !n! #!maksu#kan untuk men+uran+! atau men+(!lan+kan en#a'an Eat .arna &an+ t!#ak 'erlu &an+ mas!( menem'el 'a#a 'ermukaan luar 're'arat karena #a'at men++an++u 'roses selanjutn&a. Dalam 'em-uatan 're'arat !n! #!'erlukan 'roses #e(!#ras! karena 'a#a ta(a' terak(!r akan #!-er! Balsam 5ana#a 'a#a(al Eat .arnan&a men+an#un+ a!r #an 'en2u2!an Eat .arnan&a men++unakan akua#es &an+ t!#ak -!sa -er2am'ur #en+an Balsam 5ana#a. Dalam 'roses #e(!#ras! !n! #!+unakan +l!ser!n 10J #an #!kon#!s!kan 'a#a su(u 70M= selama 2$ jam. Gl!ser!n 10J meru'akan 2am'uran antara +l!ser!n 10 ml 8t!t!k #!#!(n&a 280M=9 #en+an akua#es G0 ml 8t!t!k #!#!(n&a 100M=9. 5arena 'er-e#aan t!t!k #!#!( !n! maka akua#es &an+ terkan#un+ akan men+ua' terle-!( #ulu 8'en+(!lan+an a!r9. De(!#ras! #!lakukan 'erla(an-la(an karena -a(an &an+ #!+unakan meru'akan -a(an &an+ lem-ut. Pen9u9ian 6etela( #!#e(!#ras!1 -a(an #!2u2! #en+an alko(ol G@J selama 30 men!t se-an&ak #ua kal! #an alko(ol 100J selama 30 men!t se-an&ak #ua kal!. "al !n! #!lakukan untuk men+(!lan+kan akua#es &an+ kemun+k!nan mas!( ter#a'at #alam -a(an. Deal,1h1lisasi 5emu#!an #!lakukan #ealko(ol!sas! 8'em-uan+an al2o(ol9 #en+an men++unakan 2am'uran antara alko(ol #an H!lol. %er-an#!n+an &an+ #!+unakan a#ala(4 <lko(ol 4 L!lol N G 4 1 <lko(ol 4 L!lol N 8 4 2 <lko(ol 4 L!lol N 7 4 3 <lko(ol 4 L!lol N 7 4 $ <lko(ol 4 L!lol N @ 4 @ <lko(ol 4 L!lol N $ 4 7 <lko(ol 4 L!lol N 3 4 7

<lko(ol 4 L!lol N 2 4 8 <lko(ol 4 L!lol N 1 4 G1 mas!n+-mas!n+ #!lakukan selama 10 men!t.

5emu#!an #en+an L!lol selama 10 men!t se-an&ak #ua kal!. %erlakuan alko(ol 4 H!lol !n! #!maksu#kan untuk men&esua!kan kon#!s! #ar! alko(ol 100J menuju H!lol untuk 'erlakuan selanjutn&a. M1un#in- a#au 0enu#u0an Mount!n+ atau 'enutu'an. %roses &an+ selanjutn&a #!lakukan a#ala( 'enutu'an 're'arat. Dalam 'roses !n! 'ertama-tama +elas -en#a #!-er! #en+an H!lol kemu#!an -a(an #!letakkan #! atasn&a #an #!tetes! #en+an Balsam 5ana#a. 5emu#!an #!tutu' #en+an +elas 'enutu' #en+an (at!-(at! su'a&a t!#ak ter-entuk +elem-un+ u#ara. %re'arat kemu#!an #!ker!n+kan (!n++a Balsam 5ana#a ker!n+. 6etela( !tu1 're'arat #!-er! keteran+an &an+ -er!s! nama s'es!es1 or+an &an+ -ersan+kutan1 #an se-a+a!n&a.

LATIHAN II +;UA+H 15 Tu<uan Mem'elajar! 'em-uatan 're'arat #en+an tekn!k s?uas( 'a#a ujun+ akar Allium cepa 25 Me#1(e <lat 4 <lat D alat &an+ #!+unakan 'a#a 'em-uatan 're'arat !n! antara la!n 2utter1 '!nset1 +elas -en#a1 +elas 'enutu' serta et!ket tem'el. Ba(an 4 Ba(an &an+ #!+unakan 'a#a 'em-uatan 're'arat s?uas( a#ala( ujun+ akar Allium cepa1 se'anjan+ 3mm #ar! ujun+ akar1 #en+an 'en+am-!lan

antara 'ukul 08.00 (!n++a 'ukul 1$.001 asam asetat +la2!al $@ J1 +l!ser!n1 "=/ 1 N1 a?ua#es1 a2etoor2e!n1 #an 2uteH1 =ara 5erja 4

%er2o-aan !n! men++unakan meto#e s?uas(!n+1 'ertama #!lakukan 3!ksas! men++unakan larutan asam asetat $@J1 #!+unakan -a(an !n! a+ar 're'arat t!#ak terlalu mem-en+kak1 olume asam asetat +la2!al &an+ #! +unakan se-an&ak @@ ml1 #an a?ua#es $@ ml selama 1@ men!t 'a#a su(u @0=. kemu#!an #!lakukan 'en2u2!an #en+an a?ua#es 2-3 kal!. 6etela( !tu #!lakukan (!#rol!sa #en+an men++unakan "=/ 1 N1 #! 'anaskan 'a#a su(u 700= selama 2 men!t. D!lakukan 'en2u2!an #en+an a?ua#es 2-3 kal!1 kemu#!an 'e.arnaan #en+an men++unakan a2etoor2e!n seelama 1 jam. 6etela( !tu #!am-!l ujun+ akar1 kemu#!an #!letakkan #!atas +elas -en#a kemua#!an #!'oton+ -a+!an ujun+ akar #en+an tan#a akarn&a le-!( terl!(at +ela'. 6etela( !tu #!tetes! #en+an +l!ser!n #an #!tutu' #en+an +elas 'enutu'1 +elas 'enutu' #! tekan te'at #! -a.a( ujun+ akar #en+an +a+an+ kuas (!n++a ujun+ akar (an2ur. 5emu#!an te'! +elas 'enutu' #!se+el men++unakan 2uteH1 (al !n! -ertujuan a+ar 're'arat t!#ak 2e'at ker!n+. 6elanjutn&a #! se-ela( k!r! +elas 'enutu' #en+an (at! D (at! #an tan'a +elem-un+1setela( !tu lan+ka( selanjutn&a #!lekatkan et!ket tem'le #an #!-er! keteran+an se-a+a! 'enan#a. 5 Hasil (an Pe!8ahasan

/a!8ar 25 %re'arat s?uas( ujun+ akar Allium cepa Pe!8ahasan %em-uatan 're'arat #en+an meto#e s?uas( #!+unakan untuk men+amat! terja#!n&a 'em-ela(an motos!s #an me!os!s. %a#a 'em-uatan 're'arat !n! #!'erlukan 1 la'!s sel a+ar #a'at #!amat! #en+an jelas 'er!st!.a 'em-ela(an motos!s &an+ terja#!. Ba(an &an+ #!+unakan #alam 'er2o-aan a#ala( ujun+ akar -a.an+ mera( 8Allium cepa9 karena 'a#a ujun+ akar Allium cepa sel-seln&a selalu mem-ela(1 #!n#!n+ seln&a trans'aran #an ukuran kromosom -esar #an jumla(n&a &an+ se#!k!t se(!n++a memu#a(kan #alam 'en+amatan. <lasan kena'a 'en+am-!lan ujun+ akar #!lakukan 'a#a 'ukul 08.00 sam'a! 1$.00 !ala( karena 'a#a .aktu !tu sel Allium cepa se#an+ melakukan akt!3!tas mem-ela(. 3i,sasi F!ksas! a#ala( 'roses &an+ -ertujuan untuk memat!kan sel1 men+uran+! 'eru-a(an 'ost mortem #an -erusa(a mem'erta(ankan kom'onen sel se'ert! atau men#ekat! kea#aan se.aktu (!#u'. Untuk meto#e s?uas(1 3!ksas! terutama #!lakukan #en+an tujuan untuk mem'erta(ankan kon#!s! kromosom &an+ se#an+ #alam kon#!s! akt!3

mem-ela(. F!ksas! #!lakukan #en+an men++unakan <sam asetat $@J selama 1@ men!t 'a#a su(u @o= 8#alam lemar! es9. <sam asetat #!+unakan karena meru'akan 3!ksat!3 &an+ 'enetras!n&a 2e'at se(!n++a kromosom #a'at se2ara 2e'at tera.etkan. 5onsentras! &an+ #!+unakan t!#ak terlalu -esar karena a'a-!la <sam asetrat konsentras! t!n++! #!tam-a(kan ke #alam 'ra'arat maka akan terja#! 'em-en+kakan. Inku-as! 'a#a su(u @ 0= #!maksu#kan untuk men+-!nakt! as! enE!m #! #alam sel. <sam asetat murn! 'a#a su(u 17 0= -er-entuk 'a#at se'ert! es &an+ #!mana men+uran+! 'eru-a(an 'ost mortem 8'eru-a(an setela( mat!9 &an+ -!asan&a terja#! 2onto(n&a autol!s!s1 #an 'a#a su(u ren#a( enE!m (!#rol!t!k t!#ak -er3un+s! #en+an kata la!n t!#ak melanjutkan 'roses autol!s!s. Pen9u9ian %roses 'en2u2!an men++unakan akua#es #!lakukan se-an&ak 3 kal!. "al terse-ut -ertujuan untuk men+(!lan+kan -a(an 3!ksat!3 &an+ se-elun&a #!+unakan #an -a(an terse-ut #a'at -ereaks! #en+an -a(an &an+ #!+unakan 'a#a ta(a'an selanjutn&a1 se(!n++a #a'at mem'en+aru(! (as!l ak(!r . 6ela!n !tu a#a tujuan la!n #ar! 'en2u2!an &a!tu untuk men+(!lan+kan kotoran #an men2e+a( kena!kan su(u &an+ terlalu ekstr!m #en+an jalan men&esua!kan su(u 're'arat 'a#a su(u kamar. Hi(r1lisa )ujuan (!#rol!sa a#ala( untuk mem!sa(kan sel-sel 8maseras!9 #en+an 2ara mele'askan kom'onen lamela antar sel a+ar kromosom #a'at terl!(at #en+an jelas. "!#rol!sa #!lakukan #en+an men++unakan "=l 1 N #an #!'anaskan 'a#a tem'eratur 70o = selama O 2 men!t. "!#rol!sa #!lakukan #en+an "=l konsentras! ren#a( karena a'a-!la #!+unakan rea+en &an+ le-!( 'ekat maka sel akan mu#a( (an2ur. Inku-as! ju+a t!#ak -ole( terlalu lama karena a'a-!la terlalu lama 're'arat t!#ak #a'at -er.arna saat 'roses 'e.arnaan. 6ela!n !tu sel ju+a -!sa rusak atau !nt! sel memanjan+ mele-!(! ukuran asl!n&a se!n++a t!#ak re'resentat! e saat

'en+amatan -erlan+sun+. /an+ka( -er!kutn&a 're'arat #!2u2! #en+an akua#es se-an&ak 3 kal!. Pe:arnaan %e.arnaan #!lakukan #en+an men++unakan <2etoor2e!n 1J &an+ #!larutkan #alam asam asetat $@J. %e.arnaan se'ert! !n! 2o2ok untuk 'e.arnaan 're'arat kromosom. %e.arna <2etoor2e!ntersusun atas 1 +ram Or2e!n se-a+a! a+en 'e.arna1 $@ ml <sam asetat +la2!al &an+ -er3un+s! untuk men2e+a( 'e.arnaan ter(a#a' s!to'lasma1 #an @@ ml akua#es se-a+a! 'elarut. %re'arat (arus teren#am a+ar #a'at ter.arna! se2ara sem'urna. %e.arnaan #!lakukan selama O 1 jam. M1un#inMount!n+ #!lakukan #en+an men++unakan +l!ser!n &a!tu #en+an men+am-!l ujun+ akar &an+ tela( #!.arna! kemu#!an #!'oton+ -a+!an ujun+ &an+ .arnan&a le-!( +ela' j!ka #!-an#!n+kan #en+an -a+!an la!n. 5arena -a+!an terse-ut meru'akan -a+!an #ar! akar #en+an mas!( mu#an&a jar!n+an mer!stem &an+ se#an+ akt!3 mem-ela( jar!n+ann&a mu#a #an ukuran sel mas!( ra'at #an ke2!l se(!n++a akan ter'ulas le-!( +ela'. Ujun+ akar &an+ #!am-!l a#ala( -a+!an akar &an+ terl!(at le-!( lan2!'1-ersera-ut1 #an ter'ulas le-!( te-al 8'ekat9 se'anjan+ P 3 mm1 kemu#!an ujun+ akar &an+ tela( #!'oton+ #!letakkan #! atas +elas -en#a #an #!tetes! +l!ser!n. 6etela( !tu +elas -en#a #!tutu' men++unakan +elas 'enutu'. Gelas 'enutu' #!tekan 8te'at #! -a.a(n&a a#a ujun+ akar9 #en+an ujun+ kuas (!n++a ujun+ akar (an2ur #an #!+esek-+esek a+ar sel t!#ak -ertum'uk se(!n++a .aktu 'en+amatan sel #a'at #!l!(at #en+an jelas. 5emu#!an 'a#a te'! +elas 'enutu' #!oles! 2uteH &an+ -er3un+s! se-a+a! se+el +elas 'enutu' a+ar t!#ak -er+eser. %enam-a(an +l!ser!n #! s!n! #!maksu#kan untuk mena!kkan !n#eks -!as1 karena !n#eks -!as a!r le-!( ke2!l j!ka #!-an#!n+kan #en+an !n#eks -!as +l!ser!n1 3un+s! la!nn&a #a'at menja+a kelem-utan serta kese+aran -a(an. Gl!ser!n ju+a mem!l!k!

t!t!k #!#!( &an+ le-!( t!n++! j!ka #!-an#!n+kan #en+an a!r maka +l!ser!n t!#ak mu#a( men+ua'. Pe!8erian Na!a %em-er!an nama #!tem'atkan #! se-ela( k!r! +elas 'enutu'1 #en+an menem'elkan la-el #an #!-er! keteran+an nama s'es!es #an nama &an+ mem-uat 're'arat serta +olon+an #an NIM ma(as!s.a. )a(a' m!tos!s &an+ #a'at #!amat! 'a#a 're'arat !ala( 4 a5 In#er=ase 6aat 3ase !n!1 sel tela( s!a' mem-ela(1 namun -elum mem'ers!a'kan ke+!atan mem-ela(. Int! sel tam'ak keru( serta tam'ak -enan+ kromat!n &an+ (alus. 85 Pr1=ase Benan+ kromat!n terl!(at memen#ek #an le-!( te-al. 5emu#!an ter-entuk kromosom-kromosom. 6et!a' kromosom mem-ela( memanjan+ #an anakan kromosom !n!la( &an+ #!namakan kromot!#. D!n#!n+ sel 'a#a 3ase !n! !kut mem-ela(. 95 Me#a=ase 5romosom -er-ar!s 'a#a -!#an+ ten+a(0ekuator se(!n++a jumla( kromosomn&a #a'at #!l!(at #an #!amat! #en+an jelas. (5 Ana=ase 6entromer mem-ela( #an ke#ua -ela( kromat!# mem!sa(kan #!r! #an menuju sel kutu- &an+ -erla.anan. 6et!a' kromat!# mem!l!k! s!3at &an+ sama #en+an !n#ukn&a. Mula! ta(a' 'em-ela(an !n! kromat!# #!an++a' se-a+a! kromosom -aru. e5 Tel1=ase %a#a t!a' kutu- sel ter-entuk sel kromosom &an+ !#ent!k. %lasma sel ter-a+! menja#! 2 -a+!an. %roses !n! #!namakan s!tokl!nase. %a#a tam-a(an karena seln&a -er-an#!n+ maka s!tok!nase #!tan#a! #en+an ter-entukn&a #!n#!n+ 'em!sa( #! ten+a( sel. )!a' sel !n#uk -ers!3at #!'lo!# 82n9 #an men+(as!lkan sel anakan &an+ (a'lo!#.

*5 Kesi!0ulan %em-uatan 're'arat tekn!k s?uas( a#ala( 're'arat #!-uat #en+an 2ara s?uas(!n+0 menekan s'es!men &an+ akan #!amat! #! atas ka2a -en#a1 se(!n++a #!'erole( la'!san t!'!s1 'enekanan !n! #!lakukan a+ar sel-seln&a men&e-ar se(!n++a #!'erole( la'!san &an+ 2uku' t!'!s se(!n++a mu#a( #!amat! #an sel t!#ak menum'uk. 6e(!n++a 'roses 'em-ela(an sel 8m!tos! atau me!os!s9 #a'at teramat! #en+an mu#a(. Dar! 'ero-aan #en+an ujun+ akar -a.an+ #!'erole( 'em-ela(an sel se2ara m!tos!s.

LATIHAN III PREPARAT POLLEN A5 TU.UAN

/at!(an !n! -ertujuan untuk mem-uat suatu 're'arat 'ollen #ar! tumu(an D!2ot&le#oneae0 Mono2ot&le#oneae. B5 METODE Ba(an %re'arat Meto#e 4 <nt(era 4 %re'arat 'ollen Hibiscus rose- sinensis #an Lillium sp. 4 <setol!s!s

65 HA+IL DAN PEMBAHA+AN Hasil

Gam-ar 3. %re'arat 'ollen Hibiscus rosa- sinensis #en+an %er-esaran 10H$0

Gam-ar $. %re'arat 'ollen Lillium sp. #en+an 'er-esaran 10H$0 Pe!8ahasan Benan+ sar! 8stamen) meru'akan metamor'os!s #ar! #aum &an+ -entuk #an 3un+s!n&a tela( #!sesua!kan se-a+a! kelam!n jantan. %a#a -enan+ sar! #!-e#akan menja#! t!+a -a+!an1 &a!tu 4 )an+ka! sar! 8filamentum) &an+ -er-entuk -enan+. 5e'ala sar! 8anthera9 &an+ ter#a'at #! uju+ tan+ka! sar!. %en+(u-un+ ruan+ sar! 8connectivum9 &an+ meru'akan lanjutan tan+ka! sar! &an+ men+(u-un+kan ke#ua -a+!an ke'ala sar! &an+ ter#a'at #! kanan k!r! 'en+(u-un+ !n!. %a#a lat!(an !n!1 -a+!an utama &an+ #!+unakan a#ala( kela'a sar! 8anthera) . a#ala( kela'a sar! 8anthera) a#ala( -a+!an #ar! -enan+ sar! &an+ ter#a'at 'a#a ujun+ tan+ka! sar! &an+ mem!l!k! -entuk &an+ -erma2am-ma2am se'ert! -er-entuk -ulat1 joron+ -ulat telur1 -an+un ker!njal1 #ll. 6er-uk sar! meru'akan -a(an &an+ san+at lem-ut #an mu#a( -eter-an+an j!ka tert!u' an+!n. D!n#!n+ 'ollen ter#!r! #ar! #ua -a+!an atau la'!san &a!tu4 Int!n <#ala( #!n#!n+ 'ollen &an+ men+an#un+ selulose1 'ekt!n1 kalose1 'ol!sakar!#a la!n1 #an 'rote!n. ,ks!n <#ala( #!n#!n+ 'ollen &an+ men+an#un+ s'oro'olen!n #an +l!kokal!ks. 6'oro'olen!n meru'akan 'ol!mer kom'leks aQ&an+ -era#a #!antara karoteno!# #an ester karoteno!# #en+an oks!+en. Den+an a#an&a s'oro'olen!n terse-ut maka #alam 'em-uatan 're'arat 'ollen !n! #!+unakan #en+an meto#e a2etol&s!s1 &a!tu #en+an melarutkan #!n#!n+ sel anthera #en+an asam asetat. 6e(!n++a akan tam'ak trans'aran. %ollen &an+ #!+unakan #alam 'rakt!kum kal! !n! a#ala( 'ollen Hibiscus rosa- sinensis #an Lillium sp. #alam 'em-uatan 're'arat 'ollen #!lakukan -e-era'a 'roses1 antara la!n se-a+a! -er!kut4 F!ksas! F!ksas! meru'akan suatu 'roses atau usa(a &an+ #!lakukan untuk kom'onen-kom'onen sel #an men+a.etkan semaks!mal mun+k!n men#ekat!

kea#aan se.aktu mas!( (!#u'. )ujuan #ar! 3!ksas! a#ala( untuk memat!kan sel 'ollen1 men+eraskan atau men+uatkan 'ollen #an men+a.etkan 'ollen. %ertama-tama1 'ollen-'olen &an+ #!'erole( #ar! antara Hibiscus rosasinensis #!kum'ulkan #an #!masukkan #alam -otol 3lakon &an+ -er!s! asam asetat +las!al. 5emu#!an #!#!amkan selam 2$ jam. <sam asetat +las!al #!+unakan -ukan untuk men+uatkan 'ollen karena 'ollen su#a( -ers!3at kuat 8mem!l!k! s'oro'olen!n &a!tu 'ol!mer kom'leks antara koroteno!# #an ester koroteno!# #en+an oks!+en &an+ ta(an ter(a#a' 'roses 'eme2a(an9. <sam asetat +la2!al -er3un+s! untuk 'en+uatan 'a#a 'roses selanjutn&a #an asam asetat +la2!al untuk mem-en+kakkan 'ollen. 6e-enarn&a 'ollen t!#ak 'erlu #!3!ksas! karena #!n#!n+ 'ollen men+an#un+ s'oro'ollen!n 8meru'akan ester karoteno!#9 &an+ kuat se(!n++a t!#ak 'erlu la+! untuk #!kuatkan. )eta'! karena 'ollen akan men+alam! -er-a+a! 'eru-a(an1 -a!k 3!s!k mau'un k!m!a.! selama 'roses 'em-uatan 're'arat1 maka 'ollen teta' #!3!ksas!. 6entr!3u+as! 6etela( 2$ jam1 -a(an #!'!n#a(kan ke #alam ta-un+ sentr!3use. 6etela( !tu #!lakukan sentr!3us selama O @ men!t ter(a#a' 'ollen. 6e(!n++a 'ollen akan -era#a #!-a+!an atas #an -erla'!s-la'!s ter+antun+ -erat molekuln&a. %ollen &an+ mem!l!k! -erat molekul &an+ ren#a( akan -era#a 'a#a -a+!an &an+ le-!( atas #ar! 'a#a 'ollen &an+ -erat molekuln&a le-!( t!n++!. 6entr!3us -er3un+s! untuk men+en#a'kan 'ollen. )a(a' selanjutn&a 2a!ran &an+ a#a #! ta-un+ -ersama 'ollen #!tuan+1 #an 'enuan+an #!lakukan lan+sun+ #alam sekal! .aktu a+ar 'ollen t!#ak !kut keluar. 6elanjutn&a #!tam-a(kan 2am'uran antara <<G #en+an asam sul3at 'ekat #en+an 'er-an#!n+an G 4 1. %enam-a(an 2am'uran ke#ua larutan terse-ut meru'akan 'roses asetol!s!s &an+ -er3un+s! menjern!(kan 'ollen #en+an jalan melarutkan #!n#!n+ sel karena a.aln&a 'ollen -eru'a -a(an &an+ t!#ak trans'aran. 6etela( #!tam-a( 2am'uran <<G #an asam sul3at 'ekat1 lalu #!'anaskan #alam .ater-at( selama O 3 men!t. "al !n! #!lakukan untuk mem'er2e'at reaks! asetol!s!s #an untuk mem-uka 'or!-'or! 'ollen. <'a-!la

asetol!s!s terlalu s!n+kat1 Eat k!m!a &an+ menem'el 'a#a 'ollen semuan&a l!s!s se(!n++a 'ollen -elum trans'aran menja#! +ela' la+!. %emanasan %ollen &an+ tela( #! sentr!3use kemu#!an #!'anaskan #alam .ater-at( selama O 3 men!t. %emanasan &an+ terlalu lama akan men&e-a-kan 'ollen menja#! +ela' atau (an+us karena a#an&a asam sul3at 'ekat #an 'anas. 6etela( !tu1 'emanasan #!(ent!kan #an ta-un+ #!am-!l. /alu #!#!amkan selama O 1@ men!t. 6elanjutn&a1 #!lakukan 'en#!n+!nan a+ar 'ollen t!#ak 'e2a( untuk #!sentr!3us la+!. <'a-!la tela( #!n+!n ta-un+ #!sentr!3us #an 2a!ran #!tuan+. /alu #!+ant! #en+an akua#es #an #!3orteks kemu#!an #!lakukan #!sentr!3us kem-al!. Ulan+! 2 D 3 kal! #an set!a' 'en2u2!an (arus #!sentr!3us la+!. %en2u2!an -er3un+s! untuk men+(!lan+kan kotoran-kotoran &an+ mun+k!n t!m-ul selama 'roses asetol!s!s. Forteks -er3un+s! untuk meratakan 'en2u2!an 'a#a 'ollen. %e.arnaan %e.arnaan 'ollen #!lakukan #en+an men++unakan sa3ran!n 1J #alam akua#es O 2 tetes #an #!tam-a( #en+an se#!k!t akua#es a+ar .arna &an+ #!#a'at t!#ak terlalu 'ekat. D!+unakan sa3ran!n 1J 8konsentras! ren#a(9 karena a'a-!la men++unakan 'e.arna &an+ mem!l!k! konsentras! t!n++!1 'ollen &an+ trans'aran akan menja#! +ela' la+!. 5emu#!an1 #!lakukan 3orteks #an sentr!3us la+!. Forteks #!+unakan untuk meratakan 'roses 'en+e2atan 'ollen. %enutu'an 6etela( larutan sa3ran!n #!-uan+ kemu#!an #!+ant! #en+an +l!ser!n jell& men++unakan -atan+ +elas sam-!l #!'anaskan1 teta'! jan+an sam'a! men#!#!( atau t!m-ul +elem-un+ u#ara karena +elem-un+ u#ara !n! akan terl!(at (!tam #an men++an++u 'en+amatan 're'arat. Ba(an #!am-!l #en+an -atan+ +elas lalu #!taru( #! +elas -en#a kemu#!an #!tutu' #en+an +elas 'enutu' &an+ Eat-Eatn&a #!-er! 'oton+an 'ara3!n. D!'anaskan la+! a+ar 'oton+an 'ara3!n melele(. %ara3!n &an+ tela( melele( #!+unakan se-a+a! 'erekat atau 'en&e+el +elas 'enutu' a+ar 'ollen t!#ak -er+eser-+eser. %em-er!an +l!ser!n jell& #a'at -er3un+s! untuk4 Menja+a kese+aran kelem-a-an Men!n+katkan !n#eks -!as )!#ak mu#a( men+ua' se'ert! a!r karena t!t!k #!#!( +l!ser!n jell& a#ala( 280M =.

Men2e+a( a+ar 're'arat t!#ak -er+eser karena +l!ser!n jell& -er-entuk 'a#at 'a#a su(u ruan+.

%em-er!an nama %enutu'an #! se-ela( k!r! +elas 'enutu' #!lekatkan et!ket #an #!-er! keteran+an 4 nama s'e2!es1 're'arat &an+ -ersan+kutan1 #s-.

LATIHAN I4 PREPARAT PENAMPAN/ TANPA EMBEDDIN/

A5 Tu<uan /at!(an !n! -ertujuan untuk mem-uat suatu 're'arat 'enam'an+ tan'a em-e##!n+. B5 Me#1(e Ba(an %re'arat Hasil 4 Batan+ Theobroma cacao 4 %re'arat Ir!san Mel!ntan+ Batan+ Theobroma cacao

65 Hasil (an Pe!8ahasan

/a!8ar &5 %re'arat 'enam'an+ mel!ntan+ -atan+ #en+an meto#e 're'arat 'enam'an+ tan'a em-e##!n+ 'a#a 'er-esaran tan'a em-e##!n+ 'a#a 'er-esaran 10H10

Pe!8ahasan %re'arat 'enam'an+ -atan+ #!lakukan #en+an men++unakan tekn!k tan'a em-e##!n+ karena -atan+n&a su#a( keras1 se(!n++a t!#ak 'erlu #!tanam ke kentan+1 .ortel1 atau l!l!n. 6e-elum 'en+!r!san -atan+1 '!sau 'emoton+ #!oles! <lko(ol 70J se-a+a! 'el!2!n a+ar 'en+!r!san -atan+ t!#ak retak. 5emu#!an -atan+ #!'oton+ #en+an 6l!##!n+ M!2rotome #en+an te-al 0101 mm #en+an se2ara

mel!ntan+ art!n&a 'emoton+ te+ak lurus #en+an 'anjan+n&a -atan+. %emoton+an mem-ujur ra#!al #an tan+ens!al a#ala( -atan+ #!'oton+ sejajar #en+an ara( 'anjan+ -atan+. 6ela!n se-a+a! 'el!2!n1 <lko(ol 70J -er+una se-a+a! 3!ksat!3 're'arat #alam larutan F<<. %e.arna 're'arat a#ala( 6a3ran!n 1J &an+ -er.arna mera(. 6a3ran!n meru'akan 2at &an+ umumn&a #!+unakan untuk me.arna! l!+n!n #an -ers!3at -asa 8-as!2 sta!ns9. %en++unaan sa3ran!n #!karenakan 'en&usun -a+!an #alam -atan+ -ers!3at asam. "as!l 'a#a +am-ar menunjukkan 'enam'an+ mel!ntan+ -atan+ &an+ ter#!r! #ar! -e-era'a la'!san 8struktur anatom!9. /an+ka(-lan+ka( 'em-uatan 're'arat 'enam'an+ l!ntan+ -atan+ #en+an tekn!k tan'a em-e##!n+ a#ala( se-a+a! -er!kut 4 3i,sasi F!ksas! #!lakukan #en+an men++unakan <lko(ol 70J1 asam asetat1 #an 3ormal!n 8larutan F<<9. )ujuan 3!ksas! a#ala( untuk mem'erta(ankan kom'onenkom'onen sel a+ar -en#a 'a#a tem'atn&a1 untuk men+uatkan -a(an #an memu#a(kan 'en+e2atan. F!ksas! #en+an men++unakan F<< karena -a(an &an+ #!+unakan ka&u 2okelat &an+ su#a( keras1 se(!n++a #!+unakan <lko(ol 70J a+ar 'ermukaan ka&u l!2!n. F!ksas! #!lakukan selama 2$ jam.

Pen-irisan 6etela( #!3!ksas! #! #alam -otol 3lakon1 lalu #!keluarkan #an #!!r!s #en+an men++unakan sl!##!n+ m!2rotome #en+an kete-alan &an+ su#a( #!atur1 -erk!sar 20 D 30 m!krometer. Ir!san #!lakukan se2ara mel!ntan+ a+ar seluru( jar!n+an #a'at terl!(at. 6emua !r!san #!tam'un+ #alam -otol 3lakon &an+ su#a( #!!s! #en+an alko(ol 70J. Pe:arnaan %roses selanjutn&a a#ala( 'e.arnaan men++unakan sa3ron!n 1J #alam alko(ol 70J selama 2$ jam. 6a3ran!n a#ala( Eat 'e.arna -asa 8-as!2 sta!n9 &an+

#a'at me.arna! l!+n!n. Den+an 'e.arnaan #!n#!n+ sel1 'oront!m #an sklerenk!m &an+ men+an#un+ l!+n!n #!(ara'kan #a'at #!amat! #en+an jelas #! -a.a( m!krosko'. Pen9u9ian 6etela( 2$ jam 2a!ran sa3ran!n #!-uan+ #an #!+ant! -erturut-turut #en+an alko(ol 70J1 80J1 G@J1 100J1 #an 100J. Mas!n+-mas!n+ 'erlakuan #!lakukan selama 10 men!t1 untuk alko(ol konsentras! 100J #!lakukan se-an&ak #ua kal!. Fun+s! 'en2u2!an a#ala( untuk men+(!lan+kan s!sa-s!sa 3!ksat!3 #an -ekas 'e.arnaan. Deal,1h1lisasi 5arena me#!um untuk menutu' 're'arat a#ala( H!lol1 maka (arus #!lakukan #ealko(ol!sas! untuk menar!k molekul alko(ol. Dealko(ol!sas! !n! #!lakukan se2ara -erta(a' a+ar 're'arat t!#ak rusak #en+an men++unakan 2am'uran alko(ol #an H!lol #en+an 'er-an#!n+an 4 <lko(ol 4 H!lon N 3 4 1 <lko(ol 4 H!lol N 1 4 1 <lko(ol 4 H!lol N 1 4 3 L!lol I L!lol II Mas!n+-mas!n+ #!lakukan selama 10 men!t. Fun+s! #ealko(ol!sas! a#ala( untuk men+(!lan+kan s!sa-s!sa 3!ksat!3 #an -ekas 'e.arnaan. Penu#u0an Ir!san #alam -otol 3lakon kemu#!an #!am-!l satu !r!san #an #!letakan #!atas +elas -en#a. 6elanjutn&a #!-er! Balsam 5ana#a #an #!tutu' #en+an +elas 'enutu' lalu #!atas (ot 'late #en+an tem'eratur $@M= a+ar Balsam 5ana#an&a ker!n+. Balsam 5ana#a #!'!l!( se-a+a! 'erekat +elas -en#a #an+an +elas 're'arat karena ta(an lama #an 're'aratn&a ter(!n#ar #ar! kerusakan atau kemasukkan m!kro-!a. 6etela( !tu1 #!amat! #! -a.a( m!krosko'.

 Pe!8erian na!a %re'arat #!-er! et!ket #! se-ela( k!r! +elas 'enutu' #an #!-er! keteran+an 4 nama s'es!es1 or+an1 'enam'an+1 #s-.

LATIHAN 4 PREPARAT PENAMPAN/ (+E6TION' A5 Tu<uan /at!(an !n! -ertujuan untuk mem-uat suatu 're'arat 'enam'an+ 8se2t!on9. B5 Me#1(e Ba(an %re'arat Meto#e 4 Fol!um Arachis hypogea 4 %enam'an+ mel!ntan+ #ar! #aun Arachis hypogea 4 %ara3!n1 'e.arnaan tun++al.

65 Hasil (an Pe!8ahasan a5 Hasil

/a!8ar >5 %enam'an+ mel!ntan+ 3ol!um Arachis hypogea #en+an 'er-esaran 10H10 85 Pe!8ahasan %em-uatan 're'arat !n! #!+unakan untuk -a(an &an+ sul!t untuk #!'oton+ se'ert! #aun. 6e(!n++a -a(an &an+ akan #!'oton+ #!-uat te+ar terle-!( #a(ulu. %em-uatan 're'arat se2t!on #aun Arochis hypogea men++unakan em-e##!n+ 'ara3!n. 3i,sasi 6e-elum em-e##!n+ -a(an #!3!ksas! #en+an F<<. Daun #!3!ksas! selama 2$ jam. D!lakukan 3!ksas! karena #aun akan men+alam! 'eru-a(an 3!s!ka k!m!a se(!n++a 'erlu #!kuatkan a+ar struktur sel t!#ak -eru-a(1 #an sama se'ert! .aktu (!#u'. %en++unaan F<< karena mem!l!k! s!3at 'en+uatan se#an+ #an #a&a 'enetras! &an+ 2uku' 2e'at. Pen9u9ian a#au (ehi(rasi 6etela( 'roses 3!ksas!1 -a(an kemu#!an #!#e(!#ras! #an #!#ealko(ol!sas!. %roses #e(!#ras! #!lakukan men++unakan alko(ol #en+an konsentras! men!n+kat #ar! 70J1 80J1 G@J1 100J #an mas!n+-mas!n+ #!lakukan selama 30 men!t. Untuk alko(ol 100J #!lakukan se-an&ak 2 kal!. Ba(an #! #e(!#ras! karena molekul a!r t!#ak #a'at -ersatu #en+an 'ara3!n.

 Deal,1h1lisasi %roses #ealko(ol!sas! men++unakan 2am'uran alko(ol #an H!lol #en+an 'er-an#!n+an 4 <lko(ol 4 H!lol N 3 4 1 <lko(ol 4 H!lol N 1 4 1 <lko(ol 4 H!lol N 1 4 3 L!lol I L!lol II Mas!n+-mas!n+ #!lakukan selama 30 men!t. 5emu#!an untuk

#ealko(ol!sas! &an+ terak(!r men++unakan 2am'uran H!lol 4 %ara3!n #en+an 'er-an#!n+an 1 4 G #en+an tem'eratur @7o = selama 2$ jam. L!lol #!+unakan #alam #ealko(ol!sas! karena 'enetras!n&a 2e'at1 se(!n++a 'roses #ealko(ol!sas! -erlan+sun+ 2e'at. In=il#rasi D!lakukan !n3!ltras!0'en&usu'an #en+an 2ara 2am'uran H!lol #an #!+ant! #en+an 'ara3!n murn! 'a#a tem'eratur @7o= selama 2$ jam. Fun+s! #ar! !n3!ltras! a#ala( untuk men+!s! ruan+-ruan+ antar sel1 !n3!ltras! #!lakukan #en+an 'ara3!n. %ara3!n akan men+!s! -a+!an #aun &an+ -eron++a1 se(!n+a -entuk sel terja+a saat #!lakukan 'en+!r!san. In3!ltras! ju+a -ertujuan untuk menja+a (u-un+an antar sel satu #en+an sel &an+ la!n #an menja+a kons!stens! -a(an. Pen)elu8un-an Untuk memu#a(kan #alam 'en+!r!san1 -a(an #!selu-un+! #en+an 'ara3!n. 6etela( 'ara3!n men+eras1 'ara3!n #!'oton+ lalu #!tem'elkan 'a#a holder ka&u se(!n++a 'ara3!n t!#ak (an2ur saat #!je'!t 'a#a rotatory microtome. Pen-irisan (an 0ere,a#an

%en+!r!san #!lakukan #en+an men++unakan rotary microtome. %em!l!(an rotary microtomo karena mam'u men+!r!s -a(an #en+an kete-alan 7 D 12 m!krometer. %en+!r!san -a(an &an+ tela( #!selu-un+! -ertujuan a+ar -a(an &an+ te-al0t!#ak trans'aran menja#! trans'aran se(!n++a sel-seln&a #a'at #!l!(at #en+an

jelas men++unakan m!krosko'. %en+!r!san #!lakukan setela( 'ara3!n men+eras 8#!#!amkan selama 2$ jam9. %ara3!n #!je'!tkan 'a#a rotatory microtome kemu#!an #!!r!s sesua! #en+an ukuran. Ir!san &an+ #!#a'at #!lekatkan 'a#a +elas -en#a &an+ tela( #!oles! +l!ser!n. %em-er!an +l!ser!n !n! -ertujuan untuk menja+a kese+aran #an kelem-a-an 're'arat a+ar t!#ak 2e'at rusak. Gelas -en#a #!tetes! a!r #an #!letakkan 'a#a hot plate #en+an tem'eratur $@M = sam'a! '!ta 'ara3!n mere+an+. Pe:arnaan %re'arat #!.arna! #en+an tekn!k 'e.arnaan tun++al men++unakan sa3ran!n 1J #alam alko(ol 70J. %elarut .arna &an+ #!+unakan a#ala( alko(ol atau akua#es1 se(!n++a 'ara3!n #an a!r (arus #!(!lan+kan. %re'arat #!masukkan #alam 'ara3!n selama 1 jam1 kemu#!an #!lakukan #ealko(ol!sas! #en+an H!lol a+ar #a'at #!-er! -alsam kana#a. %roses 'e.arnaan #an #ealko(ol!sas! 're'arat 3ol!um Arachis hypogea #en+an 'er-an#!n+an 4 L!lol I L!lol II <lko(ol 4 H!lol N 1 4 3 <lko(ol 4 H!lol N 1 4 1 <lko(ol 4 H!lol N 3 4 1 <lko(ol a-solut I <lko(ol <-solut II <lko(ol G@J

<lko(ol 80J <lko(ol 70J Mas!n+-mas!n+ #!lakukan selama 3 men!t1 setela( !tu #!lakukan 4 6a3ran!n 1J #alam <lko(ol 70J selama 1 jam <lko(ol 70J <lko(ol 80J <lko(ol G@J <lko(ol 100J <lko(ol a-solut I <lko(ol a-solut II <lko(ol 4 H!lol N 3 4 1 <lko(ol 4 H!lol N 1 4 1 <lko(ol 4 H!lol N 1 4 3 Penu#u0an %re'arat #!-er! -alsam kana#a lalu #!tutu' #en+an +elas 'enutu'. 6etela( !tu 're'arat #!ker!n+kan #!atas hot plate 'a#a tem'eratur $@M =. Pe!8erian na!a %re'arat #!-er! et!ket #! se-ela( k!r! +elas 'enutu' #an #!-er! keteran+an 4 nama s'es!es1 or+an1 'enam'an+1 #s-.

LATIHAN 4I

MA+ERA+I A5 METODE Ba(an %re'arat Meto#e 4 Batan+ Aracis hypogaea 4 Maseras! Batan+ Aracis hypogaea 4 :e33re&

B5 HA+IL DAN PEMBAHA+AN Hasil

/a!8ar ?5 %re'arat Maseras! Batan+ Aracis hypogaea #en+an 'er-esaran 10H$0 Pe!8ahasan Maseras! a#ala( suatu tekn!k 'em-uatan 're'arat #en+an 2ara #!su.!rsu.!r untuk men#a'atkan +am-aran &an+ jelas tentan+ sel. %a#a 'rakt!kum !n! &an+ akan #!l!(at a#ala( -entuk #ar! trakea. %re'arat &an+ #!+unakan a#ala( -atan+ #ar! <ra2!s (&'o+aea. Maseras! a#ala( 'roses &an+ sul!t. Batan+ &an+ #!+unakan sen+aja #!'!l!( Aracis hypogaea karena mu#a( #!lunakkan #an #!su.!r. %erlakuan k(usus 'un #!lakukan. De(!#ras! -ert!n+kat #!lakukan untuk men+(!lan+kan a!r &an+

#!+unakan untuk men2u2!. Dealko(ol!sas! #!lakukan untuk men+(!lan+kan 'en+aru( alko(ol #ar! 'roses #e(!#ras! #an #!+ant! #en+an H!lol. Dalam men+erjakan 're'arat !n! memerlukan .aktu 2 (ar!. Hari I a. Ba(an #!'oton+ kuran+ le-!( 2 2m #an #!re-us ke #alam a!r (!n++a ten++elam kuran+ le-!( 1 jam. -. Ba(an #!am-!l #an #!'oton+ se-esar korek a'!. 2. Ba(an #!re-us #en+an larutan 5O" 10J #alam .ater-at( selama kuran+ le-!( 3 men!t. #. Ba(an #!2u2! #alam a!r men+al!r selama 1 jam. e. Ba(an #!masukkan #alam <sam n!trat 10J #an <sam kromat 10J #en+an 'er-an#!n+an sama1 sam'a! -a(an menja#! lunak1 kemu#!an -a(an #!2u2! #alam a!r men+al!r selama kuran+ le-!( 1 jam. 3. /arutan #!+ant! #en+an alko(ol 70J selama 30 men!t. +. /arutan #!tuan+ #an #!+ant! la+! #en+an Eat .arna men++unakan sa3ran!n 1J #alam alko(ol 7J selama 2$ jam. Hari II Dehi(rasi (en-an Al,1h1l 8er#in-,a# - <lko(ol 70J - <lko(ol 80J - <lko(ol G@J - <lko(ol 100J - <lko(ol 100J Deal,1h1lisasi - <lko(ol0H!lol 341 - <lko(ol0H!lol 141 - <lko(ol0H!lol 143 - L!lol - L!lol 30 men!t 30 men!t 30 men!t 30 men!t 30 men!t 30 men!t 30 men!t 30 men!t 30 men!t 30 men!t

 Penu#u0an 6atu -a+!an -atan+ #!(an2urkan #en+an 2ara #!su.!r-su.!r kemu#!an #!tetes! #en+an Balsam 5ana#a #an #!atur #!atas +elas -en#a1 #!tutu' #en+an +elas 'enutu'. %re'arat #!ker!n+kan #!atas "ot %late #en+an tem'eratur $@ #erajat 2el2!us (!n++a Balsam 5ana#a ker!n+. Pe!8erian na!a %em-er!an nama #!se-ela( k!r! +elas 'enutu' #an #!lekatkan et!ket #an #!-er! keteran+an nama s'es!es1 or+an1 'enam'an+1 #an se-a+a!n&a. %re'arat &an+ tam'ak a#ala( trak(ea &an+ -er-entuk to'! !n! #!tutu' #en+an Balsam 5ana#a. %en+er!n+an #!lakukan #! atas "ot %late (!n++a Balsam 5ana#a ker!n+. %en+er!n+an !n! #!ja+a a+ar jan+an sam'a! men#!#!(. 5alau sam'a! men#!#!( akan ter-entuk +elem-un+-+elem-un+ u#ara &an+ akan men+otor! 're'arat.

LATIHAN 4II MIKROMETRI D5 METODE Ba(an 4 %ollen Lilium sp. %ollen Hibiscus rosa-sinensis O-&ek m!krometer Okuler m!krometer Meto#e 4 M!krometr!

B5 HA+IL DAN PEMBAHA+AN Hasil

/a!8ar %5 %en+ukuran 're'arat #!-a.a( m!krosko' se2ara m!krometr!

Pe!8ahasan

M!krometr! a#ala( tekn!k 'en+ukuran 're'arat #!-a.a( m!krosko'. )ekn!k !n! men++unakan alat ukur k(usus &an+ #!se-ut m!krometer. M!krometer ter#!r! #ar! o-&ek m!krometer #an okuler m!krometer. O-&ek m!krometer -er-entuk se'ert! +elas -en#a &an+ mem!l!k! skala #! -a+!an ten+a( &an+ tertutu' ole( +elas 'enutu'. Okuler m!krometer -eru'a +elas -un#ar -erskala &an+ #!letakkan 'a#a #!a3ra+ma #alam okuler.6atu skala o-&ek m!krometer a#ala( 0101mm atau 10 nm. 6kala !n! #!+unakan untuk menuntukan skala okuler m!krometer se-elum #!+unakan untuk 'en+ukuran. 6etla( #!tera #en+an o-&ek m!krometer1 skala okuler m!krometer -er3un+s! untuk men+ukur 're'arat. /an+ka(-lan+ka( #alam m!krometr! a#ala( 4 15 Persia0an M!krosko' #!s!a'kan #en+an #!-er! o-&ek m!krometer #an okuler m!krometer serta 're'arat &an+ akan #!ukur. 25 Men9ari nilai s,ala 1,uler !i,r1!e#er (en-an 9ara : a. Mata #!tem'elkan #!atas lensa okuler kemu#!an lensa atas okuler disetting se(!n++a -a&an+an skala terl!(at jelas. -. O-&ek m!krometer #!letakkan #!-a.a( lensa o-&ekt!31 kemu#!an #!atur se(!n++a -a&an+an skala o-&ek m!krometer #an skala tam'ak sejajar. 2. )!t!k 0 #ar! ke#ua skala #!letakkan sama t!n++! #en+an 2ara men++erakkano-&ek m!krometer #. D!2ar! -a&an+an skala #ar! ke#ua m!krometer &an+ -er(!m'!t. 5emu#!an #!(!tun+ jumla( skala 'a#a -a+!an m!krometer1 #!(!tun+ #ar! sklala 0 sam'a! skala an+ -er(!m'!t terse-ut. e. :arak sesun++u(n&a antara #ua skala m!krometer tertera 'a#a o-&ek m!krometer se(!n++a n!la! skala okuler m!krometer #a'at #!(!tun+. 5 Men-u,ur 0an<an- a#au le8ar sel

a. O-&ek m!krometer #!am-!l kmu#!an #!+ant! #en+an 're'arat. 5om-!nas! o-&ekt!31 okuler #an 'anjan+ -a#a- sel sama #en+an ket!ka men2ar! n!la! skala okuler m!krometer. -. Ba&an+an skala okuler m!krometer #!tem'atkan 'a#a -a&an+an 're'arat se(!n++a ara( -a&an+an skala sesua! #en+an 'anjan+ atau le-ar 're'arat. %anjan+ atau le-ar &an+ #!2ar! #!'erole( #en+an men+al!kan jumla( -a+!an skala #en+an n!la! skala.

DA3TAR PU+TAKA
6ut!kno. 2007. Petun u! Pra!ti!um "i!rote!ni! Tumbuhan. /a-orator!um M!krotekn!k #an ,m-r!olo+! )um-u(an Fakultas B!olo+!1 Un! ers!tas Ga#ja( Ma#a. *o+&akarta.