BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Sterilisasi dalam mikrobiologi berarti membebaskan tiap benda atau substansi dari semua kehidupan dalam bentuk apapun. Untuk tujuan mikrobiologi dalam usaha mendapatkan keadaan steril, mikroorganisme dapat dimatikan setempat oleh panas (kalor), gas-gas seperti formaldehide, etilenoksida atau betapriolakton oleh bermacam-macam larutan kimia oleh sinar lemba!ung ultra atau sinar gamma. "ikroorganisme juga dapat disingkirkan secara mekanik oleh sentrifugasi kecepatan tinggi atau oleh filtrasi (#urtis, $%%%). "acam-macam sterilisasi ("achmud, &''()) *ada prinsipn!a sterilisasi dapat dilakukan dengan + cara !aitu secara mekanik, fisik dan kimia,i. $. Sterilisasi secara mekanik (filtrasi) menggunakan suatu saringan !ang berpori sangat kecil ('.&& mikron atau '.-. mikron) sehingga mikroba tertahan pada saringan tersebut. *roses ini ditujukan untuk sterilisasi bahan !ang peka panas, misal n!a larutan en/im dan antibiotik. &. Sterilisasi secara fisik dapat dilakukan dengan pemanasan 0 pen!inaran,*emanasan a. *emijaran (dengan api langsung)) membakar alat pada api secara langsung, contoh alat ) jarum inokulum, pinset, batang L. b. *anas kering) sterilisasi dengan o1en kira-kira 2'-$(''#. Sterilisasi panas kering cocok untuk alat !ang terbuat dari kaca misaln!a erlenme!er, tabung reaksi. c. Uap air panas) konsep ini mirip dengan mengukus. Bahan !ang mengandung air lebih tepat menggungakan metode ini supa!a tidak terjadi dehidrasi. d. Uap air panas bertekanan ) menggunakan autoklaf. +. Sterilisaisi secara kimia,i biasan!a menggunakan sen!a,a desinfektan antara lain alkohol.
1

Sterilisasi !ang umum dilakukan dapat berupa) a. Sterilisasi secara fisik (pemanasan, penggunaan sinar gelombang pendek !ang dapat dilakukan selama sen!a,a kimia !ang akan disterilkan tidak akan berubah atau terurai akibat temperatur atau tekanan tinggi). 3engan udara panas, dipergunakan alat 4bejana5ruang panas6 (o1en dengan temperatur $7'o 8 $('o# dan ,aktu !ang digunakan adalah & jam !ang umumn!a untuk peralatan gelas). b. Sterilisasi secara kimia (misaln!a dengan penggunaan disinfektan, larutan alkohol, larutan formalin). c. Sterilisasi secara mekanik, digunakan untuk beberapa bahan !ang akibat pemanasan tinggi atau tekanan tinggi akan mengalami perubahan, misaln!a adalah dengan saringan5filter. Sistem kerja filter, seperti pada saringan lain adalah melakukan seleksi terhadap partikelpartikel !ang le,at (dalam hal ini adalah mikroba) (Suria,iria, &''.). 9ndikator atau tanda bah,a air lingkungan telah tercemar adalah adan!a perubahan atau tanda !ang dapat diamati !ang dapat digolongkan menjadi ) $. *engamatan secara fisis, !aitu pengamatan pencemaran air berdasarkantingkat kejernihan air (kekeruhan), perubahan suhu, ,arna dan adan!a perubahan ,arna, bau dan rasa. &. *engamatan secara kimia,i, !aitu pengamatan pencemaran air berdasarkan /at kimia !ang terlarut, p:. +. *engamatan secara biologis, !aitu pengamatan pencemaran air berdasarkan mikroorganisme !ang ada dalam air, terutama ada tidakn!a bakteri pathogen. Pemeriksaan E.colli Air minum seharusn!a bebas dari kehidupan mikroorganisme. ;alau dalam air ditemukan adan!a mikroorganisme pathogen, akan membaha!akan kesehatan. 9ndikator adan!a pencemaran dalam air ialah adan!a bakteri coliform atau fecal coli. Adan!a bakteri coliform dalam air ditandai dengan adan!a gas (udara) dalam tabung durham karena bakteri ini mampu memfermentasi lactose. Untuk mendapatkan spesimen !ang paling sesuai dengan keadaan spesimen !ang seharusn!a, maka sebelum dilakukan pemeriksaan laboratorium, pengambilan spesimen air harus dilakukan secara steril guna memastikan tidak terdapatnn!a organisme !ang mengontaminasi dan untuk mendapatkan hasil pemeriksaan !ang 1alid, sampel harus segera diperiksa atau disimpan dalam suhu dingin atau lemari es paling lama & < &- jam.
2

Pemeriksaan Fe Besi (=e) hampir semua perairan alami mengandung besi. Unsur logam ini merupakan /at penting dalam pemeliharaan (nutrition) tubuh manusia, tetapi tidak dapat dipergunakan langsung dalam minuman atau makanan (dalam tablet multi1itamin). Adan!a besi dalam air minum dalam jumlah !ang berlebihan akan men!ebabkan rasa logam atau besi, selain itu ,arna air pun menjadi kuning atau cokelat. Selain itu apabila digunakan untuk mencuci pakaian atau kain maka akan meninggalkan ,arna kuning atau cokelat pada kain tersebut (;armono, $%7(). *ada sistem biologi seperti he,an, manusia dan tanaman, logam ini bersifat esensial, kurang stabil, dan secara pelahan berubah menjadi fero (=e99) atau =eri (=e999). >asa pada air sumur dapat disebabkan oleh derajat keasamanan (ph) !ang rendah sehingga dapat melarutkan besi, sedangkan bau disebabkan oleh kadar sulfida !ang tinggi. Berdasarkan pers!aratan kualitas air minum !ang dibuat oleh *ermenkes ?o.-$25"@?;@S5*@>59A5$%%', kadar besi maksimum !ang diperbolehkan sebesar $.' mg5l. Besi dapat larut pada p: rendah dan dapat men!ebabkan air !ang ber,arna kekuningan, menimbulkan noda pada pakaian dan tempat berkembang biakn!a bakteri #r eonothr in< , oleh sebab itu kadar besi tidak boleh melebihi $ mg5l, karena dapat mempercepat pertumbuhan bakteri besi tersebut dan dapat menimbulkan rasa serta bau (Sutapa, &'''). B. Bujuan $. Agar mahasis,a dapat mengetahui dan melakukan teknik sterilisasi botol pemberat dengan benar. &. Agar mahasis,a dapat mengetahui dan melakukan teknik pengambilan air sumur secara kimia dan biologi dengan benar. +. Agar mahasis,a dapat mengetahui dan melakukan pemeriksaan kualitas air sumur secara kimia, fisik, dan mikrobiologi dengan benar. -. Untuk mengetahui jumlah coli tinja per $''ml sampel !ang diambil dari air sumur. .. Untuk mengetahui kualitas fisik (suhu) dari air sumur. 2. Untuk mengetahui kualitas kimia (kadar =e) dalam air sumur.

BAB II CARA KERJA, HASIL DAN PEMBAHASAN . S!erilisasi "o!ol #an $emeriksaan E.colli Ala! a. Botol sampel dengan pemberat. b. Beaker glass c. C1en d. 9ncubator e. Darum ose f. Babung reaksi g. Lampu spirtus h. >ak tabung reaksi i. Babung durham j. *ipet ukur $'ml Ba%an a. "edia lactose Broth ',.E b. "edia lactose Broth $,. E c. "edia brilian green lactose Broth d. Spirtus e. Alkohol f. Akuades

g. ;apas

Cara ker&a s!erilisasi #en'an "o!ol $em"era! $. "en!iapkan botol sampel !ang bersih dan kering. &. "engikat tali kenur,dirapikan5diatur supa!a mudah untuk ditarik atau dilepas. +. "enutup Botol, lalu dibungkus secara keseluruhan dengan kertas pa!ung !ang rapat ,diikat dengan benang kenur (jangan diikat mati). -. ;emudian disterilkan ke dalam o1en pada suhu $$'o#-$&'o# selama $(-&- jam

Hasil ker&a 3ari langkah kerja di atas didapatkan botol sampel !ang bersih dan steril. Botol tersebut dapat digunakan untuk pengambilan sampel air di lapangan.

(. Pemeriksaan colli !in&a $a#a s)m)r 'ali Cara ker&a a. Bes perkiraan5pendugaan (ragam .).).) "en!usun media LB$,.E dan ',.E dalam rak tabung dengan ragam. .).. "enulis kode ) tanggal penanaman dan 1olume sampel.
5

"engisi sampel masing-masing $'ml ke dalam . tabung media LB $,.E. "engisi sampel masing-masing $ml ke dalam . tabung media LB ',.E. "engisi sampel masing-masing ',$ml ke dalam . tabung media LB ',.E. "enggo!ang rak berisi tabung LB tersebut sampai homogen. Semua media dalam tabung LB diinkubasikan dalam incubator selama & < &- jam pada suhu +7o#,din!atakan positif jika terdapat gelembung gas dalam tabung durham.

"encatat semua tabung !ang positif dan dilanjutkan ke tes penegasan.

b. Bes penegasan "en!iapkan media BFLB. "emindahkan semua media dalam tabung !ang positif $ ose penuh ke dalam media BFLB. "engeramkan pada incubator pada suhu --o# selama $ < &- jam. "encatat semua tabung BFLB !ang positif . "encocokkan dengan tabel "*? #oli tinja sesuai dengan ragamn!a.

Hasil ker&a

*ada saat tes perkiraan5pendugaan ragam .).). hasiln!a positif semua. 3itandai dengan adan!a gelembung udara pada tabung durham. *ada saat tes penegasan terdapat satu tabung !ang positif,!aitu pada tabung !ang diisi sampel $'ml. jadi hasiln!a dapat ditulis !aitu $)')'. Setelah dicocokkandengan tabel formula Bhomas didapatkan hasil bah,a e.colli !ang terdapat dalam air sumur tersebut ialah & per $''ml.

Pem"a%asan Adan!a bakteri @.#oli pada sumber air, mengindikasikan kalau air tersebut kurang higienis peruntukkann!a sebagai air minum. ;arena, bakteri ini biasan!a berasal dari kotoran he,an atau manusia. @schericia coli merupakan salah satu kelompok bakteri !ang berasal dari kotoran manusia sehingga disebut pula fecal coli atau coli tinja. @.#oli merupakan mikroorganisme indikator pencemaran air karena terdapat peluang bagi berbagai macam mikroorganisme pathogen lainn!a !ang secara berkala terdapat pada saluran pencernaan masuk ke air tersebut. @.coli merupakan flora normal pada saluran percernaan manusia Untuk mengetahui jumlah @. coli di dalam sampel air dapat di uji dengan metode "*? ("ost *robable ?umber) atau Dumlah *erkiraan Berdekat. Berdasarkan data hasil praktikum, setelah diinkubasi pada suhu +7o# selama & < &- jam ,sampel air menunjukkan bah,a semuan!a positif,!ang ditandai dengan adan!a gas pada tabung durham, terjadin!a perubahan ,arna dari kuning bening menjadi keruh dan adan!a bau. :asil !ang positif tersebut kemudian dapat dilanjutkan ke tes penegasan. *ada tes penegasan, pada sampel air sumur !ang diinkubasi pada suhu --o# selama &- jam untuk indentifikasi adan!a coli tinja maka ada satu tabung menunjukkan hasil !ang positif,!aitu pada tabung !ang berlabel $'ml. Sehingga angka !ang diperoleh untuk menunjukkan hasil !ang positif adalah $)')' dan inde< "*? coli tinja !ang diperoleh !aitu &5$'' ml.

*. Pemeriksaan k)ali!as +isik #an kimia air s)m)r :ari 5 tanggal ) Senin, '% oktober &'$&

Lokasi Bujuan

) Blun!ahrejo >B && >G '2, Begalrejo, Sleman ) untuk memeriksa kualitas fisik (suhu) dan kadar =e air sumur

Cara ker&a, . Pen'am"ilan sam$el a. Sampel kimia,i "emasukkan air ke dalam bak penampung sampai penuh,kemudian masukkan jerigen secara pelan-pelan ke dalam bak penampung air dan isi sampai penuh dan jangan sampai terjadi aerasi. "engangkat jerigen dan tutup dengan rapat "emberi label, !ang berisikan ) ?o sample Lokasi sampling Gaktu sampling Denis pemeriksaan

(. Pemeriksaan kimia -Fe. a. "engambil & ml sampel menggunakan pipet ukur dari erlenme!er. b. "emasukkan sampel ke dalam tabung komparator. c. "enambahkan & tetes laruran =e ke dalam tabung berisi sampel. d. "enunggu selama + menit. e. Lalu memeriksan!a ke dalam komparator.
8

*. Pemeriksaan +isik -s)%). a. "en!elupkan termometer pada jerigen. b. "enunggu sekitar $' menit. c. ;emudian membaca suhu !ang tertera pada termometer. d. "encatat hasil. Hasil $emeriksaan 3ari cara kerja di atas didapatkan hasil bah,a kadar =e air sumur di Blun!ahrejo sama dengan nol. Sedangkan suhu pada air sumur tersebut adalah -'H#. Pem"a%asan 3alam praktikum ini digunakan sampel !aitu air sumur dusun Blun!ah >B '% >G '2 Begalrejo Sleman, air sumur diambil menggunakan jirigen tanpa terjadi aerasi. Iang kemudian dilakukan pemeriksaan dengan metode colorimetri. ;andungan besi dalam air berbaha!a bagi kesehatan. Dika /at tersebut berada dalam air maka dapat men!ebabkan rasa tidak enak dan noda. ;elebihan /at besi (=e) bisa men!ebabkan keracunan dimana terjadi muntah, kerusakan usus, penuaan dini hingga kematian mendadak, mudah marah, radang sendi, cacat lahir, gusi berdarah, kanker, cardiom!opathies , sirosis ginjal, sembelit, diabetes, diare, pusing, mudah lelah, kulit kehitam hitaman, sakit kepala, dan gagal hati. "enurut *eraturan "enteri ;esehatan >9 ?o. -$25"en;es5 *er59A5$%%' tentang s!arat-s!arat Air Bersih, ;eputusan "enteri ;esehatan >9 ?o.%'75"@?;@S5S;5J995&''& tentang s!arat-s!arat dan penga,asan kualitas Air "inum, maka kadar maksimum !ang diperbolehkan untuk =e adalah ',+ mg5L . Setelah dilakukan pemeriksaan didapatkan kadar =e air sumur di dusun Blun!ahrejo adalah nol, dikarenakan setelah dilakukan pemeriksaan menggunakan =e test kit ,arna air sumur tidak berubah. Sehingga dapat disimpulkan bah,a kualitas air sumur tersebut masih diba,ah kadar maksimum diperbolehkan. BAB 999 ;@S9"*ULA?

$. 3ari hasil pemeriksaan mikrobilogi (@.#oli) didapatkan hasil &5$''ml,sehingga dapat disimpulkan bah,a sampel air sumur tidak memenuhi pers!aratan seperti !ang tertera dalam *ermenkes5-$25"enkes5*@>59A5$%%' !aitu '5$''ml. &. Berdasarkan pers!aratan kualitas air minum !ang dibuat oleh *ermenkes

?o.-$25"@?;@S5*@>59A5$%%', kadar besi maksimum !ang diperbolehkan sebesar $.' mg5l. Besi dapat larut pada p: rendah dan dapat men!ebabkan air !ang ber,arna kekuningan. 3alam pemeriksaan ini didapatkan kadar =e sama dengan nol. Dadi, dapat disimpulkan bah,a air sumur di desa tersebut tidak melabihi kadar maksimum !ang diperbolehkan. +. Berdasarkan hasil pemeriksaan didapatkan suhu air sumur di dusun Blun!ahrejo adalah -'H#.

DAF/AR PUS/AKA

10

"achmud, ". &''(. Beknik *en!impanan dan *emeliharaan "ikroba. %!!$,00kimia+armasi.1or#$ress.com0(2 20 20 30$ers4ara!an5air5"ersi%5secara5 +isikkimia#an5mikro"iolo'i0

11

LA"*9>A? FA"BA>

gambar.$

gambar.&

Fambar. +

gambar. -

12

Fambar. .

gambar.2

Fambar. 7

gambar. (

Fambar. %

gambar. $'

13

Fambar.$$

gambar. $&

Fambar. $+

gambar. $-

14

Fambar. $.

gambar. $2

Fambar. $7

gambar. $(

15

Fambar. $%

gambar. &'

Fambar.

KE/ERAN6AN
Fambar $ Fambar & Fambar + Fambar Fambar . Fambar 2 Fambar 7 Fambar ( Fambar % Fambar $' Fambar $$ Fambar $& Fambar $+ Fambar $Fambar $. ) *engambilan sampel bakteriologis ) *engambilan sampel bakteriologis ) *engambilan sampel bakteriologis ) *engambilan sampel bakteriologis ) *engambilan sampel bakteriologis ) *engambilan sampel bakteriologis ) sumur ,arga desa blun!ah rejo ) Sampel bakteriologis ) *emeriksaan suhu ) Sampel kimia ) fe test kit ) fe test kit ) air sample untuk fe ) cara kerja fe test kit ) cara kerja fe test kit
16

Fambar $2 Fambar $7 Fambar $( Fambar $% Fambar &' Fambar &$

) cara kerja fe test kit ) hasil fe ) *enanaman sampel ke media LB Triple dan LB Single ) *enanaman sampel ke media LB Triple dan LB Single ) *emeriksaan e.coli ) :asil *emeriksaan e.coli

*eraturan "enteri ;esehatan >.9 ?o ) -$25"@?;@S5*@>59A5$%%' Banggal ) + September $%%'

3A=BA> *@>SIA>ABA? ;UAL9BAS A9> "9?U"

17

18

19

20

;eterangan ) mg L Bg K miligram ml K milliliter K Liter K Beguerel

?BU K ?epnelometrik Burbidit! Units B#U K Brue #olour Units

Logam berat merupakan logam terlarut

21

3itetapkan di ) Dakarta *ada tanggal ) $+ September $%%'

ttd

"enteri ;esehatan >epublik 9ndonesia, 3r. Adh!atma, "*:

3A=BA> *@>SIA>ABA? ;UAL9BAS A9> B@>S9:

22

23

24

3itetapkan di ) Dakarta *ada tanggal ) $+ September $%%'

ttd

"enteri ;esehatan >epublik 9ndonesia, 3r. Adh!atma, "*:

25

3A=BA> *@>SIA>ABA? ;UAL9BAS A9> ;CLA" >@?A?F

26

#atatan ) Sumber air kolam renang adalah air bersih !ang memenuhi pers!aratan sesuai Surat ;eputusan "enteri ;esehatan ini

3itetapkan di ) Dakarta *ada tanggal ) $+ September $%%'

ttd

"enteri ;esehatan >epublik 9ndonesia, 3r. Adh!atma, "*:

27

3A=BA> *@>SIA>ABA? ;UAL9BAS A9> *@"A?39A? U"U"

3itetapkan di ) Dakarta *ada tanggal ) $+ September $%%'

28

ttd

"enteri ;esehatan >epublik 9ndonesia, 3r. Adh!atma, "*:

29