LAPORAN RESMI PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK PERCOBAAN I PENETAPAN KADAR KREATININ

Hari/ Tanggal Percobaan : Selasa/ 02 Maret 2010 Golongan/ Kelas : I/ FKK 2008 Dosen Jaga : Dr. Edy Meiyanto, M.Si, Apt Asisten Jaga : Mbak Putri dan Mbak Fitria
Nama Anggota : 1. Nanda Huda Ardianto 2. Falita 3. Niken Feladita 4. Dian Tyas Ariestya 5. Vera Irine Riseno 6. Fenny Christine. H 7. Fadhilla Dini Ishmatika 8. Anastasia Putri Rahayu 9. Fadhliyani Nst 10. Meyfhanuranie Yolanda. P 11. Intan Anatasia 12. Annisa Nadya Utami 13. Yanita Harliana Atharini 14. Anis Puji Lestari 15. M. Zaki bin Illias 16. Husna Zainal (FA/ 08017) (FA/ 08018) (FA/ 08023) (FA/ 08028) (FA/ 08029) (FA/ 08034) (FA/ 08037) (FA/ 08038) (FA/ 08041) (FA/ 08043) (FA/ 08045) (FA/ 08046) (FA/ 08048) (FA/ 08055) (FA/ 08216) (FA/ 08217)

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK

Hari/Tanggal Praktikum : Selasa, 02 Maret 2010 Golongan : I
I. Tujuan Percobaan Agar mahasiswa mampu menetapkan kadar kreatinin dalam sampel plasma dan urin dengan metode Jaffe tanpa deproteinisasi. II. Prinsip Dasar Percobaan Metode Jaffe merupakan salah satu metode kolorimetri. Metode ini pertama kali diperkenalkan pada tahun 1886. Prinsip reaksi Jaffe adalah reaksi antara kreatinin dengan pikrat dalam suasana basa, membentuk kompleks kreatinin pikrat berwarna jingga dan diukur menggunakan spektrofotometer visibel pada 492 nm. Reaksi:
O2 N

ON+ O-

Asam pikrat

Kreatinin
NO2

CH CO

N NH C NH

Kreatinin pikrat

III. Metode Sistematis A. Alat dan Bahan Alat: Bahan -

Tabung reaksi Labu takar 50 mL Beaker glass Mikropipet Blue dan yellow tip Spektrofotometer visible Kuvet Pipet tetes Tissue Jarum suntik

Aquadest 50 L Sampel plasma dan urin 50 L Baku kreatinin 50 L Larutan Buffer (NaOH dan Na2HPO4) Larutan asam pikrat 250 L Alkohol kapas

B. Cara kerja - Kadar Kreatinin dalam Plasma Sampel 50 L Blangko Standart 50 L + Reagen 1 (Buffer) Campur, inkubasi 5 menit pada suhu kamar + Reagen 2 (asam pikrat) Campurkan, baca absorbansi 1 menit pertama (A1) Baca absorbansi 2 menit kemudian (A2)

- Kadar Kreatinin dalam Urin Sampel 50 L Blangko Standart 50 L + Reagen 1 (Buffer) Campur, inkubasi 5 menit pada suhu kamar + Reagen 2 (asam pikrat) Campurkan, baca absorbansi 1 menit pertama (A1) Baca absorbansi 2 menit kemudian (A2) -Perhitungan Leukosit 4 mL darah EDTA + pereaksi Hayem 4 ml Tunggu 15 menit Hitung jumlah leukosit menggunakan hemositometer di mikroskop - Perhitungan Eritrosit 2 mL darah EDTA + Amonium Oxalat 1% 2 ml Tunggu 2 3 menit

Hitung jumlah eritrosit menggunakan hemositometer di mikroskop

- Perhitungan Trombosit 0,5 mL darah EDTA + Amonium Oxalat 1% 2 ml Tunggu 3-5 menit Hitung jumlah trombosit menggunakan hemositometer di mikroskop

IV. Hasil Percobaan DATA PERCOBAAN Data Absorbansi Baku Menit ke-1: 0,02 Menit ke-3: 0,03 1. Kadar Kreatinin dalam Urine Kelompok Data Urine Absorbansi

1. 2. 3. 4. 5. Rumus perhitungan:

Sampel 1 Sampel 2 Sampel 3 Sampel 4 Sampel 5

0,275 0,018 0,202 0,052 0,141

0,321 0,072 0,280 0,148 0,161

Konsentrasi Kreatinin =

A2 (sampel) - A1 (sampel) A2 (baku) A1 (baku)

Kadar Sampel 1 Konsentrasi kreatinin = 0,321 0,275 x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = 0,046 x 2 mg / 100 mL 0,01 = 9,2 mg / 100 mL = 9,2 mg/ dL Kadar Sampel 2 Konsentrasi kreatinin = 0,072 0,018 x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = 0,054 x 2 mg / 100 mL 0,01 = 10,8 mg / 100 mL = 10,8 mg/ dL

Kadar Sampel 3 Konsentrasi kreatinin = 0,280 0,202 x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = 0,078 x 2 mg / 100 mL 0,01 = 15,6 mg / 100 mL = 15,6 mg/ dL Kadar Sampel 4 Konsentrasi kreatinin = 0,148 0,052 x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = 0,096 x 2 mg / 100 mL 0,01 = 19,2 mg / 100 mL = 19,2 mg/ dL Kadar Sampel 5 Konsentrasi kreatinin = 0,161 0,141 x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = 0,02 x 2 mg / 100 mL 0,01 = 4 mg / 100 mL = 4 mg/ dL

Rata-rata konsentrasi kreatinin = 9,2 + 10,8 + 15,6 + 19,2 + 4 = 11,76 mg/dL 5 SD (dengan kalkulator) = 5,870 SE = SD = 5,870 = 2,625 N 5 LE = t x SE = 2,57 x 2,625 = 6,746 Rentang Kadar = x LE = 11,76 6,746 x 11,76 + 6,746 = 5,014 x 18,506 CV = SD x 100% x = 5,870 x 100% 11,76 = 49,915 %

2.

Kadar Kreatinin dalam Darah Kelompok Data Plasma Absorbansi

1. 2. 3. 4. 5. Rumus perhitungan:

Sampel 1 Sampel 2 Sampel 3 Sampel 4 Sampel 5

0,019 0,011 -0,049 0,066

0,022 0,015 -0,029 0,076

Konsentrasi Kreatinin =
Kadar Sampel 1

A2 (sampel) - A1 (sampel) A2 (baku) A1 (baku)

Konsentrasi kreatinin = 0,022 0,019 x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = 3 x 10-3 x 2 mg / 100 mL 0,01 = 0,6 mg / 100 mL = 0,6 mg/ dL Kadar Sampel 3 Konsentrasi kreatinin = 0,015 0,011 x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = 0,004 x 2 mg / 100 mL 0,01 = 0,8 mg / 100 mL = 0,8 mg/ dL Kadar Sampel 4 Konsentrasi kreatinin = -0,049 (-0,029) x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = -0.02 x 2 mg / 100 mL (dianggap positif) 0,01 = 4 mg / 100 mL = 4 mg/ dL

Kadar Sampel 5 Konsentrasi kreatinin = 0,076 0,066 x 2 mg / 100 mL 0,03 0,02 = 0,01 x 2 mg / 100 mL 0,01 = 2 mg / 100 mL = 2 mg/ dL

Rata-rata konsentrasi kreatinin = 0,6 + 0,8 + 4 + 2 = 1,85 mg/dL 4 SD (dengan kalkulator) = 1,561 SE = SD = 1,561 = 0,781 N 4 LE = t x SE = 2,78 x 0,781 = 2,171 Rentang Kadar = x LE = 1,85 2,171 x 1,85 + 2,171 = -0,321 x 4,021 CV = SD x 100% x = 1,561 x 100% 1,85 = 84,37 %

DATA PENGAMATAN SEL DARAH 1. Eritrosit a. Bentuk

b. Pengamatan

2. Leukosit

3. Trombosit

Jenis Sel Darah Leukosit Eritrosit Trombosit

Volume Darah (mL) 20 L 20 L 20 L

Volume Pereaksi 0,5 mL Turk 4,0 mL Hayem 2,0 mL Ammonium Oksalat 0,1%

Pengenceran (kali) 26 200 101

Volume Kotak 0,4 0,02 0,04

Jumlah

150 600 79

9750 6000000 199475

Perhitungan: 1. Leukosit Pengenceran

Jumlah leukosit

Normal Hasil percobaan 2. Eritrosit Pengenceran

= Vol. Pereaksi + 0,02 0,02 = 0,5 + 0,02 0,02 = 26 = 1 x Pengenceran x N Vol.kotak = 1 x 26 x 150 0,4 = 9750 : 5000-10.000 sel/mm3 : 9750 normal

= Vol. Pereaksi + 0,02 0,02 = 4 + 0,02 0,02 = 201 = 1 x Pengenceran x N Vol.kotak = 1 x 201 x 600 0,02 = 6.030.000 : 4,1-5 sel/mm3 : 6.030.000 diatas normal

Jumlah leukosit

Normal Hasil percobaan

3. Trombosit Pengenceran

= Vol. Pereaksi + 0,02 0,02 = 2 + 0,02 0,02 = 101 = 1 x Pengenceran x N Vol.kotak = 1 x 101 x 79 0,04 = 199475 : 150.000 400.000 sel/mm3 : 199.475 normal

Jumlah leukosit

Normal Hasil percobaan