1 Doddi Yudhabuntara 2 Pendahuuan Pengendalian mikroorganisme dalam bahan makanan asal hewan perlu dilakukan apabila kita menginginkan bahan makanan tersebut tidak cepat rusak atau cepat menjadi busuk, melainkan menjadi tahan lama. Kerusakan bahan makanan yang disebabkan oleh mikroorganisme terjadi karena mikroorganisme tersebut berkembangbiak dan bermetabolisme sedemikian rupa sehingga bahan makanan mengalami perubahan yang menyebabkan kegunaannya sebagai bahan pangan menjadi terganggu. Proses kerusakan ini dimungkinkan karena bahan makanan memiliki persyaratan untuk pertumbuhan mikroorganisme. Dengan demikian, kerusakan bahan makanan dapat terjadi apabila tersedia substrat (yaitu bahan makanan tsb.) yang cocok, kemudian bahan makanan itu telah tercemar oleh mikroorganisme dan ada kesempatan bagi mikroroganisme untuk berkembangbiak. Usaha pengendalian mikroorganisme dapat dilaksanakan apabila faktorfaktor yang mempengaruhi pertumbuhan atau perkembangbiakan mikroorganisme telah diketahui sebelumnya. !aktorfaktor yang mempengaruhi tersebut umumnya dibagi ke dalam lima bahasan yaitu a) waktu generasi" b) faktor intrinsik" c) faktor ekstrinsik" d) faktor proses dan e) faktor implisit. Wa!tu "enera#i #aktu generasi adalah waktu yang diperlukan oleh mikroorganisme untuk meningkatkan jumlah sel menjadi dua kali lipat jumlah semula. Kur$a pertumbuhan mikroorganisme terdiri atas empat fase yaitu fase penyesuaian (lag phase), fase eksponensial atau fase logaritmik, fase stasioner dan fase kematian. 1 Disampaikan pada Pelatihan Pengawas Kesmavet yang diselenggarakan oleh Direktorat Jenderal Bina Produksi Peternakan Departemen Pertanian di Cisarua Bogor tanggal 18 25 gustus 2!!" 2 #ta$ Bagian Kesehatan %asyarakat &eteriner 'akultas Kedokteran (ewan )*% +ogyakarta 1 Pada fase eksponensial terjadi peningkatan jumlah sel dan digunakan untuk untuk menentukan waktu generasi. %eberapa contoh waktu generasi pada suhu pertumbuhan yang optimal antara lain &' menit untuk Bacillus cereus, (' menit untuk Escherichia coli dan Salmonella, dan )' menit untuk Clostridium perfringens. $a!tor intrin#i! !aktor intrinsik meliputi p*, akti$itas air (activity of water, a w ), kemampuan mengoksidasireduksi (redoxpotential, +h), kandungan nutrien, bahan antimikroba dan struktur bahan makanan. Ukuran keasaman atau p* adalah log )' konsentrasi ion hidrogen. ,a-imnya bakteri tumbuh pada p* sekitar netral (.,/ 0 1,/) sedangkan kapang dan ragi pada p* 2,'.,/. 3kti$itas air (a w ) adalah perbandingan antara tekanan uap larutan dengan tekanan uap air sol$en murni pada temperatur yang sama ( a w 4 p5p o ). 6ni merupakan jumlah air yang tersedia untuk pertumbuhan mikrobia dalam pangan dan bukan berarti jumlah total air yang terkandung dalam bahan makanan sebab adanya adsorpsi pada konstituen tak larut dan absorpsi oleh konstituen larut (mis. gula, garam). 3ir murni mempunyai a w ),' dan
bahan makanan yang sepenuhnya terdehidrasi memiliki a w 4 '. %akteri 7ram negatif lebih sensitif terhadap penurunan a w dibandingkan bakteri lain. %atas a w minimum untuk multiplikasi sebagian besar bakteri adalah ',8'. Escherichia coli membutuhkan a w minimum sebesar ',8., sedangkan Penicillium ',9). :eskipun demikian a w minimum untuk Staphylococcus aureus adalah ',9/. Kemampuan mengoksidasireduksi (redoxpotential, +h) adalah perbandingan total daya mengoksidasi (menerima elektron) dengan daya mereduksi (memberi elektron). +h dalam pangan bergantung pada p*, kandungan 2 substansi yang mereduksi, tekanan partial oksigen (p;() dan kemampuan metabolisasi oksigen. Potensi +h diukur dalam mili$olts (m<). Dalam keadaan teroksidasi ukuran m< makin positif, sedangkan dalam keadaan tereduksi akan semakin negatif. %erdasarkan +h, mikroorganisme dibagi menjadi aerob, anaerob, fakultatif anaerob dan mikroaerofilik. :ikroorganisme aerob memerlukan keadaan +h positif, mikroorganisme anaerob memerlukan +h negatif, mikroorganisme fakultatif anaerob memerlukan keadaan +h positif atau negatif dan mikroorganisme mikroaerofilik memerlukan +h sedikit tereduksi. Pertumbuhan mikroorganisme memerlukan air, energi, nitrogen, $itamin dan faktor pertumbuhan, mineral. 3ir yang tersedia untuk pertumbuhan mikroorganisme ditentukan oleh a w bahan makanan. =ebagai sumber energi, mikroorganisme memanfaatkan karbohidrat, alkohol dan asam amino yang terdapat dalam bahan makanan. !aktor pertumbuhan yang diperlukan adalah asam amino, purin dan pirimidin, serta $itamin. Salmonella typhi memerlukan triptofan untuk pertumbuhannya, sedangkan Staphylococcus aureus memerlukan arginin, sistein dan fenilalanin. %eberapa unsur dalam bahan makanan mempunyai sifat antimikroba. =usu sapi mengandung laktoferin, konglutinin, liso-im, laktenin dan sistem laktoperoksidase. %ahan antimikroba dalam telur adalah liso-im, konalbumin, o$omukoid, a$idin. =istem laktoperoksidase terdiri dari laktoperoksidase, tiosianat dan peroksidase. Ketiga komponen ini diperlukan untuk efek antimikroba. =usu kambing mengandung lebih banyak liso-im dibandingkan susu sapi. :eskipun demikian kandungan liso-im susu lebih rendah bila dibandingkan dengan putih telur. ,aktoferin adalah protein penangkap !e dalam susu dan dapat disamakan dengan konalbumin putih telur. ,iso-im yang terdapat dalam telur menyebabkan lisis lapisan peptidoglikan dinding sel bakteri. Kandung liso-im dalam telur adalah &,/ >. =truktur bahan makanan yang dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme misalnya lemak karkas dan kulit pada karkas unggas dan karkas babi dapat melindungi daging dari kontaminasi mikroorganisme. Kerabang telur " yang mempunyai poripori sebesar (/2' ?m dapat mempersulit masuknya mikroorganisne ke dalam telur walau tidak dapat mencegah tetap masuknya mikroorganisme. :ikroorganisme akan ditahan oleh lapisan membran dalam yang mencegah masuknya mikroorganisme ke albumen. Daging giling atau daging yang sudah dipotong menjadi bagian lebih kecil akan lebih memberi kemudahan bagi mikroorganisme untuk berkembang biak dibandingkan dengan pada daging karkas. $a!tor e!#trin#i! !aktor ekstrinsik yang mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme adalah suhu penyimpanan dan faktor luar lainnya yang pada prinsipnya berhubungan dengan pengaruh atmosferik seperti kelembaban, tekanan gas5keberadaan gas, juga cahaya dan pengaruh sinar ultra$iolet. %erdasarkan suhu optimumnya, mikroorganisme dibagi menjadi psikrofil dengan suhu optimum kurang dari @ (' AB, mesofil (@('A s5d @ 2' AB) dan termofil (lebih dari @2' AB). Pada suhu minimum terjadi perubahan membran sel sehingga tidak terjadi transpor -at hara. =ebaliknya pada suhu maksimum terjadi denaturasi en-im, kerusakan protein dan lipida pada membran sel yang menyebabkan lisisnya mikroorganisme. :ikroorganisme patogen biasanya termasuk ke dalam kelompok mesofil. Pengaruh suhu rendah pada mesofil adalah inakti$asi dan perubahan struktur protein permease. Kapang mempunyai kisaran pertumbuhan yang lebih luas dibandingkan bakteri, sedangkan ragi mampu tubuh pada kisaran psikrofil dan mesofil. :ikroorganisme juga dapat diklasifikasikan menurut resistensinya terhadap temperatur yang tidak menguntungkan yaitu psikrotrof (tumbuh pada suhu kurang dari @ 1 AB) dan termotrof (tumbuh pada suhu lebih dari @ // AB). Kelembaban lingkungan (relative humidity, C*) penting bagi a w bahan makanan dan pertumbuhan mikroorganisme pada permukaan bahan makanan. Cuang penyimpanan yang memiliki C* rendah akan menyebabkan bahan , makanan yang tidak dikemas mengalami kekeringan pada permukaannya dan dengan demikian mengubah nilai akti$itas airnya.Produk bahan makanan yang kering ini bila dibawa ke lingkungan yang lembab (C* tinggi) akan menyerap kelembaban sehingga permukaannya dapat ditumbuhi jamur. *al yang sama akan terjadi bila bahan makanan yang telah didinginkan dibawa ke lingkungan yang lebih hangat. *al ini akan menyebabkan kondensasi air di bagian permukaannya. Proses ini penting untuk diperhatikan pada pengepakan produk yang dapat membusuk, karena biasanya ruang pengepakan lebih hangat dibandingkan dengan ruang pendingin, sehingga akan terbentuk lapisan tipis air kondensasi. *al ini akan menyebabkan peningkatan akti$itas air yang pada gilirannya dapat mempermudah pertumbuhan mikroorganisme. Penyimpanan bahan makanan di ruang terbuka meningkatkan kadar B;( sampai )' > yang dapat dicapai dengan menambahkan es kering (B;() padat. Penghambatan oleh B;( meningkat sejalan dengan menurunnya suhu karena solubilitas B;( meningkat pada suhu rendah. %akteri 7ram negatif lebih rentan terhadap B;( dibandingkan bakteri 7ram positif. Pseudomonas paling rentan sedangkan bakteri asam laktat serta bakteri anaerob paling tahan. 3danya cahaya dan sinar ultra $iolet dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme dan kerusakan toDin yang dihasilkannya, misalnya pada Aspergillus ochraceus. $a!tor %ro#e# =emua proses teknologi pengolahan bahan makanan mengubah lingkungan mikro bahan makanan tersebut. Proses tersebut dapat berupa pemanasan, pengeringan, modifikasi p*, penggaraman, curing, pengasapan, iradiasi, tekanan tinggi, pemakaian medan listrik dan pemberian bahan imbuhan pangan. 5 $a!tor i&%i#it !aktor lain yang berperan adalah faktor implisit yaitu adanya sinergisme atau antagonisme di antara mikroorganisme yang ada dalam ElingkunganF bahan makanan. Ketika mikroorganisme tumbuh pada bahan makanan dia akan bersaing untuk memperoleh ruang dan nutrien. Dengan demikian akan terjadi interaksi di antara mikroorganisme yang berbeda. 6nteraksi ini dapat saling mendukung maupun saling menghambat (terjadi sinergisme atau antagonisme). Pen"endaian &i!roor"ani#&e daa& bahan &a!anan Pengendalian mikroorganisme dalam bahan makanan pada prinsipnya bertujuan untuk membuat bahan makanan menjadi tahan lama, atau dengan perkataan lain bertujuan untuk pengawetan bahan makanan. Pengendalian mikroorganisme berarti mencegah pertumbuhan mikroorganisme yang dapat berarti membunuh atau menghambat pertumbuhan itu sendiri. %iasanya tindakan ini dilakukan dengan perlakuan fisik atau perlakuan kimia. Perlakuan fisik dapat dilakukan dengan cara perlakuan termal, perlakuan pengeringan dan perlakuan penyinaran (iradiasi). Perlakuan termal terdiri dari suhu rendah, yaitu pendinginan dan pembekuan, dan suhu tinggi5pemanasan yang dapat berupa pasteurisasi atau sterilisasi. Perlakuan pengeringan dapat dilakukan dengan cara pengeringan atau cara pengeringan beku. Perlakuan penyinaran dapat dilakukan dengan sinar ultra$iolet dan ionisasi (sinar rGntgen, sinar gamma, sinar elektron). Perlakuan kimia dapat dilakukan dengan cara penggaraman, curing, pengasaman, pengasapan dan pemberian bahan pengawet. Pera!uan ter&a =uhu merupakan faktor ekstrinsik yang penting yang mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme. Dibandingkan dengan mahluk tingkat tinggi, mikroorganisme memiliki rentang pertumbuhan yang sangat lebar (kirakira 0 )/ - s5d 8' AB). Pada suhu rendah, pertumbuhannya akan berhenti, sedangkan pada suhu tinggi organisme ini akan mati. Pada kedua situasi di atas, terkait proses terjadinya metabolisme yang menyebabkan terjadinya kerusakan bahan makanan. Karena proses en-imatik juga bergantung pada suhu, maka perlakuan dengan suhu ekstrim akan menyebabkan pengawetan hampir seluruh bahan makanan. =uhu rendah =uhu rendah tidak membunuh mikroorganisme tetapi menghambat perkembangbiakannya. Dengan demikian pertumbuhan mikroorganisme semakin berkurang seiring dengan semakin rendahnya suhu, dan akhirnya di bawah Esuhu pertumbuhan minimumF perkembangbiakannya akan berhenti. Habel ). =uhu pertumbuhan minimal beberapa mikroorganisme (=inell, )88() *enus atau spesies #uhu pertum.uhan minimum /0C1 Patogen atau potensial patogen Bacillus cereus Staphylococcus aureus S. aureus pem.entuk enteroto2in Vibrio parahaemolyticus E.coli enteropatogenik Clostridium botulinum tipe A Pseudomonas aeruginosa Salmonella sp Clostridium perfringens Clostridium botulinum tipe 3 dan .e.erapa strain tipe B dan ' Fusarium, Penicillium 1! 5 1" 1! 4 15 5 4 8 8 1! 1! 5 - 5 "65 5 418 %ikroorganisme inde2 atau indikator E. coli Klebsiella sp, Enterobacter sp. Streptococcus faecalis 8 1! 7! 7! %ikroorganisme penye.a. .usuk Bacillus subtilis Streptococcus faecium actobacillus sp Pseudomonas fluorescens 8agi 12 7! " 1 4" 412 =uhu pertumbuhan minimum yang tertera dalam Habel ) hanyalah angka perkiraan dan secara eksperimental hanya berlaku untuk beberapa strain dari spesies tertentu dan tidak dapat berlaku umum. Pada penyimpanan bahan makanan dalam suhu beku, proses pembusukan oleh mikroorganisme masih 9 dapat terjadi walau sangat diperlambat. Proses kerusakan baru dapat dihentikan pada suhu di bawah )9AB. =uhu minimal hanya berlaku bila dalam keadaan lingkungan yang optimal. 3danya perubahan sedikit saja pada nilai a w atau p* telah dapat menyebabkan peningkatan suhu pertumbuhan secara drastis. Bontohnya adalah Enterobacter aerogenes yang memiliki suhu pertumbuhan minimal sebesar / AB apabila angka akti$itas airnya optimal yaitu di atas ',81. Pada nilai a w sebesar ',8// pertumbuhannya berhenti pada suhu sekitar (' AB , dan pada a w ',8/' pertumbuhan berhenti pada suhu &' . Pada uji mikroorganisme yang sama, terjadi peningkatan suhu pertumbuhan minimal menjadi )/ AB ketika terjadi penurunan p* dari p* optimal 1 menjadi &,8. Pada beberapa mikroorganisme, suhu rendah dapat pula menyebabkan akti$itas en-imatik menjadi intensif. Pseudomonas lebih banyak menghasilkan lipase dan proteinase pada suhu di bawah suhu optimum pertumbuhannya. *al ini dapat menjelaskan hasil pengamatan yang menunjukkan bahwa perubahan akibat kerja mikroorganisme dalam bahan makanan sering terjadi walau jumlah mikroorganisme tidak melebihi jumlah yang diperbolehkan. Pada fase eksponensial, mikroorganisme sangat peka terhadap suhu rendah, khususnya Enterobacter dan Pseudomonas, sedangkan bakteri 7ram positif nampaknya lebih tahan. Pembekuan sedikit banyak membuat kerusakan mikroorganisme. Kerusakan ini dapat bersifat re$ersibel maupun menyebabkan kematian sel bakteri. Kerusakan ini bergantung pada jenis dan kecepatan proses pembekuan. Pembekuan cepat dengan suhu sangat rendah tidak atau hanya sedikit membuat kerusakan sel bakteri, sedangkan pembekuan lambat dengan suhu pembekuan relatif tinggi (s5d 0)' AB) dapat membuat kerusakan hebat pada sel bakteri. *al ini didukung pada kenyataan bahwa laju kematian bakteri meningkat dengan semakin meningkatnya suhu mendekati titik nol. Dalam suatu uji kultur diperoleh hasil bahwa setelah disimpan selama ((' hari dalam suhu 0)' AB hanya tinggal (,/ > sel bakteri yang masih hidup, sedangkan yang disimpan pada suhu 0(' AB masih ada /' > sel bakteri yang hidup. Pada suhu 02 s5d 0 )' AB angka kematian sangat tinggi. :eskipun demikian hal ini dalam prakteknya tidak dapat digunakan untuk menghilangkan mikroorganisme pada bahan 8 makanan yang dibekukan karena pada suhu ini mikroorganisme psikrofil tertentu masih dapat berkembangbiak dan juga perombakan kimiawi masih berjalan sehingga mempengaruhi kualitas bahan makanan. Pengetahuan mengenai proses ini penting karena alasan berikutI :ikroorganisme yang subletal rusak sulit ditemukan pada pemeriksaan kultur bakteriologik. =etelah bahan makanan beku ini dihangatkan dan pada kondisi yang menguntungkan, bakteri ini dapat kembali berakti$itas sehingga seperti halnya pada kasus =almonella, dapat menjadi ancaman kesehatan konsumen. ;leh karena itu, pada pemeriksaan mikrobiologik bahan makanan yang dibekukan (demikian pula pada produk yang dikeringkan atau dipanaskan), hendaknya memakai metode dan media yang cocok untuk dapat menghidupkan kembali mikroorganisme yang rusak tersebut. :a.el 2; <ilai p( dan a w se.agai petun=uk kemampuan simpan .ahan makanan /#inell6 15521 Kemampuan simpan <ilai p( dan a w #uhu penyimpanan yang di.utuhkan Dapat disimpan p( 562 dan a w !655 atau p( 56! atau a w !651 :idak diperlukan pendinginan Dapat .usuk p( 562 56! atau a w !655 !651 %a2imum 1! >C %udah mem.usuk p( 562 dan a w !655 %a2imum 5 >C =uhu tinggi Pengendalian mikroorganisme melalui perlakuan suhu tinggi pada umumnya dilakukan dengan pasteurisasi atau sterilisasi. Pasteurisasi adalah pemanasan dengan suhu di bawah )'' AB dan tidak akan menyebabkan inakti$asi mikroba dan en-im secara sempurna. Dengan demikian produk yang dipasteurisasi tidak akan bertahan lama bila tidak disertai perlakuan pendinginan atau faktor proses lainnya seperti perubahan a w dan p*. =terilisasi adalah 5 pemanasan yang dapat menyebabkan inakti$asi mikroba dan en-im sehingga produk dapat tahan lama. Pera!uan %en"erin"an Pengeringan adalah identik dengan pengurangan akti$itas air. Pada a w kurang dari ',1' pertumbuhan agen penyebab infeksi dan intoksikasi tidak perlu dikuatirkan lagi. Pada produk yang dikeringkan, mikroorganisme berada dalam keadaan EtidurF atau dengan perkataan lain berada dalam fase lag yang diperpanjang. %ila terjadi rekonstruksi (penyerapan air kembali) maka flora yang ada dalam bahan makanan dapat kembali berakti$itas. =ecara umum pengeringan dibedakan menjadi pengeringan di bawah tekanan udara dan pengeringan $akum. Proses yang khusus adalah kombinasi antara pembekuan dan penghilangan air dengan atau tanpa $akum. Pengeringan dengan udara dilakukan dalam udara yang bergerak, dalam ruang pengeringan yang dipanaskan, dll. Pera!uan %en'inaran Dosis penyinaran diukur dengan satuan 7ray (7y). Penyinaran rendah bila dosisnya adalah kurang dari ) k7y, medium bila J ))' k7y, dan tinggi bila lebih dari )' k7y. ,ingkup proses penyinaran (iradiasi) adalah untuk desinfeksi, pemanjangan shelf-life, dekontaminasi dan perbaikan kualitas produk. Keuntungan yang diperoleh adalah pengurangan seminimal mungkin bahan makanan yang hilang akibat proses pengawetan, dan penghematan energi serta keuntungan lainnya. Daging sapi yang mendapat perlakuan iradiasi akan menyebabkan pertumbuhan Psedomonas dan Enterobacteriaceae sangat terhambat tanpa menyebabkan perubahan organoleptik. Shelf life daging mentah yang dikemas $akum dapat diperpanjang. Pada daging babi, iradiasi dengan dosis antara ',& 0 ),' k7y dapat membuat inakti$asi Trichinella spiralis. Pera!uan !i&ia 1! Perlakuan yang biasa dilakukan antara lain dengan pemberian garam. Penggaraman ini bertujuan untuk menurunkan akti$itas air dan garam sendiri tidak memiliki pengaruh antimikroba secara langsung. Perlakuan yang lain adalah dengan curing, yaitu perlakuan dengan menggunakan garam dapur dan garam nitrit (natrium nitrit atau kalium nitrit). Perlakuan ini dapat menghambat pertumbuhan dan produksi toDin oleh Clostridium botulinum. +fek utamanya adalah menentukan panjangnya fase lag. !aktor yang mempengaruhi efekti$itas nitrit antara lain p*, oksigen, komponen pangan lainnya (konsentrasi garam), pemanasan dan iradiasi. Pengasapan juga merupakan salah satu cara pengendalian mikroorganisme dalam bahan makanan dengan menggunakan metode pengasapan dingin, pengasapan hangat dan pengasapan panas. Pengasaman dan penggunaan bahan pengawet juga la-im dilakukan dengan menggunakan bahanbahan yang tidak merugikan kesehatan selama diberikan dengan dosis yang tepat untuk tujuan menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Da(tar %u#ta!a PrKndl, ;., !ischer, 3.,=chmidhofer H., =inell, *.L., )899. *andbuch der ,ebensmitteltechnologie. !leischI Hechnologie und *ygiene der 7ewinnung und <erarbeitung. Ulmer, =tuttgart. Prescott, ,.:., *arley, L.P., Klein, D.3. , )888. :icrobiology. 2 th ed. #B% :c7raw *ill, %oston. =inell, *.L., )88(. +infMhrung in die ,ebensmittelhygiene.&. 3uflage. <erlag Paul Parey, %erlin, *amburg 11