Microbiology

Microbial Growth

Bacterial Growth - increase in the #

of cells
biner Fisi
Waktu Generation (Menggandakan waktu)
waktu yang dibutuhkan untuk sel untuk membagi
paling sekitar 1 Hr. Untuk 3 Jam.

E. coli - 20 menit
Mycobacterium tuberculosis - 24 Jam.

Binary Fission - unchecked

E. coli - generation time of 20 min.
20 generations (about 7 hrs.)

1 million cells
30 generations ( about 10 hrs.)

1 billion cells
72 generations ( about 24 hrs.)

1 x 1021
1,000,000,000,000,000,000,000 cells

Phases of Growth

1. Lag Phase
2. Log Phase
3. Stationary Phase
4. Death Phase

1. Lag Phase
- ada peningkatan langsung dalam jumlah sel dan massa terjadi
- Sel beradaptasi dengan faktor media baru dan
- Evtl. enzim baru dan jalur metabolik yang diinduksi
- Adaptasi suhu
- Panjang fase lag tergantung pada faktor-faktor yang berbeda:
misalnya usia kultur sel, jenis media, suhu, ada atau tidak adanya cofaktor penting atau suplemen

2. Log Phase
Pertumbuhan sel yang cepat (pertumbuhan eksponensial)
bakteri membagi dan dua kali lipat jumlah pada tingkat konstan
mikroba yang sensitif terhadap kondisi buruk
antibiotik
agen anti-mikroba-

2. Log Phase
jumlah sel N dari populasi sel dengan jumlah sel N0 (pada awal
inokulasi) dan setelah pembelahan sel n dapat dihitung dengan
menggunakan rumus berikut:
N(n) = N0 2n
Number of cell divisions n:
n = lgN - lgN0 / lg2
Division rate or mean growth rate constant k:
k = n / t = lgN - lgN0 / lg2 (t - t0)
--> number of generations per unit of time
Mean generation time or Doubling time g:
g = 1/ k

3. Stationary Phase
pertumbuhan penduduk berhenti dan kurva pertumbuhan
menjadi horisontal
Tingkat kematian = tingkat reproduksi
kepadatan populasi bakteri mencapai jumlah maksimum: biasanya 109 sel / ml
Sel-sel mulai mengalami stres lingkungan
kekurangan nutrisi, air, sumber karbon (misalnya glukosa, asam amino)
Konsumen energi produksi protein kelaparan, misalnya meningkat
silang, protein peptidoglucan DNA-melindungi (Dps), chaperons,
protein stres-respon
tidak cukup ruang
limbah metabolik
oksigen bawah
pH turun (menjadi asam)

Endospora akan membentuk sekarang

4. Death Phase
Tingkat kematian> tingkat reproduksi
Karena faktor-faktor pembatas dalam lingkungan

Kekurangan makanan, air atau nutrisi

ruang
akumulasi limbah metabolik
kekurangan oksigen
perubahan pH
suhu

penurunan jumlah sel yang layak karena untuk membangun-up

beracun produk akhir metabolisme
Sel kemampuan longgar untuk mereproduksi dan mati; beberapa
produk endospora tingkat kematian mungkin eksponensial

Microbial Growth - refers to the # of

cells, not the size of the cells
Requirements for Growth
Physical (Temperature, pH, Osmotic pressure)
Chemical (nutrient/elements, oxygen)

Physical Requirements
Temperature
psychrophiles (cold loving microbes )
range

0 C - 20 C

mesophiles (moderate temp. loving microbes)

range

thermophiles
range

20 C - 40 C

(heat loving microbes)

40 C - 100 C

pH
Kebanyakan bakteri tumbuh antara pH 6,5 - pH
7,5
Sangat sedikit dapat tumbuh di bawah pH 4.0
banyak makanan, seperti asinan kubis, acar, dan
keju yang diawetkan dari pembusukan oleh asam
yang dihasilkan selama fermentasi

Osmotic Pressure
Mikroba mendapatkan hampir semua nutrisi mereka dalam
larutan dari air sekitarnya
Tonicity
isotonic
hypertonic
hypotonic

Chemical Requirements
Macro elements (there are ten):
C, O, H, N, S, P, K, Ca, Mg and Fe,
micro- or trace-elements f(or optimum growth):
Mn, Mo, Zn, Co, Cu, Ni, V, B, Cl, Na, Se, Si and W,

Oxygen
Bacteria can be classified base on their oxygen requirements

Obligate
Aerobes,

Obligate
Anaerobes,

Facultative
Anaerobes,

Microaerophilic,

Oxygen is lethal to some organisms

Semua organisme menghasilkan superoksida (O2)
Superoksida merupakan racun bagi sel-sel (mencuri
elektron)
Superoksida harus dinetralisirSuperoxide dismutase:
O2- + O2- + 2 H+ -------> H2O2 + O2
Catalase
2 H2O2 --------> 2 H2O + O2

Wajib Anaerob kekurangan:

Superoksida dismutase (SOD)
katalase

Growth Media
Media sintetik: solusi yang terdiri dari jumlah yang ditetapkan
ingrediences kimia dan senyawa
- Media minimum adalah solusi yang mengandung cukup bahan kimia dan
senyawa untuk memungkinkan pertumbuhan yang baik dari
mikroorganisme tertentu
Kompleks Media: larutan nutrisi yang mengandung sejumlah didefinisikan
ekstrak kimia tidak didefinisikan, misalnya ekstrak dari ragi, pepton,
tryptone atau daging -? mereka sering pilihan atau satu-satunya pilihan
jika kondisi pertumbuhan yang tepat dan persyaratan mikroorganisme
tertentu yang tidak diketahui? - Umumnya menggunakan media kompleks
dalam mikrobiologi adalah :?
1. Tryptic kaldu kedelai?
2. Gizi kaldu?
3. Peptone ekstrak ragi kaldu?
4. Luria Bertani (LB) kaldu?
5. MacConkey

Selective Media
Menghambat pertumbuhan beberapa bakteri saat
memilih untuk pertumbuhan lain
contoh:
Brilliant Hijau Agar
pewarna menghambat pertumbuhan bakteri Gram (+)
memilih untuk Gram (-) bakteri
Kebanyakan G.I. Infeksi saluran disebabkan oleh Gram (-) bakteri

Selective Media
EMB (Eosin Methylene Blue)
dyes inhibit Gram (+) bacteria
selects for Gram (-) bacteria
G.I. Tract infections caused by Gram (-) bacteria

Differential Media
Membedakan antara organisme yang berbeda yang tumbuh di
piring sama
contoh:
Pelat Agar darah (TSA dengan darah domba 5%)
digunakan untuk membedakan berbagai jenis Streptococcus

Beta Hemolytic
Streptococci

Selective and Differential Media

Manitol Salt Agar

digunakan untuk mengidentifikasi Staphylococcus aureus

Pekat garam tinggi. (7,5%) menghambat kebanyakan bakteri
Mengandung gula manitol
Indikator pH (Ternyata Kuning ketika asam)

MacConkey Agar di

digunakan untuk mengidentifikasi Salmonella

Garam empedu dan kristal violet (menghambat () bakteri Gram +)
mengandung laktosa
Indikator pH

Thank you!

Culture Media
1. kimia Ditetapkan
komposisi kimia yang tepat diketahui
digunakan untuk tumbuh organisme yang rewel

2. Media Complex
Komposisi kimia yang tepat tidak diketahui
sebagian besar bakteri dan jamur yang tumbuh dengan ini

Special Culture Techniques

1. Anaerobic Bacteria

a. Reducing Media
b. Anaerobic Container
c. Agar Stab
d. Agar Shake

Special Culture Techniques

2. Microaerophilic Bacteria
grow best under reduced O2 levels and increased CO2 levels
Normal Atmosphere

21 % O2, 0.3 to 0.03 % CO2

Microaerophilic Bacteria

A. Candle Jar

16 % O2
4%

CO2

Microaerophilic Bacteria
B. CO2 Generating Packet

Enumeration of Bacteria
Turbid culture - 10 million bacterial cells per ml
Serial Dilution

 1. Petroff-Hauser Counting Chamber

2.