IMUNOHEMATOLOGI

Y.NINING SRIWURYANINGSIH
Fak Kedokteran UKDW
Jogya

IMMUNOHEMATOLOGI

Mengacu pada reaksi imunologi yang melibatkan

komponen-komponen darah.
Mewakili cabang ilmu Patologi Kliniik :
transfusi darah dan komponennya
patogenesis, diagnosis, pencegahan dan managemen
imunisasi (sensitization) yang berhubungan dengan
kehamilan.
pemeriksaan lekosit untuk transplantasi organ.
pemecahan laboratorium masalah asal-usul ORTU

IMUNOHEMATOLOGI
Cabang Ilmu Patologi Klinik yg mempelajari
penggunaan teknik imunologik untuk
mendeteksi kelainan-kelainan hematologik, al:
1. Reaksi transfusi hemolitik
2. Reaksi hemolitik pd bayi yang baru lahir
(HDN=Hemolytic Disease of the Newborn)
3. Reaksi hemolitik pd AIHA
(Auto Immun Hemolytic Anemia)
3

IMUNOHEMATOLOGI
KLINIS PENTING:

PENYESUAIAN DONOR DAN RESIPIEN

TRANSFUSI DARAH,TRANSPLANTASI

IDENTIFIKASI DAN PENCEGAHAN ALLO

IMUNISASI
WANITA HAMIL OLEH ANTI
GEN RHESUS,

Dx, MERAMALKAN PROGNOSE DAN MENEN

TUKAN TX HDN/AKIBAT ALLOANTIBODI

Dx DAN PEMERIKSAAN DESTRUKSI ERIT
OLEH AUTO/ALOANTIBODI

PRINSIP
IMMUNOHEMATOLOGI
ANTIGEN ERITROSIT :
MAMPU MERANGSANG PEMBENTUKAN ALOANTIBODI
SPESIFIK
ANTIGEN GOLONGAN DARAH

TERDAPAT DIPERMUKAAN ERITROSIT, ADA YG

DIPERMUKAN LEKOSIT , TROMBOSIT, DAN DIBERBAGAI
JARINGAN MAUPUN CAIRAN TUBUH.

STABIL SEUMUR HIDUP,PADA BEBERAPA KEADAAN

ANTIGEN DAPAT BERUBAH
BEBERAPA
SPESIFISITAS TIDAK TERBENTUK SEMPURNA / BERUBAH
KARENA PENYAKIT
ERITROSIT MENDAPAT
ANTIGEN SEMU

 Pemeriksaan laboratorium yg sering

dilakukan untuk kepentingan klinis adalah :
1. Deteksi Antigen (Ag) gol darah
ABO & Rhesus (Rh)
2. Tes pretransfusi : Cross matching test
reaksi silang Mayor & Minor
3. Deteksi antibodi (Ab) Coombs test
(Test Anti Globulin)

ANTIGEN DAN ANTIBODI

ERITROSIT

Antigen pada sistem ABO :

Mempunyai dua ciri khas :
1) Umumnya timbul reaksi yang kuat aglutinasi
dalam serum
(A mempunyai agglutinin B atau anti-B,
dimana B mempunyai aglutinin A atau anti-A,
dst)
2) ABH antigen timbul secara reguler pada
jaringan sel dan substansi ABH pada sekresi dari
kelenjar.

RESPON IMUNOLOGIK DAN ANTIBODI

SESEORANG DAPAT MENUNJUKKAN RESPON THD

STIMULI 3 JENIS ANTIGEN :HETEROLOG , ISOLOG
DAN AUTOLOG
RESPON IMUN PRIMER:
TERPAPAR ANTIGEN I
SEL IMUN PROLIEFRASI
& DIFFERENSIASI
MEMORY SEL.
RESPON IMUN PRIMER
IgM,SEBENTAR.
PAPARAN KEDUA
IgG, CEPAT,TITER
TINGGI.
NON RESPONDER
TIDAK ADA RESPON
TERHADAP STIMULI ANTIGEN
30%
WANITA TIDAK MEMBENTUK ANTI -D MESKI TERJADI
IMMUNISASI DENGAN JANIN RH-POS.

ANTIBODY

IMMUNE ANTIBODIES : PEMBENTUKAN ALO

/ISOANTIBODI ERITROSIT SPESIFIK BILA
KEMASUKKAN ERIT YANG MEMPUNYAI ANTIGEN
YANG BERBEDA
TRANSFUSI,TRANSFUSI
FETO MATERNAL .
IMMUNE ANTIBODIES : BIASANYA TERDIRI DARI IgG
BIASANYA TIDAK LANGSUNG MENGHANCURKAN
ERITROSIT
MELAPISI ERITROSIT ATAU
DESTRUKSI INTRAVASKULER DENGAN BANTUAN
KOMPLEMEN
BERUPA IgG

ANTIBODY

REAKSI ANAMNETIS:PEMBENTUKAN ANTIBODI

LEBIH CEPAT,TITER LEBIH TINGGI
Rx
TRANSFUSI HEMOLITIK ( ANTI RHESUS, ANTI -E,
ANTI-C DAN GOLONGAN DARAH Kidd)
BERUPA IgM

NATURAL ANTIBODY : ANTIBODI YG

DIBENTUK SECARA ALAMIAH (ANTI-A DAN ANTIB,ANTI-A1,ANTI-P,ANTI LEWIS) .

KOMPLEMEN
KOMPLEMEN

FAKTOR YG MENYEBABKAN LISIS ERITROSIT.

DALAM KEADAAN NORMAL
INAKTIF.

AKTIFASI KOMPLEMEN MELALUI JALUR KLASIK

KALAU ADA INTERAKSI ANTIGEN - ANTIBODI

PERAN KOMPLEMEN SISTEM GOL.DARAH; HEMOLISIS
INVIVO
ALLO/AUTOANTIBODI MENGAKTIFASI
KOMPLEMEN DIPERMUKAAN ERITROSIT
LISIS.

ABO antigen pada umumnya

Penting dalm praktek : A1, A2, (lebih lemah dari

A) dan B
Adakalanya terlihat : A3, Am,, Ax, B3, dan Oh
Sel O : tidak mempunyai antigen dalam ABO
mempengaruhi antigen H, dimana timbul
secara luas di sel darah merah, dengan
mengabaikan grup ABO.
Antigen A dan B dapat dideteksi dalam sel
darah merah di fetus yang masih sangat muda,
keadaan yang sama pada H antigen.

ANTIGEN ERITROSIT

ANTIGEN ERIT GOL A,B MAUPUN O

MENGANDUNG ANTIGEN H

ERITROSIT BAMBAY/OH, ERIT. TDK MEMILIKI

ANTI - A,B MAUPUN ANTI-O TETAPI
SERUMNYA MEMPUNYAI ANTI- A,B MAUPUN
ANTI - H YANG KUAT.

ANTIBODI

ANTI - A DAN ANTI- B DAPAT DIJUMPAI PADA

NEONATUS.

KADARNYA MENINGKAT MAKSIMUM UMUR

5-10 THN KMD TURUN.

ANTI-A DAN ANTI B DAPAT BERUPA

ANTIBODI ALAMIAH ATAU Rx IMUNITY
AUTOANTIBODI

ANTIBODI SEBAG.BESAR ALAMIAH:IgM

AGLUTINASI LANGSUNG (+ AB SPESIFIK)
HEMOLISIS INTRAVASC

Golongan darah

Tipe gol drh ditentukan oleh ekspresi antigen di

permukaan eritrosit (Antigen A, B, H)
Ditemukan I x oleh Landsteiner th 1900
(Golongan A, B, O)
Golongan AB ditemukan oleh
Von Decastello & Sturli (1902)
Identifikasi gol drh ditentukan dg melihat reaksi
aglutinasi antara Ag & Ab

ABO grouping of erythrocyte

Cell against
serum with

Serum against
cells of group

Anti-A AntiB
-

+
-

+
-

A
B
AB

+
+

+
+

Interpretasi

Golongan A

Golongan B
Y
Y

Y
A

H
H

A
Y
Y

Anti B

Antigen/aglutinogen A
Antigen/aglutinogen B

Anti A

Anti/aglutinin A
Anti/aglutinin B

Golongan AB

Golongan O
Y

AB

Anti B

Antigen/aglutinogen A
Antigen/aglutinogen B

Anti/aglutinin A
Anti/aglutinin B

Anti A

Substansi H

Constantoulakis menemukan substansi H pd sel

fetus dari semua golongan ABO (ada sejak lahir)
Substansi H berguna untuk pembentukan antigen
A, B dan H pd eritrosit
Pembentukan Ag A, B dan H tsb ditentukan oleh
interaksi gen ABO dan Hh
Substansi H merup struktur dasar Ag A & B
Bila tdp gen H pd prekursor substance mk akan
diubah mjd substansi H

Substansi H

Shg seseorang dg gol A akan memp Ag A & H

Gol B : memp Ag B & H
Gen O, tak ada produk yg dpt dideteksi pd sel
Gol O, tak ada substansi H yg diubah,
hanya ditemukan substansi H saja
Substansi H pada gol A & B < gol O
Pd subgrup A, tak banyak substansi H yg diubah
mjd Ag A
bila reaksi thd Ag A menurun pd subgrup
A yg lemah mk reaksi dg H mjd meningkat

Golongan
darah

Genotipe

Gen

AA
atau
AO

Homozygot

Imunologi
Memp Ag A & H
Memp Anti B

Heterozygot

BB
Atau
BO

Homozygot

Memp Ag B & H
Memp Anti A

Heterozygot

AB

AB

Heterozygot

Memp Ag A, Ag B, Ag H
Tidak punya anti

OO

Homozygot

Memp Ag H
Tdk punya Ag A & B
Memp Anti A
Memp Anti B

Bombay

hh

Homozygot

Tdk memp Ag H, A & B

Memp anti A, anti B, &
anti H

Phenotype A dpt dibagi menjadi sub group :

Sub grup dlm sistem ABO :
80 % group A : ph A1
20 % group A : ph A2

A1 & A2
Kualitatif dan
Kuantitatif berbeda

A2 : bereaksi lemah, kdg2 terdeteksi sbg Gol O

A2B : bereaksi lemah, kdg2 terdeteksi sbg Gol B
Antigen (Ag) yg termasuk sistem gol AB terdapat dlm :
- eritrosit, endotel & epitel
- cairan tubuh (mis : saliva) : glikoprotein

Suami istri homozygot

Suami

Istri
B

AB

AB

AB

AB

Anak
Semua
Gol AB
100%

Suami heterozygot A
Istri homozygot B
Suami

Istri
B

AB

BO

AB

BO

Anak
Bisa B
a/ AB
Prob.
50:50

Suami istri heterozygot

Suami

Anak

Istri
B

AB

BO

AO

OO

Bisa A,
B, O, AB
Prob ms
25%

Suami homozygot A
Istri heterozygot B
Suami A
A
Anak
Istri
B

AB

AB

AO

AO

Bisa A
a/ AB
Prob.
50:50

Suami heterozygot A
Istri heterozygot A
Suami
Istri
A
O

A
AA
AO

Anak

A 75%
O 25%

Suami homozygot O
Istri homozygot O
Suami
Istri
O
O

O
OO
OO

Anak

100%
O

BO

BO

BO

BO

Anak

100%
B

Suami heterozygot AB
Istri homozygot O
Suami A
B
Anak
Istri
O

OO
OO

Suami
Istri
O

AO
OO

Suami homozygot B
Istri homozygot O

AO
AO

BO
BO

50% A
50% B

Golongan darah Bombay

Pertama kali ditemukan oleh Bhense di Bombay

(1952)
Jarang ditemukan >> 99,(% individu:HH atau Hh
Darah Bombay adalah homozygot hh
Dicurigai adanya darah yg tidak diaglutinasi oleh
anti-A, anti-B, anti-AB dan anti-H
Dituliskan sebagai golongan darah Oh untuk
menunjukkan tidak adanya substansi H
Memp Anti-A, anti-B, & anti-H

Seorang yang tidak mengekspresikan gen H

(disbt juga genotype-nya hh)

memp phenotype
Bombay (Oh)

tidak memproduksi substrat H

gen A & B juga tdk bisa diekspresikan shg juga

tidak mampu memproduksi Ag A dan Ag B

Perbedaan gol drh Oh dan O biasa

Gol

Anti
A

Anti
B

Anti
AB

Anti H

Sel
A1

Sel
A2

Sel B

Sel O

Oh/
Bombay

Golongan BOMBAY
Y

Y
h

BOMBAY

Anti B

Anti A

Anti/aglutinin H

Pentingnya Penggolongan
Darah
Transfusi

Masalah Orangtua

Aglutinasi eritrosit oleh adanya reaksi

antigen-antibodi ada 2 tahap :

1. Tahap Sensitisasi
2. Tahap Hemaglutinasi
Lisis eritrosit terjadi bila seluruh rangkaian sistem komplemen
teraktifkan menyertai interaksi Ag-Ab
Aglutinasi terjadi bila Ab yg terikat menghubungkan eritrositeritrosit yg berdekatan membentuk gumpalan

Reaksi aglutinasi
Golongan B
Anti-B

Anti A

Anti-B

Anti-B
Hemaglutinasi
= reaksi positiff

Anti-B

Reaksi aglutinasi
Anti-A

Golongan O
Anti A

Anti A

O
-

Anti B

Anti A

Anti B

Anti B

Anti-B

+
Anti-A

Anti-B

Anti-AB

Tdk tjd hemaglutinasi

= reaksi negatif

PENGUJIAN GOLONGAN
DARAH

SALAH PENGGOLONGAN ;A2B BEREAKSI

LEMAH DENGAN A1
GOL B.

HYPOGAMAGLOBULINEMIA

LEUKEMIA;ANTIGEN LEKOSIT
TERTEKAN,ANEMIA REFRAKTER ANTIGEN A1
DAN H TERTEKAN.

OBAT-OBAT INTRAVENA.

LANGKAH MENGATASI
PENYIMPANGAN

ULANG PENETAPAN GOL DARAH

PERHATIKAN UMUR, PENYAKIT,TRANSFUSI

ATAU OBAT2 YG PERNAH DIMINUM

PE + AN GARAM FISIOLOGIS
MENCEGAH ROULEAUX

PERIKSA DGN BERBAGAI ANTI-A DAN ANTI

B, SALIVA

The Rh System
Kedua terpenting dalam transfusi darah
Antibodi Rh sekarang disebut anti-Rho
atau anti-D, timbul kira-kira 85% dari
populasi.
RhD merupakan Rh antigen yang paling
penting karena mempunyai imunogenitas
yang tinggi, hal ini karena kemampuan dari
anti-D untuk menyebabkan HDN berat dan
hemolytic transfusion reaction

GOL.DARAH RHESUS

MAKNA KLINIS BESAR SELAIN A ,B,O

ALAMIAH TIDAK DIJUMPAI

SELALU SEBAGAI Rx IMMUNOLOGIK

MUNCUL AKIBAT TRANSFUSI/KEHAMILAN

(TRANSFUSI FETOMATERNAL)

ANTIGEN RHESUS SANGAT IMMUNOGENIK

TRANSFUSI

TINDAKAN MEMASUKKAN
DARAH/KOMPONENNYA KEDALAM PEMBULUH
DARAH

SEMACAM TRANSPLANTASI YAITU

PEMINDAHAN ALAT YG MASIH HIDUP (VIABLE)
DARI SESEORANG KE ORANG LAIN

PERLU DI USAHAKAN DARAH YG COCOK

/COMPATIBEL SUPAYA TIDAK TERJADI Rx
PENOLAKAN/ REJECTION.

MERUPAKAN TINDAKAN YG TIDAK TANPA

RESIKO
KOMPLIKASI YANG DAPAT
BERAKIBAT FATAL .

TUJUAN TRANSFUSI

MENGEMBALIKAN KEBUTUHAN DARAH

SECARA CEPAT.

MENAMBAH SALAH SATU FAKTOR DALAM

DARAH (ERITROSIT, LEKOSIT,
TROMBOSIT,PLASMA, KRIOPRESIPITAT DAN
DERIVATNYA)

MENGEMBALIKAN VOL DARAH

Harus sesuai kebutuhan

- siapa?
- kapan?
- apa?

- dampak?

Dewasa : perdarahan > 20 %

Anak-anak : perdarahan > 10%

Efikasi SDM + NS / RL = WB
WB

: resiko overload, infeksi,

penyimpanan

Indikasi Transfusi

Mengganti kehilangan darah (kecelakaan, perdarahan

peripartum)
Mengganti darah yang rusakkarena hemolisis (anemi
krn berbagai sebab selain perdahan, kelainan enzim
yg diturunkan dll)
Mengganti komponen darah yang kurang (kurangnya
albumin krn peny liver, kurangnya faktor pembekuan
darah)
Mengatasi metabolit pengganggu dlm darah
(hyperbilirubinemia pd bayi)

INDIKASI PEMBERIAN DARAH

DARAH LENGKAP; KEHILANGAN DARAH

MENDADAK------SYOCK HYPOVOLEMIK,
SYOCK KRN SEPSIS, EXCANGE
TRANSFUSION, DIALISE GINJAL.

PACKED CELL (KONSENTRAT ERITROSIT);

1.ANEMIA YG DENGAN Tx OBAT2AN TIDAK
BERHASIL; SUTUL APLASTIK, PRELEKEMIA.Tx
SITOSTATIKA, PROSES GANAS DGN/TANPA
INFILTRASI SUTUL, INSUF.GINJAL
2.DECOMP CORDIS.

DARAH MISKIN LEKOSIT;DEMAM POST

TRANSFUSI KRN BHN ANTI LEKOSIT PD
LEKOSIT DONOR, PENDERITA YANG AKAN
MENGALAMI TRANSPLANTASI.

KONSENTRAT TROMBOSIT,PENDERITA
TROMBOSITOPENIA YG JUGA BUTUH
DARAH,TROMBOSITOPENIA AKIBAT
DESTRUKSI YANG BERLEBIHAN.

ERTROSIT YG TELAH DICUCI;PEMBERIAN

DONOR PLASMA (DEF.IgA---- ANTI IgA)

KOMPLIKASI TRANSFUSI

REAKSI IMMUNOLOGIS:
BERVARIASI,URTIKARIA( Rx THD PLASMA),
DEMAM (Rx RINGAN THD PROT PLASMA
/LEKOSIT) : RENJATAN (TRANFUSI) ERITROSIT
YG TIDAK COCOK /INCOMPATIBLE).

Rx NON IMMUNOLOGIS : DIAKIBATKAN OLEH :

OVERLOAD, ANTICOAGULAN YANG
BERKELEBIHAN, DNG METABOLIK (KADAR K+,
AS SITRAT YG TINGGI ) PERDARAHAN
(DEF .FAKTOR PEMBEKUAN, KADAR ANTI
COAGULAN >>)

PENULARAN PENYAKIT : PENYAKIT YG

DITULARKAN MELALUI TRANSFUSI YG
PALING SERING ADALAH :HEPATITIS B DAN C
,MALARIA, HIV / AIDS, SIFILIS, CMV / EBV.

PERLU PEMERIKSAAN PENYARING UNTUK

CALON DONOR UNTUK PENYAKIT
SIFILIS,HEPATITIS B DAN C, HIV/AIDS DAN
PADA DONOR TERTENTU CMV/EBV

REAKSI IMUNOLOGIS

BERUPA Rx TRANSFUSI HEMOLITIK

TERJADI HEMOLISIS INTRAVASC, MASIV
AKIBAT ANTIBODI YG MENGAKTIFKAN IgM DAN IgG
SPESIFITAS ABO
GAMBARAN KLINIS:
FASE SYOCK HEMOLITIK
BBRP ML DARAH
SAJA/1-2 SETELAH AKHIR TRANSFUSI
FASE OLIGORIK
NEKROSIS TUBULUS
GINJAL
DENGAN GAGAL GINJAL AKUT
FASE DIURETIK
KETDK SEIMBANGAN CAIRAN
DAN ELEKTROLIT SELAMA PEMULIHAN GAGAL
GINJAL AKUT

PENANGANAN Rx TRANSFUSI

PASTIKAN IDENTITAS RESIPIEN

KESALAHAN
ADMINISTRASI
ULANGI PENENTUAN GOL DARAH (PRA & POST TRANS)
DONOR
ULANG UJI SILANG
UJI ANTIGLOBULIN DIREK PD SAMPEL POST TRANS.
PERIKSA ADANYA HEMOGLOBINEMIA PADA PLASMA
PERIKSA KEMUNGKINAN TERJADI DIC
PERIKSA SAMPEL
KONTAMINASI BAKTERI
URIN POST TRANSFUSI
HbURIA
POST TRANSFUSI 6 / 24 JAM PERIKSA DARAH; BILIRUBIN,
Hb BEBAS, MET HEMALBUMIN
HASIL NEGATIF
5-10 HARI
ANTIBODI
ERIT/LEKOSIT

UJI KOMPATIBILITAS.

PENTING DAN MUTLAK DIKERJAKAN PADA

BANK DARAH.
TUJUANNYA MENCEGAH Rx TRANSFUSI DAN
TERJAMINNYA DONOR MENERIMA MANFAAT
DARI DARAH TRANSFUSI.

TERMASUK UJI KOMPATIBILITAS :

REAKSI SILANG /CROSS MATCH
COOMBS CONTROL
AGLUTININ DINGIN NON SPESIFIK
AGLUTININ DINGIN SPESIFIK
ANTIBODI HANGAT SPESIFIK
ANTIBODI HANGAT NON SPESIFIK

Reaksi silang

Merupakan bagian dari test kompatibilitas

Cek final kompatibilitas ABO antar donor &
pasien
Mendeteksi antibodi dlm serum penderita yg akan
bereaksi dg Ag donor, yg tak terdeteksi dg tes
skrining Ab

Reaksi silang terdiri atas 2 macam :

Reaksi Mayor : reaksi antara eritrosit donor
dengan serum resipien
Reaksi Minor : reaksi antara eritrosit resipien
dengan serum donor

Eritrosit

Serum

Eritrosit

MINOR

Serum

MAYOR

Resipien

Donor

REAKSI SILANG

MAYOR : MEMERIKSA AB DALAM SERUM

RESIPIEN YG DAPAT MENGHANCURKAN
ERITROSIT DONOR.

MINOR : MEMERIKSA AB DALAM SERUM

DONOR YG DAPAT MENGHANCURKAN ERIT
RESIPIEN

Minor + : sebab?
- Ab donor ?
- Ab melapisi eritr pasien ?
Cek dg tes Coombs Direk

negatif

Ab donor

positif
Ab yg melapisi eritrosit pasien:
AIHA
HDN
transfusi sebelumnya

KEUNTUNGAN REAKSI MINOR

RE CEK PENETAPAN GOL.DARAH

O YANG KELIRU .

HANYA

ERITROSIT RESIPIEN COMB TEST DIREK +

MINOR CROSSMATCH +

MINOR CROSSMATCH INCOMPATIBEL

INDIKASI UTAMA PEMBENTUKAN AB PADA
RESIPIEN POST TRANFUSI.

A B DONOR YG SPESIFIK UNTUK ANTIGEN YG

JARANG PADA ERITROSIT RESIPIEN DAPAT
DIDETEKSI

TAHAPAN UJI
KOMPATIBILITAS.

FASE I,FASE SUHU KAMAR.

UNTUK MENDETEKSI COLD AGLUTININ
(ANTI-A1, ANTI-M, ANTI-P) PENAMBAHAN
SERUM PENDERITA PADA SUSPENSI
ERITROSIT DONOR PADA SUHU KAMAR
SELAMA 15 MENIT (2 TABUNG).
SALAH SATU DI (+) BOVINE ALBUMIN:
MENDETEKSI BANYAK AB: ME(-) DAYA
TOLAK MENOLAK ANTAR ERITROSIT :
MENINGKATKAN SENSITIFITAS PADA TES
ANTIGLOBULIN

FASE INKUBASI : KEDUA TABUNG

DIMASUKKAN INKUBATOR DNG SUHU 37o C
PALING LAMA 15 MENIT
Rx ANTIGEN
ANTIBODI THP I BERLANGSUNG.

FASE ANTIGLOBULIN : SUSPENSI DICUCI

DNG LARUTAN SALIN DI(+) ANTI HUMAN
SERUM. PALING SEDIKIT 1/8 ANTIBODI
PENEYBAB Rx TRANFUSI DAPAT
TERDETEKSI.

ANTIGLOBULIN TEST ( COOMBS TEST )

Definisi :
Tes utk mendeteksi adanya antibodi tidak sempurna
(incomplete antibody) yang diabsorpsi oleh eritrosit dengan jalan
mereaksikan anti Ig G dan anti komplemen dengan eritrosit yg
sudah tersensitisasi
terjadi hemaglutinasi
Serum Coombs :
Serum kelinci yg telah diimunisasi dg fraksi globulin/Ig G manusia,
sehingga disebut juga Serum Anti Globulin

Pembuatan serum Coombs:

Serum manusia disuntikkan ke kelinci
Kelinci membuat Ab thd serum mns yg disuntikkan, disebut
Rabbit Antihuman globulin = serum Coombs
Digunakan dlm Tes Coombs / Uji Antiglobulin

 Direct Coombs Test

Indikasi : untuk diagnosis

HDN ( Hemolytic Disease of the Newborn )
AIHA ( Autoimmune Hemolytic Anemia )
Reaksi transfusi hemolytik
Drug Induced Hemolytic Anemia

Indirect Coombs Test

Indikasi :
Skrining Antibodi
Deteksi Ab IgG; IgG anti Rh (D), lain2 Ig G
Deteksi thd variant Rh yg bereaksi lemah, Ag Kell & Duffy
Pada keadaan hipo/a- gamaglobuliemia/a-gamaglobulinemia
Pada cross matching (reaksi silang)

Direct Antiglobulin Test

( Direct Coombs Test )
Untuk mendeteksi incomplete antibody yg melapisi
eritrosit penderita in vivo
Cara :
Eritrosit penderita dicuci dengan salin untuk
menghilangkan globulin plasma yang tidak bersifat
antibodi spesifik
Campur dengan serum Coombs
tambahkan pada
antibodi spesifik incomplete yg diabsorbsi
/melapisi eritrosit in vivo

DIRECT ANTIGLOBULIN TEST

(DAT)/Direct Coombs Test
Untuk mendeteksi incomplete antibody yg
melapisi eritrosit penderita in vivo

Ag

Incompl Ab

Serum Coombs

hemaglutinasi

Indirek Antiglobulin Test / IAT

( Indirect Coombs Test )
Untuk mendeteksi incomplete antibody Ig G
incomplete yang terdapat didalam serum penderita :
Cara :
Eritrosit normal dari golongan darah yg sama
atau gol darah O disuspensikan ke dalam
serum penderita dan diinkubasikan pada 370 C
Sesudah dicuci dengan salin, tambahkan serum
Coombs, disentrifus 1 menit pada 1000 rpm
agglutinasi
serum penderita mengandung
antibodi tsb
positif

IAT

Ab dlm serum

Ag

E
E
Inkubasi 37 C

Sentrifus 1000 rpm (1 menit)

Cuci dg salin

Serum Coombs

hemaglutinasi

Kd tes Coombs menghasilkan hasil NEGATIF PALSU,

sebab:
Pencucian eritrosit seblm pe + an serum Coombs
kurang sempurna, msh tdp sisa globulin yg
menetralkan serum Coombs
2. Salin terkontaminasi oleh protein/globulin
3. Lupa menambahkan serum Coombs
1.

Diperlukan Coombs Control Cells (CCC)

UJI PRA TRANSFUSI

PENENTUAN GOLONGAN DARAH: RESIPIEN( ABO & Rh)
UJI ANTIGLOBULIN TIDAK LANGSUNG
NEGATIF

POSITIF

Pencocokan silang Uji antiglob tdk langsung Uji antiglob langsung

Alo antibodi

Auto antibodi

Uji antiglob,tak langsung Uji antiglob tak langsung

Alur uji laboratorium pre-transfusi

Pasien

a. Serum

a. Serum

b. Eritrosit

b. Eritrosit

Buat suspensi eritosit

1. 5% dlm salin
2. 10% dlm salin
3. 40% dlm salin a/ serum

Donor

Buat suspensi eritosit

1. 5% dlm salin
2. 10% dlm salin
3. 40% dlm salin a/ serum

Reaksi silang
ABO
Rh

c. Pem gol ABO, Rh metode slide, jika hasil OK:

d. Reaksi silang

Merup tes Coombs

indirek

MAYOR
Fase I
Fase II
Fase III

MINOR
Fase I
Fase II
Fase III

e. CCC

Minor + : sebab?
- Ab donor ?
- Ab melapisi eritr pasien ?

Cek dg tes Coombs Direk

PERSYARATAN DONOR
UMUR : 17 65 TH
PEMERIKSAAN FISIK:
1. Suhu : < 37,50 ; Nadi 50 100 / menit
2. Tek. darah;Sistole 90-160 mm Hg
Diastole 50-90mm Hg
3. Tidak dijumpai luka/ radang kulit
disekitar vena.
4. Hb: laki2 > 12 gr/dl wanita > 11gr/dl

PERSYARATAN DONOR
RIWAYAT MEDIK:
1.
Waktu donasi ulangan 2-3 bulan
2.
Tidak pernah ditolak sebagai donor
3.
Hamil dan 6 minggu post partum tdk boleh, kecuali
transfusi autologus,
4.
Ditolak:Post operative < 6 bulan.( operasi besar)
5.
Ditolak: menderita tbc; radang aktif/ proses degeneratif
pada ginjal/hati; kelainan jantung koroner/ jantung
rematik berat.
6.
Donor trombosit: 5 hari tidak boleh makan obat yang
menekan fungsi trombosit.

Persyaratan Donor
7

Dihindari yang mempunyai riwayat epilepsi

8 Ditunda : BB turun berlebihan

9 Ditolak: menderita keganasan ;lekemia,
limpoma.
10 Ditolak : donor dengan penyakit infeksi
( hepatitis, sifilis, malaria,AIDS)
11 Donor plasma hanya terbatas bila ada
defisiensi faktor- faktor koagulasi

HAEMOLYTIC DISEASE OF NEW BORN/HDN

PRINSIP:DESTRUKSI ERITROSIT JANIN

ANTI BODI DARI IBU
PLASENTA
TERJADI KARENA ANTIBODI ABO / ANTI Rh(D)
KELAS IgG
GEJALA BERVARIASI DARI RINGAN KE YANG
BERAT ( DISEBABKAN ANTI-D)
ANTI D PADA IBU ; KEHAMILAN/PERSALINAN
TERDAHULU
ABORTUS
RESPON PRIMER
AMNIOSENTESIS
TRANSFUSI DARAH Rh(+)

ANTI D
plasenta
janin
( kehamilan selanjutnya)
eritrosit
dilapisi AB lisis ( anemia & icterus)

Destruksi eritrosit >> :

Anemia

Reticulositosis
Erit.berinti
(eritroblastosis foetalis )
Hemolisis
Bilirubin lewat placenta
Hepar ibu
Bil.diglukuronida
ginjal ibu

Bayi lahir
hepar imature
bilirubin
sulit hilang dari darah
penumpukan
bil.indirek
biliruin numpuk diotak
kern Icterus
Gangguan neurologis
-Gangguan pernafasan
-Kematian( Bil > 19 mg/dl

 SEBELUM LAHIR

Antibody menyebabkan destruksi eritrosit

Anemia
Gangguan jantung
fetal death

 SESUDAH LAHIR

Antibody menyebabkan destruksi eritrosit

Anemia
Gangguan jantung
Bilirubinemia
Kernicterus
Retardasi berat

74