IgG serum spesifik di diagnosis Staphylococcus aureus aliran darah

invasi berkorelasi dengan perkembangan penyakit

abztrak
Meskipun Staphylococcus aureus merupakan penyebab yang menonjol dari infeksi,
tidak ada vaksin yang saat ini tersedia. Aktif
vaksinasi mengandalkan memori kekebalan tubuh, kompetensi inti dari sistem imun
adaptif.
Untuk menjelaskan apakah kekebalan adaptif dapat memberikan perlindungan dari
komplikasi serius dari infeksi S. aureus,
sebuah studi observasional prospektif dari 44 pasien dengan infeksi S. aureus rumit
oleh bakteremia dilakukan.
Pada diagnosis, serum IgG mengikat S. aureus protein ekstraseluler yang diukur
pada immunoblots dan dengan
Luminex berbasis FLEXMAP 3D tes yang terdiri 64 rekombinan protein S. aureus.
Hasil berkorelasi
dengan perjalanan infeksi dengan sepsis sebagai variabel hasil utama.
Kadar serum IgG S. aureus spesifik di diagnosis infeksi S. aureus lebih rendah pada
pasien mengembangkan sepsis
dibandingkan pada pasien tanpa sepsis (P b 0,05). Pola IgG mengikat delapan
karena protein S. aureus dengan benar
meramalkan perjalanan penyakit di 75% dari pasien.
Memori kekebalan tubuh yang kuat S. aureus dikaitkan dengan perlindungan dari
komplikasi serius dari bakteri
invasi. Serum IgG mengikat delapan dilestarikan protein S. aureus diaktifkan
stratifikasi pasien dengan tinggi
dan risiko rendah sepsis di awal perjalanan infeksi aureus S. rumit oleh bakteremia.
Signifikansi: S. aureus merupakan patogen berbahaya yang semakin meningkat
penting baik di rumah sakit dan di masyarakat.
Karena krisis resistensi antibiotik, kebutuhan mendesak ada untuk strategi baru
untuk memerangi S. aureus
infeksi, seperti vaksinasi. Untuk saat ini, bagaimanapun, semua uji vaksin telah
gagal dalam studi klinis. Oleh karena itu
jelas apakah sistem imun adaptif adalah sama sekali mampu mengendalikan S.
aureus pada manusia.
Makalah ini menunjukkan penggunaan proteomik untuk menyediakan jawaban
untuk pertanyaan penting ini. Ini menggambarkan Novel
Hasil dari studi prospektif pada pasien dengan infeksi S. aureus rumit oleh invasi
aliran darah. Imun
analisis proteomika menunjukkan bahwa memori kekebalan tubuh yang kuat S.
aureus - tercermin antibodi serum IgG yang kuat
mengikat antigen S. aureus - dikaitkan dengan perlindungan klinis dari sepsis. Ini
memberikan dukungan untuk gagasan

vaksin untuk melindungi terhadap komplikasi paling serius dari infeksi S. aureus.
Oleh karena itu, data mendorong upaya lebih lanjut dalam pengembangan vaksin.

. Perkenalan
Staphylococcus aureus merupakan patogen serius di kedua rumah sakit dan
masyarakat, tetapi juga komensal umum [1-3]. Meskipun intensif
upaya, tidak ada vaksin untuk melindungi terhadap infeksi S. aureus [4,5].
Strategi vaksinasi aktif mengandalkan memori kekebalan tubuh, kompetensi inti
dari sistem imun adaptif, terdiri dari sel-sel T, sel B dan
antibodi. Hal ini menimbulkan pertanyaan tentang apa yang imun adaptif
sistem dapat berkontribusi untuk perlindungan terhadap S. aureus.
Kedua operator S. aureus (sekitar 20% dari orang dewasa) juga sebagai nonoperator
antibodi pelabuhan serum khusus untuk spektrum yang luas dari protein S. aureus
dan antigen non-protein [6,7]. Jelas, pertemuan S. aureus
dengan host manusia tidak menyebabkan kekebalan steril, juga tidak mencegah
atau tidak bisa berkerumun. Tak satu pun dari isolat yang positif untuk
racun eksfoliatif encoding gen eta atau etd (Tabel S1).
3.2. Serum IgG mengikat sel aureus S. atau protein ekstraseluler
USA300, penyebab paling sering dari invasi aliran darah dalam kelompok ini,
dipilih untuk kuantifikasi S. aureus-spesifik serum IgG. SEBUAH
protein-A mutan penghapusan gen, USA300spa, dihasilkan untuk menghindari
non-spesifik antibodi yang mengikat. Pasien sera diperoleh pada diagnosis,
selambat-lambatnya empat hari setelah timbulnya gejala, dan IgG mengikat
ekstraseluler
protein bakteri diukur (n = 46). Jumlah IgG yang mengikat
bervariasi dengan faktor 27 (kisaran: 65140-1763988 AUC, Gambar 1A.). Pasien
yang kemudian dikembangkan sepsis - tidak rumit sepsis, sepsis berat
atau syok septik - menunjukkan lebih rendah IgG mengikat S. aureus ekstraseluler
protein (P = 0,0481, Gambar. 1B). Selain itu, IgG mengikat ekstraseluler
Protein S. aureus menurun dengan meningkatnya keparahan sepsis (Gambar. 1D).
Di sisi lain, 7 dari 11 pasien dalam kuartil bawah
nilai-nilai yang mengikat antibodi dikembangkan sepsis, tetapi hanya 3 dari 11 di
kuartil atas melakukannya (Gambar. 1E). Demikian pula, IgG mengikat ke
permukaan bakteri
lebih rendah pada kelompok sepsis dibandingkan pada pasien yang tetap
sepsis bebas (P = 0,0409, Gambar. 1C).
3.3. Serum IgG mengikat karena protein S. aureus
Untuk mengidentifikasi kekhususan antibodi yang terkait dengan perlindungan
terhadap
sepsis, IgG mengikat 64 rekombinan protein S. aureus wasmeasured,
terdiri ekstra-seluler, permukaan terikat dan sitoplasma protein S. aureus

(Tabel S2). 44 sera tersedia untuk analisis ini (sera diperoleh

sebelum atau pada timbulnya gejala). Pada awalnya, pasien dikelompokkan ke
dalam
(i) tidak ada sepsis, (ii) sepsis tidak rumit, dan (iii) sepsis berat atau septic
shock dan hasilnya dikenakan parsial analisis kuadrat terkecil
(PLS) (Gambar. 2A). Pasien dengan sepsis rumit dan sepsis berat /
septic shock berkerumun bersama-sama dalam satu area dan karenanya ditangani
sebagai
satu kelompok, "sepsis", dalam analisis PLS kedua. Hal ini mengakibatkan
perpisahan
dari pasien tanpa sepsis, seperti ditunjukkan pada Gambar. 2B.
Atas 20 protein S. aureus bertanggung jawab atas diskriminasi yang
tercantum dalam Tabel 2. Hampir semua protein ini milik
proteome ekstraseluler, yang menimbulkan antibodi terkuat mengikat,
seperti yang diharapkan (Gbr. 3). Mereka termasuk racun dan faktor virulensi
S. aureus dan juga protein dari fungsi yang tidak diketahui. Analisis lebih lanjut
dengan mesin dukungan vektor mengungkapkan diskriminasi terbaik antara
pasien dengan dan tanpa sepsis dengan menerapkan Fisher linear diskriminan
analisis dengan intensitas IgG mengikat atas 8
protein: fosfolipase C (Plc), staphopain B (SspB), yang
imunodominan staphylococcal protein A (ISAA), stafilokokus yang
eksotoksin M (SEM), glycerophosphoryl diester phophodiesterase
(GlpQ), komponen C dari -hemolisin (HlgC) dan dua protein yang tidak diketahui
fungsi, SACOL0444 dan SACOL0985. Untuk memvalidasi hasil ini, sebuah
analisis komponen utama dilakukan dengan serum IgG yang mengikat
ke atas 8 protein pada diagnosis. Derajat pemisahan pasien
dengan dan tanpa sepsis selanjutnya digambarkan dalam Gambar. 2C. Keracunan
darah
itu benar memprediksi dengan analisis diskriminan linier Fisher di 16 dari
21 kasus dan tidak ada sepsis di 17 dari 23 kasus; dengan demikian, prediksi itu
benar dalam 75% kasus (sensitivitas 76%; spesifisitas 74%). IgG yang mengikat
ke atas 8 protein berbeda secara signifikan antara pasien yang kemudian
sepsis maju atau tidak sepsis seperti digambarkan pada Gambar. 2D. Namun,
kedua kelompok tersebut tidak lepas atas dasar antibodi yang mengikat
protein S. aureus tunggal.
Rincian analisis data yang disediakan dalam bahan pendukung.
Jurnal Proteomika 128 (2015) 1-7
Sesuai penulis di: Institut fr Immunologie und Transfusionsmedizin,
UNIVERSITTSMEDIZIN Greifswald, Ferdinand-Sauerbruchstrae / DZ7, 17475
Greifswald,
Jerman.
Alamat E-mail: broeker@uni-greifswald.de (BM broker).

4. Diskusi
Pada diagnosis infeksi aliran darah S. aureus, serum IgG mengikat
proteome ekstraseluler bakteri berbanding terbalik dengan
risiko perkembangan sepsis. Kami mengamati variasi hampir 30 kali lipat
total serum IgG mengikat ekstraseluler protein S. aureus. sangat
S. kadar serum IgG-aureus spesifik yang tinggi ditandai subkelompok pasien
yang hampir tidak pernah mengalami sepsis. Nasib pasien dengan
media untuk intensitas rendah IgG yang mengikat adalah non-seragam. antibodi
mengikat
untuk ekstraseluler protein S. aureus dan S. aureus diskriminasi sel
kedua kelompok sama-sama baik.
Tanda tangan proteome kekebalan delapan protein S. aureus diprediksi
perjalanan penyakit pasien bakteremia dengan akurasi 75% (76%
sensitivitas dan 74% spesifisitas). Signature proteomika ini terutama erdiri dari
dilestarikan ekstraseluler protein S. aureus: dengan pengecualian
dari superantigen SEM, semua milik inti genom S. aureus
[23]. Hal ini diperkirakan karena pasien tidak dikelompokkan menurut
dengan jenis yang menginfeksi S. aureus mengisolasi, dan banyak S. aureus racun
gen - seperti yang superantigens encoding dan racun lainnya - adalah
sangat bervariasi dalam spesies S. aureus, seperti antibodi serum spesifik
kepada mereka [10,24]. Mengingat bahwa menginfeksi S. aureus isolat di
penelitian ini mencerminkan situasi epidemiologi di AS, hasil
harus dianggap sebagai bukti dari konsep. Sementara prediksi
nilai antigen tanda tangan S. aureus yang dijelaskan mungkin tidak membenarkan
klinis
aplikasi, hasil yang memberikan dorongan bagi penyelidikan
kohort pasien yang lebih besar fromdifferent wilayah geografis baik mendefinisikan
tanda tangan proteome kekebalan universal perlindungan terhadap S. aureus
sepsis atau untuk mengembangkan tes yang lebih khusus menangkap antigen
repertoar invasif S. aureus di berbagai wilayah dunia.
Meskipun uji vaksin belum dicegah infeksi S. aureus
[4,5,25], hasil studi prospektif ini memperkuat kasus
dari peran pelindung sistem imun adaptif dalam mengatasi
Infeksi S. aureus. IgG serum spesifik menunjukkan memori kekebalan
S. aureus, kompetensi inti dari sistem kekebalan tubuh adaptif, yang
dasar efek vaksinasi. Itu jelas associatedwith perlindungan
dari komplikasi septik S. aureus aliran darah invasi. Hebatnya,
asosiasi S. aureus-spesifik serum IgG dengan menguntungkan
Tentu saja penyakit itu hilang jika sera diperoleh paling lambat 4 hari setelah infeksi
presentasi (data tidak ditampilkan). Hal ini menunjukkan bahwa perlindungan
dari komplikasi septik S. aureus invasi wasmainly disediakan oleh
sudah ada IgG spesifik atau memori kekebalan S. aureus bukan oleh

respon IgG dipicu oleh infeksi saat ini.

Temuan menguatkan pengamatan sebelumnya: operator S. aureus
memiliki tingkat lebih tinggi dari antibodi spesifik dibandingkan non-operator [6,18],
tetapi tingkat lowermortality dalam kasus S. aureus bakteremia [9]. Demikian pula,
pasien dengan pemulihan rumit dari infeksi aliran darah
memiliki titer antibodi lebih tinggi khusus untuk S. aureus eksotoksin pada diagnosis
daripada pasien yang mengembangkan sepsis [19]. Epidermolisis bulosa
pasien, yang menderita luka kronis berat dijajah oleh S. aureus,
menunjukkan konsentrasi serum tinggi antibodi anti-staphylococcal dan
biasanya tidak mengembangkan sistemik S. aureus infeksi [26]. Sebaliknya,
anak-anak dengan rendah sudah ada titer IgG untuk S. aureus -hemolisin dan
Panton-Valentine leukocidin lebih rentan terhadap penyakit S. aureus invasif
[27]. Singkatnya, literatur setuju tentang korelasi negatif
antara antibodi dan keparahan penyakit S. aureus tertentu.
Karya ini meluas pengetahuan ini dan menunjukkan untuk
pertama kalinya bahwa stratifikasi pasien berdasarkan S. aureus spesifik antibodiDimungkinkan pada diagnosis S. aureus aliran darah invasi.
Secara khusus, subkelompok pasien bakteremia dengan sangat
antibodi S. aureus-spesifik yang kuat mengikat jarang dikembangkan septic
komplikasi. Informasi tersebut juga dapat berguna dalam intervensi klinis
penelitian, seperti uji coba vaksinasi S. aureus aktif atau pasif.
Untuk ini, sebuah panel delapan S. aureus antigen diidentifikasi antara 64 diuji
rekombinan antigen S. aureus berperan. Semangat
- Berbeda dengan data yang sebelumnya dilaporkan dari kohort pasien yang sama
[19] - tujuh dari delapan protein tanda tangan ini milik dilestarikan
S. aureus genom inti. Hal ini membuat tidak perlu untuk menyaring pasien
menurut menginfeksi S. aureus saring dan akan membuatnya
mudah untuk menerjemahkan temuan menjadi alat diagnostik.
Mengenai mekanisme proteksi yang diberikan oleh adaptif
sistem kekebalan tubuh, ada beberapa kemungkinan saling non-eksklusif
[28]. Di satu sisi, antibodi dapat opsonize bakteri atau menetralisir
ampuh S. aureus faktor virulensi seperti racun pori-membentuk racun, PVL dan Lukas / LukF, serta superantigen. Di samping itu,
antibodi mungkin juga dianggap sebagai penanda S. aureusspecific
Memori sel T, karena sebagian besar sel B membutuhkan serumpun
(antigenspecific)
T cell bantuan untuk menghasilkan antibodi, terutama untuk melakukan
beralih kelas dari IgM ke subclass lain Ig. Selain bantuan untuk sel B,
sel memori T dapat memenuhi berbagai fungsi dalam pertahanan anti-bakteri,
misalnya, mereka mempromosikan pematangan neutrofil, pembebasan mereka
dari sumsum tulang dan perekrutan ke tempat infeksi [28-30].
Singkatnya, selain menunjukkan kemungkinan stratifikasi pasien
menurut risiko sepsis mereka, data kami memberikan dukungan terhadap gagasan

vaksin untuk melindungi terhadap komplikasi paling serius dari S. aureus

infeksi dan mendorong upaya lebih lanjut dalam arah ini