USULAN PENELITIAN

PENGARUH JUS BUAH SEMANGKA MERAH (Citrullus vulgaris)

TERHADAP BERAT VESIKULA SEMINALIS DAN JUMLAH LAPISAN
SEL SPERMATOGENIK TIKUS (Rattus norvegicus strain wistar)
YANG DIINDUKSI ALKOHOL.

Tomy Wijaya Kurniawan

201110330311060
Dosen Pembimbing 1
M.Kes
Dosen Pembimbing 2
1
Dosen
Penguji

: dr. Thontowi Djauhari, NS,

: dr. Halida Nelasari, Sp. OG
: dr. Ruby Riana Asparini

LATAR BELAKANG
Riskesdas 2007 :
Jawa Timur,
presentase
peminum alkohol :
Kota Malang dan
Batu (6,3%) , kota
Madiun (5,7%),
Sumenep (0,2%) ,
Bangkalan dan
Sampang (0,3%)

Alkohol
Di metabolisme
menjadi
asetaldehid
ROS
FSH dan LH
produksi
testosteron

Jus buah
semangka
(Citrullus
Vulgaris)
mengandung
likopen
sebagai
antioksidan

RUMUSAN MASALAH

Adakah pengaruh jus semangka merah

(Citrullus vulgaris) terhadap berat vesikula
seminalis

dan

spermatogenik
nurvegicus

tikus

Strain

dipapar alkohol?

jumlah

lapisan
putih

Wistar)

sel

(Rattus

jantan

yang

TUJUAN PENELITIAN
Tujuan Umum
Untuk mengetahui pengaruh jus semangka
merah (Citrullus vulgaris) terhadap berat
vesikula seminalis dan jumlah lapisan sel
spermatogenik
tikus
putih
(Rattus
nurvegicus Strain Wistar) yang dipapar
alkohol

Tujuan Khusus

Mengetahui berat vesikulla seminalis tikus putih (Rattus

nurvergicus Strain Wistar) jantan yang dipapar alkohol

Mengetahui jumlah lapisan sel spermatogenik tikus

putih (Rattus nurvergicus

Strain Wistar) jantan yang

dipapar alkohol

Melihat pengaruh jus buah semangka merah (Citrullus

vulgaris ) terhadap berat vesika seminalis tikus putih
(Rattus nurvergicus Strain Wistar) jantan yang dipapar
alkohol
5

Melihat

pengaruh

jus

buah

semangka

merah

(Citrullus vulgaris ) terhadap jumlah lapisan sel

spermatogenik

tikus

putih

(Rattus

nurvergicus

Strain Wistar) jantan yang dipapar alkohol

Melihat hubungan antara dosis jus buah semangka

merah (Citrullus Vulgaris) dengan berat vesikula
seminalis dan jumlah lapisan sel spermatogenik
tikus putih (Rattus Norvegicus Strain Wistar) Jantan
yang di papar Alkohol.

MANFAAT PENELITIAN

Klinis
Untuk
membuktikan
pengaruh
jus
buah
semangka merah terhadap berat vesika
seminalis dan jumlah lapisan sel spermatogenik
tikus yang dipapar alkohol.
Akademis

Memberikan informasi

Memberi dorongan dan motivasi eksplorasi

Memberikan informasi yang berguna untuk

penelitian lebih lanjut

Manfaat Masyarakat
Memberikan informasi tentang dampak
alkohol dalam fertilisasi dan manfaat jus
semangka yang dapat menghambat atau
mengurangi dampak radikal bebas akibat
mengkonsumsi alkohol.

Tinjauan Pustaka

Testis

Tubulus seminiferus

10

Sel spermatogenik

11

Vesika seminalis

12

Tubulus berlokus dan berkelok kelok dilapisi epitel

sekretoris yang menyekresikan mucus yang
mengandung fruktosa, asam nitrat dan nutrisi
lainnya
dan
sejumlah
prostaglandin
dan
fibrinogen.

Alkohol

Metabolisme

13

Terhadap sistem reproduksi

14

Radikal Bebas

Radikal bebas molekul yang bersifat tidak

stabil
(tidak
punya
elektron
yang
berpasangan) mencari elektron yang stabil
di dekatnya memulai reaksi berantai yang
dapat merusak tubuh karbohidrat, protein,
lipid, DNA

15

Antioksidan
Antioksidan

menetralisir dan mencegah

radikal bebas menstabilkan radikal bebas
dengan melengkapi kekurangan elektronnya
Antioksidan enzim (endogen) dan vitamin
(eksogen) endogen : SOD, katalase, glutation
eksogen : vitamin E, vitamin C, betakaroten,
flavonoid (flavon, flavonol, dll), phenolic, asam
ferulic

16

Semangka
likopen.
Suplementasi 4-8 mg likopen setiap hari
pada
manusia
dapat
menurunkan
peroksidasi lipid, kerusakan DNA, dan
peningkatan antioksidan (Selvan et al, 2011)

Malviya (2014)

17

KERANGKA KONSEP

HIPOTESIS

Terdapat Pengaruh Jus Semangka (Citrullus

vulgaris) Terhadap Berat Vesikula Seminalis
dan Jumlah lapisan Sel Spermatogenik
Tikus

Putih

(Rattus

nurvegicus

Wistar) Jantan yang Dipapar Alkohol

19

Strain

METODE PENELITIAN

20

Rancangan Penelitian:

Experimental posttest only control group

design

Lokasi dan Waktu Penelitian

Lokasi: Laboratorium farmakologi FK UMM
Waktu: Februari 2015
Populasi
tikus putih jantan (Rattus norvegicus
strain wistar)
Sampel

21

Sampel
Kriteria inklusi :

Tikus

Putih

Rattus

Kriteria eksklusi :

novergicus strain wistar

Terdapat

kelainan

anatomi pada organ

dengan umur 2-3 bulan

testis

Berat badan 200 gram

Jenis kelamin jantan

Sehat, ditandai dengan

dengan

gerakannya aktif, bulu

tidak

tebal,

matanya buram

jernih
22

dan

matanya

Sakit,

ditandai
gerakannya
aktif

dan

 Replikasi
Dengan rumus Federer, sebagai berikut:

Dalam penelitian ini terdapat 4 kelompok,

sehingga jumlah sempel menjadi 24, tetapi
jumlah ini akan ditambah antisipasi drop out
sebanyak 10% dari jumlah keseluruhan.
23

 Estimasi

drop out

Jumlah sampel penelitian yang digunakan adalah

24+10%

drop

out=

28.

Dalam

penelitian

ini,

menggunakan 4 kelompok sehingga tiap kelompok

terdiri dari 6,75 7 sampel.
24

Teknik pengambilan sampel

Pengambilan
sampel
simple random sampling.

menggunakan

Variabel Penelitian
Variabel Bebas : dosis jus buah semangka
(1,8 cc dan 2,4 cc).
Variabel Tergantung : berat vesikula
seminalis
dan
jumlah
lapisan
sel
spermatogenik.

25

Definisi operasional

Jus buah semangka merah adalah semangka

merah yang di blender, di pisahkan kulit dan
bijinya (Pardede et al, 2010). Jus semangka merah
mengandung likopen 6.20 mg / 100 ml (Naz, et
al. 2013).
Lapisan sel spermatogenik adalah lapisan tubulus
seminiferus terdiri dari 4 8 lapisan diantaranya :
spermatogonia, spermatosit primer, spermatosit
sekunder, spermatid dan spermatozoa. ( guyton.,
2006).

26

Definisi operasional

Penurunan berat vesikula seminalis adalah

berat vesikula seminalis yang mengalami
penurunan dibandingkan dengan vesikula
seminalis normal yang didapatkan dari hasil
analisa pada organ vesikula seminalis tikus
Alkohol yang digunakan adalah alkohol
dengan kadar etanol 96% KEMENKES RI PKD
2050/9000054 no batch 10111488 yang
diencerkan menjadi 25%.

27

Alat dan bahan

Alat

Timbangan

Kandang

Bahan

Tikus putih jantan (strain wistar)

Alkohol 25%, dengan dosis 0,6

cc

Jus semangka dosis 1,8 cc &2,4

cc

Pakan BR-1

Aquadest

Alat bedah

Mikroskop

Object glass

Eter & kapas untuk membius

tikus

Aquadest

Paraffin

Alkohol 30%, 70%, 85%, 95%

Xilol

Hematoxilin Eosin (HE)

Formalin 10%, Aquades

Eosin

Gelas ukur dan pengaduk

28

Blender

Alur
Penelitian

29

Etanol diberikan per oral melalui intubasi lambung

pada penelitian ini berat badan tikus yang
digunakan adalah 200 gr (0,2 Kg). Dosis yang
digunakan 3 g / kg BB dua kali sehari 25% selama
15 hari sehingga dosis yang digunakan dalam
penelitian ini adalah 3 gr/kg = 0,6 gr 0,6 cc/kali
pemberian
Jus semangka merah mengandung likopen 6.20
mg / 100 ml, dosis pada manusia sebanyak 4-8
mg likopen. Jadi perhitungannya :

30

Setelah didapatkan dosis pada manusia, kemudian

di konversikan pada tikus menggunakan tabel
konversi dosis antar spesies :

Dosis untuk tikus seberat 200 gr :

Dosis

= 96,7 ml x 0,018 = 1,74 ml 1,8 cc

Dosis

= 129 ml x 0,018 = 2,32 ml 2.4 cc

31

Tahap Pembedahan Dan Fiksasi

Membedah tikus untuk mendapatkan testis tikus

Mencuci testis tikus dengan larutan NaCl

Memasukkan testis ke dalam botol flakon yang berisi larutan

formalin 10 % dan memfiksasi selama 24 jam.

Tahap pembuatan Preparat histologi

- Tahap Dehidrasi
- Tahap Pewarnaan HE
- Tahap Mounting
Tahap penghitungan jumlah lapisan sel spermatogenik

Perhitungan jumlah lapisan sel spermatogenik dilakukan

dengan cara menghitung jumlah sel tubulus seminiferus
dalam 10 lapang pandang dengan perbesaran 400x
(Anindita, 2012).

Penguburan Tikus

Tikus dikumpulkan pada kotak kayu berukuran 30 x 20 x 20

cm untuk kemudian dikuburkan.

32

Analisis Data
Uji T-test
Uji One way Anova
Uji post hock
Pearson korelasi

33

Hasil Penelitian
Tabel 5.1 hasil penimbangan vesikula seminalis tikus putih (Rattus
nurvegicus strain wistar) jantan.
Berat Vesikula Seminalis Tikus / Ulangan

Perlakua
n

rerata

SD

k-

1.119

1.007

0.659

0.839

0.572

0.758

0.825667

0.189652

k+

0.444

0.555

0.301

0.124

0.326

0.427

0.362833

0.135311

p1

0.742

0.601

0.504

0.983

0.736

0.341

0.651167

0.202459

p2

1.337

0.719

0.606

0.709

1.021

0.731

0.853833

0.250686

Sumber : Data primer (2015)

Rerata berat vesikula seminalis digambarkan secara diagram

dalam bentuk grafik dibawah ini:

Tabel 5.2 Hasil pengamatan jumlah lapisan sel spermatogenik tikus

putih (Rattus novergicus strain wistar) jantan

Jumlah Lapisan Sel Spermatogenik

Perlakuan

Rerata

SD

k-

6.4

6.5

6.9

6.6

6.7

6.1

6.533333

0.249444

k+

1.9

2.2

1.8

2.1

2.2

1.9

2.016667

0.157233

p1

4.6

4.7

3.8

3.7

3.3

3.5

3.933333

0.531246

p2

4.8

4.7

4.8

4.4

4.616667

0.328718

Sumber : Data primer (2015)

36

Rerata jumlah lapisan sel spermatogenik digambarkan secara

diagram dalam bentuk grafik dibawah ini:

37

Berat vesikula seminalis

Tabel 5.3 Uji Normalitas

Shapiro-Wilk
Statistik

Jumlah Data

Sig.

0,982

24

0,923

p > 0,05
sebaran data
Normal

Sumber : Data primer (2015)

Tabel 5.4 Uji homogenity of variance
Variabel

p > 0,05
varian data
sama

Sig

Berat vesikula seminlis

0,488

Sumber : Data primer (2015)

Table 5.5 Uji T-test

Rerata

k-

0,8257

k+

0,3628

Sumber : Data primer (2015)

sig
0,002

Nilai sig 0,002 > 0,05

berarti terdapat perbedaan
yang bermakna pada
rerata berat vesikula
seminalis antara kelompok
k- dan k+.

Tabel 5.6 Uji One Way ANOVA

Kelompok

Rata-rata Berat vesikula seminalis Tikus Putih

Jantan

Kontrol -

0,8257

Kontrol +

0,3628

Perlakuan 1

0,6512

Perlakuan 2

0,8538

Sig.

0,003

Sumber : Data primer (2015)

bahwa nilai sig = 0,003 < p (0,05) yang berarti terdapat
perbedaan yang bermakna pada rerata berat vesikula seminalis
antar kelompok perlakuan.

39

Tabel 5.7 Tukey HSD

(I) kelompok
Kontrol -

Kontrol +

Perlakuan 1

Perlakuan 2

(J) kelompok

Sig.

(J) berbanding (I)

Kontrol +

0,007

Ada perbedaan

Perlakuan 1

0,521

Tidak ada perbedaan

Perlakuan 2

0,996

Tidak ada perbedaan

Kontrol -

0,007

Ada perbedaan

Perlakuan 1

0,133

Tidak ada perbedaan

Perlakuan 2

0,004

Ada perbedaan

Kontrol -

0,521

Tidak ada perbedaan

Kontrol +

0,133

Tidak ada perbedaan

Perlakuan 2

0,395

Tidak ada perbedaan

Kontrol -

0,996

Tidak ada perbedaan

Kontrol +

0,004

Ada perbedaan

Perlakuan 1

0,395

Tidak ada perbedaan

Sumber : Data primer (2015)

sig < 0,05 terdapat perbedaan yang bermakna

Jumlah lapisan sel spermatogenik

Tabel 5.9 Uji Normalitas
p > 0,05
sebaran data
Normal

Shapiro-Wilk
Statistik

Jumlah Data

Sig.

0,923

24

0,068

Sumber : Data primer (2015)

Tabel 5.10 Uji Homogenity of variance
Variabel

Sig

Jumlah
lapisan
spermatogenik

sel

0,139

p > 0,05
varian data
sama

Sumber : Data primer (2015)

Table 5.11 Uji T-test

Rerata

k-

6,5333

k+

2,016

sig

Sumber : Data primer (2015)

41

0,000

Nilai sig 0,000 > 0,05

berarti terdapat perbedaan
yang bermakna pada rerata
jumlah lapisan sel
spermatogenik antara
kelompok k- dan k+

Tabel 5.12 Uji One Way ANOVA

Kelompok

Rata-rata Jumlah lapisan Sel spermatogenik Tikus Putih

Sig.
Jantan

Kontrol -

6,5333

Kontrol +

2,0167

Perlakuan 1

3,9333

Perlakuan 2

4,6167

0,000

Sumber : Data primer (2015)

bahwa nilai sig = 0,000 < p (0,05) yang berarti terdapat

perbedaan yang bermakna pada rerata jumlah lapisan sel
spermatogenik antar kelompok perlakuan.

42

Tabel 5.13 Tukey HSD

(I) kelompok

Kontrol -

Kontrol +

Perlakuan 1

Perlakuan 2

(J) kelompok

Sig.

(J) berbanding (I)

Kontrol +

0,000

Ada perbedaan

Perlakuan 1

0,000

Ada perbedaan

Perlakuan 2

0,000

Ada perbedaan

Kontrol -

0,000

Ada perbedaan

Perlakuan 1

0,000

Ada perbedaan

Perlakuan 2

0,000

Ada perbedaan

Kontrol -

0,000

Ada perbedaan

Kontrol +

0,000

Ada perbedaan

Perlakuan 2

0,025

Ada perbedaan

Kontrol -

0,000

Ada perbedaan

Kontrol +

0,000

Ada perbedaan

Perlakuan 1

0,025

Ada perbedaan

Sumber : Data primer (2015)

sig < 0,05 terdapat perbedaan yang

bermakna
43

Correlations
Dosis
Dosis

Jumlah_LS

Berat_VS

Pearson Correlation
Sig. (2-tailed)
N
Pearson Correlation
Sig. (2-tailed)
N
Pearson Correlation
Sig. (2-tailed)
N

Jumlah_LS Berat_VS
1
.947**
.695**
.
.000
.001
18
18
18
.947**
1
.694**
.000
.
.001
18
18
18
.695**
.694**
1
.001
.001
.
18
18
18

Nilai koefisien
korelasi (r)
0,0 <0,2
0,2 <0,4
0,4 <0,6
0,6 <0,8
0,8 1

Interpretasi
Sangat lemah
Lemah
Sedang
Kuat
Sangat kuat

**. Correlation is significant at the 0.01 level (2-tailed).

p < 0,05 terdapat korelasi yang bermakna/signifikan

r = 0,947 terdapat hubungan yang sangat kuat antara dosis jus buah
semangka merah terhadap peningkatan jumlah lapisan sel spermatogenik
r = 0,695 terdapat hubungan yang kuat antara dosis jus buah semangka
merah terhadap peningkatan berat vesikula seminalis
r (+) hubungan yang searah antara dosis jus buah semangka merah
dengan berat vesikula seminalis dan jumlah lapisan sel spermatogenik,
yang artinya semakin dosis jus buah semangka ditingkatkan, maka semakin
meningkat berat vesikula seminalis dan jumlah lapisan sel spermatogenik.

Pembahasan

kelompok K(-) tidak di berikan perlakuan

kelompok K(+) diberi alkohol 25% 3 ml / kgBB/kali 2

kali sehari p.o selama 15 hari

Rata-rata berat vesikula seminalis = 0,8256

Rata rata jumlah lapisan sel spermatogenik = 6,5333

Rata-rata berat vesikula seminalis = 0,3628

Rata rata jumlah lapisan sel spermatogenik = 2,0166

Penelitian oleh Nugroho, 2009tentang pengaruh pemberian etanol

40% dosis 3 ml/kgBB peroral satu kali sehari dapat menurunkan
rerata berat vesikula seminalis 0,133 gr dan jumlah lapisan sel
spermatogenik 5 lapisan pada tikus putih jantan

P 1 diberi alkohol 25% 3 ml / kgBB/kali 2 kali sehari

dan jus buah semangka 1,8 ml p.o selama 15 hari

Rata-rata berat vesikula seminalis = 0.6511

Rata rata jumlah lapisan sel spermatogenik = 0.8538

P 2 diberi alkohol 25% 3 ml / kgBB/kali 2 kali sehari

dan jus buah semangka 2,4 ml p.o selama 15 hari

Rata-rata berat vesikula seminalis = 3.9333

Rata rata jumlah lapisan sel spermatogenik = 4,6166

Krishnamoorthy et al, Lycopen supplementation prevents

reactive oxygen species mediated apoptosis in sertoli cells
of adult albino rats exposed to polychlorinated biphenyls
dapat meningkatkan sel sertoli pada tikus putih jantan.
likopen mencegah ROS yang dapat menyebabkan lipid
peroksidasi dan apoptosis pada sel sertoli yang di sebabkan
oleh induksi tersebut .

Berat vesikula seminalis

oneway ANOVA sig = 0,003

Terdapat perbedaan yang signifikan terhadap berat vesikula

seminalis antar kelompok
Korelasi pearson = 0,695

- terdapat korelasi yang bermakna/signifikan, hubungan

yang kuat dan searah semakin dosis jus buah semangka
ditingkatkan, maka semakin meningkat berat vesikula
seminalis.

Anindita, 2012 Pengaruh Pemberian Vitamin C Terhadap

Berat vesikula seminalis, Jumlah Sel Leydig, dan Diameter
Tubulus Seminiferus Mencit (Mus musculus L) Jantan Dewasa
yang Diinduksi Monosodium Glutamat pemberian dosis
vitamin C yang semakin besar diikuti dengan peningkatan
berat vesikula seminalis
pada mencit yang di induksi
monosodium glutamat.

Jumlah lapisan sel spermatogenik

oneway ANOVA sig = 0,000

Terdapat perbedaan yang signifikan terhadap jumlah lapisan

sel spermatogenik antar kelompok
Korelasi pearson = 0,947

- terdapat korelasi yang bermakna/signifikan, hubungan

yang sangat kuat dan searah semakin dosis jus buah
semangka ditingkatkan, maka semakin meningkat jumlah
laspisan sel spermatogenik.

Alfy Yulianto, 2013 Pengaruh Pemberian Vitamin E Terhadap

Kualitas
Sperma
Tikus Putih Yang Dipapar Timbal pemberian dosis vitamin E
yang semakin besar diikuti dengan meningkatnya kualitas
48
sperma
tikus putih yang dipapar timbal.

Keterbatasan penelitian

Pada penelitian ini belum didapatkan dosis efektif

untuk
meningkatkan
jumlah
lapisan
sel
spermatogenik tikus yang di papar alkohol.
Penelitian ini tidak mengamati secara mikroskopis
vesikula
seminalis
sehingga
tidak
dapat
mengetahui letak pasti kerusakan sel vesikula
seminalis akibat paparan alkohol.

Kesimpulan
Kesimpulan

Jus Buah Semangka Merah berpengaruh

terhadap berat vesikula seminalis dan jumlah
lapisan sel spermatogenik tikus putih (Rattus
Novergicus Strain Wistar) jantan yang di
induksi alkohol
Berat vesika seminalis tikus putih (Rattus
Novergicus Strain Wistar) jantan yang di papar
alkohol mengalami penurunan yaitu 0,3628
Jumlah lapisan sel spermatogenik tikus putih
(Rattus Novergicus Strain Wistar) jantan yang
di papar alkohol mengalami penurunan yaitu
2,0166.

Jus buah semangka merah (Citrullu vulgaris)

terbukti berpengaruh terhadap berat vesikula
seminalis pada tiku putih (Rattus Novergicus
Strain Wistar) jantan yang dipapar alkohol.
Ditandai dengan bertambahnya berat vesikula
seminalis yaitu perlakuan 1 = 0,6511 dan
perlakuan 2 = 0,8538
Semakin banyak dosis pemberian jus buah
semangka merah (Citrullus vulgaris)
yang
diberikan maka semakin bertambah jumlah
sel leydig.

51

Terdapat hubungan yang kuat antara dosis

pemberian jus buah semangka merah
(Citrullus vulgaris) terhadap berat vesikula
seminalis
dan
jumlah
lapisan
sel
spermatogenik pada tikus putih (Rattus
Novergicus Strain Wistar) jantan yang dipapar
alkohol

52

Saran
Saran

Penelitian lebih lanjut:

Dilakukan

penelitian dengan menggunakan dosis jus

semangka merah yang lebih tinggi untuk mengetahui dosis
yang lebih efektif dalam meningkatkan jumlah lapisan
selspermatogenik tikus putih (Rattus Nurvegicus Strain Wistar)
jantan yang di papar alkohol.
Perlu

dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap vesika

seminalis secara mikroskopis untuk mengetahui kerusakan
akibat paparan alkohol.
Perlu

dilakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan

ekstrak likopen untuk mengetahui efek yang paling baik.

dokumentasi

55

TERIMAKASIH

56