Tujuan dari kajian

Plasmodium falciparum menyebabkan bentuk paling mematikan malarias manusia. Ini adalah parasit
protozoa yang menginfeksi eritrosit manusia dan tahap erythrocytic bertanggung jawab atas semua gejala
dan patologi penyakit. Kritis terhadap infeksi adalah pembentukan membran vacuolar parasitophorous
pada saat masuk dan dalam yang berproliferasi parasit intraselular. Sejak eritrosit kurang mesin endocytic,
cukup mengejutkan bahwa mereka dapat terinfeksi oleh patogen. Ulasan ini merangkum studi terbaru dari
interaksi eritrosit-malaria yang telah memberikan wawasan ke dalam sifat membran eritrosit serta
mekanisme parasit yang merombak eritrosit. Temuan terbaru Tema diungkapkan oleh literatur terbaru
menunjukkan bahwa kedua parasit dan eritrosit komponen mengatur masuknya parasit dan pertumbuhan
intraseluler oleh luas renovasi membran tuan rumah. Peristiwa ini renovasi termasuk invaginasi dari
membran sel inang selama entri parasit yang menghasilkan penciptaan dan pemeliharaan dari vakuola
yang mengelilingi organisme intraseluler, dan pengembangan perubahan antigenik, struktural dan
transportasi selama pengembangan parasit intraselular.
Ringkasan
Implikasi yang yang malaria eritrosit peristiwa renovasi terjadi pada biaya yang signifikan ke host
manusia karena banyak peristiwa virulensi terkait telah dikaitkan dengan patologi penyakit berat. Infeksi
Keywords, Plasmodium falciparum, sel-sel darah merah
pengantar
Malaria adalah penyakit kuno yang terus menyebabkan morbiditas manusia yang sangat besar dan
mortalitas [1]. Siklus hidup parasit penyebab melibatkan beberapa jaringan di dua berbeda tuan
organisme, nyamuk dan manusia. Semua gejala klinis malaria, bagaimanapun, adalah konsekuensi dari
infeksi eritrosit manusia. Pemahaman tentang mekanisme dasar yang mengatur parasit invasi, renovasi,
pertumbuhan dan reinvasion eritrosit dan peristiwa-peristiwa yang kompleks menyebabkan patologi
jaringan dapat menghasilkan diagnosa baru dan perawatan untuk malaria. Di sini, kita fokus pada
pemahaman terbaru eritrosit renovasi selama infeksi malaria.
Invasi eritrosit oleh parasit malaria
Eritrosit manusia dewasa adalah sel tersembuhkan dibedakan. Ini tidak memiliki organel subselular
(seperti inti atau struktur sekretori) dan protein de-novo / biosintesis lipid dan tidak endocytose membran
plasma [2]. Sel darah merah mengandung konsentrasi tinggi dari hemoglobin sitoplasma, menonjol zat
terlarut dan transportasi ion sistem dan submembrane sitoskeleton mampudeformasi, yang mencerminkan

fungsi khusus eritrosit untuk memberikan oksigen ke jaringan dan bertahan bagian diulang melalui
kapiler. Untuk mempertahankan fungsi eritrosit dalam sirkulasi, pembersihan sel merah tua dan produksi
yang baru secara hati-hati dikoordinasikan untuk mengoptimalkan pengiriman oksigen ke jaringan. Entri
parasit ke dalam eritrosit merupakan proses yang kompleks, dinamis [3]. Interaksi awal mungkin
memerlukan protein yang berada di permukaan parasit invasif. The menyerang merozoit selanjutnya
reorients nya 'apikal' end untuk mengarahkan khusus organel apikal sekretori disebut micronemes,
rhoptries dan butiran padat menuju persimpangan invasi. Interaksi awal muncul untuk merangsang cepat
'gelombang' deformasi di eritrosit membran diikuti dengan pembentukan persimpangan sel parasit-inang
yang stabil [3] (lihat Gambar. 1). Invaginasi dari lapisan ganda eritrosit kemudian menghasilkan
engulfment

dari

parasit

dan

pembentukan

tahap

'cincin'

intraseluler

parasit dikelilingi oleh membran vacuolar [4]. Microneme protein tampaknya terlibat dalam mengikat ke
permukaan penentu eritrosit seperti asam sialic host (berlimpah di eritrosit glycophorin A) dan adalah
mungkin bahwa protein micronemal membangun persimpangan sementara rhoptries mendorong
pembentukan vakuola, yang mengarah ke kerjasama antara kedua organel [5].
Meskipun bilayer eritrosit menyelubungi parasit menyerang dalam vakuola baru lahir [6], protein eritrosit
utama seperti band 3, glycophorin A dan protein sitoskeletal tidak terdeteksi pada vakuola ini. Sebaliknya,
penelitian kami [7 -10] dan orang-orang dari Nagao dan rekan [11] telah menunjukkan bahwa eritrosit
deterjen membran tahan protein (DRM) rakit direkrut ke vakuola malaria [10,11]. Protein diisolasi di
DRMS eritrosit telah tersedia vena yang kaya untuk mengidentifikasi setidaknya 12 protein tuan
terinternalisasi ke dalam vakuola plasmodial [10,12] (lihat Gambar. 2). DRMS hanya berisi beberapa
persen dari total protein membran eritrosit massal [8,10]. Hal ini mungkin menjelaskan mengapa
penelitian sebelumnya gagal mendeteksi protein tuan rumah di vakuola malaria. Rakit DRM muncul dari
microdomains membran sel yang mengandung protein G heterotrimeric dan tirosin kinase di wajah
sitoplasma mereka; protein ini bergaul dengan rakit karena mereka cenderung diasilasi [13,14].
Meskipun eritrosit tidak dianggap sangat aktif dalam signaling, G s direkrut ke vakuola malaria [7,8]
dan secara fungsional penting untuk infeksi malaria [9,15]. Peptida dirancang untuk mengganggu
interaksi G s dengan infeksi yang blok reseptor malaria [9,15]. Selain itu, agonis reseptor adrenergik b 2
(b 2 AR) merangsang produksi cAMP dan infeksi malaria, baik yang diblokir oleh antagonis [9,15]. Studi
dari Hines dan rekan kerja [16] menunjukkan bahwa sel darah merah b 2 AR signaling mengatur sifat
perekat dari eritrosit yang diambil dari pasien dengan anemia sel sabit. Pada infeksi malaria, target
signaling diharapkan menjadi kerangka eritrosit, yang harus dibersihkan untuk membentuk vakuola
malaria sitoskeleton bebas. Meskipun katekolamin mengaktifkan b 2 ARS untuk meningkatkan cAMP
dalam eritrosit, bagaimanapun, ini saja tidak menginduksi pembentukan endovacuolar dalam membran

eritrosit (S. Murphy dan K. Haldar, data tidak dipublikasikan). Endovacuolation memerlukan stimulus
dari parasit juga, dan model kerja mengusulkan bahwa protein parasit-dikodekan pasangan langsung ke
eritrosit G s sendiri atau G s -Mengandung kompleks host-rakit yang diinternalisasikan ke dalam vakuola
[17]. Selain parasit ligan, tingkat tuan katekolamin yang tinggi selama periode demam malaria, saat
parasit kemunculan dan re-invasi ke dalam sel merah. Seperti dijelaskan di atas, katekolamin merangsang
jalur sinyal eritrosit yang meningkatkan sel darah merah fleksibilitas, filterability dan deformabilitas [18
-20]. Dengan demikian, dalam hubungannya dengan ligan parasit, host simpatik .Tanggapan sebenarnya
'melunakkan' membran eritrosit, berlaku 'mengundang' parasit ke dalam eritrosit host dan mengemudi
endovacuolation. Sebuah hasil penting dari studi ini telah menyelidiki eritrosit G protein sebagai target
untuk antimalaria [15]. Hal ini dilakukan dengan menyiapkan 'hantu' eritrosit yang signaling fungsi dan
infeksi oleh parasit malaria yang sama dengan eritrosit normal. 'Hantu' eythrocyte ini ketika dimuat
dengan G s peptida yang dirancang untuk memblokir interaksi G s dengan reseptornya, ditemukan
diblokir di b adrenergik signaling agonis-diinduksi. Hal ini secara langsung menunjukkan bahwa eritrosit
G s fungsional dan tanpa keraguan bahwa propranolol, antagonis dari G protein-coupled reseptor
adrenergik b, menghambat aktivitas G s dalam eritrosit. Sistem hantu juga digunakan untuk menunjukkan
bahwa selain menghalangi invasi malaria, penghambatan tuan rumah G pertumbuhan parasit darah
stadium juga menghambat (Gambar. 3). Penghambatan pertumbuhan ini tampaknya karena untuk
menunda dalam tahap 'skizon' terminal. Bersama-sama data ini menetapkan bahwa eritrosit G sinyal
protein yang dibutuhkan untuk masuk dan intraseluler parasit proliferasi dan dengan demikian dapat
menyajikan target antimalaria baru. Ketika digunakan dalam kombinasi dengan yang ada anti malaria
dalam kultur sel, b antagonis propranolol mengurangi IC 50 dan IC 90 konsentrasi obat yang ada terhadap
P. falciparum oleh lima sampai 10 kali lipat. Kombinasi ini efektif dalam mengurangi dosis obat
pada model binatang infeksi juga. Oleh karena itu ada sekarang didirikan bukti dari konsep yang eritrosit
G s antagonisme menawarkan strategi baru untuk melawan infeksi dan dapat digunakan untuk
mengembangkan terapi kombinasi dengan antimalaria yang ada.
Eritrosit renovasi selama pertumbuhan parasit intraseluler
Selain masuk, protein parasit yang disekresikan ke eritrosit tuan rumah selama pengembangan
intraseluler.
Yang terbaik ditandai protein virulensi ini milik keluarga antigen varian adhesins permukaan disebut
P. falciparum eritrosit protein membran 1 (PfEMP1 dikodekan oleh gen VAR) yang telah dikaitkan
dengan baik malaria serebral dan malaria plasenta serta keluarga protein seperti STEVOR, RIFIN, juga
dikenal karena variasi antigenik mereka. Studi (termasuk kita sendiri) telah mengidentifikasi kritis,
dilestarikan, sinyal host-penargetan bantalan yang berbeda, motif 11-amino-asam bersama oleh ini dan

protein virulensi lain yang memungkinkan ekspor mereka ke eritrosit [21,22]. Hal ini menyebabkan
identifikasi (pertama) jalur host-penargetan utama dan 'secretome' di patogen eukariotik (Gambar. 4) [23].
Sinyal ini hadir di lebih dari 400 protein efektor diduga (host-menargetkan 'secretome'), menunjukkan
bahwa modifikasi eritrosit kompleks. Selain itu, heat shock protein parasit-dikodekan (Hsp) dapat
memainkan peran sentral dalam host renovasi [21]. Komposisi keseluruhan dari secretome hostpenargetan mengungkapkan bahwa tiga keluarga antigenik utama P. Falciparum (STEVOR, RIFIN dan
VAR) terdiri sekitar setengah secretome (Tabel 1 [24-27]). Sekitar 200 tambahan 'hipotetis' protein tidak
memiliki penjelasan dikenali selain beberapa pengulangan atau pengkayaan asam amino selektif [21].
Sebagian kecil (25 protein) yang diprediksi oleh penjelasan di-silico untuk memasukkan diduga Hsp,
pendamping, kinase, fosfatase dan protease. Lebih dari 50 gen jelas dinyatakan dalam tahap darah.
Bioinformatika menunjukkan bahwa sinyal ekspor juga hadir di sporozoite (yaitu sirkumsporozoit
protein) dan protein hati stadium (yaitu hati stadium antigen-3), namun bukti eksperimental untuk
fungsinya dalam gen ini belum tersedia. Prediksi awal dari spesies hewan pengerat malaria P. yoelii dan P.
berghei menyarankan secretomes hosttargeting mereka jauh lebih kecil (60 Total diprediksi efektor)
dengan sedikit tumpang tindih (10 orthologues syntenous; sebagian besar hipotesis) dengan P. falciparum
host-penargetan secretome [28]. Mencolok, ada P. falciparum ekspansi -specific protein, misalnya antara
protein yang mengandung HSP DNAJ domain, menunjukkan ekspansi yang mungkin terkait dengan
virulensi dan penyakit infeksi malaria manusia. Analisis awal menunjukkan bahwa th e motif hostpenargetan merupakan sinyal transportasi baru yang berbeda dari contoh-contoh yang terkenal dijelaskan
untuk transportasi protein di membran sel dalam sel mamalia dan bakteri patogen (yaitu Salmonella spp.).
Studi terbaru menunjukkan, bagaimanapun, bahwa polimorfik avirulence (AVR) protein dalam
Oomycetes, seperti Phytophthora infestans (yang menyebabkan kentang kelaparan Irlandia), mengandung
sinyal transportasi fungsional quivalent, meskipun sinyal-sinyal ini berada di luar algoritma prediksi
dirancang untuk mengidentifikasi malaria tuan rumah menargetkan sinyal [29]. Ada dua implikasi penting
sehubungan dengan infeksi malaria. Pertama, algoritma terbaru yang memprediksi malaria secretomes
host-penargetan pada motif linear [21,22] menderita keterbatasan yang signifikan tanpa adanya tiga
dimensi, informasi struktural dari urutan pemimpin yang aktif dan tidak aktif. Kedua, seperti bakteri
patogen, mikroba eukariotik yang berbeda dapat berbagi strategi sekresi patogen.
Aparatus dan mesin untuk ekspor protein virulensi ke permukaan eritrosit

Sejak eritrosit tidak memiliki alat transportasi, diharapkan parasit ekspor kedua mesin dan
kargo untuk transportasi ke dalam sel inang. Untuk permukaan terkena protein seperti PfEMP1, sinyal
host-penargetan dan transmembran dan sitoplasma domain dari protein ini cukup untuk memastikan

pengiriman ke permukaan eritrosit [21,22]. Tingginya kadar PfEMP1, bagaimanapun, telah terbukti
berada dalam struktur sumbing diinduksi di pinggiran eritrosit terhadap infeksi, sedangkan sesedikit 10%
terkena pada permukaan eritrosit yang terinfeksi [30], menunjukkan bahwa celah Maurer mungkin
intermediet di transportasi ke permukaan eritrosit [30]. Studi terbaru dari Cooke dan rekan kerja [31]
menunjukkan bahwa merobohkan penduduk Maurer ini sumbing blok protein PfEMP1 ekspor ke
permukaan eritrosit. Trelka, Taraschi dan rekan kerja [32,33] telah melaporkan bahwa kargo struktur
intraerythrocytic lalu lintas PfEMP1. Knuepfer dan rekan kerja [34] telah menyarankan bahwa PfEMP1
juga diangkut sebagai protein yang larut di eritrosit; ide mereka berdasarkan tingkat difusi fluoresensi
hijau diperoleh di photobleaching studi. Ada bukti yang baik bahwa PfEMP1 diperdagangkan sebagai
protein yang larut dalam parasit [35]. Ekspor protein larut dalam eritrosit yang dijelaskan di atas [34],
namun, bisa juga timbul dari difusi seragam vesikel, dan kontrol yang luas tambahan diperlukan untuk
mengkonfirmasi bahwa photobleaching sendiri tidak mengubah tarif diukur dari transportasi melalui
pencairan sitoplasma meskipun penggunaan agen pelindung (dan terutama di lingkungan yang kaya
hemoglobin dari eritrosit). Sebuah konsep yang menarik adalah bahwa parasit reconstitutes mesin sekresi
klasik dalam eritrosit inang enucleated. Secretome host-menargetkan diprediksi, bagaimanapun, gagal
untuk mengungkapkan ekspor dilestarikan, komponen parasit-dikodekan sekresi eukariotik (seperti jerat,
Snaps, Rabs, dll). Tidak ada bukti baik dari data yang fungsional atau urutan primer menunjukkan bahwa
faktor-faktor ini diangkut ke eritrosit. Antibodi heterolog faktor-faktor seperti COPII, N-ethylmaleimidesensitif faktor (NSF) dan Sar1p telah ditemukan struktur label dalam eritrosit terinfeksi [36-38], tetapi
tingkat yang lebih tinggi dari bukti memvalidasi fungsi mereka dalam eritrosit tidak tersedia . Meskipun
demikian, masih terlalu dini untuk menyingkirkan keterlibatan 'sekresi klasik' dimediasi oleh faktor-faktor
yang diekspor oleh mekanisme yang belum diketahui eritrosit. Ekspansi selektif protein yang
mengandung pendamping panas domain kejutan DNAJ di host-penargetan secretome P. falciparum
menunjukkan bahwa protein ini dapat mengatur mekanisme virulensi terkait dengan spesies malaria ini.
Beberapa, seperti antigen cincin terinfeksi permukaan eritrosit (RESAS) dan dewasa eritrosit permukaan
antigen (MESA), tampaknya untuk melindungi kerangka host dari sengatan panas [34] dan mengikat
kompleks junctional di membran eritrosit [39]. Orang lain mungkin langsung meningkatkan efisiensi
transportasi antigen. Banumathy dan rekan kerja [40] telah menunjukkan bahwa kompleks tuan HSP70
dengan menargetkan sejumlah kargo seperti PfHRPI / kaya histidin protein knob-terkait (KAHRP) [40].
Eritrosit tidak memiliki sebuah HSP40, yang sering dibutuhkan untuk pasangan dengan HSP70 untuk
memfasilitasi hubungan substrat dan aktivitas ATPase [41]. PFE0055c protein parasit adalah prediksi
host-penargetan parasit secretome HSP40. Hal itu juga diprediksi akan di apikoplas [42], tetapi sekarang
terbukti sebenarnya diekspor ke eritrosit [21]. Penelitian masa depan akan mengungkapkan bagaimana
gen ini serta diekspor Hsp dan DNAJ protein mungkin lain mengatur transportasi dari P. falciparum

antigen dalam virulensi renovasi erythrocytes.Thus manusia, selain antigen permukaan diekspor, mesin
yang sebenarnya yang mengatur transportasi juga mungkin penting untuk patologi malaria karena
mengatur faktor-faktor penentu ekspor virulensi pada permukaan eritrosit. Pendamping seperti Hsp secara
signifikan dapat mempengaruhi efisiensi ekspresi antigen dengan bertindak di lokasi keluar hostpenargetan atau celah-celah yang Maurer ini. Selanjutnya, sekarang ditetapkan bahwa merobohkan
penduduk protein sumbing Maurer secara signifikan mengubah ekspor protein ke host [31]. Ini
memberikan bukti persuasif bahwa perubahan baik di kargo antigenik dan aparat transportasi dapat
mempengaruhi virulensi.
Kesimpulan
Perkiraan saat protein eritrosit rakit yang terlibat dalam pembentukan vakuola malaria menunjukkan
bahwa sekitar 15 -120 kemungkinan akan terlibat dalam proses. Sebaliknya, perkiraan protein parasit
yang terlibat dalam renovasi eritrosit selama invasi dan pertumbuhan intraseluler melebihi 400. Hal ini
menunjukkan bahwa parasit menggunakan beberapa strategi untuk membangun infeksi. Patologi penyakit
apalagi seperti malaria cerebral mungkin terkait dengan beberapa faktor parasit, menggambarkan
mengapa patologi yang sangat bervariasi dan mengapa penyerapan terlihat dalam sistem organ multiple
[43,44].