PENGARUH TINGKAT KEMATIAN EMBRIO PADA SAPI DI KEBERHASILAN PROGRAM SINKRONISASI ESTRUS

ABSTRAK Maturasi oosit (jurnal yang harus dibuka) Kegagalan reproduksi dalam hasil inseminasi pada ternak dapat mempengaruhi pembuahan yang buruk dan kelangsungan hidup embrio. Produksi susu dan daging sapi dari sapi yang sedang laktasi dipengaruhi oleh tekanan panas, ketika fertilisasi hanya 55% pembuahan terjadi, keberhasilan kebuntingan ditentukan oleh kelangsungan hidup embrio dan foetus. Kegagalan kebuntingan ditandai dengan kematian embrio dini, yang terjadi sebelum periode corpus luteum (CL), pemeliharaan sapi pada hari 15-17 dari siklus, dan kematian embrio akhir, yang terjadi dari pemeliharaan CL sampai akhir tahap diferensiasi, pada 42 hari kebuntingan. Setelah 50 hari kebuntingan, kegagalan kebuntingan dan kematian foetus jarang terjadi. Kegagalan kebuntingan paling banyak terjadi sebelum masa pemeliharaan CL, tetapi pada sapi perah dalam memproduksi susu yang tinggi, kerugian besar terus terjadi hingga 42-56 hari setelah inseminasi. Faktor yang mempengaruhi kegagalan kebuntingan pada ternak, seperti kualitas oosit yang buruk sehingga tidak mampu bersatu dengan sel-sel epitel endometrium dalam perkembangan embrio, lingkungan uterus yang tidak baik, agen penyakit menular dan kekurangan gizi mengakibatkan kematian embrio. Baru-baru ini, penelitian telah menunjukkan bahwa anovulasi atau anestrus, status metabolisme hewan, beberapa bahan makanan, serta terjadinya penyakit, predisposisi sapi mengalami embrionik dan foetus mati. Meskipun beberapa protokol inseminasi mungkin berdampak pada kelangsungan hidup embrio, ketika waktunya inseminasi buatan telah diterapkan dengan benar, belum mempengaruhi kematian embrio atau foetus pada sapi. Peningkatkan program dalam reproduksi di masa depan harus fokus pada meminimalkan kematian embrio dengan mengoptimalkan angka konsepsi pada sapi perah. 2004 Elsevier BV All rights reserved

Pendahuluan Pendapatan dari peternakan susu dan daging sapi secara langsung tergantung pada efisiensi reproduksi karena mempengaruhi produksi susu dan jumlah anak sapi lahir. Keguguran dapat memiliki efek menghancurkan pada keberhasilan ekonomi pada unit susu dan daging sapi. Di peternakan sapi, diperkirakan bahwa setiap kegagalan kebuntingan dapat mengakibatkan hilangan hasil dan kerugian rata-rata US $ 640,00 ( Thurmond et al, 1990). Pada ternak sapi, kegagalan kebuntingan merupakan suatu kerugian ekonomi yang besar, karena sebagian besar faktor pendapatan ditentukan oleh jumlah anak sapi yang dijual. Terlepas dari peningkatan pengetahuan tentang biologi reproduksi sapi, efisiensi reproduksi terus menurun dalam kawanan susu. Konsolidasi terus menerus pada produksi unit, kecenderungan untuk ternak besar dan ternak kecil di antara negara cenderung membuat ternak lebih rentan terhadap agen infeksi yang berdampak pada reproduksi seperti Bovine virus diareal, Neospora caninum, Leptospira spp, dan lainnya. Zavy (1994) menyatakan bahwa angka kematian embrio pada sapi merupakan sumber utama kerugian ekonomi bagi produsen ternak. Review artikel oleh Zavy (1994) menyatakan karakteristik kekayaan literatur waktu dan tingkat kegagalan kebuntingan pada sapi telah umum terjadi, meskipun sebagian besar penyebab tetap tidak jelas. Dengan munculnya ultrasonografi, diagnosis akurat kebuntingan sedini mungkin 25 hari setelah inseminasi buatan pada sapi ( Fricke, 2002), sehingga memudahkan studi kematian embrio akhir setelah periode kebuntingan. Studi memanfaatkan transfer embrio dan diagnosis awal kehamilan menunjukkan bahwa kurang dari 50% dari embrio layak bunting dengan 27-30 hari setelah ovulasi pada sapi perah laktasi ( Drost et al, 1999; Sartori et al, 2003), sedangkan pada 69 ekor sapi dan 83% dari embrio beku dan segar, masing-masing, bunting pada hari ke 37 ( Spell et al, 2001).

1.

Karakterisasi kegagalan kebuntingan

Dalam rangka untuk meningkatkan standarisasi reproduksi sapi, Komite Bovine Reproduksi Nomenklatur (1972) menetapkan bahwa periode kebuntingan embrionik cenderung dari konsepsi sampai akhir tahap diferensiasi, sekitar 42 hari kebuntingan, dan bahwa periode foetus meluas dari hari kebuntingan 42 pada perkembangan selanjutnya. Dua sumber kegagalan kebuntingan ada setelah pembibitan, kegagalan perawatan dan kegagalan kebuntingan. Ketika interestrus atau interval interovulatory diperluas pada hewan, itu biasanya menunjukkan kerusakan embrio yang terjadi di sekitar periode pemeliharaan korpus luteum (CL) (Van Cleeff et al, 1991; Humblot, 2001). Percobaan secara terus menerus pada tingkat konsentrasi progesteron dalam darah menunjukkan bahwa kematian embrio pada waktu luteolysis pemeliharaan CL tertunda, dan diperpanjang Interval interestrus ( Humblot, 2001). Oleh karena itu, ketika kematian embrio mendahului luteolysis, regresi luteal tertunda setidaknya 3 hari

setelah berakhirnya kebuntingan ( Kastelic et al., 1991). Namun, ketika luteolysis mendahului, dan mungkin menyebabkan kematian embrio, kembali pada fase estrus yang tergantung pada tahap perkembangan folikel. Humblot (2001) menyatakan bahwa luteolysis dan kembali pada fase estrus sebelum hari 24 mungkin terkait dengan kematian embrio dini tetapi, jika CL dipertahankan dan kembali pada fase estrus yang tertunda di luar hari 24, itu bisa menunjukkan kematian embrio terjadi setelah hari ke-16 kebuntingan. Dengan demikian, kegagalan kebuntingan sebelum hari 24 menunjukkan kematian embrio dini dan antara hari 24 dan 42-50, mengindikasikan kematian embrio akhir. Kegagalan kebuntingan terdeteksi setelah hari 50 kematian foetus.

1.1. Perawatan dan kematian embrio dini Pada percobaan awal oleh Ayalon (1978), menunjukkan bahwa perawatan yang biasanya tinggi pada sapi (~ 95%), menunjukkan bahwa kematian embrio sebagian besar pada reproduksi sapi akibat pemborosan inseminasi (Zavy, 1994). Baru-baru ini, penelitian pada sapi laktasi menunjukkan bahwa tingkat rata-rata 75,0% pembuahan, dengan kisaran dari 60 sampai 100%. Rendahnya tingkat fertilisasi untuk sapi laktasi dalam studi oleh Breuel et al. (1993) mungkin terkait dengan inseminasi dilakukan postpartum dini, ketika anovulasi dan anestrous yang lazim pada sapi. Terlepas dari data yang terbatas untuk menunjukkan bahwa sapi berada pada postpartum dini, adalah pembuahan pada tingkat menyusui sapi tidak setinggi seperti yang diduga sebelumnya dan rata-rata 75,0% pada studi Breuel et al. (1993) mewakili tingkat fertilisasi pada sapi postpartum laktasi mengalami inseminasi buatan. Pada sapi non laktasi, perawatan rata-rata 98,6%, dengan kisaran dari 94,0 sampai 100%, yang lebih tinggi dan, lebih penting lagi, kurang bervariasi dari pada sapi laktasi. Data (Maurer dan Chenault, 1993; Dunne et al, 2000) menunjukkan keberhasilan pembuahan tinggi, rata-rata 88,0%, dengan kisaran antara 75,0 dan 100%. Data ini menunjukkan bahwa menyusui dapat mengerahkan efek negatif pada fertilisasi sapi potong. Pada sapi perah, perawatan yang sama antara sapi laktasi dan sapi non laktasi dengan rata-rata 76,2% (berkisar 55,3-87,8%) dan 78,1% (berkisar 58,0-98,0%), masing-masing pada (Tabel 2). Beberapa faktor yang mempengaruhi keberhasilan pembuahan pada ternak, namun stres akibat panas tampaknya memiliki dampak terbesar (Sartori et al., 2002). Jelaslah bahwa stres termal memiliki berdampak lebih besar pada kesuburan sapi dengan produksi lebih tinggi (Hansen, 2002), dan ini mungkin dimediasi oleh perawatan yang lebih rendah dan kegagalan kebuntingan yang lebih tinggi. Bahkan, Hansen (2002) diindikasikan bahwa embrio yang dihasilkan dari fertilisasi oosit kualitas baik memiliki probabilitas rendah. Hal ini tidak mengherankan bahwa tingkat konsepsi pada hari 27-31 setelah inseminasi buatan biasanya 35-45% pada sapi perah.

Pada hari 5-6 pasca inseminasi, hanya 65% dari sel telur yang dibuahi dianggap layak ( Tabel 2), sebagian menjelaskan konsepsi rendah pada sapi perah laktasi di Amerika Serikat ( Lucy, 2001; Stevenson, 2001). Hal ini diketahui bahwa sapi mengalami penurunan kesuburan ketika nutrisi untuk pemeliharaan dan menyusui melebihi asupan dan menyebabkan hilangnya kondisi tubuh yang baik. Pada sapi perah, partisi nutrisi terhadap sintesis susu mempengaruhi reproduksi sebagian karena mengurangi kualitas dan kelangsungan hidup embrio (Sartori et al, 2002). Tingkat kelayakan embrio dari studi sapi perah laktasi dan non laktasi diringkas, sekitar 50,0, 57,9, dan 71,9 % dari potensial kebuntingan sapi laktasi, non laktasi dan sapi nulipara, masing-masing, yang layak dengan hari 5-6 pasca inseminasi (Tabel 2). Kelangsungan hidup embrio dikumpulkan dari sapi yang laktasi, non laktasi, dan nulipara dengan nilai rata-arat 57.5, 79,5, dan 77.6% ( Tabel 1), masing-masing pola seperti pada sapi perah. Namun, ketika sapisapi yang laktasi kondisi tubuh pulih dan membangun kembali tingkat konsepsi yang sama dengan sapi nulipara dan berkisar 50-65%.

1.2 Kematian embrio akhir Munculnya ultrasonografi dan metode lain untuk diagnosis awal kebuntingan memiliki kemungkinan untuk menandai waktu dan tingkat kematian embrio akhir pada sapi (Tabel 3-5). Humblot (2001) dievaluasi kematian embrio pada sapi Holstein pada 44 ternak di Perancis dan mengamati bahwa kematian embrio dini dan akhir setelah pertama inseminasi buatan masingmasing 31,6, dan 14,7%. Kematian embrio akhir setelah 27 hari kebuntingan berkisar dari 3,2% pada sapi memproduksi 6000-8000 kg susu per tahun di Irlandia ( Silke et al., 2002) untuk sampai menjadi 42,7% pada sapi memproduksi lebih tinggi di bawah tekanan panas (Cartmill et al., 2001b). Ekstensif kematian embrio diamati pada sapi perah ( Tabel 3), dan data dari data ini menunjukkan tingkat kegagalan kebuntingan antara 30 dan 45 hari usia kebuntingan dari 0,85% per hari, atau sekitar 12,8%, lebih tinggi dari pada yang diamati untuk sapi ( Beal et al, 1992).

1.3 Kematian foetus Pada sapi, kematian foetus biasanya jarang terjadi dibandingkan dengan kematian embrio dini dan akhir, dan penyebab kematian foetus biasanya belum ditentukan. Laboratorium diagnostik veteriner dari University of California Davis merangkum jumlah dan penyebab abortus pada foetus ternak. Untuk tahun 1998-2001, dari 1486 foetus yang abortus pada sapi perah diserahkan ke laboratorium diagnostik 55,9% memiliki lesi dan agen menular terkait dengan abortus, sedangkan 44,1% adalah penyebab belum ditentukan, menunjukkan bahwa hampir setengah dari kematian foetus pada sapi perah tidak disebabkan oleh agen infeksi yang dikenal. Studi dengan sapi perah dan sapi menunjukkan bahwa kematian foetus adalah variabel

dan dikacaukan oleh hari ketika kebuntingan pertama kali didiagnosis. Ketika didiagnosis sebelum 35 hari kebuntingan. 2. Faktor yang terkait dengan kegagalan kebuntingan

2.1. Oosit kualitas dan folikel persisten Pada sapi, konsentrasi progesteron selama siklus estrus sebelum inseminasi mendorong peningkatan frekuensi LH menghasilkan folikel dominan persisten (Inskeep, 2002, Jembatan dan Fortune, 2003 ). Pada sapi, lebih besar pada pra-ovulasi, yang mempertahankan folikel dominan untuk jangka waktu sebelum lonjakan LH, dikurangi tingkat konsepsi yang lebih kecil dibandingkan dengan pra-ovulasi folikel (36% versus 91%; Breuel et al, 1993). Paparan oosit untuk frekuensi tinggi, pada puncak LH menginduksi pembelahan meiosis ( Revah dan Butler, 1996; Mihm et al, 1999), biokimia, dan perubahan morfologi pada oosit dalam folikel persisten mengurangi kesuburan pada sapi (Mihm et al, 1994;. Inskeep, 2002) karena kematian embrio sebelum tahap 16-sel (Ahmad et al, 1995). Oleh karena itu, memperpanjang periode folikel dominan baik oleh progestin eksogen (Mihn et al., 1994) atau ketika sapi memiliki siklus dengan dua gelombang pertumbuhan folikel (bukan dari tiga gelombang pertumbuhan folikel) (Townson et al, 2002), pada tingkat kesuburan. Untungnya, kehadiran folikel persisten tidak mengubah potensi perkembangan oosit dari folikel yang lebih kecil, yaitu jika folikel persisten regresi, kesuburan normal kembali (Smith dan Stevenson, 1995).

2.2. Durasi fase luteal proestrus dan selanjutnya Peters dan Pursley (2003), evaluasi efek GnRH akhir protocol ovulasi (hari 0 GnRH, hari 7 PGF 2 , Hari 9 GnRH, 12-16 hari inseminasi buatan) pada ovulasi folikel ukuran, fungsi luteal berikutnya, dan tingkat kebuntingan pada sapi perah laktasi. Administrasi GnRH pada saat PGF 2 suntikan atau 2 hari kemudian tidak mempengaruhi tingkat sinkronisasi dan regresi CL. Namun, sapi yang menerima GnRH secara bersamaan dengan PGF 2 pengobatan berovulasi folikel yang lebih kecil dan memiliki tingkat kebuntingan yang lebih rendah (14,7% dibandingkan 31,3%). Ketika GnRH diberikan pada hari 0, 12, 24 dan 36 setelah PGF yang 2 pengobatan, tingkat sinkronisasi adalah sama untuk semua perawatan empat namun sapi lebih menerima GnRH di hari ke 0 mengalami fase luteal pendek dibandingkan dengan yang menerima GnRH pada 36 jam setelah PGF 2, dengan peningkatan linear tingkat kebuntingan sebagai interval dari PGF 2 untuk GnRH meningkat. Mengubah ukuran folikel ovulasi dengan memanipulasi interval dari deviasi folikel- ovulasi yang diproduksi sehingga meningkatkan fase luteal pendek dan mengurangi angka kebuntingan pada sapi perah (Vasconcelos et al, 2001.). Terjadinya peningkatan siklus pendek dan mengurangi tingkat kebuntingan pada sapi dengan ovulasi folikel kecil atau dengan proestrus singkat mungkin terkait dengan paparan estradiol sebelum ovulasi. Studi terbaru oleh Mussard et .al pembedahan mengurangi panjang proestrus

menginduksi siklus berikutnya luteal pendek dan mengurangi angka kebuntingan terlepas dari ukuran folikel ovulasi (folikel 10 mm), bahkan ketika menerima embrio sapi yang layak pada hari ke 7 dari siklus. Ketika sapi-sapi menjadi sasaran Co-Synch waktunya AI protokol (hari 0 GnRH, hari 7 PGF 2 , Hari 9 GnRH dan waktunya AI) atau diinseminasi pada deteksi estrus spontan ( Perry et al, 2003.) , embrio atau foetus kelangsungan hidup berkurang ketika folikel <11 mm diinduksi ovulasi dengan GnRH, tetapi tidak saat ovulasi spontan. Ada kemungkinan bahwa folikel kecil berovulasi secara spontan adalah jumlah yang cukup kompeten dan dikeluarkan dari estradiol selama proestrus, sedangkan ovulasi folikel kecil diinduksi dengan GnRH tidak cukup matang. Memadai proestrus mungkin mengurangi paparan estradiol sebelum ovulasi, yang telah terbukti menghasilkan respon dari endometrium pada oksitosin dan pelepasan prostaglandin yang lebih besar ( Mann dan Lamming, 2000). Ahmadzadeh et al. (2003) obsevasr bahwa 0,25 mg estradiol Cypionate diberikan dengan GnRH akhir Ovsynch yang cenderung untuk meningkatkan tingkat konsepsi dalam sapi-sapi (68% versus 57,5%,. P = 0 14). Selain itu, merangsang ovulasi dengan 1 mg cypionate estradiol dalam protokol Heatsynch meningkatkan tingkat konsepsi dibandingkan dengan sapi diinseminasi pada fase estrus (Cerri et al., 2003).

2.3. Progesteron dan lingkungan uterus Secara suboptimal antara konsepsi dan sel epitel endometrium mengarah untuk sekresi PGF 2 dan dimulainya kembali siklus ovulasi dengan penghentian kebuntingan (Thatcher et al, 1986; Mann dan Lamming, 2001; Thatcher et al, 2001). Sekresi progesteron oleh CL sangat penting untuk merancang lingkungan histotrophic untuk kesuburan dari konsepsi. Memang progesteron dan estradiol bertindak sebagai regulator sistemik yang mengarah untuk bagian lokal waktunya oviductal dan endometrium dan memprogram uterus untuk meregresikan CL jika ada suboptimal komunikasi antara konsepsi dan uterus melalui sekresi PGF 2 (Robinson et al, 2001). Salah satu komponen penting dari mekanisme luteolitik adalah peri-estrus reseptor induksi estradiol dan oksitosin endometrium. Paparan progesteron membangun kembali kolam lipid dari fosfolipid endometrium yang diperlukan untuk selanjutnya sentesis PGF 2. Dengan lama paparan progesteron regulasi bawah reseptor progesteron sehingga reseptor estradiol endometrium yang penting untuk induksi reseptor oksitosin (Robinson et al., 2001). Namun demikian, efek yang paling penting dari progesteron dalam memblokir luteolysis dengan meningkatkan konsepsi. Pengembangan dan kemampuannya untuk mensekresi interferon, yang menghasilkan penurunan angka konsepsi (Darwash dan Lamming, 1998). Meskipun tidak ada konsentrasi progesteron pramapan menentukan keberhasilan kebuntingan (Mann dan Lamming, 1999), konsentrasi progesterone pada hari 4 dan 5 setelah perkawinan (tidak lebih) yang berkorelasi dengan luminal uterus konsentrasi interferon-pada hari 16 (Wathes et al., 2003). Karena peran utama perogesteron dalam merangsang produksi protein endometrium memiliki beberapa faktor pertumbuhan (Geisert et al, 1992), progesteron tambahan selama 4 hari pertama setelah inseminasi buatan meningkatkan pengembangan morfologi dan aktivitas biosintesis dari 14 hari konseptus (Garret et al., 1998). Mann dan Lamming (1999) menyatakan bahwa progesteron

tambahan memikili efek dengan tingkat kesuburan konsepsi meningkat bila diberikan sebelum hari 6 setelah inseminasi buatan sapi perah laktasi. Secara kolektif, data ini menunjukkan bahwa ketersediaan progesteron pada awal fase diestrus dapat menguntungkan angka konsepsi dan kelangsungan hidup embrio.

2.4. Pemeriksaan kebuntingan (maintenance CL) Sel-sel mononuklear dari trofektoderm dalam tahap awal pembelahan merupakan untuk produksi dan sekresi interferon (Thatcher et al., 2001). Hal ini pertama kali diproduksi oleh konseptus pada hari ke 12 dari kebuntingan karena ekspresi interferon trofoblas gen (Farin et al, 1990), namun konsentrasi dalam lumen uterus kadar tertinggi hanya pada hari 15-17 kebuntingan. Efek antiluteolytic interferon-hasil dari penghambatan ekspresi endometrium reseptor oksitosin dan mungkin melalui mekanisme transduksi setelah oksitosin mengikat reseptor pada sel-sel endometrium dan menghambat episodik rilis PGF 2 (Demmers et al., 2001) Perkembangan embrio dan keterbelakangan trofektoderm bertanggung jawab pada luteolysis dini. Oleh karena itu, beberapa kematian embrio pada sapi diperkirakan akan dimediasi oleh ketidakmampuan embrio untuk menekan kaskade luteolitik selama periode pemeliharaan CL ( Thatcher et al., 1986). Hal ini masih belum jelas apa yang mempertahankan CL karena itu, kebuntingan setelah interferon menurun. Penelitian Silva et al. (2000) menunjukkan bahwa CL yang dipertahankan selama pengakuan induk dari kebuntingan mampu pengolahan PGF 2 untuk metabolit (PGFM). Para penulis menunjukkan bahwa 13 hari CL dari domba embrio layal memiliki konsentrasi yang lebih besar dan aktivitas dehidrogenase prostaglandin (PGDH) dibandingkan hari 13 CL dari domba siklik. Ada bukti kuat bahwa kegagalan konseptus untuk menghasilkan sinyal luteotropic, atau mungkin kegagalan CL untuk merespon luteotropins berkontribusi pada kematian embriodini pada sapi (Thatcher et al, 1986., 2001 . Pengobatan sapi dengan oksitosin pada hari 5-8 setelah inseminasi buatan mengurangi kebuntingan 80-33%, tetapi efek ini dikembalikan ketika agen anti-prostaglandin diberikan bersamaan dengan oksitosin (Leemaster et al., 1999). Elli et al. (2001) menunjukkan bahwa pemberian agen antiprostaglandin pada transfer embrio meningkatkan tingkat kebuntingan (82% versus 56%). Data ini menunjukkan bahwa menekan sekresi PGF 2 dalam pembentukan dan pemeliharaan kebuntingan pada sapi dengan mengurangi angka kematian embrio.

2.5. Stres akibat panas Paparan suhu lingkungan yang tinggi pada pembahasan ini adalah steroidogenesis dan kelangsungan hidup oosit (Zeron et al, 2001), mengurangi kualitas oosit (Hansen et al., 2002), dan mengurangi tingkat fertilisasi (Sartori et al, 2002: Tabel 2 ). Al-Katanani et al. (2002) pengamatan penurunan kompetensi oosit selama stres panas. Chebel et al. (In press) diamati bahwa sapi terkena stress sebelum inseminasi buatan adalah 31-33% lebih kecil

kemungkinannya untuk bunting dibandingkan yang tidak terpapar termal stres. Drost et al. (1999) menunjukkan bahwa transfer embrio yang dihasilkan in vivo pada sapi terkena suhu thermoneutral meningkatkan angka kebuntingan sapi menekan panas. Sapi penerima dibandingkan dengan musim panas sapi stres sebelum inseminasi buatan. Cartmilletal. (2001b) mengamati keguguran sangat tinggi (42,7%), jauh lebih tinggi dari pada sapi yang diamati pada usia yang sama dari kebuntingan tidak terkena stres panas ( Tabel 3). Ini Hasil menunjukkan efek negatif dari stres panas pada kualitas oosit, yang kompromi fertilisasi dan perkembangan embrio awal, sehingga lebih memperburuk kegagalan kebuntingan.

2.6. Protokol inseminasi Berbagai macam program hormonal yang tersedia untuk mensinkronkan estrus atau ovulasi, sehingga mengoptimalkan tingkat layanan. Lucy (2001) menunjukkan bahwa kebanyakan studi mengevaluasi akhir kematian embrio pada sapi yang terlihat hewan mengalami protokol waktu inseminasi buatan. Berdasarkan hasil dari Smith dan Stevenson (1995), disarankan bahwa sapi diinseminasi mengikuti estrus spontan mungkin memiliki nilai yang lebih rendah kematian embrio dari pada berikut inseminasi yang terlalu besar (Lucy, 2001). Jangka panjang pengobatan dengan progestin untuk kesuburan sinkronisasi estrus lebih rendah karena konsepsi berkurang dan kegagalan kebuntingan meningkat, yang telah dikaitkan dengan ovulasi folikel (Ahamad et al, 1995; Inskeep, 2002). Namun, pengobatan jangka pendek dengan progestin (<8 hari) juga telah mengakibatkan konsepsi berkurang pada sapi bila dibandingkan dengan sapi diinseminasi mengikuti estrus spontan (Xu et al., 1996, Chenault et al, 2003). Penelitian pada sapi perah laktasi di Selandia Baru menunjukkan bahwa pengobatan tunggal dengan PGF 2 selama tingkat konsepsi diestrus ditingkatkan (69% dibandingkan 60%) dibandingkan dengan kontrol yang tidak diobati (Macmillan et al, 2003). Namun, 2 suntikan PGF 2 menurunkan angka konsepsi 13 hari terpisah dibandingkan dengan sapi yang tidak diobati (61,1% dibandingkan 70,5%), dengan pengurangan diamati konsepsi ketika kedua PGF 2 diberikan selama (5-9 hari) awal diestrus (Xu et al., 1997). Pada sapi, tambahan progesteron membangun kembali angka konsepsi normal. Oleh karena itu, protocol sinkronisasi diestrus dengan tumbuhnya folikel dominan pada lingkungan progesteron yang rendah mungkin mengurangi angka konsepsi, mungkin sebagai akibat dari peningkatan kematian embrio dini dan akhir. Macmillan et al. (2003) mengindikasikan bahwa waktu protocol inseminasi buatan pada sapi perah menggunakan standar GnRH dengan dosis (100 g gonadorelin) untuk menginduksi ovulasi dapat menurunkan nilai konsepsi karena CL tidak kompeten ketika folikel kecil diovulasi, dan disarankan bahwa sapi diinseminasi mengikuti protokol Ovsynch yang memiliki siklus lebih pendek. Namun, interval antar-inseminasi singkat pada sapi waktu diinseminasi mungkin disebabkan oleh kurangnya sinkronisasi ovulasi pada inseminasi buatan, yang merupakan 84-87% pada sapi di Ovysnch tersebut (Fricke et al, 1998; Vasconcelos et al, 1999). dan 86% untuk Heatsynch (Galvo et al, in press). Oleh karena itu, 13-16% dari sapi yang tidak disinkronkan karena kurangnya regresi CL atau ovulasi akan mengubah interval antarinseminasi.

Kegagalan kebuntingan pada 6 penelitian yang diterbitkan dengan sapi diinseminasi mengikuti waktu inseminasi buatan adalah 11,2%, yang sama dengan sapi diinseminasi pada deteksi estrus (12,7%; Tabel 6) . Dalam lima dari enam penelitian, keguguran tidak diubah oleh protocol inseminasi. Dalam satu studi (Cartmill et al., 2001b), kecenderungan peningkatan keguguran diamati dengan waktu inseminasi buatan, meskipun protokol inseminasi keguguran adalah sangat tinggi (42,7%), mungkin terkait dengan stres panas selama penelitian. Meskipun kurangnya bukti bahwa waktu inseminasi buatan menyebabkan kematian embrio meningkat pada sapi, mungkin bahwa protocol sinkronisasi yang membatasi panjang proestrus atau hasil dalam kompeten folikel mungkin membahayakan kesuburan dengan meningkatkan kegagalan kebuntingan.

2.7. Resinkronisasi sapi yang tidak bunting Ketika CIDR dimasukkan pada hari 14 1 setelah inseminasi buatan dan dilepas 7 hari kemudian, tingkat kebuntingan untuk pendaftaran pra inseminasi buatan berkurang dalam jumlah yang tinggi sapi perah (Chenault et al., 2003). Namun, dalam memproduksi sapi rendah, sinkronisasi ulang dengan memasukkan CIDR dari hari 16 sampai 21 setelah inseminasi buatan tidak berdampak negatif pada kesuburan (Xu et al., 1997). Setelah diamati bahwa kehadiran iritasi vagina yang parah pada sapi yang diberikan CIDR kemudian disisipan dan di kaitkan dengan tingkat konsepsi berkurang dalam pra-dan pasca-pengobatan inseminasi buatan (Chenault et al., 2003). Pengobatan dengan GnRH yang dilakukan pada hari 21 setelah inseminasi buatan, ketika status kebuntingan belum ditentukan, tidak berpengaruh pada tingkat kebuntingan dan keguguran pada pra-perlakuan inseminasi buatan dan menghasilkan tingkat kebuntingan yang sama sinkronisasi pada sapi perah (Chebel et al., 2003a). Fricke et al. (2003) mengamati bahwa pengobatan dengan GnRH pada hari 19 setelah inseminasi buatan menghasilkan angka kebuntingan yang sama dan kegagalan kebuntingan pada inseminasi buatan sebelom pendaftaran, namun tingkat kebuntingan yang disinkronisasi lebih rendah dari pada sapi yang diobati pada hari 26 dan 33. Pada sapi dengan dua gelombang perkembangan folikel, injeksi GnRH pada hari 19 diharapkan dapat menghasilkan ovulasi dan rekrutmen gelombang folikuler baru. Namun, mengubah kebuntingan, perkembangan dan melemahkan pertumbuhan folikel ovarium yang dominan dalam bantalan CL (Thatcher et al., 1991). Oleh karena itu, ada kemungkinan bahwa pada sapi bunting mengalami kematian embrio dini dan akhir, perkembangan folikel diubah dan respon ovulasi terhadap GnRH pada hari 19 kebuntingan mungkin dipertimbangkan pada gilirannya, dapat mempengaruhi kesuburan setelah protokol Ovsynch. Data menunjukkan bahwa inisial GnRH harus digunakan setelah 20 hari setelah inseminasi buatan sebelumnya untuk sinkronisasi ulang dari sapi bunting untuk mencapai tingkat kebuntingan.

2.8.Skor kondisi tubuh Lpez-Gatius et al. (2002) menunjukkan bahwa penurunan 1 unit dalam skor kondisi tubuh (BCS, 1-5 skala) dari melahirkan sampai 30 hari pasca melahirkan meningkatkan rasio yang aneh (OR) untuk kegagalan kebuntingan dengan 2,41 kali lipat. Demikian pula, Silke et al. (2002) mengamati bahwa sapi kegagalan bunting 1 unit di BCS dari hari 28-56 kebuntingan mengalami peningkatan 3,2 kali lipat dalam OR untuk kegagalan kebuntingan pada periode yang sama. Oleh karena itu, status metabolisme sapi, sebagaimana dibuktikan oleh perubahan di BCS, mempengaruhi kelangsungan hidup embrio dan foetus.

2.9. Status siklus Rhodes et al. (2003) menunjukkan bahwa antara 11 dan 38% pada sapi di sepanjang tahun kelahiran anak sapi sistem produksi anovulasi dengan 50-60 hari pasca melahirkan, sementara 13-43% pada sapi di sistem padang rumput anovulasi sebelum awal musim berkembang biak. Bahkan ketika sapi ovulasi setelah periode anovulasi atau anestrous, tingkat kesuburan rendah. Tahap pertama postpartum luteal dapat berlangsung singkat (<12 hari), yang biasanya dikaitkan dengan kurangnya paparan progestron sebelumnya (Inskeep, 2002) atau kadar estradiol yang memadai selama proestrus (Mann dan Lamming, 2000). Konsentrasi progesterone plasma yang lebih rendah dalam siklus estrus sebelumnya mengakibatkan rilis PGF 2 diawal siklus berikutnya (Shaham-Albalancy et al., 2001). Oleh karena itu, anovulasi menimbulkan risiko pembentukan dan pemeliharaan kebuntingan pada sapi. Studi literatur menunjukkan bahwa, secara umum, kematian embrio akhir yang lebih tinggi numerik untuk sapi anovulasi (Tabel 7), meskipun hanya satu studi menunjukkan statisttik perbedaan yang signifikan (Cartmill et al., 2001b). Dalam satu studi, sapi anovulasi mengalami keguguran numerik kurang dari sapi siklik (Santos et al., 2004b). Secara keseluruhan, tingkat keguguran adalah 15,7 dan 26,3% untuk sapi siklik dan anovulasi. Ketika analisis regresi dilakukan dengan data dari semua studi mengontrol untuk status siklus dan studi, sapi anovulasi adalah 2,01 kali lebih mungkin mengalami keguguran dibandingkan sapi siklik (OR = 2,01, 95% confidence interval 1,41, 2,88, P < 0. 001). Oleh karena itu, pengurangan prevalensi sapi anovulasi sebelum inseminasi buatan postpartum pertama diharapkan dapat meminimalkan kegagalan kebuntingan pada sapi.

2.10. Produksi susu yang diperoleh Kinerja reproduksi sapi perah mengalami penurunan di Amerika Utara, Eropa, dan Israel (Royal et al, 2000; Lucy, 2001, Stevenson, 2001; Zeron et al, 2001; Lpez-Gatius, yang sebagian dikaitkan dengan penekanan pada produksi susu tinggi per ekor (Royal et al., 2000) Peningkatan produksi susu yang. disertai dengan peningkatan konsumsi pakan dan tingkat metabolisme secara keseluruhan pada sapi perah, yang dapat mempengaruhi konsentrasi perifer steroid ovarium

(Sangsritavongetal., 2002). (awal diestrus dapat membahayakan perkembangan embrio awal (Mann dan Lamming, 1999), dan akibatnya mengurangi konsepsi (Darwash dan Lamming, 1998; Wathes et al, 2003) Juga, Snijders et al (2000) mengamati bahwa pembelahan angka dan jumlah oosit berkembang menjadi blastosis lebih rendah ketika berasal dari tinggi sapi jenis menengah secara genetik. Namun, studi yang sama menunjukkan bahwa 120 hari produksi susu tidak dikaitkan dengan tingkat pembelahan dan perkembangan blastosist dalam in vitro. Studi oleh kelompok belum mengamati hubungan antara produksi susu dan kematian embrio dan foetus pada sapi perah (Cerri et al, 2003; Chebel et al, dalam pers; Santos et al, 2004c). Selanjutnya, tidak satu pun pada penelitian (Cerri et al, 2003; Chebel et al, dalam pers; Santos et al. 2004c) produksi susu berhubungan dengan angka konsepsi pada hari 30-31 setelah inseminasi buatan. Oleh karena itu, ada indikasi sedikit atau tidak produksi susu merupakan faktor risiko untuk meningkatnya keguguran pada sapi perah.

2.11. Penyakit Penyakit Periparturient telah dikaitkan dengan penurunan reproduksi pada sapi (Grhn dan Rajala-Schultz, 2000). Sapi yang menderita mastitis klinis berada pada peningkatan resiko untuk penurunan angka konsepsi dan peningkatan kematian foetus (Santos et al., 2004a). Chebel et al. (In press) mengamati bahwa sapi laktasi mengalami mastitis klinis dalam 45 hari pertama setelah inseminasi buatan adalah 2,8 kali lebih mungkin untuk mengalami kematian embrio akhir antara 31 dan 45 hari kebuntingan. Schrick et al.. (2001) indikasi bahwa mastitis tidak hanya klinis, tetapi juga subklinis dikaitkan dengan peningkatan resiko keguguran pada sapi. Penyakit lain dikaitkan dengan penurunan angka konsepsi seperti retensi plasenta dan milk fever (Chebel et al., In press). Lpez-Gatius et al. (1996) menunjukkan bahwa sapi dengan retensi plasenta dan Pyometra adalah 1,8 dan 2,6 kali lebih mungkin mengalami kematian foetus, dari pada sapi tidak mengalami penyakit ini. Bahkan, sapi di diagnosis dengan masalah bahkan lebih pada uterus seperti endometritis subklinis pada 40-60 hari postpartum telah menandai penurunan angka konsepsi (Gilbert et al., 1998). Data ini menunjukkan bahwa masalah periparturient yang mempengaruhi kesehatan sapi dan keadaan lingkungan uterus yang dapat membahayakan keberlangsungan hidup embrio dan foetus.

2.12. Bahan yang memiliki lemak yang rendah Kapas mengandung gosipol yang dapat menjadi racun bagi sel-sel mamalia. Penelitian terbaru oleh kelompok kami (Santos et al, 2003; Villasenor et al, 2003) menunjukkan bahwa tingginya kosentrasi plasma gosipol (> 5 g / ml) mengurangi kualitas embrio dan penkembangannya, dan tingkat konsepsi. Sapi diberi makan diet tinggi gosipol mengalami kematian foetus, dan tingkat konsepsi berkurang dan keberlangsungan hidup foetus dikaitkan dengan konsentrasi plasma gosipol yang lebih tinggi (Santos et al., 2003).

2.13. Pejantan Pejantan memiliki efek besar pada angka konsepsi pada sapi, sedikit yang tahu tentang efek pejantan pada kegagalan kebuntingan. Ketika dievaluasi, pejantan telah terbukti memiliki efek pada penurunan foetus pada sapi. Lpez-Gatius et al. (2002) menunjukkan bahwa sapi bunting dari pejantan seekor lembu digunakan dalam penelitian adalah 3,43 kali lebih mungkin mengalami keguguran dibandingkan sapi bunting dengan pejantan jenis banteng.

3. Strategi untuk meningkatkan kelangsungan hidup embrio pada sapi 3.1. Bovine somatotropin (BST) Pengobatan dengan BST meningkatkan keberhasilan pembuahan, mempercepat perkembangan embrio, dan meningkatkan kualitas embrio (Moreira et al., 2002a,b). Bahkan, pengobatan dengan BST meningkatkan angka kebuntingan pada sapi yang diinseminasi mengikuti protokol Ovsynch atau deteksi estrus (Moreira et al, 2001; Santos et al, 2004c). Perbaikan dalam angka konsepsi diamati oleh Santos et al. (2004c) sebelum hasil kematian embrio berkurang antara 31 dan 45 hari. Karena BST mempercepat perkembangan embrio, diharapkan bahwa hal itu juga meningkatkan kelangsungan hidup embrio pada sapi siklik.

3.2. Induksi CL aksesori dengan hCG Santos et al. (2001) menyuntikkan 3300 IU hCG pada sapi laktasi 5 hari setelah inseminasi buatan, dan sapi yang menerima hCG jumlah CL meningkat dan konsentrasi progesterone plasma lebih tinggi. Nilai Konsepsi pada hari 28, 42, dan 90 yang ditingkatkan dengan perlakuan hCG, namun kematian embrionik dan foetus tetap tidak berubah. Oleh karena itu, efek positif dari hCG meningkatkan angka konsepsi sehingga merangsang dimediasi dengan mengurangi kematian embrio dini. Temuan terbaru oleh Nishigai et al. (2002) angka kebuntingan meningkat pada sapi yang menerima hCG pada hari 6 (67,5%) ketika CL aksesori terbentuk dibandingkan dengan sapi kontrol (45,0%) atau sapi menerima hCG pada hari 1 (42,5%) setelah inseminasi buatan. Bahkan, sapi dengan tambahan CL spontan delapan kali lebih mungkin mengalami kematian foetus dibandingkan dengan CL tunggal (Lpez-Gatius et al., 2002), efek yang tidak berhubungan dengan kebuntingan kembar, karena sapi kembar membawa resiko 3,1 mungkin lebih mengalami keguguran (Lpez-Gatius et al., 2002).

3.3. Menghaluskan perkembangan folikel Adanya folikel estrogenik pada saat pemeliharaan CL diperkirakan untuk mengatur reseptor oksitosin dan berpotensi meningkatkan PGF 2 rilis (Robinson et al., 2001). Santos et al. (2004a) menggantikan GnRH kedua (100 g gonadorelin) injeksi di Ovsync dengan Deslorelin agonis GnRH dalam bentuk implan yang mengandung 450 dan 750 g untuk menekan aktivitas folikel dan meningkatkan pemeliharaan kebuntingan. Deslorelin 450 cenderung mengurangi kegagalan kebuntingan dibandingkan dengan GnRH (P <0. 13), efek yang tidak diamati untuk Deslorelin 750 Oleh karena itu,. Strategi yang meminimalkan pertumbuhan folikel selama periode pemeliharaan CL mungkin mengurangi kegagalan kebuntingan sapi perah laktasi.

3.4. Progesteron tambahan Mann dan Lamming (1999) mengamati bahwa progesteron tambahan secara signifikan mempengaruhi angka konsepsi bila diberikan sebelum hari 6 setelah inseminasi buatan pada sapi perah laktasi. Selain itu, manfaat dari suplemen progesteron lebih jelas terlihat ketika digunakan dalam sapi laktasi dengan tingkat kesuburan rendah, sapi yaitu dengan angka konsepsi kurang dari 50%. Oleh karena itu, waktu pemberian suplemen progesteron sangat penting (4-5 hari kehamilan) mungkin karena itu dapat mengubah aktivitas yang keluar dari endometrium, sehingga mempengaruhi pertumbuhan embrio (Garret et al, 1998;Geisert et al, 199 2). Namun, suplementasi progesterone segera setelah inseminasi harus dihindari karena perkembangan uterus dan meningkatkan terjadinya siklus pendek (Van Cleeff et al, 1996;Garret et al, 1998; Lynch et al, 1999). Suplementasi progesteron juga dapat dimanfaatkan pada sapi potong dan perah untuk mengurangi tingkat anovulasi sebelum inseminasi buatan postpartum pertama, yang dikenal untuk mengurangi kinerja reproduksi sebagian kegagalan kebuntingan yang lebih besar (Inskeep, 2002). Oleh karena itu, penggabungan perangkat progesteron merilis dalam program seperti protocol prasinkronisasi mungkin meningkatkan proporsi sapi siklik pada inseminasi buatan postpartum pertama dan meningkatkan kelangsungan hidup embrio.

3.5. Prasinkronisasi untuk mengoptimalkan protokol reproduksi Pprotokol waktu inseminasi buatan seperti Ovsynch secara luas digunakan dalam kawanan sapi perah karena deteksi estrus umumnya diamati pada sapi penghasil susu dengan jumlah tinggi (Stevenson, 2001). Namun, respon kesuburan untuk Ovsynch tergantung pada tahap siklus ketika GnRH awal diberikan (Vasconcelos et al., 1999). Inisiasi program selama pertengahan diestrus (hari 5-12 dari siklus) meningkatkan angka konsepsi pada sapi perah laktasi (Moreira et al, 2001;Thatcher et al, 2002) karena meningkatkan ovulasi dengan GnRH pertama (inisiasi pada hari 5-9) dan jumlah sapi dengan kadar progesteron yang tinggi (> 1 ng / ml) pada saat yang PGF 2. Respon untuk protocol prasinkronisasi seperti Presynch (Moreira et al., 2001)

hanya efektif pada sapi siklik. Karena hingga 43% dari sapi laktasi mungkin anovulasi atau anestrous (Rhodes et al., 2003) sebelum inseminasi buatan postpartum pertama, tanggapan terhadap Presynch akan bervariasi dari kawanan. Penelitian selanjutnya untuk mengoptimalkan respon terhadap protocol waktu inseminasi buatan untuk inseminasi buatan postpartum pertama harus fokus pada metode prasinkronisasi yang tidak hanya mengoptimalkan ovulasi dengan GnRH pertama, tetapi juga mengurangi proporsi sapi anovulasi postpartum dini.

3.6. Makanan Metabolik dan sinyal endokrin yang terlibat dalam proses reproduksi diatur oleh status gizi. Suplementasi lemak pada 2-4% dari diet untuk sapi perah laktasi dan sapi yang memberikan pengaruh terhadap energi positif pada status reproduksi sapi (Staplesetal., 1998), namun memiliki syarat pada penyediaan kalori. Kemampuan asam lemak dari golongan -3,-linolenic (C 18:03 n -3), eicosapentaenoic (EPA, C 20:05 n -3), dan docosahexaenoic (DHA, C 22:05 n -3) dan -6 golongan, linoleat (C 18:02 n -6) untuk memodulasi sekresi PGF 2 oleh sel endometrium sapi (Mattos et al., 2003) telah diusulkan sebagai kontributor untuk kelangsungan hidup embrio pada sapi. Pada beberapa penelitian, makan lemak kaya sumber asam lemak -3 , dengan premis bahwa sintesis prostanoid mungkin dapat menghambat kebuntingan dan pada akhirnya meningkatkan kelangsungan hidup embrio, dimana reproduksi ditingkatkan (Burke et al, 1997; Petit dan Twagiramungu, 2002). Prepartum suplementasi lemak juga memiliki efek positif tertunda pada kesuburan sapi perah dan tingkat kebuntingan yang ditingkatkan (Frajblat dan Butler, 2003). Makanan garam Ca dari asam linoleat dan monoenoic C18 lemak trans meningkatkan angka konsepsi pada sapi laktasi. dibandingkan dengan garam Ca kelapa sawit (Juchemetal., inpress), yang menyebabkan tingkat konsepsi meningkat untuk menilai fertilisasi yang lebih tinggi (87,2% dibandingkan 73,3%), dan proporsi yang lebih besar dari embrio dinilai sebagai 1 dan 2 masing-masing (73,5% dibandingkan 51,5%) Cerri et al., in press).

KESIMPULAN Kegagalan perawatan dan kematian embrio adalah faktor yang paling penting yang mempengaruhi keberhasilan program reproduksi pada sapi perah dan sapi potong, dengan kematian foetus dari kecil. Kegagalan perawatan merupakan masalah penting dalam sapi perah dan sapi-sapi laktasi, namun kurang penting pada sapi-sapi non laktasi. Sapi-sapi perah laktasi tampaknya paling rentan terhadap kegagalan reproduksi sebagian karena tingkat fertilisasi rendah (~ 76%) dan viabilitas embrio dalam beberapa hari pertama kebuntingan, tetapi juga karena kematian embrio dan foetus (~ 60%). Ovulasi folikel persisten, kurangnya periode proestrus yang memadai, insufisiensi luteal, kecacatan embrio, lingkungan uterus yang buruk, pejantan, beberapa komponen makanan, tekanan lingkungan, penyakit, dan status metabolisme sapi semuanya telah dikaitkan dengan kematian embrio pada sapi. Namun, data menunjukkan bahwa prestasi genetik, hasil produksi susu, protokol inseminasi, dan metode prainkronisasi tidak jelas terlibat dengan peningkatan resiko keguguran. Ketika estrus yang disebabkan oleh suntikan secara beurutan PGF 2, konsepsi dan kelangsungan hidup embrio dapat menurunkan ketika folikel ovulasi berkembang pada lingkungan progesteron rendah. Pelaksanaan protokol waktu inseminasi buatan seperti Ovsynch dan hasil Heatsynch pada tingkat yang sama kematian embrio dan foetus bila dibandingkan dengan inseminasi pada deteksi estrus. Namun, induksi ovulasi kecil, tidak kompeten, hasil folikel dalam kelangsungan hidup embrio berkurang karena ketidak mampuan luteal dan siklus pendek. Penelitian selanjutnya untuk mengoptimalkan pembentukan dan pemeliharaan kebuntingan pada sapi harus fokus pada hormonal, manajemen nutrisi dan lingkungan yang meningkatkan kualitas oosit dan lingkungan uterus, meningkatkan perkembangan embrio dan cross talk antara sel-sel endometrium dan konsepsi untuk pemeliharaan CL, dan meningkatkan plasentasi untuk akhirnya menghasilkan kebuntingan yang sukses melewati masa embrio, dimana kegagalan kebuntingan kurang mungkin terjadi.