LAPORAN PRAKTIKUM BIOKOMPATIBILITAS

1. Prinsip kerja Laminar flow yaitu membunuh dan menghilangkan bakteri yang terbawa
dari udara pada ruangan untuk membuat suasana ruangan menjadi steril. Alat ini
berfungsi untuk mensterilkan ruangan yang akan digunakan untuk percobaan agar
tidak ada kontaminasi bakteri yang terdapat di udara (Batchelor, 2002)

2. MTT assay bekerja berdasarkan pada perubahan garam tetrazolium (MTT) menjadi
formazan dalam mitokondria sel fibroblas. Formazan adalah kompleks substrat enzim
yang dibentuk oleh MTT dan enzim suksinat dehidrogenase pada mitokondria sel
MTT berwarna kuning. MTT diabsorbsi ke dalam sel fibroblas. Enzim mitokondrial
suksinat dehidrogenase melalui reaksi reduksi dapat memecah MTT. Enzim tersebut
terdapat pada bagian matriks mitokondria dan partikel kecil pada krista. Enzim
mitokondrial suksinat dehidrogenase yang bekerja mengkonversi MTT menjadi kristal
formazan berwarna biru dan warna biru menandai bahwa sel tersebut hidup.
Terbentuknya warna biru karena perubahan ikatan rangkap menjadi ikatan selang
seling dari senyawa MTT menjadi formazan. Ikatan selang seling ini disebut dengan
gugus kromofor (Siregar,2011)






Gambar 1. Reaksi reduksi MTT menjadi formazan (Nevi, 2009)

3. Cara menghitung jumlah sel hidup pada uji MTT adalah warna biru yang terbentuk
pada konversi MTT menjadi formazan. Semakin kuat intensitas warna biru yang
terbentuk, absorbansi akan semakin tinggi, hal ini menunjukkan bahwa semakin
banyak MTT yang diabsorbsi ke dalam sel hidup dan dipecah melalui reaksi reduksi
oleh enzim reduktase dalam rantai respirasi mitokondria, sehingga formazan yang
terbentuk juga semakin banyak. Absorbansi ini yang digunakan untuk menghitung
persentase sel hidup sebagai respon. Intensitas warna biru yang terbentuk berbanding
langsung dengan jumlah sel yang aktif melakukan metabolisme. Sehingga jika
intensitas warna ungu semakin besar, maka berarti jumlah sel hidup semakin banyak.
(Siregar, 2011)

4. Uji sitotoksik digunakan untuk menentukan parameter nilai IC50. Nilai IC50
menunjukkan nilai konsentrasi yang menghasilkan hambatan proliferasi sel sebesar
50% dan menunjukkan besar atau kecilnya toksisitas suatu senyawa terhadap sel.
Nilai ini digunakan sebagai dasar untuk melakukan uji pengamatan kinetika sel. Nilai
IC50 dapat menunjukkan potensi sitotoksik pada suatu senyawa. Semakin besar harga
IC50 maka senyawa tersebut semakin tidak toksik. Akhir dari uji sitotoksisitas dapat
memberikan informasi persen dari sel yang mampu bertahan hidup (Meiyanto, 2003)
Cara Perhitungan IC50 (Dyaningtyas, 2012)
1. Melihat perbedaan absorbansi kontrol pelarut dengan kontrol sel.
2. Kontrol sel berisi media kultur + sel, sedangkan kontrol pelarut berisi media kultur +
sel + DMSO dengan konsentrasi terbesar pada seri konsentrasi) % DMSO terbesar
dilihat dari konsentrasi DMSO dalam seri konsentrasi sampel yang paling pekat.
Kontrol media berisi media kultur
Jika absorbansi kontrol pelarut sama dengan kontrol sel maka hitung prosentase sel
hidup dengan rumus berikut :
Prosentase sel hidup = (Absorbansi perlakuan Absorbansi kontrol media) x 100%
(Absorbansi kontrol sel Absorbansi kontrol media)
Jika absorbansi kontrol pelarut lebih rendah dari absorbansi kontrol sel maka hitung
prosentase sel hidup dengan rumus berikut :
Prosentase sel hidup = (Absorbansi perlakuan Absorbansi kontrol media) x 100%
(Absorbansi kontrol pelarut Absorbansi kontrol media)










DAFTAR PUSTAKA

Batchelor, G. (2000). Introduction to Fluid Mechanics.
Dyaningtyas. 2012. Cancer Chemoprevention Research Center Fakultas Farmasi UGM.
Meiyanto BS Sugiyanto, , AE Nugroho, UA Jenie. 2003. Aktivitas antikarsinogenik senyawa
yang berasal dari tumbuhan. Majalah Farmasi Indonesia 14 (4), 216-225
Nevi Y. 2009. Perbedaan biokompatibilitas saponin dari buah sapindus rarak DC dengan
larutan NaOCl 5% sebagai bahan irigasi saluran akar. Proceedings RDM&E-III FKG-
USU. Medan.
Siregar, Siti Nursani. 2011. Sitotoksisitas Ekstrak Lerak (Sapindus rarak DC) Terhadap Sel
Fibroblas Sebagai Bahan Irigasi Saluran Akar Secara In Vitro. USU Repository